尿液膽紅素定性試驗(yàn)

1、文件編號(hào)：XYJY-OP-LJ-XM-001版本/修訂號(hào)：2.0/1.0發(fā)布日期：2011-08-30西苑醫(yī)院檢驗(yàn)科編制者：實(shí)施日期：2011-08-30臨檢作業(yè)指導(dǎo)書(shū)審核者：批準(zhǔn)者：尿液膽紅素定性試驗(yàn)頁(yè)碼：第1頁(yè)，共4頁(yè) PAGE - 4 -（共 NUMPAGES 4頁(yè)）尿液膽紅素定性試驗(yàn)1 檢驗(yàn)?zāi)康哪懠t素是血紅蛋白分解代謝的中間產(chǎn)物，是膽汁中的主要成份，其代謝產(chǎn)物有尿(糞)膽原等。在正常情況下，肝細(xì)胞中生成的結(jié)合膽紅素，隨膽汁排入腸道，轉(zhuǎn)化為無(wú)色的膽素原族化合物，故尿液中無(wú)膽紅素出現(xiàn)。當(dāng)各種原因造成膽紅素產(chǎn)生過(guò)多或肝細(xì)胞攝取、結(jié)合及排泄等過(guò)程發(fā)生障礙時(shí)，均可導(dǎo)致血、尿、糞便中膽紅素及其代謝

2、產(chǎn)物(尿膽原等)的改變。因此檢驗(yàn)?zāi)蛞褐械哪懠t素可對(duì)膽紅素有關(guān)疾病的診斷，觀察疾病的變化及治療效果提供參考價(jià)值。2 檢測(cè)原理尿液膽紅素定性測(cè)定方法主要有干化學(xué)法和Harrison法。干化學(xué)法測(cè)定原理是在強(qiáng)酸介質(zhì)中，直接膽紅素與二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應(yīng)生成紅色的復(fù)合物，其反應(yīng)過(guò)程是重氮鹽作用膽紅素中央使其裂開(kāi)，再結(jié)合形成2分子的偶氮膽紅素而呈現(xiàn)顏色變化。Harrison法的實(shí)驗(yàn)原理是用氯化鋇吸附尿液中膽紅素后，將吸附物(鋇鹽膽紅素)與含有三氯化鐵及三氯醋酸的Fouchet試劑作用，將膽紅素氧化為藍(lán)色的膽青素(chole-cyanin)或綠色的膽綠素(biliverdin)及黃色的膽黃素(chole

3、telin)復(fù)合物。3 操作性能Harrison氏法測(cè)定尿液膽紅素的敏感度較高為0.9mol/L(0.05mg/dl)；尿液膽紅素定性試驗(yàn)是一個(gè)定性試驗(yàn)，目前還沒(méi)有其它試驗(yàn)性能指標(biāo)。4 標(biāo)本4.1 收集患者清晨新鮮尿液10ml。4.2 標(biāo)本采集后應(yīng)立即送到臨床檢驗(yàn)臨檢室。4.3 不能及時(shí)測(cè)定的標(biāo)本應(yīng)于2-8冰箱保存。5 容器及添加劑類(lèi)型一次性潔凈的尿杯、尿管。6 設(shè)備和試劑6.1 干化學(xué)法：羅氏公司的URYSYS 2400尿液分析儀及專(zhuān)用試帶。6.2 Harrison法：10%氯化鋇溶液3-5滴；三氯化鐵試劑：三氯醋酸：25g；三氯化鐵：0.9g；蒸餾水：100ml。7 干化學(xué)法的校準(zhǔn)步驟7.

4、1 URYSYS 2400尿液分析儀每月對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)一次。7.2 儀器校準(zhǔn)的操作步驟，詳見(jiàn)URYSYS 2400尿液分析儀儀器登記文件。8 操作步驟8.1 干化學(xué)法操作步驟樣本的準(zhǔn)備：將編好號(hào)的樣品放在儀器相應(yīng)的標(biāo)本位置；試劑的檢查：儀器開(kāi)機(jī)后，檢查各種試劑的位置、體積、批號(hào)等，確認(rèn)無(wú)誤后方可進(jìn)行測(cè)定；操作方法：測(cè)定樣本項(xiàng)目必須在儀器校準(zhǔn)通過(guò)的情況下進(jìn)行，其操作過(guò)程操作步驟詳見(jiàn)URYSYS 2400尿液分析儀儀器登記文件。8.2 Harrison法操作步驟取尿液約5ml加氯化鋇溶液3-5滴，此時(shí)出現(xiàn)白色沉淀物，混勻，離心3-5分鐘，輕輕將上清液傾棄。將上述混濁尿離心取沉淀物，加入三氯化鐵試劑

5、2-3滴，放置片刻呈綠色或綠藍(lán)色反應(yīng)者為陽(yáng)性，否則為陰性。9 質(zhì)量控制干化學(xué)法每天操作過(guò)程中應(yīng)使用尿液質(zhì)控液至少做一次質(zhì)量控制。請(qǐng)參見(jiàn)URYSYS 2400尿液分析儀儀器登記文件。Harrison法試驗(yàn)操作過(guò)程中，每次應(yīng)做一次正常對(duì)照。10 干擾因素尿液中含高濃度維生素C和亞硝酸鹽時(shí)，抑制偶氮反應(yīng)，使尿膽紅素呈假陰性，當(dāng)患者接受大劑量氯丙嗪治療或尿中含有鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物時(shí)，可呈假陰性。由于膽紅素不夠穩(wěn)定，尤其在陽(yáng)光照射下更易分解，故留尿標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)檢查。加氯化鋇溶液振蕩后如生成沉淀不多，可加入飽和硫酸銨1-2滴，再振蕩混合即有足夠的沉淀產(chǎn)生。水楊酸鹽和阿斯匹林可與Fouchet試劑發(fā)生

6、反應(yīng)，產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。當(dāng)Fouchet試劑加入過(guò)多時(shí)，膽紅素氧化過(guò)度，則生成膽黃素而不顯綠色，而誤認(rèn)為假陰性，因此Fouchet試劑只需加入2-3滴。11 計(jì)算URYSYS 2400尿液分析系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)地計(jì)算出結(jié)果。12 生物參考值區(qū)間健康人尿液膽紅素定性試驗(yàn)呈陰性。13 檢驗(yàn)結(jié)果的可報(bào)告區(qū)間14 警告危急值（不適用）15 實(shí)驗(yàn)室解釋正常人尿液中膽紅素定性試驗(yàn)為陰性。膽紅素定性陽(yáng)性常見(jiàn)于肝實(shí)質(zhì)性(病毒性、中毒性肝炎)及阻塞性(膽石癥以及其他原因引起)黃疸。在肝實(shí)質(zhì)性及阻塞性黃疸時(shí)，血液中結(jié)合膽紅素增高，超過(guò)腎閾時(shí)，可以從尿中排出。在溶血性黃疸患者，結(jié)合膽紅素多不增高，尿中無(wú)膽紅素，本試驗(yàn)一般為陰性。16 異常結(jié)果處理尿液膽紅素定性試驗(yàn)異常結(jié)果需與臨床診斷相符合，不符合的結(jié)果應(yīng)復(fù)查。17 報(bào)告時(shí)間與標(biāo)本保存13.1 尿液膽紅素定性試驗(yàn)4小時(shí)出結(jié)果；病房患者的