華北理工藥物分析教案第19章 中藥及其制劑分析概論

1、 課程名稱：藥物分析 第 15周，第 27講次摘 要授課題目（章、節(jié)）第十九章 中藥及其制劑分析概論 第一節(jié) 中藥及其制劑分析概述 第二節(jié)中藥的鑒別第三節(jié)中藥的檢查項(xiàng)目及方法第四節(jié) 含量測定與質(zhì)量整體控制 第五節(jié)中藥體內(nèi)分析及代謝組學(xué)研究 【目的要求】通過本講課程的學(xué)習(xí)，掌握中藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，中藥分析常用的方法和技術(shù)，中藥樣品的主要制備方法，熟悉中藥制劑質(zhì)量分析特點(diǎn)，了解體內(nèi)中藥分析?！局?點(diǎn)】中藥分析常用的方法和技術(shù)，中藥樣品的主要制備方法。【難 點(diǎn)】中藥分析常用的方法和技術(shù)，中藥樣品的主要制備方法。內(nèi) 容【本講課程的引入】中藥分析是以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，應(yīng)用現(xiàn)代分析方法，研究中藥材和飲片

2、、提取物和中藥制劑質(zhì)量的一門科學(xué)。板書“中藥及其制劑分析概論”。寫出章節(jié)的題目，參照講稿列出標(biāo)題；根據(jù)需要在每個(gè)標(biāo)題下適當(dāng)寫出需解釋的內(nèi)容或強(qiáng)調(diào)重點(diǎn)、難點(diǎn)等?！颈局v課程的內(nèi)容】一、概述 （一）中藥及其制劑定義 1中藥：以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的術(shù)語表述其性能、功效和使用規(guī)律，并且只有當(dāng)按中醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)其臨床應(yīng)用的傳統(tǒng)藥物，才可稱之謂中藥。 2中藥制劑（中成藥）：用中藥為原料，按中醫(yī)藥學(xué)理論譴藥、配伍和組方，以一定制備工藝和方法制成一定劑型的藥物制劑。 （二）中藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1現(xiàn)狀：中國藥典（2000年版一部）已收載中藥品種992種，其中中藥材532種，中藥制劑460種。中藥及其制劑的質(zhì)量控

3、制主要包括鑒別、檢查和含量測定。 2進(jìn)展：中藥制劑的質(zhì)量控制有許多工作要做，如何確定中藥制劑質(zhì)量評價(jià)的指標(biāo)是關(guān)鍵問題。只有在天然藥物化學(xué)、藥理學(xué)、藥劑學(xué)、藥物分析以及臨床和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)等方面進(jìn)行深入的研究，探明中藥制劑的作用機(jī)理、主要成分及相互的作用關(guān)系后，才能評價(jià)其質(zhì)量的客觀指標(biāo)，制定出比較完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 （三）中藥制劑分析的特點(diǎn)由于中藥制劑的組成十分復(fù)雜，因此給分析測試帶來一定困難，中藥制劑分析的樣品一般需要經(jīng)過提取、純化等預(yù)處理過程，以排除干擾組分的干擾。但過于繁瑣預(yù)處理不宜作為藥品常規(guī)檢驗(yàn)的方法。中藥制劑中有效成分的含量一般較低，因此要求方法有較高的靈敏度。（四）中藥及其制劑的分類與質(zhì)量

4、分析要點(diǎn)1分類 中藥材及其炮制品液體制劑：合劑與口服液、酒劑和酊劑、注射劑半固體制劑：煎膏劑、浸膏劑和流浸膏劑固體制劑：丸劑、散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑2質(zhì)量分析要點(diǎn)注射劑：為了確保中藥注射劑的質(zhì)量穩(wěn)定、可控，中藥注射劑在固體中藥材品種、產(chǎn)地和采收期的前提下，需制訂中藥材、有效部位或中間體、注射劑的指紋圖譜。中藥指紋圖譜包括色譜指紋圖譜（HPLC、GC、TLC等），光譜指紋圖譜及脫氧核糖核酸指紋圖譜。二、中藥及其制劑分析中待測成分的提取分離與純化方法（一）提取方法1萃取法 2冷浸法3回流提取法4連續(xù)回流提取法：使用索氏提取器連續(xù)進(jìn)行提取，提取效率高。5水蒸氣蒸餾法：適用于揮發(fā)性組分的提取。組分

