硫化氫與眼底病

1、硫化氫與眼底病冉瑞金,張學(xué)東（400016 重慶，重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科，眼科學(xué)重慶市市級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室） 摘要 硫化氫(H2S)是繼NO和CO之后，被證實(shí)的第三個(gè)內(nèi)源性氣體信號(hào)分子。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)通過胱硫醚-合酶（CBS）和胱硫醚-裂解酶（CSE）作用產(chǎn)生,有調(diào)節(jié)神經(jīng)傳遞、松弛平滑肌、抑制炎癥反應(yīng)等作用，通過抑制氧化應(yīng)激來保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞和心血管組織的損傷，是一個(gè)很好的細(xì)胞保護(hù)劑和新的內(nèi)源性調(diào)節(jié)介質(zhì)。最近的研究證實(shí)在動(dòng)物的視網(wǎng)膜組織內(nèi)能夠分離出產(chǎn)生硫化氫的酶，并且通過預(yù)先應(yīng)用硫化氫可以干預(yù)或延緩部分眼底疾病的發(fā)生或發(fā)展。本文總結(jié)了硫化氫在視網(wǎng)膜變性、視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷、糖尿病視網(wǎng)膜病變等眼底

2、疾病中的保護(hù)作用，為眼底疾病的防治提供了一個(gè)新的研究方向。關(guān)鍵詞 硫化氫；胱硫醚-合酶；胱硫醚-裂解酶；眼底病 前言硫化氫是一個(gè)有毒性的氣體早被大家認(rèn)識(shí)，繼第一個(gè)毒性氣體NO1 和另外一個(gè)毒性氣體CO2 被證實(shí)為氣體信號(hào)分子后，在1996年Abe報(bào)道3腦組織中H2S生成的酶促反應(yīng)機(jī)制和在生理濃度下H2S的生物活性，人們才認(rèn)識(shí)到H2S也可能是一個(gè)內(nèi)源性的神經(jīng)遞質(zhì) 。目前硫化氫在神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)的研究比較多，研究證實(shí)在哺乳動(dòng)物體內(nèi)以半胱氨酸為底物通過CBS和CSE作用產(chǎn)生硫化氫，它在神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)的作用意義已很明確。它作為一個(gè)內(nèi)源性的調(diào)節(jié)介質(zhì)，有調(diào)節(jié)神經(jīng)傳遞、松弛平滑肌、抑制炎癥反應(yīng)等作

3、用；作為細(xì)胞保護(hù)劑通過抑制氧化應(yīng)激對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)的損傷有重要的保護(hù)作用。眼底的許多疾病如視網(wǎng)膜變性性疾病、視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷、糖尿病視網(wǎng)膜病變等都有神經(jīng)組織和血管組織的病變，這些病變與硫化氫的生物活性密切相關(guān)，而且在動(dòng)物試驗(yàn)中也證實(shí)了硫化氫能夠在視網(wǎng)膜組織產(chǎn)生，并對(duì)眼底的病變有很好的保護(hù)作用，現(xiàn)就硫化氫在眼底疾病方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。硫化氫的特性和產(chǎn)生硫化氫是一個(gè)無色、有臭雞蛋氣味的氣體，它具有水溶性、高度易燃和能被許多種物質(zhì)氧化為硫化物或者是硫酸鹽的特性，也與NO和CO相似，具有很強(qiáng)的脂溶性，可以自由的通過生物膜，進(jìn)而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。大家過去一直認(rèn)為它是一個(gè)污染環(huán)境且有毒性的氣體

4、，由于它在心血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的保護(hù)作用，硫化氫被證實(shí)是一個(gè)新的氣體信號(hào)分子。研究證實(shí)硫化氫在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有很強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)作用4和抗炎作用5，它通過抗氧化應(yīng)激保護(hù)神經(jīng)元，減弱由脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)炎癥反應(yīng)6證實(shí)了硫化氫的抗凋亡和抗炎作用。硫化氫在正常人血漿的生理濃度在10m到100m之間7，在腦組織的濃度要高于其它的組織。哺乳動(dòng)物體內(nèi)，在兩個(gè)5-磷酸吡哆醛（PLP）依賴性酶CSE和CBS的作用下，以半胱氨酸為底物脫硫作用產(chǎn)生硫化氫，在腦組織中主要以CBS催化生成，在心血管系統(tǒng)中則主要由CSE催化產(chǎn)生。除此之外，巰基丙酮酸硫基轉(zhuǎn)移酶（3MST）聯(lián)合半胱氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（CAT）催化也可

