項(xiàng)目七 藥物分析課件

1、項(xiàng)目七 藥物的衛(wèi)生檢驗(yàn)項(xiàng)目一 藥品檢驗(yàn)崗位培訓(xùn)【學(xué)習(xí)目的】 通過本節(jié)內(nèi)容的學(xué)習(xí)，了解微生物檢驗(yàn)的基本知識(shí)，為今后從事藥品生物檢定技術(shù)工作奠定基礎(chǔ)。項(xiàng)目一 藥品檢驗(yàn)崗位培訓(xùn)【知識(shí)要求】 掌握微生物檢驗(yàn)的無菌技術(shù)；掌握藥品微生物的檢測(cè)項(xiàng)目及方法。項(xiàng)目一 藥品檢驗(yàn)崗位培訓(xùn)【技能要求】 學(xué)會(huì)無菌操作基本技術(shù)；能對(duì)滅菌藥品進(jìn)行無菌檢查操作；能對(duì)非滅菌藥品進(jìn)行微生物限度檢查操作。 藥物作為一種防病、治病的特殊商品，除了在理化方面有效地控制其質(zhì)量以外，其衛(wèi)生檢驗(yàn)也至關(guān)重要。藥物的衛(wèi)生檢驗(yàn)有別于藥物其他的檢驗(yàn)檢查項(xiàng)目，其方法、原理、操作、要求均相對(duì)特殊，但作為檢驗(yàn)技術(shù)的一部分，在藥物的分析檢驗(yàn)中有著舉足輕重的

2、作用。 對(duì)藥物的衛(wèi)生檢驗(yàn)是指對(duì)藥品中微生物的檢驗(yàn)。藥品的衛(wèi)生檢驗(yàn)包括兩項(xiàng)內(nèi)容，即無菌檢查和微生物限度檢查。項(xiàng)目一 藥品檢驗(yàn)崗位培訓(xùn)Part 1 任務(wù)1 藥物的無菌檢查一、常規(guī)技術(shù)要求（1）應(yīng)在環(huán)境潔凈度10 000級(jí)以下的局部潔凈度100級(jí)單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行檢查。（2）全過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。（3）單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。Part 1 任務(wù)1 藥物的無菌檢查二、培養(yǎng)基 無菌檢查需按照藥典規(guī)定選擇適合需氧菌、厭氧菌或真菌生長的培養(yǎng)基，按規(guī)定處方（亦可使用商品脫水培養(yǎng)基）

3、制備及滅菌，配制好的培養(yǎng)基避光保存于225，試驗(yàn)前需做適用性檢查。Part 1 任務(wù)1 藥物的無菌檢查四、無菌檢查法（一）檢驗(yàn)數(shù)量及檢驗(yàn)量檢驗(yàn)數(shù)量是指一次試驗(yàn)所用供試品最小包裝容器的數(shù)量。檢驗(yàn)量是指一次試驗(yàn)所用供試品總量（g或mL）。中國藥典（2010年版）在附錄列出“批出廠產(chǎn)品最小檢驗(yàn)數(shù)量表”、“上市抽驗(yàn)樣品（液體制劑）的最小檢驗(yàn)量表”和“上市抽驗(yàn)樣品（固體制劑）的最小檢驗(yàn)量表”，可按表中的規(guī)定取量檢驗(yàn)。（二）對(duì)照試驗(yàn)供試品在做無菌檢查的同時(shí)還需作對(duì)照試驗(yàn)，包括陽性對(duì)照和陰性對(duì)照。Part 1 任務(wù)1 藥物的無菌檢查五、無菌檢查結(jié)果判斷（1）若供試品管顯澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供

4、試品符合規(guī)定。（2）若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無效，即生長的微生物非供試品所含。（3）試驗(yàn)若經(jīng)確認(rèn)無效，需依法重試。 藥品中的微生物數(shù)量，對(duì)判斷藥品被污染的程度有積極意義。細(xì)菌數(shù)越多，表明藥品受到致病菌污染的可能性越大，安全性越差。多數(shù)中西藥劑型屬非密封品，不能做到絕對(duì)無菌，因此微生物限度成為非規(guī)定滅菌制劑保證藥品質(zhì)量的重要檢查內(nèi)容，也是綜合評(píng)價(jià)藥品生產(chǎn)各環(huán)節(jié)衛(wèi)生狀況的一個(gè)依據(jù)。 微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受到微生物污染程度的方法，檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌的檢查。Part 1 任務(wù)2藥物的微生

