細胞產(chǎn)物分析技術(shù)細胞產(chǎn)物分離方法

1、關(guān)于細胞產(chǎn)物分析技術(shù)細胞產(chǎn)物分離方法第一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月樣品的預(yù)處理細胞產(chǎn)物的提取細胞產(chǎn)物的分離產(chǎn)物的分析鑒定經(jīng)典分離方法紅外光譜紫外可見光譜色譜分離法質(zhì) 譜核磁共振譜第二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月經(jīng)典分離方法液-液萃取法利用組分在兩個互不相溶的液相中的溶解度差異而將其從一個液相轉(zhuǎn)移到另一個液相的分離過程稱為液液萃取，也叫溶劑萃取，簡稱萃取。待分離的一相稱為被萃相，萃取后成為萃余相，用做分離劑的相 稱為萃取相。第三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月經(jīng)典分離方法液-液萃取法 被萃取組分在萃取相中的溶解度要大于被萃取相。一般一相為水相，一相為有機相

2、。在水相中增加鹽離子濃度可以降低有機相在水中的溶解度。萃取應(yīng)采用少量多次原則。從水相中萃取有機物質(zhì)時，單級萃取時一般選擇該物質(zhì)的最佳溶劑。多級萃取溶劑選擇一般從弱極性強極性。密度：石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丁醇、苯水600m2/g 0.4ml/g 150-180m 80-100 20-30A 600m2/g 0.4ml/g 125-180m 80-120 20-30A 600m2/g 0.4ml/g 75-150m 100-200 20-30A 600m2/g 0.4ml/g 45-75m 200-300 20-30A 600m2/g 0.4ml/g 柱層析硅膠（粗孔）粒度 目數(shù) 平均孔徑 比表

3、面積 孔體積（約） 180-250m 60-100 80-100A 300-400m2/g 0.8ml/g 125-180m 80-120 80-100A 300-400m2/g 0.8ml/g 75-150m 100-200 80-100A 300-400m2/g 0.8ml/g 45-75m 200-300 80-100A 300-400m2/g 0.8ml/g 第四十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相硅膠 硅膠的吸附性能取決于硅 膠中硅醇基的數(shù)及含水量。 隨著水分的增加吸附能力 降低。若吸水量超過12， 吸附力極弱，不能用做吸附色譜，只可用于分配色譜的

4、載體。 硅膠的表面積、表面結(jié)構(gòu)、微孔體積及微孔半徑均直接影響著色譜分離的效果。第五十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相硅膠 硅膠應(yīng)是中性無色顆粒，由于制備過程中接觸強酸常帶有酸性，故在使用前應(yīng)檢查其水浸液的酸度不低于pH 5 時才可使用；否則應(yīng)用水洗至中性再在110活化24小時。 硅膠在甲醇、水等強極性溶劑中有一定的溶解性，約為0.01。在pH=9以上，則溶解度急劇上升。 有時可以向硅膠中摻入某種試劑以改良吸附性能，提高分離效果。通常用硝酸銀處理過的硅膠對不飽和烴類有極好的分離作用。改良吸附劑的制備一般是將含110填加試劑的水或丙酮溶液與硅膠混勻，稍后于110

5、干燥即可。 第五十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相硅膠 硅膠的再生一般可用乙醇或甲醇洗滌，除去溶劑烘干活化處理即可使用。必要時用0.5氫氧化鈉水溶液浸泡洗滌、過濾、水洗，再以510鹽酸浸泡洗滌最后用蒸餾水洗至中性，110活化，過篩即可。 50200m的硅膠每克吸附劑承載 10 mg樣品，吸附劑每克硅膠載樣30mg時只能用于被分離物質(zhì)的Rf值差別很大的情況。上樣較多時可達到過濾的目的。 第五十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相氧化鋁 色譜用的氧化鋁可分酸性、中性和堿性三種。酸性氧化鋁pH約為4-4.5，用于分離羧酸、氨基酸

