新型冠狀病毒中和抗體類藥物非臨床研究

1、新型冠狀病毒中和抗體類藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）（征求意見稿）藥品審評(píng)中心2021年4月目 錄 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc70322869 一、前言 PAGEREF _Toc70322869 h 1 HYPERLINK l _Toc70322870 二、基本考慮 PAGEREF _Toc70322870 h 1 HYPERLINK l _Toc70322871 三、受試物要求 PAGEREF _Toc70322871 h 3 HYPERLINK l _Toc70322872 四、藥理學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322872 h 3 HYPE

2、RLINK l _Toc70322873 （一）體外作用機(jī)制研究 PAGEREF _Toc70322873 h 3 HYPERLINK l _Toc70322874 （二）體外中和活性和耐藥性研究 PAGEREF _Toc70322874 h 4 HYPERLINK l _Toc70322875 （三）動(dòng)物感染模型體內(nèi)藥效學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322875 h 4 HYPERLINK l _Toc70322876 （四）免疫學(xué)特性研究 PAGEREF _Toc70322876 h 5 HYPERLINK l _Toc70322877 五、藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc7

3、0322877 h 5 HYPERLINK l _Toc70322878 六、毒理學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322878 h 5 HYPERLINK l _Toc70322879 （一）組織交叉反應(yīng) PAGEREF _Toc70322879 h 5 HYPERLINK l _Toc70322880 （二）安全藥理學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322880 h 6 HYPERLINK l _Toc70322881 （三）一般毒理學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322881 h 6 HYPERLINK l _Toc70322882 （四）免疫毒性 PAGEREF _Toc703

4、22882 h 7 HYPERLINK l _Toc70322883 （五）制劑安全性試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322883 h 7 HYPERLINK l _Toc70322884 （六）特殊毒理學(xué)試驗(yàn) PAGEREF _Toc70322884 h 7一、前言目前，臨床急需針對(duì)新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）（簡(jiǎn)稱：新冠病毒）的治療和控制（預(yù)防）性藥物。為積極應(yīng)對(duì)新冠病毒感染肺炎（COVID-19）疫情，加速和促進(jìn)新冠病毒中和抗體類藥物（簡(jiǎn)稱：新冠中和抗體）的研發(fā)，特制定本指導(dǎo)原則。本指導(dǎo)原則基于當(dāng)前的科學(xué)認(rèn)知水平，同時(shí)考慮當(dāng)前新冠病毒疫情的狀態(tài)而制定，用于指導(dǎo)應(yīng)急狀態(tài)下新冠中和

5、抗體的非臨床研究。隨著對(duì)新冠病毒及COVID-19認(rèn)知的深入、非臨床研究的進(jìn)展情況，以及公共衛(wèi)生狀態(tài)的改變，本指導(dǎo)原則將適時(shí)更新。二、基本考慮本指導(dǎo)原則適用于新冠中和抗體類藥物。新冠中和抗體以基因重組技術(shù)表達(dá)制備的單克隆抗體為主，其非臨床評(píng)價(jià)應(yīng)參考ICH S6（R1）、ICH M3（R2）等相關(guān)指導(dǎo)原則，同時(shí)應(yīng)根據(jù)中和抗體特點(diǎn)和品種具體情況開展相關(guān)研究工作。支持進(jìn)行臨床試驗(yàn)和上市的毒理學(xué)試驗(yàn)應(yīng)遵循非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（GLP）。對(duì)于因采用特殊試驗(yàn)系統(tǒng)而無法遵循GLP的要求的，應(yīng)明確不遵循的情況，并評(píng)估其對(duì)總體安全性評(píng)價(jià)的影響。新冠中和抗體的主要作用機(jī)制為靶向結(jié)合新冠病毒的包膜蛋白通常為刺突蛋

6、白（簡(jiǎn)稱S蛋白），其介導(dǎo)病毒與宿主細(xì)胞上的受體人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（hACE2）結(jié)合，阻止病毒吸附于易感細(xì)胞，進(jìn)而阻斷病毒進(jìn)入胞內(nèi)進(jìn)行增殖。根據(jù)不同品種開發(fā)時(shí)的設(shè)計(jì)，新冠中和抗體可能還通過其它作用來發(fā)揮對(duì)感染細(xì)胞內(nèi)病毒的清除作用。因此，新冠中和抗體的非臨床研究中，應(yīng)闡明并驗(yàn)證中和抗體的設(shè)計(jì)理念，表征其可能的作用機(jī)制?；谄渌《荆ㄈ绲歉餆岵《荆┑囊呙绾涂贵w開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，抗體Fc段與宿主細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合，有可能會(huì)導(dǎo)致抗體依賴增強(qiáng)效應(yīng)（ADE），從而導(dǎo)致感染增強(qiáng)。目前尚不清楚抗體Fc段介導(dǎo)的功能效應(yīng)在預(yù)防和治療COVID-19中的作用及ADE風(fēng)險(xiǎn)。因此，應(yīng)評(píng)估新冠中和抗體潛在的ADE風(fēng)險(xiǎn)。新冠病毒