5、對熱應(yīng)穩(wěn)定。6超聲提取法：超聲波具有助溶作用，提取較冷浸法速度快，一般僅需數(shù)十分鐘浸出即可達(dá)到平衡。由于超聲提取過程中溶劑可能會有一定的損失，所以用作含量測定時(shí)，應(yīng)于超聲振蕩前先稱定重量，提取完畢后，放冷至室溫，再稱重，并補(bǔ)足減失的重量，濾過后，取續(xù)濾液備用。用于藥材粉末的提取時(shí)，由于組分是由細(xì)胞內(nèi)逐步擴(kuò)散出來，速度較慢加溶劑后宜先放置一段時(shí)間，再超聲振蕩提取。7超臨界流體萃取法1）超臨界流體：是指當(dāng)壓力和溫度物質(zhì)的臨界點(diǎn)時(shí)，所形成的單一相態(tài)。常用的超臨界流體有超臨界CO2，它具有較低的臨界溫度（31）和臨界壓力（7390kPa），惰性、無毒、純凈、價(jià)廉。2）特點(diǎn)：首先，它具有與液體相似的密度

6、，因而具有與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力；其次，溶質(zhì)在其中擴(kuò)散系數(shù)卻與氣體相似，因而具有傳質(zhì)快，提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)，提取完全一般僅需數(shù)十分鐘；超臨界流體的表面張力為零，這使它很容易滲透到樣品的里面，帶走測定組分；超臨界流體萃取的選擇性強(qiáng)，通過改變萃取的條件，如溫度、壓力等，可以選擇性的萃取某些組分；超臨界流體在通常狀態(tài)下即成為氣，因此萃取后溶劑立即變?yōu)闅怏w而逸出，容易達(dá)到濃集的目的。3）超臨界流體萃取的因素：溫度、壓力、改性劑和提取時(shí)間。（二）純化萃取的方法不僅用于測定組分的提取，也可用于純化。例如二次萃取和柱色譜法。三、中藥及其制劑分析的一般程序中藥及其制劑分析的一般程序包括：取樣、檢驗(yàn)依據(jù)和分析

7、方法準(zhǔn)備、樣品的真?zhèn)舞b別試驗(yàn)、樣品的雜質(zhì)檢查、樣品中主藥的含量測定和檢驗(yàn)記錄等。（一）取樣取樣原則：供試品要具有一定的代表性； 必須嚴(yán)格按照規(guī)定的取樣方法進(jìn)行取樣。（二）鑒別試驗(yàn)1鑒別試驗(yàn)的重要性：中藥及其制劑的鑒別可以通過確認(rèn)其中所含藥味的存在或某些特征成分的檢出而達(dá)到鑒別的目的。目前部分中藥尚無含量測定項(xiàng)目，因此，鑒別就成為中藥制劑質(zhì)量控制的一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。2鑒別方法 性狀鑒別、顯微鑒別：顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法理化法鑒別：微量升華法、熒光與光譜鑒別法顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)鑒別法色譜鑒別：紙色譜法、毛細(xì)管分析法、TLC、GC、HPLC 1）顯微鑒別：用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡進(jìn)行鑒別。該法通常在下

8、列情況中應(yīng)用：藥材及炮制品的外形鑒別特征不明顯或外形相似難于鑒別而組織構(gòu)造不同時(shí)；藥材破碎或呈粉末不易用肉眼辨認(rèn)或區(qū)分時(shí)；含原藥材粉末的中藥制劑。顯微化學(xué)反應(yīng)鑒別法：一般可取藥材切片或粉末，中成藥取粉末，置載玻片上，滴加各種試劑，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀物，以及特殊的顏色變化，作為鑒別特征。該法可以確定基礎(chǔ)品種中特殊化學(xué)成分的存在及在組織中的分布。2）TLC法薄層板：最多的是硅膠G板，也可另加0.2%0.5%的CMC作為黏合劑，可用軟鋁筆在板上做標(biāo)記；能經(jīng)受一般的化學(xué)試劑處理，如用含濃硫酸的顯色劑處理后，可將酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展開劑：無水乙醇-苯（1：4）