5、在腦、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞8、視網(wǎng)膜9等組織產(chǎn)生硫化氫。硫化氫體內(nèi)的釋放和作用2.1硫化氫的體內(nèi)釋放至少有兩種機(jī)制，一是硫化氫被酶產(chǎn)生后立即釋放；另外的一種機(jī)制可能是硫化氫儲(chǔ)存在體內(nèi)，通過生理信號(hào)的反應(yīng)釋放。硫化氫在細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的兩種機(jī)制是明確的10，酸性條件下從不穩(wěn)定的酸性硫化物釋放，另一種儲(chǔ)存形式是硫烷硫原子的結(jié)合，在硫化氫減少的情況下釋放11。酸性不穩(wěn)定硫在鐵硫混合物中是主要的硫原子，在線粒體呼吸鏈酶的氧化還原反應(yīng)中起到了一個(gè)重要的作用，硫化氫的硫與蛋白質(zhì)的結(jié)合像硫烷硫原子結(jié)合一樣，只有二價(jià)的硫跟其它的硫原子結(jié)合，如過硫化物外部的硫原子和聚硫化物的內(nèi)鏈原子結(jié)合，半胱氨酸代謝產(chǎn)生的硫并入

6、硫烷硫原子形成結(jié)合物12?！就ㄓ嵶髡摺?張學(xué)東,電話: ( 023) 89012704，E-mail: zxued 外源性立即吸入的硫化氫的硫可以像硫烷硫原子一樣儲(chǔ)存，表明酶產(chǎn)生的硫化氫也可以像硫烷硫原子一樣的儲(chǔ)存13。3MST聯(lián)合CAT的細(xì)胞表達(dá)增加了硫烷硫原子的結(jié)合程度，如果細(xì)胞表達(dá)有3MST突變的缺陷，就不能產(chǎn)生硫化氫，只能保持硫烷硫原子結(jié)合的可控制程度14。細(xì)胞內(nèi)硫烷硫原子結(jié)合的程度依靠3MST的活性產(chǎn)生硫化氫，3MST產(chǎn)生的硫化氫就像細(xì)胞內(nèi)的硫烷硫原子結(jié)合物一樣被儲(chǔ)存。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)主要的物質(zhì)減少時(shí)，谷胱甘肽和半胱氨酸在它們的生理濃度下，PH8.4時(shí)硫化氫就從神經(jīng)元和星狀膠質(zhì)細(xì)胞釋放13。

7、2.2硫化氫在調(diào)節(jié)神經(jīng)傳遞、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、松弛平滑肌、調(diào)節(jié)胰島素的釋放和抑制炎癥反應(yīng)等方面的作用。 在1993年Kombian等15研究硫化氫的毒性時(shí)就發(fā)現(xiàn)了硫化氫能抑制突觸電位和調(diào)節(jié)鉀離子通道，1996年Abe等16研究發(fā)現(xiàn)硫化氫能誘導(dǎo)海馬長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)，這些研究證實(shí)了硫化氫是一個(gè)神經(jīng)調(diào)節(jié)遞質(zhì)，具有調(diào)節(jié)神經(jīng)傳遞的功能。產(chǎn)生硫化氫的酶3MST和CAT主要集中在線粒體，在氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡途徑中通過增加谷胱甘肽的水平減少氧化應(yīng)激17，起到重要的作用，因?yàn)樯窠?jīng)細(xì)胞表達(dá)的3MST和CAT能夠抑制谷氨酸鹽的氧化毒性，清除線粒體內(nèi)的氧化反應(yīng)物并從氧化應(yīng)激來保護(hù)細(xì)胞18，這些研究證實(shí)了硫化氫通過抑制氧化應(yīng)

8、激來保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。2008年Yang等19研究發(fā)現(xiàn)CSE的不足會(huì)引起老鼠的高血壓，這表明硫化氫是一個(gè)生理性的血管平滑肌松弛劑對(duì)血壓水平有重要的調(diào)節(jié)作用。2009年feng等20 研究證實(shí)脂肪組織細(xì)胞可以表達(dá)CSE并可內(nèi)源性生存硫化氫，在果糖誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型中H2S/CSE系統(tǒng)上調(diào)與葡萄糖的攝取呈明顯的負(fù)相關(guān)，而且硫化氫對(duì)葡萄糖的攝取抑制作用能夠被磷脂酰肌醇(-3)激酶（PI3K）抑制劑阻斷而不是格列本脲阻斷，這說明了硫化氫是胰島素抵抗新的調(diào)節(jié)劑。2005年Li等5在脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)大鼠體內(nèi)和敗血癥患者的血漿中發(fā)現(xiàn)硫化氫濃度增加，并且在培養(yǎng)介質(zhì)中硫化氫能抑制炎癥因子的分泌，這說明硫化氫在