7、作為一種RNA病毒，在流行傳播過程中容易發(fā)生突變，這些突變（尤其是發(fā)生在結(jié)合表位附近的突變）可能會(huì)導(dǎo)致病毒變異株對(duì)新冠中和抗體的敏感性降低，因此建議測(cè)定中和抗體對(duì)正在流行或可能即將流行的臨床分離株（包括變異株）的中和活性和耐受性。新冠中和抗體直接作用于外源靶點(diǎn)（病毒），可考慮在一種合適的種屬中進(jìn)行短期安全性試驗(yàn)，同時(shí)結(jié)合組織交叉反應(yīng)等試驗(yàn)綜合評(píng)估中和抗體的非臨床安全性。在疾病模型中的藥效學(xué)試驗(yàn)中納入安全性評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)評(píng)估安全性也有一定的參考價(jià)值。三、受試物要求非臨床研究用樣品應(yīng)能代表臨床試驗(yàn)擬用樣品。若產(chǎn)品在開發(fā)過程中發(fā)生工藝變更，應(yīng)對(duì)變更前后的產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量對(duì)比研究。當(dāng)質(zhì)量分析數(shù)據(jù)不足以確定可

8、比性時(shí)，需進(jìn)行非臨床橋接研究，以評(píng)估藥學(xué)質(zhì)量差異對(duì)安全性、有效性和免疫原性等的潛在影響。原則上，建議采用經(jīng)篩選的單克隆細(xì)胞建庫生產(chǎn)非臨床研究用樣品。若為縮短開發(fā)周期而在研發(fā)早期采用瞬轉(zhuǎn)工藝或非單克隆細(xì)胞群生產(chǎn)，并采用此種樣品進(jìn)行非臨床評(píng)價(jià)，在后續(xù)研究時(shí)需評(píng)估瞬轉(zhuǎn)工藝或非單克隆細(xì)胞群造成產(chǎn)品質(zhì)量差異對(duì)藥學(xué)及非臨床研究造成的影響。應(yīng)建立起非臨床研究用樣品與擬進(jìn)行人體試驗(yàn)用樣品之間的相關(guān)性，進(jìn)行質(zhì)量可比性分析，從而為后續(xù)的人體試驗(yàn)提供安全性方面的支持。具體橋接性要求參見新冠中和抗體藥學(xué)相關(guān)指導(dǎo)原則。四、藥理學(xué)試驗(yàn)（一）體外作用機(jī)制研究應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的設(shè)計(jì)理念進(jìn)行相應(yīng)的概念驗(yàn)證試驗(yàn)，表征中和抗體可能的作用

9、機(jī)制。期臨床試驗(yàn)前，應(yīng)進(jìn)行與新冠病毒S蛋白/S蛋白亞基/S蛋白受體結(jié)合區(qū)域（RBD）等的結(jié)合活性（包括對(duì)平衡解離常數(shù)KD的測(cè)定）、對(duì)靶蛋白與其受體（ACE2）的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合活性/阻斷作用等研究。結(jié)合活性研究中建議包含對(duì)S蛋白和/或S蛋白R(shí)BD突變體的研究。結(jié)合表位的保守性/多態(tài)性可能會(huì)影響抗體的結(jié)合，建議表征中和抗體的結(jié)合表位。（二）體外中和活性和耐藥性研究期臨床試驗(yàn)前，應(yīng)采用具有代表性的流行新冠病毒分離株（活病毒）和假病毒進(jìn)行體外中和活性試驗(yàn)。開發(fā)過程中應(yīng)持續(xù)監(jiān)測(cè)新冠病毒的基因組庫，對(duì)于正在或即將流行、在靶表位附近有突變的變異株，應(yīng)測(cè)定這些突變是否會(huì)影響抗體的中和活性。在開發(fā)過程中，鼓勵(lì)將病毒在

