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1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識一、微生物的分布微生物分布非常廣泛。通過對外界微生物的檢查,了解微生物在自然界中的分布,從而樹立“有菌觀點”,認識“無菌操作” 對于微生物學(xué)及醫(yī)學(xué)實踐的重要性。2醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識一、微生物的分布微生物分布非常廣泛。2醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)實驗操作步驟:1取瓊脂平板2個,一個啟開皿蓋,培養(yǎng)基面向上,放在實驗桌上,30min后蓋好皿蓋。另1個平板,不啟開蓋作為對照。22個平板均置37培養(yǎng)1824h,觀察結(jié)果??諝庵形⑸锏臋z查3醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識實驗操作步驟:1取瓊脂平板2個,一個啟開皿蓋,培養(yǎng)基面向上1、消毒(disinfection)

2、:殺滅物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒劑(disinfectant):用以消毒的藥品2、滅菌(sterilization) :殺滅物體上所有微生物的方法,包括殺滅細菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。(一)消毒滅菌的常用術(shù)語:二、理化因素對微生物的影響4醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識1、消毒(disinfection):殺滅物體上或環(huán)境中的病3、防腐(antisepsis)防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。防腐劑(antiseptic):用以防腐的藥物。4、無菌(asepsis):不存在活菌的意思,多是滅菌的結(jié)果。 5、無菌操作(ase

3、ptic technique):防止細菌及其他微生物進入人體或其他物品的操作技術(shù)。5醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識3、防腐(antisepsis)防止或抑制皮膚表面細菌生長醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識培訓(xùn)課件1、高壓蒸汽滅菌法 103.4kPa(1.05kg/cm2) (121.3 ,維持1520min ) 滅菌效果最好,可殺滅包括細菌芽胞在內(nèi)的所用微生物。 常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕物品的滅菌。高壓蒸汽滅菌器7醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識1、高壓蒸汽滅菌法 103.4kPa(1.05kg/cm22、手指皮膚消毒前后微生物的檢查 絡(luò)合碘對細菌的作用(示教)(1)取瓊脂平板1個,將底面

4、分成兩等份,注明A/B。(2)用無菌棉簽蘸生理鹽水,在左手食指頭上涂擦。用該指頭在平板A處瓊脂表面涂抹,作為消毒前的對照。(3)用棉簽蘸絡(luò)合碘消毒左手食指。待絡(luò)合碘干后,依上法在平板B處瓊脂表面涂抹。(4)置平板于37培養(yǎng)1824h。8醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識2、手指皮膚消毒前后微生物的檢查 平板A處瓊脂表面有細菌生長,B處不長細菌或出現(xiàn)極少的菌落。說明一定濃度的絡(luò)合碘能殺滅細菌?!窘Y(jié)果】 9醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識平板A處瓊脂表面有細菌生長,B處不長細菌或出現(xiàn)極少的菌落。說3、抗生素敏感試驗(示教)一種抗生素只對一定種類的生物細胞有拮抗作用,這種作用范圍稱抗菌譜??股氐目咕鷻C制 影響細胞壁

5、的合成; 損傷或破壞細胞膜的結(jié)構(gòu); 干擾細胞碳水化合物的代謝; 抑制核酸或蛋白質(zhì)的合成,這些作用都有一定的選擇性。10醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識3、抗生素敏感試驗(示教)一種抗生素只對一定種類的生物細胞觀察紙片周圍有無抑菌圈,并量出抑菌圈直徑大小,得出待測菌對所試抗生素的敏感性。紙片瓊脂擴散法試驗程序(a)挑取菌落 (b)轉(zhuǎn)種肉湯 (c)比濁 (d)涂布平板上 (e)放置藥敏紙片 (f)量取抑菌圈大小11醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識觀察紙片周圍有無抑菌圈,并量出抑菌圈直徑大小,得出待測菌對所4、紫外線殺菌實驗紫外線DNA T - T二聚體波長240300nm,265266nm最強干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄

6、變異或死亡(1)原理:12醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識4、紫外線殺菌實驗紫外線DNA T - T二聚體波長2(2)特 點 穿透力較弱; 僅能殺死細菌的繁殖體,不能殺死細菌的芽胞。(3)臨床應(yīng)用 僅用于實驗室、傳染病房、手術(shù)室的空氣或不耐熱物品的表面消毒。 注意事項: 紫外線可損傷皮膚、眼睛,使用時應(yīng)注意防護。13醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識(2)特 點 穿透力較弱;(3)臨床應(yīng)用13醫(yī)學(xué)微生三、細菌的分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應(yīng)細菌的新陳代謝分解代謝合成代謝熱原質(zhì)毒素與侵襲性酶色素抗生素細菌素維生素合成代謝產(chǎn)物14醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識三、細菌的分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應(yīng)細菌的新陳代謝分解代謝細菌

7、的分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng)(示教) 細菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力的不同,因而代謝產(chǎn)物各異,利用生物化學(xué)方法鑒別不同細菌稱為細菌的生化反應(yīng)。15醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識細菌的分解代謝產(chǎn)物和生化反應(yīng)(示教) 細菌對糖、蛋白質(zhì)的糖發(fā)酵試驗:乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖發(fā)酵試驗:細 菌葡萄糖丙酮酸各種酸類甲 酸H2 + CO2脫氫酶16醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識糖發(fā)酵試驗:乳糖乳酸乳糖酶葡萄糖發(fā)酵試驗:細 菌葡萄糖丙酮吲哚試驗(Indole test):色氨酸色氨酸酶氨基苯甲醛玫瑰吲哚甲基紅試驗(Methy red test):葡萄糖細菌丙酮酸 脫羧乙酰甲基甲醇(中性)pH5.4 桔黃色:陰性pH4.5 紅色:陽性

8、17醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識吲哚試驗(Indole test):色氨酸色氨酸酶氨基苯甲VP試驗:葡萄糖細菌丙酮酸脫羧乙酰甲基甲醇氧化二乙酰含胍基化合物紅色的化合物( VP試驗陽性)枸櫞酸鹽利用試驗(Citrate utilizatio):枸櫞酸鹽碳酸鹽銨 鹽氨溴麝香草酚藍(淡綠)深藍堿性18醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識VP試驗:葡萄糖細菌丙酮酸脫羧乙酰甲基甲醇氧化二乙酰含胍基化IMViC試驗大腸桿菌:+ - - 產(chǎn)氣桿菌:- + +19醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識IMViC試驗19醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實驗醫(yī)學(xué)知識第1頁:實驗內(nèi)容一、微生物的分布及理化因素對微生物的影響 1、空氣中微生物的檢查(示教) 2、手指皮膚消毒前后微生物的檢查(示教) 3、紫外線殺菌試驗(自

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