基礎知識回歸-答案即全日制八、高三春季標課下基礎

1、必記-選修新課標高考生物最后沖刺回歸選修 1 一、 傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用一、果酒和果醋的制作1果酒制作的原理所需菌種為酵母菌，其代謝類型 兼性厭氧型菌種的生活特點。酶在有氧氣條件下，進行有氧呼吸，大量繁殖反應式：C6H12O6 + 6O2 + 6H2O6CO2 + 12H2O + 能量酶在無氧條件下，進行無氧呼吸。反應式：C6H12O6發(fā)酵最適溫度： 18252果醋制作的原理2C2H5OH + 2CO2 + 能量所需菌種：醋酸菌，其代謝類型為菌種的生活特點異養(yǎng)需氧型，最適生長溫度為 3035 。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變成乙醛，再變?yōu)榇姿帷?/p>

2、酶反應簡式：C H OH2 5+ O2CH COCOOH+ H O2+ 能量33果酒、果醋的制作流程挑選葡萄沖洗榨汁發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果醋二、腐乳的制作所需菌種：多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、曲霉、毛霉等，起主要作用的是 毛霉。菌種的作用特點產生蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸。產生的脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3腐乳制作的實驗流程讓豆腐上長出毛霉4.影響腐乳品質的條件加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。（1）鹵湯直接關系到腐乳的色、香、味。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在_12% 左右。加酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種

3、類很多，如：胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等，香辛料可以調制腐乳的風味，也具有 防腐殺菌作用的作用。（2）控制好材料的用量用鹽腌制時，若鹽的濃度_過低，以抑制微生物生長，可能導致豆腐會影響腐乳的口味。變質；若鹽的濃度 過高，鹵湯中酒的含量應控制在 12%左右。含量過高，腐乳成時間會_延長 ；含量過低，以抑制微生物生長，可能導致豆腐。二、DNA 的粗提取與鑒定思路利用 DNA 與 RNA、蛋白質等在物理和化學性質方面的差異，提取 DNA，去除其他成分。原理（1）利用 DNA 的溶解性DNA 和蛋白質等其他成分在不同濃度 NaCl 中溶解度不同，鹽濃度為 0.14 mol/l 時，DNA 溶解度

4、最小。DNA 不溶于溶液，某些 蛋白質則溶于（2）利用 DNA 的耐受性蛋白酶水解：蛋白酶能水解蛋白質，但是對 DNA 沒有影響。高溫變性：大多數(shù)蛋白質受 6080的高溫，而 DNA 在 80以上才會變性。洗滌劑能夠3實驗設計細胞膜，但對 DNA 沒有影響。（1）材料的選?。哼x用DNA相對較高的生物組織。加蒸餾水 用過濾（2）細胞的破碎（以雞血為例） 雞血細胞玻璃棒攪拌收集濾液。（3）雜質的去除：方案之一是利用 DNA 在不同濃度的 NaCl 中溶解度的不同，通過控制 NaCl 溶液的濃度去除雜質。具體做法：在濾液中加入 NaCl，使 NaCl 溶液的濃度為 2 mol/ L，過濾除去不溶的雜

5、質，再加蒸餾水 調節(jié) NaCl 溶液的濃度為 0.14 mol/ L，析出 DNA,過濾除去溶液中的雜質，在我用 2 mol/ L 的溶液溶解 DNA。 （4）DNA 的析出：處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的4DNA 的鑒定 DNA 溶解在 2 mol/l 的 NaCl溶液中 + 二苯胺試劑溶液可使 DNA 析出。溶液顏色變藍。沸水浴加熱選修三 一、工程一工程的概念由于二工程是在 DNA 分子水平上進行操作,因此又叫做 重組 DNA 技術 。工程的基本工具（一）“分子手術刀”限制性核酸內切酶（簡稱限制酶）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。功能：能夠識別雙鏈 DNA 分子的某

6、種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二 酯鍵斷開。3結果：經(jīng)限制酶切割產生的 DN（二）“分子針線”DNA 連接酶段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。分類：根據(jù)酶的來源不同，可分為EcoliDNA 連接酶和T4DNA 連接酶兩類功能：恢復被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。兩種 DNA 連接酶(EcoliDNA 連接酶和 T4DNA 連接酶)的比較：相同點：都縫合磷酸二酯鍵 區(qū)別：EcoIiDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能使黏性末端之間連接；T4DNA連接酶能縫合兩種平末端，但連接平末端之間的效率較低。DNA 連接酶與 DNA 聚合酶作用的比較DNA

7、連接酶DNA 聚合酶不 同點連接的 DNA雙鏈單鏈模板不要模板要模板連接的對 象2 個 DN段單個脫氧核苷酸加到已存在的單鏈 DN段上相 同點作用實質形成磷酸二酯鍵化學本質蛋白質操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程結果生物體外分子水平剪切拼接導入表達人類需要的產物(三) “分子車” 載體 1.載體具備的條件：能在受體細胞中并穩(wěn)定保存；具有一至多個 限制酶切割位點，段；具有標記，供重組 DNA 的鑒定和選擇。供外源 DN工程常用的載體有： 質粒 、 噬菌體 和動、植物等最早應用的載體是質粒，它是雙鏈環(huán)2.狀 DNA 分子。三工程的基本過程(一) 獲得目的（目的的獲?。?.獲取方法主要有兩種：從自然界

