干化學、尿流式儀及顯微鏡尿液沉渣檢查的關系課件

1、向兄弟單位學習干化學、尿流式儀及顯微鏡尿沉渣檢查的關系三零一醫(yī)院叢玉隆尿液沉查鏡檢歷史Ismail（1000年前），宏觀在對尿液進行分析Bright（1827年）首次發(fā)現管型Bird（1854年）Purdy（1900年）進一步證明了尿沉渣檢查的臨床價值Addis（1948年）建立了尿沉渣物定量檢查法美國NCCLS（1991年）提出了“尿常規(guī)分析”的推薦標準（GP16-P）；經過四年實踐以提出了“尿液分析和尿液標本采集、轉運和保存”（1995年）的標準文件（GP-16A）日本JCCLS（1995年）制定了“尿沉渣檢查標準）中華醫(yī)學會第一次全國臨床檢驗學術會議（1983年會議）提出了尿常規(guī)檢查標準

2、化問題中華醫(yī)學會檢驗分會臨床血液學檢驗與尿液分析專題研討會提出了我國尿沉渣的推薦標準（1995年武夷山會議）。尿常規(guī)檢查的重要意義泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和療效觀察其它系統(tǒng)疾病的診斷職業(yè)病的輔助診斷安全用藥的監(jiān)護尿液常規(guī)檢查項目沉渣顯微鏡檢化學成份分析外觀檢查標準化尿沉渣檢查方法標準沉渣檢查系統(tǒng)自動充液儀檢查倒置顯微鏡檢查法Censide 檢查系統(tǒng)干化學紅、白細胞檢測與鏡檢的關系9/19/202210解放軍總醫(yī)院 干化學尿紅、白細胞檢查與鏡檢關系 尿沉渣的標準化、規(guī)范化 操作規(guī)程為：尿液10ml，離心5分鐘，相對離心力（RCF）為400 g，剩余沉淀為0.2ml，混勻后吸沉淀物約20l，滴入玻片上，

3、用18mm18mm蓋玻片覆蓋后鏡檢。先用低倍鏡（1010）觀察全片，高倍鏡（1040）仔細觀察，細胞檢查10個高倍視野（HP），管型檢查20個低倍視野（LP）。報告方式：個細胞/HP，個管型/LP。 美國NCCLS文件，推薦使用一次性尿檢測板，并用XXul報告，國內專家亦認為應逐步在我國施行個/ul的報告。 八一干化學尿紅、白細胞檢查與鏡檢關系規(guī)范的尿沉渣鏡檢在常規(guī)工作的可行性與篩選規(guī)范的尿沉渣鏡檢是保證尿液分析結果準確的基礎，原則上每個尿液標本都采用這種方法檢查，但目前化驗室人員少，工作量大，每天有幾十甚至于幾百個標本需要及時報告，要使用規(guī)范的鏡檢及時地發(fā)出報告是困難的，最好尋找一個簡單、快

4、速的方法進行過篩，即將完全正常的標本篩去后，對異常的標本進行規(guī)范性檢查。干化學尿液分析儀提供了過篩的手段。八一9/19/202211解放軍總醫(yī)院 干化學尿紅、白細胞檢查與鏡檢關系干化學尿紅、白細胞篩選的概念與原則 所謂過篩就是在儀器、試帶符合實驗要求，檢驗人員相對穩(wěn)定的條件下制定的一個標準，達到此標準可視為尿沉渣成份在正常范圍內，可免去進一步顯微鏡檢查。如果一個標本經過干化學、鏡檢兩種方法檢查，干化學結果符合過篩標準，鏡檢結果在正常范圍內，說明過篩是正確的。干化學結果不符合過篩標準，鏡檢結果也異常，也說明過篩標準是正確的。干化學結果異常，鏡檢結果正常視為假陽性，反之干化學結果正常，鏡檢結果異常

