CFXConnece實時熒光定量PCR儀論證報告

1、編號：CFX Connect實時熒光定量檢測系統(tǒng)可行性論證報告設(shè)備名稱CFX ConnectTM實時熒光定量檢測系統(tǒng)申購單位 （公章）申請人填表日期論證日期一、申購儀器設(shè)備概況中文CFX Connect實時熒光定量檢測系統(tǒng)設(shè)備名稱英文 CFX Connect Real-Time PCR Detection System型號規(guī)格CFX Connect國別美國廠商Bio-Rad申購數(shù)量壹臺價格?萬人民幣安裝地點經(jīng)費來源主要功能在聚合酶鏈?zhǔn)綌U增反應(yīng)溫控循環(huán)過程中，通過對目的核酸片段進(jìn)行特異性擴增 和熒光標(biāo)記，獲得實時變化的熒光信號，監(jiān)測循環(huán)過程的熒光信號強度變化并與實 時設(shè)備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)

2、。實時熒光定量檢測設(shè)備的軟件對收集到的數(shù) 據(jù)進(jìn)行處理,設(shè)定域值水平，鑒定初始模板的數(shù)量和濃度水平。技術(shù)指標(biāo).工作環(huán)境工作溫度15-31 工作和存儲濕度10-80%工作電源100-240 VAC(10%),50-60HZ.用途用于檢測和分析聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中熒光信號值的實時變化,監(jiān)測體外核酸片 段擴增過程，通過熒光信號曲線分析初始模板濃度，具有動態(tài)溫度梯度功能.可用 于核酸定量、基因表達(dá)水平分析、基因突變檢測、GMO檢測及產(chǎn)物特異性分析等 多種研究領(lǐng)域。3主要性能指標(biāo)與儀器參數(shù)主要性能指標(biāo)3個檢測通道，可實現(xiàn)2重PCR,可同時檢測2個靶基因，專用FRET檢 測通道有動態(tài)溫度梯度PCR功能，可以同時

3、運行8個不同的溫度，每個溫度孵育 時間相同完全試劑開放，各種科研和臨床試劑適用適用于多種熒光方法，如 Taqman, Molecular Beacon，F(xiàn)RET 探針，SYBR Green I 等耗材開放，可使用0.2ml單管、八聯(lián)管、96孔板等可獨立運行，真正離線操作，無需連接電腦即可實時監(jiān)控PCR熒光擴增曲 線主要技術(shù)參數(shù)樣品容量：96x0.2ml，可使用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格96孔板（12x8）耗材類型：可使用0.2ml單管、八聯(lián)管、96孔板等反應(yīng)體系：1-50川（推薦10-253）光源：三個帶有濾光片的LED檢測器：三個帶有濾光片的光敏二極管升降溫速度：5/秒溫控范圍：0 -100溫度準(zhǔn)確性：0.2

4、（90時）溫度均一性：0.4（10秒內(nèi)達(dá)到90）動態(tài)溫度梯度功能：同時運行8個不同的溫度；梯度溫控范圍：30 -100；梯度溫差范圍：1 - 24；梯度溫度孵育時間：相同激發(fā)/發(fā)射波長范圍：450-580nm靈敏度：能檢測人類基因組中單拷貝基因動態(tài)范圍：10個數(shù)量級數(shù)據(jù)分析模式：標(biāo)準(zhǔn)曲線定量、熔解曲線、CT或AACT基因表達(dá)分析、多內(nèi)參基因分析和擴增效率計算、多個數(shù)據(jù)文件的基因表達(dá)分析、等位基因分析、 終點分析、具有等位基因、熔解曲線分析功能數(shù)據(jù)導(dǎo)出：Excel, Word,或PowerPoint。用戶報告包含運行設(shè)置，圖形 和表格數(shù)據(jù)結(jié)果，可直接打印或保存為PDF染色體結(jié)構(gòu)研究:采用real

5、-time PCR方法，通過比較核酸酶對基因組DNA 降解作用效果，定量分析染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的方法。真正證明了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與基因表達(dá) 之間的高度相關(guān)性應(yīng)用范圍定量PCR可以對樣品的初始濃度進(jìn)行準(zhǔn)確定量，具有多種豐富的應(yīng)用。包括基因表達(dá)調(diào)控情況，、等位基因的分析等，在病原體檢測、產(chǎn)前診 斷、藥物療效評估分析等臨床科研領(lǐng)域也得到極為廣泛的應(yīng)用。聚該技 術(shù)具有特異、敏感、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點；目 前熒光實時定量PCR儀已經(jīng)成為分子生物學(xué)實驗室的基礎(chǔ)設(shè)備和最重要 的實驗儀器。儀器特色擬購型號具有以下特點：CFX Connect型熒光實時定量PCR儀功能強大、檢測靈敏。三通道的實 時PCR系