8、中已有的物種中分離出來，如可從文庫中獲取。用人工的方法。獲得原核細胞的目的可采取 直接分離，獲取真核細胞的目的一般是人工。人工目的的常用方法有反轉錄法和化學法。2.利用 PCR 技術擴增目的PCR 的含義：是一項在生物體外目的：獲取大量的目的原理： DNA 雙鏈特定 DN段的核酸技術。過程：第一步：加熱至 9095DNA 解鏈為單鏈 第二步：冷卻到 5560，引物與兩條單鏈 DNA 結 合；第三步：加熱至 7075，熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶從引物起始進行互補鏈的。特點：指數(shù)形式擴增(二)重組 DNA 分子（表達載體的構建）1重組 DNA 分子的組成：除了目的外，還必須有標記。標記的作用：鑒定受體

9、細胞中是否含有 目的，從而將含有目的的細胞 篩選出來。2方法： 同種限制酶分別切割載體和目的，再用 DNA 連接酶把兩者連接。(三) 轉化受體細胞（將目的導入受體細胞）轉化的概念：是 目的進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定 和 表達的過程。常用的轉化方法：將目的導入植物細胞：采用最多的方法是 農桿菌介導轉化技術（農桿菌 轉化法），其次還有槍 介導轉化技術（槍 法）和花粉管通道技術（花粉管通道法 法）。導入動物細胞：最常用的方法是顯微注射技術。此方法受體細胞多是卵。將目的將目的導入微生物細胞： Ca處理法。(四) 篩選出獲得目的的受體細胞、培養(yǎng)受體細胞并誘導目的的表達（目的的檢測與鑒定）1

10、. 首先要檢測轉生物的技術。DNA 上是否了目的，方法是采用DNA 分子雜交2.其次還要檢測目的是否轉錄出 mRNA，方法是采用 分子雜交技術。最后檢測目的是否翻譯成蛋白質 ，方法是采用抗原抗體雜交技術。有時還需進行生物學水平的鑒定。如抗蟲或抗病的鑒定等。工程的應用1運用工程改良動植物品種最突出的優(yōu)點是：能打破常規(guī)育種難以突破的物種之間的界限。2工程的應用植物動物工程：抗 蟲 、抗 病 、抗 逆 轉植物，利用轉改良植物的品質。工程：提高動物生長速度來提高動物生長速度，改善產品 品質 ，用轉動物生產 藥物，用動物作移植的 供體等。轉（3）和治療：又稱為 DNA，是采用的方法來判斷患者是否出現(xiàn)了異

11、?；驍y帶病原體。治療：指利用 正常置換或彌補缺陷的治療方法。實例：ADA缺陷癥的治療二、細胞工程（一）植物細胞工程理論基礎（原理）：細胞全能性全能性表達的難易程度：卵生殖細胞干細胞體細胞； 植物細胞動物細胞植物組織培養(yǎng)技術（1）過程：離體的植物、組織或細胞 愈傷組織 試管苗 植物體（2）用途：微型繁殖、作物脫毒、制造人工、單倍體育種、細胞產物的工廠化生產。（3）地位：是培育轉植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細胞雜交技術（1）過程：誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等?；瘜W法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。意義：克服了遠緣雜交不親和的。（二）動物細胞工

12、程動物細胞培養(yǎng)（1）概念：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個 細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。（2）動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的或組織）剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞制成細胞懸液轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。（3）細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞生長到表面相互抑制時，細胞就會停止增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。（4）動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處

13、理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。營養(yǎng)：培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入、血漿等天然成分。溫度：適宜溫度：哺乳動物多是 36.50.5；pH：7.27.4。氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2。O2 是細胞代謝所必需的，CO2 的主要作用是維持培養(yǎng)液的 pH。（5）動物細胞培養(yǎng)技術的應用：、單克隆抗體、檢測物質、培養(yǎng)醫(yī)學研究的各種細胞。2.動物體細胞核移植技術和克隆動物（1）哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植（比較容易）和體細胞核移植（比較難）。（2）選用去核)細胞的原因：)

14、細胞比較大，容易操作；)細胞細胞質多，營養(yǎng)豐富。（4）體細胞核移植技術的應用：加速家畜遺傳改良進程，促進良畜群繁育； 保護瀕危物種，增大存活數(shù)量；生產珍貴的醫(yī)用蛋白；用于組織的移植等。（5）體細胞核移植技術存在 克隆動物存在著健康問題、作為異種移植的供體；：遺傳和生理缺陷等。（3）體細胞核移植的大致過程是：（右圖）核移植胚胎移植3.動物細胞融合（1）動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個 或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。（2）動物細胞融合與植物原生融合的原理基本相同，誘導動物細胞融合的方法與植物原生融合的方法類似，常用的誘導有聚乙二醇、滅活的、電刺激等。（3）動物細胞融合的意義：克服了遠緣雜交的不親和性，成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要。（4）動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較：4.單克隆抗體（1）抗體：一個 B 淋巴細胞只一種特異性抗體。從中分離出的抗體產量低、純度低、特異性差。（2）單克隆抗體的過程：雜交瘤細胞的特點：既能大量繁殖，又能產生專一的抗體。單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，并能大量。比較項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導用法植物體細胞雜交細胞膜的性去除細胞壁后誘導原生融合離心、電刺激、振動，聚乙二醇等試劑誘導克服了遠緣雜交的不親