日本牙鲆Toll樣受體

1、日本牙鲆Toll樣受體14分子（TLR14）克隆與表征Molecular cloning and characterization of Toll-like receptor 14 in Japanese flounder, Paralichthys olivaceus報(bào)告人：吳功倍2010級生科2班 專業(yè)論文讀書報(bào)告1摘要1、Toll樣受體（TLRs）對于入侵病原體固有免疫應(yīng)答活化是至關(guān)重要的。魚類特有的TLR14已經(jīng)在幾種魚類中得到鑒定，但其功能尚不清楚。2、在本研究中，經(jīng)過注射出血性敗血癥病毒、革蘭氏陽性海豚鏈球菌和革蘭氏陰性愛德華氏菌，日本牙鲆TLR14基因（jfTLR14）已被克隆，

2、且該基因的表達(dá)譜也已得到分析。 jfTLR14 cDNA編碼區(qū)長2607 bp，能編碼878個(gè)氨基酸殘基。23、jfTLR14 在健康牙鲆頭腎中高豐度表達(dá)。jfTLR14對于應(yīng)答所注射的出血性敗血癥病毒和海豚鏈球菌，其表達(dá)只于1dpi升高，而對愛德華氏菌的應(yīng)答表達(dá)則從1dpi增加到6dpi。這些結(jié)果意味著jfTLR14在注射愛德華氏菌的免疫應(yīng)答中參與程度較其他注射病原體的高。關(guān)鍵詞： Toll樣受體14（TLR14）；牙鲆；固有免疫；愛德華氏菌3一、引言1、TLRs是型跨膜受體的一個(gè)家族，在對入侵病原體病原相關(guān)分子模式（PAMPs）的識別中扮演著重要的角色。它們由一個(gè)配體LRR識別區(qū)、一個(gè)跨膜

3、區(qū)和一個(gè)胞內(nèi)Toll/白介素1受體信號區(qū)組成。2、目前，TLR1-TLR13在哺乳動物中已被鑒定。然而，有趣的是，現(xiàn)在在硬骨魚類中已經(jīng)鑒定出了15種TLR，包括與哺乳動物同源的TLR和魚類特有的TLR 。其中，TLR5、 TLR14、 TLR21和TLR22還并未在哺乳動物中得到鑒定。43、在魚類中，TLR14屬于由TLR1、TLR2、TLR6、TLR10所組成的TLR2亞家族。而在哺乳動物中，TLR2亞家族更傾向于與彼此形成識別多種微生物成分的異二聚體。 TLR6和TLR10在哺乳動物基因后期出現(xiàn)進(jìn)化，而在魚類基因中卻沒有。所以， TLR14有可能是哺乳動物產(chǎn)生免疫應(yīng)答抵御多種水生病原體 T

4、LR6和TLR10的功能替代者。4、這里，我們將報(bào)導(dǎo)日本牙鲆jfTLR14的鑒別與分子鑒定。對于注射出血性敗血癥病毒、革蘭氏陽性海豚鏈球菌和革蘭氏陰性愛德華氏菌后jfTLR14的表達(dá)也將進(jìn)行定量實(shí)時(shí)PCR分析。5二、材料與方法1）jfTLR14分子克隆；2）jfTLR14外顯子/內(nèi)含子結(jié)構(gòu)的確定；3）健康魚體內(nèi)jfTLR14基因的表達(dá)檢測；4）注射出血性敗血癥病毒、革蘭氏陽性海豚鏈球菌和革蘭氏陰性愛德華氏菌對jfTLR14基因表達(dá)的影響。6三、結(jié)果1. jfTLR14cDNA與基因的鑒定72. jfTLR14基因表達(dá) 8雖然TLR2亞家族能夠識別一系列代表多種物種的病原體成分，但是TLR14的功能仍然不清楚。這些結(jié)果意味著j