9、炎癥反應(yīng)中是一個(gè)新的調(diào)節(jié)介質(zhì)。硫化氫與眼底病 眼底疾病與神經(jīng)系統(tǒng)和血管系統(tǒng)方面的病變聯(lián)系十分密切，包含了視網(wǎng)膜視神經(jīng)和視網(wǎng)膜血管組織方面的疾病。很多眼底疾病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，尚不明了，因此缺乏有效的干預(yù)和治療措施，嚴(yán)重威脅著人類的視力康復(fù)。如糖尿病視網(wǎng)膜病變既有高血糖引起的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的病變，也有視網(wǎng)膜微血管方面的病變，現(xiàn)在的研究又證實(shí)了糖尿病視網(wǎng)膜病變也有炎癥因素的參與，年齡相關(guān)性黃斑變性、視網(wǎng)膜光損傷、視神經(jīng)萎縮及缺血再灌注損傷等眼底疾病都與神經(jīng)細(xì)胞的凋亡和血管的病變發(fā)生密切相關(guān)，而硫化氫具有抑制氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡及抗炎的作用，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞和血管組織的損傷有很好的保護(hù)作用，眼底的這些病

10、變與硫化氫的生物學(xué)活性緊密相連，這就有可能硫化氫參與了眼底病變某個(gè)環(huán)節(jié)的表達(dá)。最近 HYPERLINK /pubmed?term=%22Kulkarni%20M%22%5BAuthor%5D t _parent Kulkarni等21報(bào)道在牛眼的視網(wǎng)膜組織中發(fā)現(xiàn)了產(chǎn)生硫化氫的酶CSE和CBS，且在硫化氫供體、CBS激活劑及半胱氨酸存在時(shí)，生成內(nèi)源性硫化氫的水平升高。一些研究發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜變性、視網(wǎng)膜脫離、視神經(jīng)萎縮等許多眼底疾病的發(fā)生與CBS缺乏有關(guān)22 。 HYPERLINK /pubmed?term=%22Mikami%20Y%22%5BAuthor%5D t _parent Mikami等9

11、在大鼠視網(wǎng)膜組織發(fā)現(xiàn)3MST和CAT位于視網(wǎng)膜內(nèi)叢狀層、外叢狀層、內(nèi)核層、外核層、感光細(xì)胞外層等，這些研究表明在哺乳動(dòng)物的視網(wǎng)膜組織內(nèi)能夠產(chǎn)生硫化氫，且它對(duì)眼底疾病有很好的保護(hù)效應(yīng)。3.1 硫化氫與視網(wǎng)膜變性性疾病視網(wǎng)膜變性性疾病是一組由于視網(wǎng)膜感光細(xì)胞變性凋亡所導(dǎo)致的嚴(yán)重致盲性眼病,分為獲得性和遺傳性視網(wǎng)膜變性，在這里我們主要討論的是硫化氫對(duì)獲得性視網(wǎng)膜變性的保護(hù)或干預(yù)作用。最近 HYPERLINK /pubmed?term=%22Mikami%20Y%22%5BAuthor%5D t _parent Mikami等9用強(qiáng)光照射大鼠眼誘導(dǎo)視網(wǎng)膜變性，測(cè)定視網(wǎng)膜產(chǎn)生的硫化氫要比暗光下多，而且產(chǎn)