6、統(tǒng)包括了先進(jìn)的光學(xué)系統(tǒng)和精確的溫控系統(tǒng)，可提供高靈敏、 可信賴的檢測結(jié)果。固定光路技術(shù)（3個LED燈和3個光敏二極管）能夠使每個通道中的檢 測達(dá)到最佳效果，對靶基因進(jìn)行精確定量和分型。每次檢測掃描，光學(xué) 檢測頭都能夠準(zhǔn)確的、高重復(fù)性的聚焦在反應(yīng)管的正中心上方，所以光路始終處于最優(yōu)狀態(tài)，而且無需額外占用一個檢測通道使用參照染料進(jìn) 行檢測校正。.溫控準(zhǔn)確度為土 0.2，溫度準(zhǔn)確性高可以避免引物與模板非特異性 結(jié)合引起的非特異性擴增，保證實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)的可靠性。.最大升降溫速率達(dá)5/秒，可大大縮短實驗所需時間。提高引物結(jié) 合特異性，保護(hù)聚合酶活性，避免低溫下聚合酶造成非特異性擴增。.可存儲至少100

7、0個反應(yīng)程序，此外可使用U盤擴展內(nèi)存，這樣可以 完全保存所有的已知實驗程序，使實驗結(jié)果有很好的重復(fù)性和可靠性。.自動編程：帶有程序自動編寫功能，輸入退火溫度和擴增片斷長度 等信息可自動生成擴增程序。.溫度梯度：進(jìn)口 PCR儀可同時運行8個不同的溫度，以不同的速率 升溫同時到達(dá)設(shè)定溫度，可以在最短時間內(nèi)進(jìn)行實驗條件優(yōu)化，控制引 物結(jié)合條件，檢測擴增效果。.出廠校準(zhǔn)一安裝簡單，光路精準(zhǔn). CFX ManagerTM軟件一基因表達(dá)分析功能，可對多個參考基因及每個 基因的擴增效率進(jìn)行歸一化.大型觸摸屏可以實現(xiàn)對儀器的完全控制和操作。二、可行性論證近年來，隨著生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的飛速發(fā)展，分子

8、生物學(xué)理論和技術(shù)已 滲透到了生命科學(xué)的各個領(lǐng)域，推動了生命科學(xué)的深入發(fā)展。PCR技術(shù)可以在生物體外擴增特異DNA片段的技術(shù)，能快速、特異地擴增目的DNA 片段。能通過試管內(nèi)的數(shù)小時反應(yīng)將特定的DNA片段擴增數(shù)百萬倍。迅速獲取大量 的單一核酸片段，為分子生物學(xué)研究提供了強大的工具。PCR反應(yīng)不僅可用于基因分 離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究，亦可用于遺傳疾病診斷及基因表達(dá)水平檢測等 用途。這項技術(shù)被廣泛地運用在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)實驗室，例如用于判斷檢體中是否會表 現(xiàn)某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制，以及親子鑒定等領(lǐng)域。實時熒光定量PCR技術(shù)的基本原理基于在普通PCR反應(yīng)多重循環(huán)中加入熒光標(biāo)記

9、物質(zhì)，實時檢測DNA復(fù)制過程，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通 過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。所謂real-time Q-PCR技術(shù)，是指在PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn) 曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光實時定量PCR儀作為最重要最基礎(chǔ)的分子 生物學(xué)實驗設(shè)備具有完全不可替代的應(yīng)用領(lǐng)域。擬引進(jìn)的Bio-Rad PCR設(shè)備具有高通量，靈敏快速、溫控穩(wěn)定、操作簡便、數(shù)據(jù) 重復(fù)性高等顯著特點，可以適應(yīng)我學(xué)科重大研究項目不斷增加、研究水平顯著提升后 對儀器設(shè)備的要求的要求。.安裝場地、水電、安全等必要條件落實情況（說明本