5、物限度檢查（二）檢驗(yàn)量 檢驗(yàn)量即一次試驗(yàn)所用的供試品量（g、mL或cm2）。除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗(yàn)量為10 g或lO mL；化學(xué)膜劑為100 cm2；中藥膜劑為50 cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗(yàn)量應(yīng)增加2O g或20 mL（其中10 g或10 mL用于陽性對(duì)照試驗(yàn)）。 檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)從2個(gè)以上最小包裝單位中抽取供試品，膜劑還不得少于4片。一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于檢驗(yàn)用量（兩個(gè)以上最小包裝單位）的3倍量供試品。Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查一、常規(guī)技術(shù)要求及檢驗(yàn)量二、供試液的制備 需要根據(jù)供試品的理化特性和生物學(xué)特性，采用適宜的方法制備

6、供試液。中國藥典（2010年版）附錄中提供了液體供試品、固體、半固體或黏稠液供試品以及需用特殊供試液制備方法的供試品供試液的制備方法，其中需用特殊供試液制備方法的供試品有非水溶性供試品（軟膏、乳膏劑、眼膏劑、油劑、栓劑）、膜劑供試品、腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品、氣霧劑、噴霧劑供試品及具抑菌活性的供試品。Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查三、菌種及培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基 微生物限度檢查常用的培養(yǎng)基有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基及改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（YPD）、膽鹽乳糖培養(yǎng)

7、基（BL）、膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基等20種，試驗(yàn)時(shí)需根據(jù)藥典規(guī)定的方法及要求進(jìn)行選擇。如大腸埃希菌，做細(xì)菌計(jì)數(shù)時(shí)使用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，而作為控制菌檢查時(shí)，需使用膽鹽乳糖培養(yǎng)基和4-甲基傘形酮葡糖苷酸（MUG）培養(yǎng)基。除另有規(guī)定外，培養(yǎng)基制備的滅菌條件均為121 20min。Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查四、方法的驗(yàn)證試驗(yàn) 建立微生物限度檢查法時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行方法驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的方法適合于該藥品的細(xì)菌、霉菌、酵母菌的菌落計(jì)數(shù)測(cè)定或控制菌的檢查。方法驗(yàn)證時(shí)需選擇法定試驗(yàn)菌按照規(guī)定的方法及要求進(jìn)行。Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查五、藥品的微生物限度檢驗(yàn)方法 微生物限度檢

8、查主要檢查項(xiàng)目有細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)和控制菌檢查。（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù) 細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)，檢測(cè)的是藥物在單位質(zhì)量或體積內(nèi)所存在的活菌數(shù)量，可評(píng)價(jià)生產(chǎn)過程中原輔料、設(shè)備、器具、工藝、環(huán)境及操作者的衛(wèi)生狀況。法定檢查方法包括平皿法和薄膜過濾法，常用平皿法。（二）控制菌檢查 控制菌檢查旨在檢查非規(guī)定滅菌制劑中是否存在有可疑的致病菌。中國藥典（2010年版）控制菌檢查項(xiàng)目包括大腸埃希菌、大腸菌群、沙門菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌及梭菌。Part 1 任務(wù)2藥物的微生物限度檢查六、中國藥典（2010年版）微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 非無菌藥品的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)是基于藥品的給藥途徑及對(duì)患者健康潛在的

9、危害而制訂的，是藥品生產(chǎn)、貯存、銷售過程中的檢驗(yàn)，是對(duì)原料及輔料的檢驗(yàn)，是新藥標(biāo)準(zhǔn)制訂、進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核、藥品質(zhì)量考察及仲裁等的依據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)內(nèi)容如書中表7-l所示。實(shí)訓(xùn) 葡萄糖微生物限度檢查【實(shí)訓(xùn)要求】 了解微生物限度的檢查方法?！緦?shí)訓(xùn)內(nèi)容】 微生物限度檢查法系指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受到微生物污染程度的方法。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌的檢查?！緦?shí)訓(xùn)內(nèi)容】一、實(shí)驗(yàn)原理 微生物限度檢查法系指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受到微生物污染程度的方法。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌的檢查。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和操作步驟（一）培養(yǎng)基及其制備方法（二）方法實(shí)訓(xùn) 葡萄糖微生物限度檢查1. 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（2010版）M.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010. 2.杭太俊.藥物分析M.(7版).北京：人民衛(wèi)生出版社，2011.3.劉文英.藥物分析M.(6版).北京：人民衛(wèi)生出版社，2007.4.中國藥品生物制品檢定所.中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（2010版）G.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.5.何仲貴.藥物制劑注解M.(1版). 北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.6. 馬廷升.藥物分析M.(1版).西安：第四軍醫(yī)大學(xué)出版社，2011.7. 孫瑩，呂潔.藥物分析M.(1版).北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.8鄭一美.藥物分析與質(zhì)