DB13-T1358-2011養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法

1、ICS 65.150B 50DB13河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 13/T 13582011養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法The qualitative determination of malachite green in aquiculture water by surface-enhanced laser raman spectrometry2011 - 01 - 28 發(fā)布2011 - 02 - 28 實(shí)施河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā) 布DB13/ T 13582011I前言本標(biāo)準(zhǔn)由 GB/T 1.12009 給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北省

2、食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、歐普圖斯光學(xué)納米科技有限公司、國家果類及農(nóng)副加工產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人： 李揮、張敬軒、張會軍、張巖、劉春偉、賈茜、范斌、李強(qiáng)、龐坤 PAGE 4養(yǎng)殖用水中孔雀石綠快速測定方法激光拉曼光譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用激光拉曼光譜法快速檢測水產(chǎn)品養(yǎng)殖、銷售用水或其他水體中微痕量孔雀石綠的定性定量檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品養(yǎng)殖、銷售用水或其他水體中孔雀石綠的激光拉曼光譜法的現(xiàn)場快速篩查檢測。本方法在水中孔雀石綠的定量限為5.0g/L。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最

3、新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法（GB/T 66822008，ISO 3696:1987，MOD）。原理試樣經(jīng)高速離心后直接測定。樣品中的孔雀石綠分子與表面增強(qiáng)試劑混合后，分子吸附在表面增強(qiáng)納米顆粒上，其拉曼散射信號可增強(qiáng)106倍以上，使用便攜式激光拉曼檢測儀通過自動判別其特征峰即可定性檢測出孔雀石綠。通過對測定的拉曼譜圖進(jìn)行基線調(diào)整和歸一化處理，應(yīng)用外標(biāo)法可進(jìn)行定量分析。試劑與材料除另有規(guī)定，所有試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的三級水。孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品：CAS 2437-29-8，純度大于 99。表面增強(qiáng)試劑：OTR201，銀納

4、米溶膠，或相當(dāng)者。無機(jī)鹽凝聚劑：1 氯化鈉水溶液。無機(jī)鹽離子促進(jìn)劑：2 溴化鉀水溶液。孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 g/mL）：準(zhǔn)確稱取 0.1 000 g 孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈溶解后，定容到 100 mL，4避光保存。儀器與設(shè)備激光拉曼光譜儀。高速離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于 14 000 r/min（轉(zhuǎn)/分鐘）。分析步驟樣品采集、保存取具代表性樣品，裝于棕色瓶中，于25冷藏保存，并在24小時內(nèi)完成檢測。樣品制備取1.0mL待測水樣，14000r/min離心5min，上清液即為待測液。儀器參考條件激光功率：200 mW積分時間：10 sec平均次數(shù)：2平滑參數(shù)：36.3.1定性測定依次加入0.25

5、mL表面增強(qiáng)試劑（4.2）、0.10 mL無機(jī)鹽凝聚劑（4.3）、0.25 mL待測液和0.10 mL 無機(jī)鹽離子促進(jìn)劑（4.4），混勻后開始檢測。根據(jù)譜圖435 cm-1（3 cm-1）、1171 cm-1（3 cm-1） 和1615 cm-1（3 cm-1）處特征拉曼光譜，對水樣中的孔雀石綠進(jìn)行評估：如同時存在上述特征峰，則可判定樣品中含有孔雀石綠；否則，不能證明樣品中含有孔雀石綠，需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。水中孔雀石綠表面增強(qiáng)拉曼光譜圖參見附錄A。定量測定對測定的拉曼譜圖進(jìn)行基線調(diào)整和歸一化處理，基本操作如下：首先將測定的拉曼光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行基線調(diào)整；以 1171 cm-1（3 cm-1）處的特征

6、拉曼峰作為定量基準(zhǔn)峰，對孔雀石綠特征拉曼峰進(jìn)行歸一化處理；歸一化后得到的特征拉曼峰強(qiáng)度可根據(jù)當(dāng)天測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。6.4計算繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。結(jié)果按式（1）計算：式中：（1）. .X 樣品中孔雀石綠的含量，單位為毫克每千克（mg/L）；c 從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的孔雀石綠含量，單位為毫克每升（mg/L）；V 樣品定容體積，單位為毫升（mL）；m 樣品量取體積，單位為毫升（mL）。允許差在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均數(shù)的10%。驗(yàn)證試驗(yàn)對陽性樣品需經(jīng)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行確證。附錄A（資料性附錄）Intensity (a. u.)水中孔雀石綠表面增強(qiáng)拉曼光譜圖4000004