生物安全柜及應(yīng)用課件

1、生物安全柜biological safety cabinets （BSC）湛江市疾病預(yù)防控制中心艾滋病確證實驗室 1生物安全柜biological safety cabi工作臺的分類 超凈工作臺 生物安全柜生物安全柜的基本防護(hù)功能保護(hù)操作人員保護(hù)樣品保護(hù)環(huán)境2工作臺的分類 超凈工作臺2生物安全柜的定義 Class II 生物安全柜防止操作處理過程中，含有危險性或未知性生物微粒氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置 3生物安全柜的定義 Class II 生物安全柜防止操作生物安全柜的分類根據(jù)處理樣品的危害不同，分為三個等級:級, 級, 級BSC-(級生物安全柜)BSC-( 級生物安全柜)BSC-

2、( 級生物安全柜)4生物安全柜的分類根據(jù)處理樣品的危害不同，分為三個等級:4級生物安全柜的分類1.級A1型生物安全柜柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排出，窗口流速0.4/s2.級A2型生物安全柜柜內(nèi)空氣70%循環(huán)，30%排出，窗口流速0.5/s 3.級B1型生物安全柜柜內(nèi)空氣30%循環(huán)，70%排出,窗口流速0.5/s 級B2型生物安全柜 柜內(nèi)空氣100%排出,窗口流速0.5/s 5級生物安全柜的分類1.級A1型生物安全柜5級生物安全柜1.美國對級生物安全柜有新的分 類方法2.歐洲產(chǎn)品無B2型級生物安全柜6級生物安全柜1.美國對級生物安全柜有新的分 類方法6 級生物安全柜(BSC )主要功能：用于低度

3、危險性的微生物和病原體作業(yè)空間并未到達(dá)無菌潔凈的條件保護(hù)操作人員及環(huán)境但不保護(hù)樣品7 級生物安全柜(BSC )主要功能：7 級生物安全柜(BSC )主要結(jié)構(gòu):帶有抽氣裝置的操作箱氣體向操作箱內(nèi)流動,保護(hù)操作者排出氣體經(jīng)HEPA過濾氣流速度在0.4/s以上(排氣量/進(jìn)氣面積)8 級生物安全柜(BSC )主要結(jié)構(gòu):8級生物安全柜可開啟前窗在負(fù)壓下操作表面風(fēng)速75-100fpm排出的氣體經(jīng)HEPA 過濾保護(hù)操作人員和環(huán)境 HEPA適用于樣品不需保護(hù)的實驗工作9級生物安全柜可開啟前窗在負(fù)壓下操作HEPA適用于樣品不需保級生物安全柜（BSC ） 主要功能：用于操作低、中度危險的微生物，病原體操作空間到達(dá)

4、無菌的潔凈條件10級生物安全柜（BSC ） 主要功能：10級生物安全柜（BSC ） 主要結(jié)構(gòu)：具有前吸風(fēng)口和排氣口可防止內(nèi)部污染氣體流出避免外部氣體進(jìn)入箱內(nèi)污染樣品氣體經(jīng)HEPA過濾排出11級生物安全柜（BSC ） 主要結(jié)構(gòu)：11級生物安全柜的分類B1Type BB2 Class IIType AA1A2廢氣經(jīng)煙罩排入實驗室或室外廢氣必須經(jīng)排風(fēng)系統(tǒng)排至室外，并帶報警裝置12級生物安全柜的分類B1Type BB2 Class I安全柜的選擇選用A類還是B類生物安全柜?不是生物因素而是是否使用揮發(fā)性的有害物質(zhì)或放射性物質(zhì)Type BType A13安全柜的選擇選用A類還是B類生物安全柜?Type

5、BType級生物安全柜滿足生物安全等級1、2、3的要求不涉及放射性物質(zhì)不涉及揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火14級生物安全柜滿足生物安全等級1、2、3的要求不涉及放射性物1515級生物安全柜最小流速 75 fpmType A1有排風(fēng)管路Type A1無排風(fēng)管路16級生物安全柜最小流速 Type A1有排風(fēng)管路Type A1717級A2型生物安全柜（B3型）前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5m/s經(jīng)HEPA的下送氣流與操作口向內(nèi)氣流混合循環(huán)氣流比例：70%經(jīng)HEPA過濾器的空氣，可以排回實驗室或通過排風(fēng)罩排入環(huán)境18級A2型生物安全柜（B3型）前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5m無排風(fēng)管級A2型生物安全柜最小表面