9、苯-氯仿（1：3） 丙酮-甲醇（1：1）顯色方法：紫外燈下觀察熒光斑點(diǎn) 選用顯色劑（三）雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查項(xiàng)目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷鹽、重金屬、農(nóng)藥殘留量、浸出物、揮發(fā)油、總氮測定等。1水分檢查法 中國藥典（2000年版一部）附錄收載以下四種方法： 烘干法、甲苯法、減壓干燥法和GC法。2總灰分和酸不溶性灰分總灰分：是指藥材或制劑經(jīng)加熱熾灼灰化遺留的無機(jī)物，包括藥物本身所含無機(jī)鹽（稱為生理灰分）、泥土、砂石等藥材外表黏附的無機(jī)雜質(zhì)。酸不溶性灰分：主要是外來雜質(zhì)，如泥土、砂石。3砷鹽與重金屬檢查：與化學(xué)合成藥物不同的是，檢查前必須對樣品進(jìn)行有機(jī)破壞，破壞方法有干法和濕法兩種。4農(nóng)藥殘留量：可

10、測定總氯量、總磷量，也可采用GC法測定某個(gè)農(nóng)藥的量。采用GC時(shí)，先用非極性有機(jī)溶劑萃取出殘留農(nóng)藥，再通過硅藻土或弗羅里硅土進(jìn)一步醇化。測定有機(jī)氯時(shí)，使用電子撲獲檢測器（ECD）；測定有機(jī)磷時(shí)，使用火焰光度檢測器（FPD）。（四）含量測定中藥及其制劑中含有眾多成分，僅以單一成分作為質(zhì)量控制的指標(biāo)不能全面反映藥材質(zhì)量，更不能保證藥效。指標(biāo)成分的選擇原則 1. 首選君藥及貴重藥建立含量測定方法。 2. 中藥和化學(xué)藥品組成的復(fù)方制劑，除建立君藥的測定項(xiàng)目外，所含化學(xué)藥品必須建立含量測定項(xiàng)目。3. 有毒藥物必須建立含量測定項(xiàng)目，無法測定時(shí)，需規(guī)定限度檢查或含量限度范圍。4. 測定成分應(yīng)盡量與中醫(yī)理論、用

11、藥的功能主治相近。5. 測定成分需考慮與生產(chǎn)工藝的關(guān)系。6. 測定成分應(yīng)歸屬于某一單一藥味。 7. 若確實(shí)無法進(jìn)行含量測定的，可測定藥物的總固體量。 含量測定方法主要有：化學(xué)分析法、分光光度法、薄層掃描法和HPLC法。1薄層掃描法1）對色譜條件的要求：選擇性好，組分能完全分離，斑點(diǎn)對稱、均勻、不拖尾。2)測量方法：多使用反射法。3）掃描方式：單波長 雙波長 測定波長選在被測組分的最大吸收波長， 參比波長選在組分無吸收的位置上，若背景有均勻污染時(shí)，可選擇背景光譜中與測定波長的等吸收處。 4）散射參數(shù)SX：由于薄層板對光的散射，其吸收度和濃度之間的關(guān)系不服從比爾定律，二者不呈直線，但符合K-M方程，可以進(jìn)行校正，使其成為直線。薄層掃描儀均裝有線性化器，測定時(shí)需輸入SX值，因?yàn)槲斩?濃度曲線的形狀與SX值有關(guān)。5）定量方法：外標(biāo)法 若曲線經(jīng)過原點(diǎn)，可用一點(diǎn)法校正；若曲線不經(jīng)過原點(diǎn)，用二點(diǎn)法校正； 必要時(shí)，可采用多點(diǎn)法校正。 內(nèi)標(biāo)法 將內(nèi)標(biāo)加入供試液中，以組分與內(nèi)標(biāo)峰面積比值作為定量依據(jù)。（五）檢驗(yàn)記錄要求：原始資料真實(shí)、詳細(xì)、整潔。內(nèi)容：送檢單位、送檢日期、檢品名稱與規(guī)格、批號、檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)者、審核者及檢驗(yàn)日期。對用顯微鏡或電鏡檢驗(yàn)所锝的