6、等酸性物質(zhì)；中性氧化鋁pH值為7.5，用于分離中性物質(zhì)，應(yīng)用最廣；堿性氧化鋁pH為9-10，用于分離生物堿、胺和其它堿性化合物等。 吸附劑的活性與其含水量有關(guān)。含水量越低，活性越高。脫水的中性氧化鋁稱為活性氧化鋁。第五十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相氧化鋁 常用規(guī)格：50100目、100200目、200300目、300400目、400500目、500目以上 外觀白色微球和沙狀白色微球 白色微球 粒徑(m) 75 (%) 250 250 250 PH 值 4.55.5 6.57.5 8 酸堿度 酸性 中性 堿性 第五十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022

7、年6月色譜分離法柱色譜常用固定相聚酰胺 由酰胺聚合而成的一類高分子物質(zhì)，又 稱錦綸、尼龍等，層析常用的是錦綸6 和錦綸66；其單體物質(zhì)是已內(nèi)酰胺、已二胺和已二酸。分子中的酰胺鍵是其結(jié)構(gòu)的重要部分，酰胺鍵也是與其它極性鍵基團產(chǎn)生氫鍵的物質(zhì)基礎(chǔ)。是吸附層析，酰胺鍵與物質(zhì)分子中的極性鍵的相互作用應(yīng)該是吸附作用的主要原因；分離物質(zhì)的氫鍵作用是聚酰胺層析的根本原因；但非氫鍵物質(zhì)也可用聚酰胺進行分離。原理目前尚未完全闡明。第五十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜常用固定相聚酰胺 通常有兩種雜質(zhì)：一種是蠟質(zhì)，另一種是錦綸的聚合原料單體及其小分子聚合物。原料單體及其小分子聚合物可與酚

8、類物質(zhì)形成復(fù)合物，而蠟質(zhì)能被醇液洗脫下來，與分離之物質(zhì)混在一起則難以除去。除去原料單體及其小分子聚合物的方法是用二甲基甲酰胺（DMF）或DMF：醋酸：水：乙醇（5：10：30：20）混合液洗脫。除去蠟質(zhì)的方法是用甲醇：二氯乙烷（1：1）混合液洗脫。第五十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜裝柱 要求:固定相的上表面一定要 平整，并且固定相的高度要根 據(jù)需要，短了可能分離效果不 好，長了也會出現(xiàn)擴散或拖尾 導(dǎo)致分離效果不好。 濕法裝柱:是先把硅膠混懸于 流動相溶劑中，然后加入到裝 有溶劑的柱子頂端，在保持一 定流速的條件下固定相逐漸沉 積并達到需要的高度，并始終保持一定的

9、液面高度，不可將柱子“走干”，最大的優(yōu)點是柱子裝的比較結(jié)實，沒有氣泡。第五十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜裝柱 干法裝柱：直接往柱子里填入硅膠，然后再輕輕敲打柱子兩側(cè)（濕法也要敲的，效果好點），至硅膠界面不再下降為止，然后再填入硅膠至合適高度，減壓抽氣可以使得柱子裝得結(jié)實，接著是用洗脫劑“走柱子”，干法裝柱較方便，技術(shù)要求低，但容易產(chǎn)生氣泡，在上樣前需要用大量溶劑淋洗才能達到濕法裝柱的效果。因而相對成本較高。第五十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜上樣 濕法上樣：適合濕法的樣品 是粘度不大均勻液體樣品或 者在極性弱于洗脫劑的溶劑 中溶解度