6、風(fēng)速0.5m/s有排風(fēng)管19無排風(fēng)管級A2型生物安全柜最小表面風(fēng)速0.5m/s有排風(fēng)管級A2生物安全柜(無排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的要求不涉及放射性物質(zhì)不涉及揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火20級A2生物安全柜(無排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的要級A2型生物安全柜(有排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的要求適用于含痕量放射性物質(zhì)的工作適用于含少量揮發(fā)性有害化學(xué)品的工作建議不應(yīng)有明火21級A2型生物安全柜(有排風(fēng)管)滿足生物安全等級1、2、3的BSC-A2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍無外接風(fēng)道有外接風(fēng)道22BSC-A2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍無外接風(fēng)道有外接風(fēng)2323級B1型生物安

7、全柜前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5m/s經(jīng)HEPA過濾器的下送氣流，大部分是未被污染的循環(huán)吸入氣流循環(huán)氣流比例為30%污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大多數(shù)經(jīng)過專門的排風(fēng)管排入大氣 24級B1型生物安全柜前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5m/s24級B1型生物安全柜最小表面風(fēng)速100 fpm經(jīng)HEPA過濾的下送氣流，大部分未被污染污染的下送氣流經(jīng)HEPA過濾后，大部分經(jīng)排風(fēng)管排入大氣25級B1型生物安全柜最小表面風(fēng)速經(jīng)HEPA過濾的下送氣流，大級B1型生物安全柜滿足生物安全等級1、2、3的要求工作區(qū)域的后部可使用少量的放射性物質(zhì)工作區(qū)域的后部可使用少量的揮發(fā)性有害化學(xué)品建議不應(yīng)有明火26級B1型生物安全柜

8、滿足生物安全等級1、2、3的要求工作區(qū)域BSC-B1型 正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍27BSC-B1型 正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍27級B2型生物安全柜（全排型） 前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5m/s循環(huán)氣流比例為0，即柜中排出的氣體不再循環(huán)所有污染的風(fēng)道和壓力排風(fēng)系統(tǒng)均保持負(fù)壓28級B2型生物安全柜（全排型） 前窗進(jìn)風(fēng)氣流平均流速0.5級B2型生物安全柜（全排型）29級B2型生物安全柜（全排型）29級B2型生物安全柜（全排型）滿足生物安全等級適用于放射性物質(zhì)*適用于揮發(fā)性有害化學(xué)品 建議不應(yīng)有明火30級B2型生物安全柜（全排型）滿足生物安全等級適用于放射性物BSC-II-B2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍

9、31BSC-II-B2型正壓污染區(qū)被負(fù)壓區(qū)域包圍31BSC-型保護(hù)實驗人員、實驗對象和環(huán)境密閉結(jié)構(gòu)通過手套操作柜內(nèi)負(fù)壓不小于120Pa排風(fēng)兩道高效過濾器32BSC-型保護(hù)實驗人員、實驗對象和環(huán)境323333一般無定型產(chǎn)品，需特殊定貨若干級生物安全柜連在一起使用，全部操作流程均在柜內(nèi)完成，以確保安全級生物安全柜 34一般無定型產(chǎn)品，需特殊定貨級生物安全柜 34級生物安全柜35級生物安全柜35生物安全柜的操作理論顆粒經(jīng)HEPA過濾去除氣流為層流氣流有方向生物安全柜的要求:36生物安全柜的操作理論顆粒經(jīng)HEPA過濾去除生物安全柜的要求:生物安全柜的操作理論HEPA濾膜馬達(dá)/風(fēng)扇強(qiáng)制氣體流動馬達(dá)轉(zhuǎn)速的

10、控制部分氣體的吸入、平衡控制及管路系統(tǒng)生物安全柜的主要部件:37生物安全柜的操作理論HEPA濾膜生物安全柜的主要部件:37操作理論-層流層流氣流向下掃過工作區(qū)域，捕獲氣溶膠，經(jīng)安全柜的內(nèi)層至HEPA濾膜為實現(xiàn)真正的層流，各點的氣流速率必須在平均流速的+/- 20%以內(nèi)38操作理論-層流層流氣流向下掃過工作區(qū)域，捕獲氣溶膠，經(jīng)安全操作理論-有方向的氣流空氣從柜前和周圍吸入，使工作區(qū)域的氣溶膠更難逃逸此氣流通常以向內(nèi)吸入的體積或平均流速計算、表示39操作理論-有方向的氣流空氣從柜前和周圍吸入，使工作區(qū)域的氣操作理論-煙氣分束在工作區(qū)域的一個垂直平面內(nèi)煙氣被分束，向前方和后方的氣孔移動為最有效的防止

