動物細(xì)胞融合和單克隆和抗體

1、人獸混合胚胎合成示意圖 人獸混合胚胎是指利用即克隆技術(shù),將人體細(xì)胞的細(xì)胞核，放入已經(jīng)去核的動物卵細(xì)胞，使融合后的細(xì)胞發(fā)育到囊胚階段，并提取到胚胎干細(xì)胞。 導(dǎo)入新課如果放行“人獸胚胎”能否出現(xiàn)人猿戰(zhàn)士把人類細(xì)胞注入到動物大腦 “引起倫理界最大關(guān)注的事件” 在陽光普照的美國圣路易斯加勒比海岸的實(shí)驗(yàn)室里，耶魯大學(xué)研究人員正在把數(shù)百萬人類腦細(xì)胞注入深受帕金森病折磨的猴子大腦中。 很多不同種類的動物細(xì)胞之間或動物與人的細(xì)胞之間都能進(jìn)行融合，形成雜種細(xì)胞，例如人鼠、人兔、人雞、人蛙、鼠雞、鼠兔、鼠猴等的細(xì)胞都能進(jìn)行融合。在中國的一家農(nóng)場里也飼養(yǎng)了29只體內(nèi)被注入人類細(xì)胞的山羊，科學(xué)家在這群山羊的胚胎中注入

2、了人類血細(xì)胞。 人與動物的細(xì)胞融合 引起外界眾說紛紜 從事該項(xiàng)研究的科學(xué)家堅(jiān)持認(rèn)為，倫理學(xué)所控訴的實(shí)驗(yàn)有助于他們更好地了解疾病，且更有希望治愈一些病癥。 社會保守派抗議“任何形式的人類克隆實(shí)驗(yàn)”和“人類與動物的混合接種實(shí)驗(yàn)”，并將其列為“醫(yī)學(xué)研究濫用最惡劣的行為”。專題2 細(xì)胞工程 2.2.2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2.2動物細(xì)胞工程1、簡述動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別。1、培養(yǎng)學(xué)生知識遷移能力、思維能力。知識目標(biāo)能力目標(biāo)教學(xué)目標(biāo)2、簡述單克隆抗體的制備及應(yīng)用。 2、提高獨(dú)立獲取知識的能力、邏輯思維能力、分析問題和解決問題的能力。情感態(tài)度與價值觀 1、初步培養(yǎng)學(xué)生勇于探索，不斷創(chuàng)新的精

3、神和合作精神。 2、明確人們對生命奧秘的揭示愈加廣泛和深入，知識不斷更新并向前發(fā)展。認(rèn)識到學(xué)無止境，形成終生學(xué)習(xí)的意識。用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程。重點(diǎn)難點(diǎn)教學(xué)重難點(diǎn)動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件。用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程。你能回憶出植物體細(xì)胞雜交的過程嗎？能否采用類似的方法將不同動物的細(xì)胞進(jìn)行在雜交呢？如人鼠融合細(xì)胞：雜交細(xì)胞細(xì)胞融合人細(xì)胞小鼠細(xì)胞紅色熒光燃料標(biāo)記的膜蛋白綠色熒光燃料標(biāo)記的膜蛋白兩個細(xì)胞正在融合 受精作用1、動物細(xì)胞融合1.1概念： 動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞形成一個細(xì)胞的過程。雜交細(xì)胞 融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)

4、胞，成為雜交細(xì)胞。1.2單個動物細(xì)胞的獲得： 動物細(xì)胞雖然沒有細(xì)胞壁，但細(xì)胞間的連接方式多樣而復(fù)雜，在進(jìn)行有效的細(xì)胞融合之前，也必需獲得單個分散的細(xì)胞。組織的獲得 采用各種適宜的方法處死動物，取出組織塊放入小燒杯中，用剪刀將組織塊剪碎。組織的消化 利用生物化學(xué)的方法將剪碎的組織塊分散成細(xì)胞團(tuán)或單細(xì)胞。膠原酶消化 是一種由細(xì)菌中提取的酶，對膠原和細(xì)胞間質(zhì)有較強(qiáng)的消化作用。單個動物細(xì)胞的獲取方法細(xì)胞核病毒顆粒細(xì)胞核滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜連接細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞融合，形成雜種細(xì)胞1.3動物細(xì)胞融合的過程：為什么用滅活的病毒？ 病毒一般對生物體是有傷害的。滅活使病毒或細(xì)菌失去感染能力，

