桔梗的祛痰鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn)

1、桔梗的祛痰鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn)第1頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四桔梗(Platycodon grandiforus)，桔?？平酃僦参铮嗄晟荼?，葉子卵形或卵狀披針形，花暗藍(lán)色或暗紫白色，可作觀(guān)賞花卉。其藥用部位為桔梗的干燥根部，味苦、辛，性微溫，入肺經(jīng)，能祛痰止咳，并有宣肺、排膿作用。其嫩莖葉和根均可供蔬食。盛產(chǎn)于我國(guó)東北部地區(qū)，是朝鮮族的特色菜。桔梗皂甙有很強(qiáng)的溶血作用，其溶血指數(shù)與其來(lái)源產(chǎn)地和生長(zhǎng)年限、采集時(shí)間、加工方法等因素相關(guān)，從1：100 到1 ：1000 不等。韌皮部的溶血作用為本質(zhì)部的4.4-6.5倍，不去皮的桔梗溶血作用略大于去皮桔梗。因此桔梗不可注射給藥。小

2、鼠皮下注射的最小致死量為770mg/kg。粗桔梗皂甙灌胃小鼠和大鼠的半數(shù)致死量分別為420mg/kg和800mg/kg，皮下注射分別為22.3mg/kg和14.1mg/kg。灌胃大劑量桔梗皂甙，可反射性興奮嘔吐中樞，可引起惡心、嘔吐。桔梗第2頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)小鼠氨水引咳法，觀(guān)察桔梗水煎液的止咳作用；學(xué)習(xí)酚紅從呼吸道排泌的實(shí)驗(yàn)方法，觀(guān)察桔梗水煎液對(duì)小鼠氣管段酚紅排泌量的影響第3頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【實(shí)驗(yàn)原理】化學(xué)刺激物可作用于呼吸道感受器，反射性地引起咳嗽。故，凡能抑制咳嗽中樞或降低呼吸道感受器敏感性的藥

3、物均有止咳作用。于小鼠腹腔注射酚紅后，后者可以部分地從氣管分泌排出。將氣管段放入定量的生理鹽水中，加入NaHCO3使其顯色。用紫外分光光度計(jì)測(cè)出酚紅的排泌量，從而得知藥物的化痰作用。桔梗所含的皂苷經(jīng)口服刺激咽喉黏膜和胃黏膜，反射性地增加支氣管粘膜分泌，使痰液稀釋而易被排出。桔梗及桔梗皂苷亦有鎮(zhèn)咳作用第4頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【實(shí)驗(yàn)步驟】一、 止咳藥實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠，禁食不禁水12h，雌雄各半，體重1822g實(shí)驗(yàn)器材：500mL燒杯，表面皿（直徑小于燒杯），篩網(wǎng)實(shí)驗(yàn)藥品：濃氨水，桔梗水煎液（1g/mL），苦味酸，生理鹽水第5頁(yè)，共11頁(yè)，2022

4、年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【實(shí)驗(yàn)方法】篩選小鼠：將小鼠置于500mL燒杯中，在直徑小于燒杯的表面皿內(nèi)放一棉球，上面加蓋篩網(wǎng)，向棉球中注入0.4mL濃氨水，迅速將燒杯倒置，使得氨水刺激小鼠引發(fā)咳嗽（腹肌收縮，同時(shí)張大嘴，有時(shí)有咳聲）。以1min內(nèi)咳嗽次數(shù)3次判定為咳嗽模型初步篩選成功。用于接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)。將篩選出的小鼠標(biāo)記稱(chēng)重，隨機(jī)分為兩組。甲組灌服桔梗水煎液20mL/kg（0.2mL/10g），乙組灌服等體積生理鹽水。給藥30min后，氨水刺激小鼠咳嗽，以倒置燒杯發(fā)生咳嗽的時(shí)間為咳嗽潛伏期，3min內(nèi)不咳嗽者，記為3min，記錄小鼠3min內(nèi)咳嗽次數(shù)。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)第6頁(yè)，共11頁(yè)，20

5、22年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【結(jié)果處理】桔梗水煎液鎮(zhèn)咳實(shí)驗(yàn)研究組別 動(dòng)物數(shù)量（只） 劑量（g/kg） 咳嗽潛伏期（s） 咳嗽次數(shù)（次）生理鹽水組桔梗水煎液組第7頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四二、祛痰實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小白鼠，禁食不禁水12h，雌雄各半，體重1822g實(shí)驗(yàn)器材：手術(shù)剪，鑷子，注射器，灌胃針頭，小試管，試管架，蛙板，721型或723型分光光度計(jì)，離心機(jī)實(shí)驗(yàn)藥品：桔梗水煎液（1g/mL），生理鹽水，苦味酸，5%NaHCO3，0.5%酚紅溶液第8頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【實(shí)驗(yàn)方法】取12只小鼠，標(biāo)記，稱(chēng)重，隨機(jī)

6、分為兩組甲組灌服桔梗水煎液20mL/kg（0.2mL/10g），乙組灌服等體積生理鹽水。給藥30min后，由腹腔注射酚紅溶液（0.5mL/只），30min后頸椎脫臼處死。剝?nèi)夤苤車(chē)M織，剪下自甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管，放進(jìn)盛有3ml生理鹽水的試管中，再加入5%NaHCO3溶液，離心后取上清液，用分光光度計(jì)（波長(zhǎng)546nm）測(cè)定OD值，計(jì)算祛痰指數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。第9頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【數(shù)據(jù)處理】桔梗水煎液的祛痰實(shí)驗(yàn)研究組別 動(dòng)物數(shù)量（只） 劑量（g/kg） 氣管酚紅排泌量（g/mL）生理鹽水組桔梗水煎液組第10頁(yè)，共11頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)37分，星期四【注意事項(xiàng)】給藥至處死動(dòng)物的時(shí)間必