11、煙氣逃逸，物品應(yīng)放在煙氣分束以后的區(qū)域，操作也應(yīng)在此進(jìn)行40操作理論-煙氣分束在工作區(qū)域的一個垂直平面內(nèi)煙氣被分束，向前生物安全柜的使用1.正確安裝，確保安全柜與外部排風(fēng)系統(tǒng)壓力平衡，保證安全柜處于正常工作狀態(tài)2.定期維護(hù)和檢測，確保安全性41生物安全柜的使用1.正確安裝，確保安全柜與外部41生物安全柜的使用工作前認(rèn)真理解操作步驟和所需設(shè)備盡量減少擾動準(zhǔn)備好消毒劑制定計劃42生物安全柜的使用工作前認(rèn)真理解操作步驟和所需設(shè)備制定計劃42生物安全柜的使用關(guān)紫外燈，前窗開至適當(dāng)高度，打開安全柜的燈和風(fēng)扇檢查出風(fēng)口是否有障礙物，等待5min用消毒液徹底洗凈手和手臂；穿長袖工作服和手套；帶防護(hù)眼鏡開始清

12、潔 用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦霉ぷ鲄^(qū)域內(nèi)壁43生物安全柜的使用關(guān)紫外燈，前窗開至適當(dāng)高度，打開安全柜的燈和生物安全柜的使用只放入所需物品不能超載出風(fēng)口不要有障礙物大物體間要保持一定距離前窗降至適當(dāng)高度2-3min以吹掃污染物上樣44生物安全柜的使用只放入所需物品上樣44生物安全柜的使用 工作結(jié)束，繼續(xù)開機(jī)10-15min 最后的吹掃下樣 與污染物接觸的物品，取出之前必須經(jīng)表面去污處理 所有托盤或容器取出前必須加蓋45生物安全柜的使用 工作結(jié)束，繼續(xù)開機(jī)10-15min 生物安全柜的使用用消毒劑清潔內(nèi)壁，待其干燥定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域清潔46生物安全柜的使用用消毒劑清潔內(nèi)壁，待其干燥

13、清潔46生物安全柜的使用關(guān)閉燈、風(fēng)機(jī)、關(guān)閉前窗開紫外燈關(guān)機(jī)47生物安全柜的使用關(guān)閉燈、風(fēng)機(jī)、關(guān)閉前窗關(guān)機(jī)47生物安全柜的使用所有物品離前窗至少2英寸，所有污染性的操作盡量遠(yuǎn)離工作區(qū)域的后部干凈的與污染的物品分開放置；污染物品盡量放置在工作區(qū)域后部操作時物品和手臂不要穿過前窗技巧48生物安全柜的使用所有物品離前窗至少2英寸，所有污染性的操作盡生物安全柜的使用避免使用明火，用適當(dāng)?shù)臏缇胧┍苊馐褂酶蓴_安全柜內(nèi)層流的實驗手段安全柜處于操作狀態(tài)時，徹底消毒內(nèi)壁技巧49生物安全柜的使用技巧49生物安全柜的使用干凈物品理想的工作臺擺放污染區(qū)域廢棄物托盤垃圾袋50生物安全柜的使用干凈物品理想的工作臺擺放污染

14、廢棄物垃圾袋50515152525353545455555656生物安全柜內(nèi)感染性材料溢灑的處理發(fā)生少量溢灑，用吸收紙巾立即處理，并浸滿消毒液的毛巾或紗布對生物安全柜及其內(nèi)部的所有物品擦洗。消毒后更換手套，不論是摘下手套還是更換手套都要洗手。若發(fā)生大量溢灑，液體通過柜前面或后面的格柵流到下面，柜內(nèi)所有物品都應(yīng)進(jìn)行表面消毒，并從柜中取出，關(guān)閉排水閥，將消毒液倒在工作臺面上，使液體通過格柵流到排水盤上。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和/或高壓滅菌處理。57生物安全柜內(nèi)感染性材料溢灑的處理發(fā)生少量溢灑，用吸收紙巾立即調(diào)整椅子高度，讓肩膀放松雙肘自然放于兩側(cè)人體工程學(xué)方面的考慮肘和肩膀58調(diào)整椅子