10、含有抗體的體外培養(yǎng)細(xì)胞中連續(xù)傳代，以了解中和抗體治療的耐藥性風(fēng)險(xiǎn)和特征。對(duì)于采用此種方式選擇的耐藥株，應(yīng)進(jìn)行表型和基因型鑒定，并評(píng)估耐藥株對(duì)其他已批準(zhǔn)中和抗體的交叉耐藥性。（三）動(dòng)物感染模型體內(nèi)藥效學(xué)試驗(yàn)?zāi)壳耙延卸喾N動(dòng)物感染模型可用于新冠病毒藥物研究和開發(fā)，包括hACE2轉(zhuǎn)基因小鼠、倉鼠、雪貂、食蟹猴、恒河猴等。這些模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)，不同的模型組合可用于解決不同問題。應(yīng)采用合適的動(dòng)物感染模型，考察中和抗體在動(dòng)物體內(nèi)是否有治療和/或預(yù)防作用（基于其臨床定位）。建議研究量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系。動(dòng)物感染模型試驗(yàn)應(yīng)在患者臨床試驗(yàn)開展前完成。對(duì)于體外試驗(yàn)提示有ADE風(fēng)險(xiǎn)擔(dān)憂的中和抗體，應(yīng)在動(dòng)物感染模型試驗(yàn)中

11、評(píng)估潛在的ADE風(fēng)險(xiǎn)，該試驗(yàn)應(yīng)在首次人體臨床試驗(yàn)前完成。（四）免疫學(xué)特性研究作為單克隆抗體，應(yīng)詳細(xì)描述抗體的免疫學(xué)特性。應(yīng)基于抗體特別設(shè)計(jì)相應(yīng)的檢測(cè)項(xiàng)目，包括Fc受體、人新生兒Fc受體（FcRn）、C1q的結(jié)合活性研究，評(píng)估Fc介導(dǎo)的功能效應(yīng)（如ADCC、CDC、ADCP效應(yīng)等）。ADE風(fēng)險(xiǎn)是中和抗體所特別關(guān)注的一種風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)提供ADE風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估資料。五、藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)應(yīng)提供至少一種動(dòng)物的藥代動(dòng)力學(xué)（PK）或毒代動(dòng)力學(xué)（TK）試驗(yàn)數(shù)據(jù)，獲得完整的藥時(shí)曲線，明確其PK特征。六、毒理學(xué)試驗(yàn)（一）組織交叉反應(yīng)應(yīng)采用體外試驗(yàn)來評(píng)估中和抗體與一系列人體和/或動(dòng)物組織的交叉反應(yīng)性。體外組織交叉反應(yīng)試驗(yàn)有助于毒

12、理學(xué)的種屬選擇。若發(fā)現(xiàn)與人體組織有特異性的結(jié)合，應(yīng)進(jìn)一步研究，如采用與人體相似交叉反應(yīng)模式的動(dòng)物開展體內(nèi)毒理學(xué)試驗(yàn)。（二）安全藥理學(xué)試驗(yàn)安全藥理學(xué)試驗(yàn)可單獨(dú)進(jìn)行，也可結(jié)合在一般毒理學(xué)試驗(yàn)中。若結(jié)合于一般藥理學(xué)試驗(yàn)中，應(yīng)關(guān)注安全藥理學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)應(yīng)符合評(píng)價(jià)的要求。（三）一般毒理學(xué)試驗(yàn)新冠中和抗體直接作用于外源靶點(diǎn)，通常不會(huì)與人和動(dòng)物組織/蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，可采用一種動(dòng)物種屬（應(yīng)說明種屬選擇的合理性及依據(jù)）開展一項(xiàng)短期的重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)用于支持臨床試驗(yàn)和上市。為加快新冠中和抗體的臨床轉(zhuǎn)化，擴(kuò)展的單次給藥毒性試驗(yàn)也可用于支持在健康受試者中進(jìn)行的單次給藥的期臨床試驗(yàn)。臨床試驗(yàn)期間再繼續(xù)進(jìn)行重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)，以用于支持后續(xù)臨床試驗(yàn)和上市。擴(kuò)展的單次給藥毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)（動(dòng)物數(shù)、檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)和終點(diǎn)指標(biāo)等）應(yīng)符合ICH M3（R2）的要求。重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)的給藥期限和恢復(fù)期應(yīng)綜合考慮人IgG抗體和中和抗體本身的半衰期、臨床試驗(yàn)給藥方案等因素，進(jìn)行合理設(shè)計(jì)。一般毒理學(xué)試驗(yàn)中應(yīng)進(jìn)行免疫原性評(píng)價(jià)，并分析其對(duì)PK和安全性評(píng)價(jià)的影響。（四）免疫毒性建議在單次/重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中進(jìn)行免疫毒性考察，如免疫細(xì)胞表型分析、免疫球蛋白、細(xì)胞因子等的測(cè)定。必要時(shí)采用體外試驗(yàn)或在體內(nèi)藥效學(xué)試驗(yàn)中評(píng)估潛在的免疫毒性風(fēng)險(xiǎn)，如體外細(xì)胞因子釋放試驗(yàn)，在藥效學(xué)試驗(yàn)中增加安全性評(píng)價(jià)指標(biāo)。（五）制劑