12、生的硫化氫受鈣離子流入的調(diào)節(jié)，因?yàn)殁}離子能激活許多酶的活性。他們測(cè)量鈣離子對(duì)視網(wǎng)膜溶解物中3MST和CAT產(chǎn)生硫化氫數(shù)量的影響，在鈣離子不存在或鈣離子被抑制時(shí)硫化氫的產(chǎn)生是最多的，它們之間有一個(gè)劑量依賴關(guān)系。硫化氫的產(chǎn)生完全被抑制時(shí)鈣離子的濃度在2.9M，在大鼠感光細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度在暗光下大約是600nM，少于在照明光下10 nM23。在高耗氧量和日光暴露下，視網(wǎng)膜對(duì)氧化應(yīng)激是敏感的，視網(wǎng)膜在過度的強(qiáng)光照射下易導(dǎo)致感光細(xì)胞變性24，感光細(xì)胞的死亡是由多種因素促使的不可逆轉(zhuǎn)因素，例如活性氧和細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高25，因?yàn)榱蚧瘹涫菑难趸瘧?yīng)激來保護(hù)神經(jīng)元，這可能就是硫化氫保護(hù)光損傷誘發(fā)的視網(wǎng)膜

13、感光細(xì)胞變性的機(jī)制。為了證實(shí)強(qiáng)光損傷導(dǎo)致的視網(wǎng)膜變性的硫化氫效應(yīng)，用硫氫化鈉研究體內(nèi)硫化氫的保護(hù)效應(yīng)，硫氫化鈉和硫化鈉一樣能在視網(wǎng)膜抑制鈣離子流入26，通過這些研究證實(shí)了硫氫化鈉可以用于光損傷的視網(wǎng)膜變性研究，這些感光細(xì)胞外段是變性的，這說明光損傷的視網(wǎng)膜變性是有意義的被硫氫化鈉抑制。為確定硫化氫對(duì)視網(wǎng)膜光損傷變性的保護(hù)作用， HYPERLINK /pubmed?term=%22Mikami%20Y%22%5BAuthor%5D t _parent Mikami等9又研究了由視桿細(xì)胞外段受損的DNA產(chǎn)生8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）水平，用免疫組化抗體對(duì)抗8-OHdG，在外核層光損傷產(chǎn)生大量

14、8-OHdG陽(yáng)性細(xì)胞。相反，在經(jīng)硫氫化鈉處理后8-OHdG陽(yáng)性細(xì)胞減少，以上的這些研究表明硫化氫在視網(wǎng)膜光損傷時(shí)是從氧化應(yīng)激來保護(hù)感光細(xì)胞。硫化氫在視網(wǎng)膜神經(jīng)元細(xì)胞被3MST和CAT產(chǎn)生，通過激活V-ATPase的負(fù)反饋調(diào)節(jié)從水平細(xì)胞到感光細(xì)胞調(diào)節(jié)鈣離子流入，來保護(hù)光損傷的視網(wǎng)膜變性，這說明了3MST聯(lián)合CAT途徑的促進(jìn)作用和硫化氫的應(yīng)用有可能對(duì)視網(wǎng)膜變性的治療有臨床意義。3.2硫化氫與視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷 缺血-再灌注損傷是在缺血損傷的基礎(chǔ)上發(fā)展而來，再灌注可以使可逆性損傷加重，甚至轉(zhuǎn)化為不可逆損傷，損傷過程主要包括谷氨酸和天冬氨酸的神經(jīng)毒性作用、細(xì)胞內(nèi)鈣超載和炎癥反應(yīng)的介入等。在眼底病中

15、的缺血-再灌注損傷包括前部缺血性視神經(jīng)病變，視網(wǎng)膜動(dòng)脈阻塞，以及內(nèi)眼手術(shù)過程中眼內(nèi)壓變化導(dǎo)致的視網(wǎng)膜組織的損傷等。在視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷中視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞尤其易受到損傷， 最近的研究表明，硫化氫在在缺血性視網(wǎng)膜病變中能抑制神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡27。2010年osborne等28報(bào)道了當(dāng)視網(wǎng)膜缺血后硫化氫的供體ASC67( a latanoprost acid derivative ）對(duì)缺血性視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用和減弱氧化應(yīng)激對(duì)RGC-5（視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞）的作用，Osborne等28又在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)ACS67激活后，RGC-5在氧化應(yīng)激后的凋亡細(xì)胞減少。在同樣的研究中，視網(wǎng)膜缺血后玻璃體內(nèi)