15、高度，讓肩膀放松雙肘自然放于兩側(cè)人體工程學(xué)方面的考慮常見說法和錯誤認(rèn)識 噴燈火焰將嚴(yán)重影響安全柜內(nèi)的層流，可能造成氣溶膠的擴(kuò)散若噴燈的火苗很大，可能融化HEPA濾膜的粘結(jié)劑或燒濾膜若無人看守，噴燈可能熄滅，在A類或A/B3類安全柜內(nèi)，泄露的氣體可能達(dá)到爆炸極限“可以在安全柜中使用噴燈.替代方法：如電熱套或可拋的加熱環(huán)。59常見說法和錯誤認(rèn)識 噴燈火焰將嚴(yán)重影響安全柜內(nèi)的層流，可能造排風(fēng)柜用于排出有害有毒的煙和氣溶膠，應(yīng)該用對多種化學(xué)試劑惰性的材料構(gòu)成“可以把生物安全柜當(dāng)排風(fēng)柜使用”不能常見說法和錯誤認(rèn)識60排風(fēng)柜用于排出有害有毒的煙和氣溶膠，應(yīng)該用對多種化學(xué)試劑惰性常見說法和錯誤認(rèn)識錯! 只有

16、在正確使用的情況下，才能保護(hù)操作人員、樣品和環(huán)境。在生物安全柜中工作，什么時候都需無菌操作 如果在生物安全柜中工作， 就不必很小心的操作61常見說法和錯誤認(rèn)識錯! 如果在生物安全柜中工作，61常見說法和錯誤認(rèn)識錯! 使用紫外燈可以減少安全柜不用時工作區(qū)域的污染。紫外線穿透力差，不能殺滅被灰塵或有機(jī)物保護(hù)的微生物 生物安全柜有紫外燈， 就不必消毒清潔工作區(qū)域 62常見說法和錯誤認(rèn)識錯! 生物安全柜有紫外燈，62常見說法和錯誤認(rèn)識不能！ 工作區(qū)域放置大物體將影響氣流，降低安全柜的效率離心機(jī)、攪拌機(jī)等電器的風(fēng)扇，可能破壞安全柜內(nèi)的氣流離心機(jī)內(nèi)最好使用密封的安全杯，在安全柜內(nèi)裝樣和下樣“離心機(jī)可以放在

17、生物安全柜內(nèi)使用?63常見說法和錯誤認(rèn)識不能！ “離心機(jī)可以放在生物安全常見說法和錯誤認(rèn)識不一定。對于遠(yuǎn)離揮發(fā)性有害化學(xué)品的侵害，對于遠(yuǎn)離生物有害氣溶膠的侵害，則不是根據(jù)實際工作的要求和研究內(nèi)容，確定使用B類或A類的生物安全柜“B類安全柜和A類相比能提供更好的保護(hù).”64常見說法和錯誤認(rèn)識不一定?！癇類安全柜和A類相比能提供更好的常見說法和錯誤認(rèn)識 某些應(yīng)用，如研究生物毒素藥物的工作，為防止有害物質(zhì)逃逸，建議連續(xù)使用 連續(xù)使用將降低HEPA濾膜的壽命”所有的生物安全柜應(yīng)連續(xù)工作.”65常見說法和錯誤認(rèn)識 某些應(yīng)用，如研究生物毒素藥物的工作，常見說法和錯誤認(rèn)識 假若房間密閉，沒有通風(fēng)系統(tǒng)，沒有什

18、么活動，循環(huán)式的A類安全柜可能會把空氣凈度降至100級。不幸的是，一旦人員進(jìn)入，將再次被污染。這樣做將降低HEPA濾膜的壽命”如果讓安全柜連續(xù)工作，室內(nèi)空氣潔凈度將達(dá)到100級.”66常見說法和錯誤認(rèn)識 假若房間密閉，沒有通風(fēng)系統(tǒng)，沒有什么常見說法和錯誤認(rèn)識不一定！ HEPA濾膜應(yīng)在壓力差過大時更換（濾膜沾滿顆粒）決定濾膜壽命的兩大因素：房間內(nèi)空氣污染的程度安全柜工作的時間按時間表更換濾膜，而不考慮濾膜被污染的程度,可能造成不必要的浪費(fèi)” 應(yīng)每年更換HEPA濾膜？.”67常見說法和錯誤認(rèn)識不一定！” 應(yīng)每年更換HEPA濾膜？.”常見說法和錯誤認(rèn)識錯! I級安全柜適用于一級、二級和三級安全實驗室 級和級安全柜則適用于所有級別安全實驗室I級安全柜只適用于一級安全實驗室 級安全柜只適用于二級安全實驗室級安全