10、實驗室是否具備安裝該儀器設(shè)備的使 用環(huán)境、設(shè)施條件以及落實情況）：該儀器需要實驗室條件簡單，本平臺已經(jīng)具備相關(guān)條件。.所需配套設(shè)備落實情況（說明應(yīng)配套的儀器設(shè)備名稱、型號、用途等以及落實情況）：該儀器無需其它配套設(shè)備。.儀器設(shè)備運行維護(hù)經(jīng)費落實情況（說明儀器設(shè)備每年運行維護(hù)經(jīng)費的數(shù)量及其經(jīng)費來源情 況）：.儀器設(shè)備管理人員配備情況（說明本實驗室使用、維護(hù)、維修所購儀器設(shè)備的技術(shù)力量以及 設(shè)備管理人員姓名、職稱、專業(yè)、職責(zé)等情況，包括維護(hù)能力及培訓(xùn)計劃）：.國內(nèi)、省內(nèi)同類儀器設(shè)備配置情況：Dcode適于分子生物學(xué)、生化學(xué)微生物學(xué)等多種研究，是相關(guān)研究中不可或缺的一款儀器，廣泛應(yīng)用于各高校及研究所

11、等科研單位、疾病控制系統(tǒng)、檢驗檢疫、食品衛(wèi)生和風(fēng)險評估系統(tǒng)、醫(yī)療 系統(tǒng)、農(nóng)業(yè)、藥品相關(guān)公司等，如中科院、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院、環(huán)境科學(xué)研究院等單位，儀器品質(zhì)過 硬，客戶反映良好。.提供不少于三家國內(nèi)外廠商同類型儀器設(shè)備性能、價格、售后服務(wù)比較（說明所申購的 儀器設(shè)備的主要性能及選購某型號產(chǎn)品的理由，并進(jìn)行比較）：DCODE 突變檢測系統(tǒng)可實現(xiàn) DGGE （Denaturing Gradient Gel Electrophoresis 變性梯度凝膠 電泳，分為電泳方向與變性劑梯度濃度方向垂直與平行兩種）、CDGE （Constant Denaturing Gel Electrophoresis 恒濃度

12、變性凝膠電泳） 、TTGE（Temporal Temperature Gradient Electrophoresis 時間溫度梯度凝膠電泳）、SSCP（Single-Strand Conformation Polymorphism 單 鏈構(gòu)象多態(tài)）、HA （Heteroduplex Analysis 異源雙鏈檢測）和 PPT （Protein Truncation Tests） 方法的檢測。系統(tǒng)提供精確的溫度控制，可使電泳在5-70之間的恒定溫度下進(jìn)行。加熱器和溫控部分可使溫度最慢以0.1/h上升，最快200/h?？赏瑫r運行2塊16X 16c。專用的梯度形成 儀用于混合和傳送高、低密度的溶液

13、，產(chǎn)生線性梯度凝膠，無需蠕動泵或磁力攪拌器。通用灌膠系統(tǒng)，可同時制備2塊膠。專用的軟件對DNA序列進(jìn)行熔解分析，優(yōu)化引物設(shè)計，提高檢測分辨率在突變檢測系統(tǒng)相關(guān)研究中，Bio-Rad的DCODE是市場占有率最高的產(chǎn)品，非常多的相關(guān)文獻(xiàn)中 使用的均為該款產(chǎn)品。另外相關(guān)其他品牌還有荷蘭的IngenyPhorU系統(tǒng)，但是該系統(tǒng)在國內(nèi)的裝機 率非常低，參考文獻(xiàn)少，并且需要在國內(nèi)另購蠕動泵和攪拌器進(jìn)行梯度生產(chǎn)，非常繁瑣。相比之下，伯樂的DCODE系統(tǒng)包含了由凸輪操縱的人工梯度生成儀（包括聚乙烯細(xì)管，Y形管，配套注射器）Ingeny使用蠕動泵和攪拌器，自動化精確控制，制膠重復(fù)性更好。更外國內(nèi)的君意東方也有類似產(chǎn) 品，雖然價格及其低廉，但是產(chǎn)品質(zhì)量及售后服務(wù)培訓(xùn)難以保障，幾乎沒有參考文獻(xiàn)支持。Bio Rad公司是專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域知名公司，世界5大生命科學(xué)產(chǎn)品供應(yīng)商之一，完全有能力 為客戶提供優(yōu)秀的服務(wù)及合作機會。公司在全國設(shè)有多個辦事處，擁有完善的演示培訓(xùn)實驗室并會 定期舉辦相關(guān)產(chǎn)品的培訓(xùn)交流課程。多個資深工程師及技術(shù)支持可提供快速、良好的儀器安裝培訓(xùn) 及協(xié)助解決后續(xù)實驗過程中的各種技術(shù)問題。綜合考慮儀器性能、價格和后續(xù)長期的售后服務(wù)等因素，此次擬購Bio Rad公司的TC20自動 細(xì)胞計數(shù)儀，以便于檢測和