16、應(yīng)用ACS67，盡管半胱天冬酶-3的向上調(diào)節(jié)和-8mRNA水平?jīng)]有被ACS67減少，但它可直接抵抗視網(wǎng)膜缺血再灌注的損傷。半胱天冬酶-3是半胱天冬酶的效應(yīng)物，連接細(xì)胞和線粒體的凋亡途徑，正像Osipov等29的描述，硫化氫能減少半胱天冬酶-3的分解，在心肌的缺血再灌注損傷模型中半胱天冬酶能夠被激活。最近Biermann等27在建立的大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型中，缺血前一小時(shí)吸入一定濃度的硫化氫,在損傷后7天整個(gè)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的密度被熒光素標(biāo)記，被用去分析視網(wǎng)膜組織的表達(dá)，熱休克蛋白（HSP-90）和促分裂原活化激酶（MAPKs）、氨基末端激酶（JNK）、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK1/2）和

17、P38等可以用來解釋神經(jīng)保護(hù)的可能途徑，以及DNA綁定轉(zhuǎn)錄因子NF-kB的活性，反應(yīng)結(jié)合蛋白（CREB）和熱激原件（HSE），就像半胱天冬酶裂解和激活一樣，這些保護(hù)途徑是被確定的。視網(wǎng)膜切片用抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白染色進(jìn)一步分析評(píng)估，結(jié)果在預(yù)先吸入硫化氫組死亡的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞比吸入室內(nèi)空氣組的要減少41.5%，這說明缺血前吸入硫化氫能減少半胱天冬酶和減弱半胱天冬酶的活性。Biermann等的研究數(shù)據(jù)揭示了硫化氫能減弱半胱天冬酶-3的分解和半胱天冬酶-3的活性，和osborne等研究的數(shù)據(jù)一致，硫化氫+視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷后視網(wǎng)膜切片Mller細(xì)胞的活性降低，根據(jù)他們的這些研究，為硫化氫調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡

18、的作用提出了一個(gè)誘人的途徑：外源性吸入硫化氫的應(yīng)用能抑制半胱天冬酶-3的分解和半胱天冬酶-3的活性。組織學(xué)也發(fā)現(xiàn)了很多的證據(jù)，不但有視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活，還有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活性降低。這為用硫化氫預(yù)處理來保護(hù)視網(wǎng)膜受損的分子靶點(diǎn)、作用部位提出了新的研究方向。3.3硫化氫與糖尿病視網(wǎng)膜病變 糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病性微血管病變的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，是由高血糖引起的視網(wǎng)膜代謝和生理功能的異常，之前大家都知道糖尿病視網(wǎng)膜病變是由高血糖引起的視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞和視網(wǎng)膜微血管的病變，最近國(guó)外Johnny和Kern報(bào)道30糖尿病視網(wǎng)膜病變也與低度的炎癥反應(yīng)有關(guān)。Li等5在2005年報(bào)道由脂多糖誘導(dǎo)的大鼠體內(nèi)和敗血

19、癥的人群中硫化氫的濃度增高，大鼠體內(nèi)注射硫化氫供體硫氫化鈉可以引起體內(nèi)器官的炎癥損傷，這說明硫化氫參與了炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)，硫化氫的這些生物學(xué)特性與糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)生密切相關(guān)。目前暫時(shí)還沒有硫化氫對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變保護(hù)作用的文獻(xiàn)報(bào)道，但是Jain 等31在2010年報(bào)道了 2-型糖尿病患者血漿中硫化氫水平的變化情況，2-型糖尿病患者糖化血紅蛋白在8.3%0.5%時(shí)，血漿中硫化氫的水平與正常人相比顯著下降。在2-型糖尿病病人和鏈脲佐菌素（Streptozotocin）處理的大鼠中發(fā)現(xiàn)低濃度的硫化氫可能引起血管炎癥，說明了糖尿病與血液中低濃度的硫化氫相聯(lián)系，在培養(yǎng)媒質(zhì)中也發(fā)現(xiàn)硫化氫能抑制血管內(nèi)的炎

20、癥因子IL-8和MCP-1的分泌。2011年Csaba和Andreas32報(bào)道了對(duì)小雞絨毛膜尿囊的膜應(yīng)用硫化氫能夠促進(jìn)新生血管的生長(zhǎng)和分支，在大鼠體內(nèi)應(yīng)用硫化氫也能刺激新生血管的形成，這些研究表明硫化氫能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增生、新的血管形成，這說明硫化氫既參與了炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)也參與了新生血管的形成。而糖尿病視網(wǎng)膜病變?cè)缙诰陀形⒀艿牟∽儯皆鲋称跁r(shí)有新生血管的形成，現(xiàn)在的研究表明也有炎癥反應(yīng)的參與，這就有可能硫化氫或者其供體參與了糖尿病視網(wǎng)膜病變某個(gè)過程的表達(dá)，需要去進(jìn)一步的研究它們之間關(guān)系，為糖尿病視網(wǎng)膜病變的防治提供新的策略。 結(jié)束語(yǔ) 綜上所述，硫化氫不僅是一個(gè)很好的神經(jīng)調(diào)節(jié)劑和細(xì)胞

