疣清顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、疣清顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究【摘要】目的建立疣清顆粒質(zhì)量控制方法。方法采用薄層色譜法對制劑中香附、白芍進展定性鑒別；對組方中有效成分黃芪甲苷用反相高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法(rp-hpl-elsd)進展定量分析。結(jié)果薄層色譜中斑點明晰,易于識別；rp-hpl-elsd法精細(xì)度、重現(xiàn)性良好,黃芪甲苷在1.0325.16g范圍內(nèi)具有較好的線性關(guān)系,平均加樣回收率為99.0516%,rsd1.05%。結(jié)論在本研究根底上制定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可以控制本品的內(nèi)在質(zhì)量,方法是可行的?！娟P(guān)鍵詞】疣清顆粒；黃芪甲苷；反相高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法；薄層色譜法abstrat：bjetivetestablishthequ

2、alityntrlethdfryuqinggranules.ethdsqualitatindisriinatinfrhizayperiandraidixpaeniaeinthisfrulaasidentifiedbytl.quantitiveanalysisfastragalsideahihistheeffetiveeleentfthefrulaasadptedbyrp-hpl-elsd.resultthespeksintlerelearandeasytdisriinate.thepreisinandreprduibilityftherp-hpl-elsdethderefine.in1.032

3、5.16g,thententfastragalsideahadgdlinearrelatinship.theaveragereveryratefsapleas99.0516%,andrsd1.05%.nlusinthequalitystandardestablishednthisstudyanntrlthequalityftheprduts,theethdisviable.keyrd：yuqinggranules；astragalsidea；rp-hpl-elsd；tl疣清顆粒由黃芪、白芍、香附、薏苡仁等藥物組成,具有清熱解毒、托毒排膿、斂瘡生肌成效,主要用于治療鋒利濕疣等皮膚玻本試驗采用薄層

4、色譜法對方中黃芪、香附、白芍進展薄層鑒別。黃芪是方中主藥,因此,選定黃芪甲苷為該制劑的含量測定工程,采用反相高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法(rp-hpl-elsd)進展檢測,以制定該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。1儀器、試劑與藥品日本島津h-2000高效液相色譜儀(日本島津公司)；kq-500e型醫(yī)用超聲清洗器(昆山超聲儀器)；td5a低速臺式離心機(長沙湘儀離心機)；ay220電子天平(島津)；lihrpher18(5,4.6id15)色譜柱(淮陰漢邦科技；硅膠g(青島海洋化工廠)。黃芪甲苷對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號為110781-202211)。黃芪、白芍、薏苡仁、香附等藥材購自遼寧省

5、藥材公司,經(jīng)鑒定,符合2022年版?中華人民共和國藥典?(一部)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。疣清顆粒樣品自制,批號為060611,060613,060615。甲醇為色譜純,其余所用試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1薄層色譜鑒別2.1.1白芍1取本品3g,加乙醇10l,超聲處理10in,濾過,濾液蒸干,殘渣加乙醇1l使溶解,作為供試品溶液。另取白芍對照藥材0.5g,同法制成對照藥材溶液。再取除白芍外的其它處方量藥材,按制備工藝制成缺白芍的陰性樣品,取適量陰性樣品同法制成缺白芍的陰性對照溶液。照薄層色譜法2022年版?中華人民共和國藥典?(一部)附錄b試驗,分別汲取上述3種溶液10l,分別點于同一硅膠g薄層板上,以

6、二氯甲烷-甲醇-丙酮(842)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,加熱至斑點顯色明晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯一樣顏色的斑點。陰性對照無干擾。2.1.2香附2取本品4.6g,加溫水(50)30l,超聲處理10in,水溶液用乙醚提取2次,每次30l,合并乙醚液,揮去乙醚,殘渣加醋酸乙酯1l使溶解,作為供試品溶液。另取香附對照藥材0.5g,同法制成對照藥材溶液。另按處方及工藝分別制備不含香附的陰性樣品,同法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法2022年版?中華人民共和國藥典?(一部)附錄b試驗,汲取上述溶液各5l,分別點于同一硅膠g薄層板上,以二氯甲烷-甲苯(32)