5、視為假陰性。 八一9/19/202212解放軍總醫(yī)院 不同正常篩選標準的RBC測定結果對比分析儀篩選標準鏡檢異常鏡檢正常RBC35/HPRBC02/HP敏感性(%) 特異性(%) 假陽性(%) 假陰性(%) 正常(RBC陰性) 0 1490 100 35.8 55.1 0 異常(RBCu/l) 2183 2676 正常(RBC10u/l) 4 3191 99.8 76.6 30.9 0.13 異常(RBC25u/l 2179 975 正常(RBC25u/l) 294 3862 86.5 92.7 13.8 7.1 異常(RBC50u/l)1889 3049/19/202214解放軍總醫(yī)院 鏡檢

6、與試 條同時檢測尿 WBC對比八一9/19/202215解放軍總醫(yī)院 鏡檢 0 0-3 0-5 3-5 6-10 11-20 20Neg 2638 614 112 51 25 346 1070 244 249 132 43 15100 5* 32 30 85 104 129 49 500 0 8* 5* 7 42 82 23423(蛋白陽性)9（RBC陽性）7（Nit陽性）3（單核,淋巴）9(蛋白陽性)3(Nit陽性)5(RBC陽性)2(淋巴)2(蛋白陽性)1(Nit陽性)203(個/ul)(個/ul)試 條以WBC25/ul為標準篩選鏡下管型WBC陰性WBC25/ul 01 25 610 1

7、0 01 25 610 10（個/LP） 透明管型108 40 8 11 53 15 5 8顆粒管型 15 21 3 6 14 11 2 1細胞管型 11 5 12 4 臘樣管型 6 1 9/19/202217解放軍總醫(yī)院 八一以RBC25/ul為標準篩選鏡下管型RBC10/ulRBC025/ul 01 25 610 10 01 25 610 10（個/LP） 透明管型83 28 3 2 78 27 10 17顆粒管型 9 7 2 20 25 5 5細胞管型 5 2 18 7臘樣管型 2 4 19/19/202218解放軍總醫(yī)院 八一以蛋白75mg/dl為標準篩選鏡下管型蛋白25mg/dl蛋白

8、75mg/dl 01 25 610 10 01 25 610 10（個/LP） 透明管型106 13 4 55 42 9 19顆粒管型 9 6 2 20 26 3 7細胞管型 7 5 16 4臘樣管型 9/19/202219解放軍總醫(yī)院 八一以WBC25/ul RBC25/ul 蛋白75mg/dl為標準篩選鏡下管型WBC陰性蛋白25mg/dl 01 25 610 10（個/LP） 透明管型 29 0 0 0顆粒管型 0 0 0 0細胞管型 0 0 0 0臘樣管型 0 0 0 0RBC10/ul9/19/202220解放軍總醫(yī)院 八一干化學法檢測白細胞紅細胞存在的問題干化學法檢查尿內白細胞的原理

9、是基于粒細胞漿內有酯酶可作用于試帶中的吲哚酚酯，釋放吲哚酚與重氮鹽反應形成縮合物，其顏色與細胞的多少成比例。此法只能測定粒細胞，不與淋巴細胞反應。尿液中污染甲醛或高濃度膽紅質或使用某些藥物（如呋喃咀啶），可產生假陽性；尿蛋白5g/L或尿液中含有大劑量先鋒或慶大霉素等藥物時，可使結果出現假陰性。 引起紅細胞試驗假陽性：肌紅蛋白，易熱酶 引起紅細胞試驗假陰性：維生素C八一9/19/202221解放軍總醫(yī)院 干化學尿紅、白細胞檢查與鏡檢關系細胞破壞造成的“假陽性”現象：所謂“假陽性”、“假陰性”是以顯微鏡檢查為基礎的。由于干化學是檢測細胞胞漿內涵物來確定細胞的有無.在實際工作中可能存在下列問題：由于