21、保護(hù)劑，還參與了炎癥反應(yīng)的抑制，在視網(wǎng)膜變性性疾病、視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷、糖尿病視網(wǎng)膜病變等眼底疾病中，硫化氫參與了表達(dá)，對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞的凋亡起到了一定的阻滯作用，通過硫化氫的預(yù)先處理，受損的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞明顯減少。這些研究表明了硫化氫在眼底病變中對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞和血管組織有很好的保護(hù)作用，為眼底疾病的防治提供了一個(gè)新的研究方向，但其保護(hù)機(jī)理或參與保護(hù)的途徑還需要進(jìn)一步的研究，為硫化氫應(yīng)用于眼底疾病的臨床防治提供更有力的證據(jù)。參考文獻(xiàn)：1 Furchgott RF, Zawadzki JV.The obligatory role of endothelial cells in the re

22、laxation of arterial smooth muscle by acetylcholineJ.Nature,1980,288:373376.2 Verma A, Hirsch DJ, Glatt CE, et al.Carbon monoxide: a putative neural messengerJ.Science,1993,259:381384.3 Abe K. The possible role of hydrogen sulfide as an endogenous neuromodulatorJ. J Neurosci,1996,3:1066-1071.4 Y.Kim

23、ura, R.Dargusch, D.Schubert,et al.Hydrogen sulfide protects HT22 neuronal cells from oxidative stressJ.Antioxid Redox Signal,2006,8:661670.5 Li L, Bhatia M, Zhu YZ， et al. Hydrogen sulfide is a novel mediator of lipopolysaccharide-induced Inflammation in the mouseJ.FASEB J,2005,19: 11961198 .6 L.F.

24、Hu, P.T. Wong, P.K. Moore,et al.Hydrogen sulfide attenuates lipopolysaccharide induced Inflammation by inhibition of p38 mitogenactivated protein kinase in microgliaJ.J.Neurochem,2007,100 :11211128.7 Jain SK, Velusamy T, Croad JL,et al.L-cysteine supplementation lowers blood glucose, glycated hemogl

25、obin, CRP, MCP-1, oxidative stress and inhibits NF-kB activation in the livers of Zucker diabetic ratsJ. Free Radic Biol Med,2009,46: 16331638.8 Shibuya N.3-Mercaptopyruvate sulfurtransferase produces hydrogen sulfide and bound sulfane sulfur in the brainJ. Antioxid Redox Signa,2009,l4: 703-714.9 HY

26、PERLINK /pubmed?term=%22Mikami%20Y%22%5BAuthor%5D t _parent Mikami Y, HYPERLINK /pubmed?term=%22Shibuya%20N%22%5BAuthor%5D t _parent Shibuya N, HYPERLINK /pubmed?term=%22Kimura%20Y%22%5BAuthor%5D t _parent Kimura Y，et al.Hydrogen sulfide protects the retina from light-induced degeneration by the mod

27、ulation of Ca2+ influxJ. HYPERLINK /pubmed/21937432 l # o The Journal of biological chemistry. t _parent J Biol Chem,2011,286(45):39379-86.10 Ogasawara Y, Ishii K, Togawa T,et al. Determination of bound sulfur in serum by gas dialysis/high-performance liquid chromatographyJ.J Anal Biochem,1993,215:7

28、381.11 Ogasawara Y, Isoda S, Tanabe S.Tissue and subcellular distribution of bound and acid-labile sulfur, and the enzymic capacity for sulfide production in the ratJ. J Biol Pharm Bull,1994,17:15351542.12 Daniels KM, Stipanuk MH.The effect of dietary cysteine level on cysteine metabolism in ratsJ.