5、但并不破壞這些病毒的抗原結(jié)構(gòu)。仙臺病毒物理或化學(xué)方法喪失感染活性保留融合活性滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么？ 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。誘導(dǎo)方式物理法：化學(xué)法：生物法：1.4誘導(dǎo)融合的方法：電激法、電穿孔、電融合技術(shù)、 聚乙二醇等誘導(dǎo)因素法滅活的病毒細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞太空細(xì)胞融合“神舟”四號：細(xì)胞“太空婚禮” 空間細(xì)胞融合試驗(yàn)，為空間制藥和培育生物新品種探索新的方法。 空間細(xì)胞融合儀1.4動物細(xì)胞融合的意義： 突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。至今，種間、屬間、

6、科間甚至動物與植物細(xì)胞之間的融合已經(jīng)取得了成功。1.5動物細(xì)胞融合的應(yīng)用： 成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體.2.1什么叫抗體： 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。 抗體是由B淋巴細(xì)胞分化形成的漿細(xì)胞合成、分泌的。2、單克隆抗體2.2抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法：再從動物血清中分離抗體輸入漿細(xì)胞動物體內(nèi) 某抗體 某抗原 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何獲得大量化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？該法制備抗體的特點(diǎn)：思考與探究一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖雜交瘤

7、細(xì)胞既能分泌一種特異性抗體又能無限增殖1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒設(shè)想：2.3單克隆抗體的概念： 由一個效應(yīng)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖形成的一個細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體，即單克隆抗體。單個細(xì)胞無性繁殖化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)單：克隆：抗體：單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系：每一個淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。動物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。想一想2.4單克隆抗體的制備過程： 單克隆抗體制備過程 注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選

8、，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體細(xì)胞水平的克隆2.5單克隆抗體的應(yīng)用：作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合。用于運(yùn)載藥物：制成生物導(dǎo)彈治療疾病：主要用于癌癥治療對比多莉羊和課本高產(chǎn)奶牛的克隆過程，找出操作過程的不同點(diǎn)？ 多莉克隆過程的受體細(xì)胞是去核卵細(xì)胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程的受體細(xì)胞是去核卵母細(xì)胞；多莉克隆過程是將供體細(xì)胞核注入受體細(xì)胞，而高產(chǎn)奶牛的克隆過程是將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞。想一想 卵母細(xì)胞當(dāng)中的細(xì)胞周期蛋白含量、活性比卵細(xì)胞高，用它作受體更容易成功. 將供體細(xì)胞注入受體細(xì)胞，使克隆動物更像供體動物，操作也方便.討論分析上述哪

9、一種措施更科學(xué)？并說明理由？想一想課堂小結(jié)兩個過程動物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法滅活病毒一個新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢課堂練習(xí)1.單克隆抗體制備的原理: 利用_產(chǎn)生特異性抗體的功能。 利用_無限增殖的特性。 利用_技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得 雜交瘤細(xì)胞。 利用_技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞培養(yǎng)2.在動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 （）A.結(jié)果是相同的B.雜種細(xì)胞的形成過程基本相同C.操作過程中酶的作用相同D.誘導(dǎo)融合的手段相同3.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)

10、胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 （ ） AA.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞4. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 （ ） 淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A BC. DC主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株主要用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合 細(xì)胞融合的 方法細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性植物細(xì)胞全能性細(xì)胞融合的 原理動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目去除細(xì)胞壁后誘5.簡述植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融