7、為展開劑,展開,取出,晾干,噴以2,4-二硝基苯肼乙醇試液,放置1h,斑點漸變?yōu)槌燃t色,而陰性對照液在相應(yīng)位置上無此斑點。2.2黃芪甲苷的含量測定2.2.1色譜條件3色譜柱為lihrspher18(5,4.6id15,淮陰漢邦科技)；流動相：甲醇-水(8020)；流速：1l/in；柱溫：25。elsd檢測溫度：92；氣體流量2.24l/in。2.2.2對照品溶液的制備和線性關(guān)系的考察精細(xì)稱取黃芪甲苷對照品5.16g置于10l容量瓶中并定容至刻度,得到濃度為0.516g/l的對照品溶液。分別取對照品溶液,用甲醇稀釋成0.1032、0.2064、0.3096、0.4128、0.516g/l黃芪甲苷

8、溶液,按上述色譜條件測定。以黃芪甲苷的進樣量常用對數(shù)為縱坐標(biāo),黃芪甲苷的峰面積常用對數(shù)為橫坐標(biāo),回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線：lga0.779133lg7.380524,r0.999973。結(jié)果說明,黃芪甲苷的進樣量在1.0325.16g范圍內(nèi),與其峰面積有良好的線性關(guān)系。2.2.3供試品溶液的制備與測定取疣清顆粒2.5g,混勻,精細(xì)稱定,置于錐形瓶中,加水50l,浸泡30in,超聲波處理30in,放冷,用水飽和正丁醇萃取3次(40、40、30l),分取正丁醇層置于上述分液漏斗中,參加40%氨試液洗滌2次,每次40l,棄去氨試液,分取正丁醇提取液,水浴蒸干,殘渣加蒸餾水35l溶解,放冷,通過d101大孔樹脂

9、柱(內(nèi)徑1.5,長12),以水50l洗脫,棄去水液,再用40%乙醇30l洗脫,棄去40%乙醇洗脫液,繼續(xù)用70%乙醇50l洗脫,搜集洗脫液,蒸干,用甲醇轉(zhuǎn)移并定容至5l容量瓶中。從該溶液中取一局部用0.45微孔過濾器過濾后即得疣清顆粒供試品溶液。取上述供試品溶液10l注入液相色譜儀,測定峰面積。2.2.4精細(xì)度考察按選定的黃芪甲苷hpl測定條件,精細(xì)汲取同一對照品溶液,進樣10l,重復(fù)進樣6次,測定黃芪甲苷峰面積,結(jié)果rsd1.19%(n6)。2.2.5重復(fù)性試驗準(zhǔn)確稱取疣清顆粒2.5g,共6份,按上述供試品溶液的制備方法制備,各進樣10l,每份樣品進2針,測定黃芪甲苷峰面積,rsd0.92%

10、(n6)。2.2.6穩(wěn)定性考察將同一樣品溶液,在0、2、8、12、16、20h分別進樣10l,記錄峰面積,結(jié)果說明,峰面積的rsd0.71%(n6)。說明供試品溶液在20h內(nèi)是穩(wěn)定的。2.2.7加樣回收率試驗取已測知含量的樣品適量,共6份,分別參加等同于樣品中黃芪甲苷含量80%、100%、120%的黃芪甲苷對照品,按“2.2.3項下同法測定,用外標(biāo)兩點法計算含量。結(jié)果見表1。表1黃芪甲苷加樣回收率測定結(jié)果略2.2.8含量測定取疣清顆粒3批樣品(自制,批號為060611、060613、060615),按供試品溶液制備方法制備樣品液,按上述色譜條件進展測定,進樣10l,每份重復(fù)進樣2次,測定疣清顆粒中黃芪甲苷含量。結(jié)果見表2。表2疣清顆粒樣品含量測定結(jié)果(略)3討論疣清顆粒中白芍、香附薄層鑒別與陰性對照品相比無干擾,且重現(xiàn)性較好。香附薄層色譜鑒別參照有關(guān)文獻報道,噴以2,4-二硝基苯肼乙醇試液,放置片刻后斑點顯現(xiàn)不明顯,根據(jù)試驗結(jié)果,需放置1h后斑點漸顯,且在較長時間內(nèi)斑點明顯,不褪色。黃芪甲苷含量測定方法已報道有比色法、薄層掃描法、hpl法等,其中hpl法大多用紫外檢測器于203n處檢測。在預(yù)試驗中,曾使用紫外檢測器檢測,結(jié)果干擾較大,基線漂移嚴(yán)重,測定結(jié)果不穩(wěn)定,而改用rp-hpl-elsd進展檢測,空白無干