29、J Nutr,1982,112:21302141.13 Ishigami M, Hiraki K, Umemura K,et al.A source of hydrogen sulfide and a mechanism of its release in the brainJ. Antioxid Redox Signal ,2009,11:205214.14 Shibuya N, Tanaka M, Yoshida M,et al.3-Mercaptopyruvate sulfurtransferase produces hydrogen sulfide and bound sulfane

30、sulfur in the brainJ. Antioxid Redox Signal,2009,11:703714.15 Kombian SB, Reiffenstein RJ, Colmers WF.The actions of hydrogen sulfide on dorsal raphe serotonergic neurons in vitroJ.J Neurophysiol,1993,70:8196.16 Abe K, Kimura H.The possible role of hydrogen sulfide as an endogenous neuromodulatorJ.

31、J Neurosci,1996,16:10661071. 17 Kimura Y, Kimura H.Hydrogen sulfide protects neurons from oxidative stressJ. FASEB J ,2004,18:11651167.18 Kimura Y, Goto Y, Kimura H.Hydrogen sulfide increases glutathione production and suppresses oxidative stress in mitochondriaJ. Antioxid Redox Signal,2010, 12:113.

32、19Yang G,Wu L,Jiang B,et al.H2S as a physiologic vasorelaxant:hypertension in mice with deletion of cystathionine gammalyaseJ.J Science ,2008,322:587590.20 Feng X.Hydrogen sulfide from adipose tissue is a novel insulin resistance regulatorJ. J Biochem Biophys Res Commun,2009,1:153-15921 HYPERLINK /p

33、ubmed?term=%22Kulkarni%20M%22%5BAuthor%5D t _parent Kulkarni M, HYPERLINK /pubmed?term=%22Njie-Mbye%20YF%22%5BAuthor%5D t _parent Njie-Mbye YF, HYPERLINK /pubmed?term=%22Okpobiri%20I%22%5BAuthor%5D t _parent Okpobiri I, et al.Endogenous production of hydrogen sulfide in isolated bovine eyeJ. J HYPER

34、LINK /pubmed/21533862 l # o Neurochemical research. t _parent Neurochem Res.2011,36(8):1540-1545.22Kraus JP, Kozich V.Cystathionine B synthase and its deficiency. In: Carmel R, Jacobsen DW (eds) Homocysteine in health and diseaseM. Cambridge University Press, Cambridge,2001:pp 223243. 23 Krizaj,Cope

35、nhagen,D.R.Compartmentalization of calcium entry pathways in mouse rods FrontJ. J Biosci,2002,7:d2023-2044. 24John S.Penn,Barbara N.Baker,Alice G.Howard, et al.Retinal light-damage in albino rats:Lysosomal enzymes,rhodopsin,and ageJ.J Experimental Eye Research, 1985,41 (3): pp275-284.25 Wenzel A,Gri

36、mm C, Samardzija,et al.HYPERLINK /pubmed/15610977Molecular mechanisms of light-induced photoreceptor apoptosis and neuroprotection for retinal degenerationJ.J Prog Retin EyeRes,2005,24:275-306. 26 KimuraY,Goto Y,and Kimura H.Hydrogen sulfide increases glutathione production and suppresses oxidative

37、stress in mitochondriaJ. J Antioxid.Redox Signal,2010,12:1-13. 27 Biermann J, Lagrze WA, Schallner N, et al. HYPERLINK /pubmed/21633713 t _parent Inhalative preconditioning with HYPERLINK /pubmed/21633713 t _parent hydrogen sulfide HYPERLINK /pubmed/21633713 t _parent HYPERLINK /pubmed/21633713 t _p

38、arent attenuated apoptosis after retinal ischemia/reperfusion injuryJ. J Mol Vis,2011,7:1275-86. 28 Osborne NN, Ji D, Abdul Majid AS,et al.ACS67,a hydrogen sulfide-releasing derivative of latanoprost acid, attenuates retinal ischemia and oxidative stress to RGC-5 cells in cultureJ. J Invest Ophthalm

39、ol Vis Sci,2010,1:284-94.29 Osipov RM, Robich MP, Feng J, et al.Effect of hydrogen sulfide in a porcine model of myocardial ischemia-reperfusion: comparison of different administration regimens and characterization of the cellular mechanisms of protectionJ.J Cardiovasc Pharmacol,2009,54:287-97.30 Jo

40、hnny Tang,Timothy S. Kern.Inflammation in diabetic retinopathyJ.J progress in Retial and Research,2011,30: 341-358.31 Jain SK.Low levels of hydrogen sulfide in the blood of diabetes patients and streptozotocin-treated rats causes vascular inflammationJ. J Antioxid Redox Signal,2010,11: 1333-1337.32 Csaba Szab , Andreas Papapetropoulos