10、尿液在膀胱貯存時間過長，導致白細胞破壞，酯酶釋放到尿液中，造成干化學陽性，鏡檢陰性的所謂“假陽性”現象。腎病患者，紅細胞在腎臟或泌尿道破壞，或尿比重過低、尿PH偏高均易造成經細胞破壞血紅蛋白釋放尿中，造成所謂紅細胞干化學檢查的“假陽性”現象。八一9/19/202222解放軍總醫(yī)院 干化學過篩應用范圍的局限性(1)腎科及泌尿科病人尿液不適合于干化學過篩顯微鏡檢查。即無論干化學結果如何，均應做顯微鏡檢查。鏡檢結石、結晶、腫瘤細胞作為診斷依據或觀察療效時，不宜用干化學方法過篩。由于干化學分析干擾因素較多，且不可避免的有一定的假陰性率，因此要結合臨床表現判斷結果，決不可只看干化學分析，忽視鏡檢。尿液的

11、外觀（特別是顏色、濁度）與尿沉渣有一定相關關系，當尿液外觀異常時，應注意顯微鏡檢查。八一9/19/202224解放軍總醫(yī)院 干化學過篩應用范圍的局限性(2)干化學試帶的質量、穩(wěn)定性及質量控制與過篩的準確性密切相關。儀器及干化學試帶一定要符合要求：儀器的正常運轉和試帶質量合格取得是實驗結果的基本保證。筆者制定上述標準使用的是BM公司的Midiitron尿液分析儀及Combur10TestM配套試帶.每個實驗室使用過篩標準時，首先必須做對照觀察（所用干化學試帶與顯微鏡對比），確認儀器試帶的敏感性與特異性是否符合過篩標準的要求。八一9/19/202225解放軍總醫(yī)院 流式細胞儀的原理與分類 流式細胞

12、儀通用型專用型科研型臨床型網織紅細胞分析儀血細胞分析儀尿沉渣分析儀導電率尿導電率前向散射光流式細胞測定法熒光電阻抗測定電阻抗信號前向散射光強度熒光脈沖寬度熒光強度前向散射光脈沖寬度細胞體積細胞長度染色部分長度染色強度細胞大小電阻抗紅細胞散射圖酵母細胞結晶小圓上皮病理管型細菌白細胞上皮細胞管型前向散射光直方圖前向散射光直方圖紅細胞參數白細胞參數氬激光尿樣品電極電阻信號放大器稀釋導電率感應器熒光信號放大器染色鞘液前向散射光信號放大器流式細胞儀測定原理簡圖流式細胞儀原理FscFlFlwFscwFlFl2Fscw250ch250chRBCWBCFscFsc尿流式細胞儀與鏡檢的關系UF可提供客觀的形態(tài)學

13、指標，尤其對球性血尿和非球性血尿的鑒別UF可直接進行定量檢測，簡單、快速 尿流式細胞儀紅、白細胞檢查仍是鏡檢篩選 干化學尿與流式“篩選”之比較 尿流式較鏡檢的優(yōu)勢與局限性再 見尿沉渣檢查的重要意義檢查內容：上皮細胞、血細胞、管型及結晶臨床意義：上皮細胞扁平上皮大圓上皮尾型上皮小圓上皮血細胞白細胞及膿細胞紅細胞尿沉渣檢查的重要意義臨床意義：管型透明管型細胞管型顆粒管型蠟樣管型白細胞管型紅細胞管型上皮細胞管型細粒管型粗粒管型脂肪管型腎衰竭管型尿沉渣檢查的重要意義臨床意義：結晶磺胺結晶堿性結晶酸性結晶亮氨酸及絡氨酸結晶三價磷酸鹽尿酸銨結晶非晶型磷酸鹽尿酸結晶草酸鈣結晶非晶型磷酸鹽尿沉渣鏡檢進展1.采

14、用干涉、相差、偏振光、掃描及透射電鏡鑒別管型2.有用活體染色及細胞化學染色識別各種管型3.應用單克隆抗體技術識別各種細胞尿沉渣鏡檢進展尿中紅細胞形態(tài)尿中白細胞形態(tài)尿沉渣鏡檢進展S 染色各種上皮細胞形態(tài)尿沉渣鏡檢進展S 染色各種管型形態(tài)尿沉渣鏡檢進展S 染色各種管型形態(tài)復檢條件一 REVIEW 標記計數錯誤總數 40,000電導率錯誤電導率 5ms/cm或 38ms/cm界標錯誤RBC-Fl-DWSD 40 ch 或紅細胞數 2.5/l且其 Fsc 200ch 或紅細胞數 15 /l時未溶解的RBC% 20%二 菌尿UF在鑒別血尿來源中的應用 301醫(yī)院用此儀器對隨機95例腎小球性和非腎小球性出

15、血病人的尿紅細胞形態(tài)進行了觀察，以臨床診斷腎小球病變（腎活檢）為標準，以此儀器檢測尿非均一性紅細胞為腎小球病變診斷依據，結果：敏感性：100，特異性：78.2UF在鑒別血尿來源中的應用急性腎小球性腎炎病人尿液測定結果UF在鑒別血尿來源中的應用慢性腎小球性腎炎病人尿液測定結果UF在鑒別血尿來源中的應用前列腺癌病人尿液測定結果UF在鑒別血尿來源中的應用腎結石病人尿液測定結果UF在鑒別血尿來源中的應用慢性膀胱炎病人尿液測定結果 尿沉渣成分 主要臨床意義 紅細胞 月經、過度運動、各種腎，泌尿系統(tǒng)如外傷 、 腎 小管炎癥、結石、結核、腫瘤、急性腎小球腎炎 白細胞 各種腎損害、泌尿道感染、腎盂腎炎 上皮細

16、胞 腎小管上皮細胞 腎實質腎小管受損 鱗狀上皮細胞 正常人或污染 管型 寬型 嚴重腎疾病 腎上皮細胞 腎小管退化、變性 脂肪 腎病綜合征 顆?；蛳灅?腎實質損害 透明 酸性尿-含高鹽，多為病理性 細菌 泌尿道感染 脂肪體(卵圓小體) 腎病綜合征 各種尿沉渣成分主要臨床意義尿沉渣染色的臨床意義SM染色： 管型的鑒別巴氏染色： 識別細胞甲苯胺蘭： 觀察管型與核結構過氧化酶： 鑒別粒細胞與上皮細胞管型非特異酯酶：識別單核細胞油紅O、蘇丹：脂肪變性細胞酸性磷酸酶：區(qū)分腎上皮細胞與前列腺細胞 方法 白細胞 紅細胞普通載玻片不加蓋玻片法15.0 17.0載玻片加蓋玻片法 12.0 15.0改良Neubau

17、er 10.2 9.9Fast-Read-10R定量板法 9.3 7.0四種常見尿沉渣檢查法CV%值比較單克隆抗體免疫過氧化物酶染色檢查特異細胞抗體名稱 對應的特異細胞FMC 10 粒細胞FMC 32 單核細胞AMDT 4 輔助/支持T淋巴細胞Huly-m8 細胞毒/抑制T淋巴細胞URO 1 腎小球/輸尿管上皮細胞URO 3 近曲小管上皮細胞URO 5 亨利襻/遠曲小管/集合管/輸尿管URO 7 亨利襻URO 9 輸尿管急性腎小管壞死、急性間質性腎炎、新月形腎炎尿中各種細胞數量及鑒別 細胞數/ml 急性腎小管壞死 急性間質性腎炎 新月形腎炎總細胞數 425006000 63330028800細胞數 66001100 596700287004650025000單核細胞 1500800 6800600163008400CD4淋巴細胞 4030 2300120073004700CD8淋巴細胞 100100 2000110041001800腎小球上皮細胞 500400 1500900118003800近曲小管上皮細胞 177004200 1220062002980014000遠曲小管/集合管上皮細胞 74001700 15200850084004200亨利襻 45002