10、好的固體樣品，需保證上樣過程中不會析出。 用于溶解樣品的溶劑體積應(yīng)越少越好。樣品沿柱子內(nèi)壁于硅膠面上方0.5cm以內(nèi)距離均勻地加樣，加樣的速度以柱子不出現(xiàn)氣泡為限。待所有樣品上完后，用盡可能少的溶劑洗滌樣品瓶，待樣品在固定相上恰好走干后依上樣法將溶液加到固定相上。第五十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜上樣 干法上樣：干法就是把待分離的樣品用少量低沸點溶劑溶解后，再加入少量固定相，拌勻后再揮干溶劑。如此得到的粉末再小心加到柱子的頂層，注意保留足夠的溶劑使加入的干粉恰好能被覆蓋以防柱子開裂。此時加入的干粉層中可能會有大量的氣泡，但由于是松的，可以用玻棒稍做攪拌以除去氣泡

11、，同樣要保持硅膠表面的平整。 若擔心上樣及加溶劑過程中會將柱子表面弄破可考慮在上樣前先在柱子上加一層石英砂。過程中時刻保持柱子不要干出氣泡或裂紋！第六十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜洗脫 柱層析所用的流動相，習(xí)慣上稱為 洗脫劑,可將目的組分自混合樣品 中逐次分離出來。 洗脫的過程中，洗脫劑自柱上端加 入,固定相上端始終在洗脫劑溶劑不 能干，每30分鐘1小時內(nèi)流出的洗 脫劑體積等于所用吸附劑的重量為 宜。洗脫劑可隨意變，混合過渡為重點。 根據(jù)需要分段收集，然后用薄層色譜檢測。第六十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜洗脫劑 在柱色譜分離過程中混

12、合物中各組分在吸附劑和洗脫劑之間發(fā)生吸附-溶解分配，強極性洗脫劑對極性大的有機物溶解的多，弱極性或非極性洗脫劑對極性小的有機物溶解的多，隨洗脫劑的流過不同極性的有機物以不同的次序形成分離帶。 當一種溶劑不能實現(xiàn)很好的分離時，選擇使用不同極性的溶劑分級洗脫。 如一種溶劑作為洗脫劑只洗脫了混合物中一種化合物，對其它組分不能洗脫，需換一種極性更大的溶劑進行第二次洗脫。這樣分次用不同的洗脫劑可以將各組分分離。 第六十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜利用各種裝置施加壓力進行的液相色譜，壓力可高達100bar?？稍试S在分離過程中使用顆粒度更小的吸附劑，從而獲得更高的分

13、辨率。可加快洗脫劑的流速縮短分離時間。在對敏感化合物進行長時間的常壓色譜分離時，化合物的結(jié)構(gòu)可能會發(fā)生轉(zhuǎn)變，而縮短分離時間的最大優(yōu)點在于可以避免這種轉(zhuǎn)變的發(fā)生。第六十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜根據(jù)分離中所用壓力的大小可把制備型柱色譜區(qū)分為快速色譜（約2bar）、低壓液相色譜（bar）。中壓液相色譜（520 bar）及高壓液相色譜（20 bar) 低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊。分離中所用色譜柱及固定相顆粒的大小需根據(jù)分離的難易程度而定。一般對于難分離的樣品應(yīng)采用小顆粒的固定相及稍長的色譜柱分離所需壓力也會加大。第六十四張，PPT

14、共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜快速色譜Still等于1978年介紹了快速色譜技術(shù)。色譜分離時長時間的洗脫可造成敏感化合物的分解并使色帶脫尾，快速色譜大大縮短分離所需時間從而避免產(chǎn)生上述問題?？焖偕V中使用最廣泛的固定相為硅膠。一些粒度范圍較窄的球形硅膠是專門為快速色譜而設(shè)計的。此外也可采用具有一定粒度范圍的非球形硅膠。硅膠快速色譜可對天然產(chǎn)物進行最終純化，但更常見的是用此方法對粗提物或混合物進行初步純化，然后再利用其他具有高分辨率的色譜技術(shù)進行純化。第六十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜 加壓柱色譜快速色譜快速色譜分離裝置包括一裝有活塞，

15、長度適合的玻璃柱。可用干法或濕法將固定相加入其中。干法裝柱效果更好，但需用大量溶劑使固定相完全潤濕。在固定相的頂部最好加一層沙子。第六十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜固定相的上端應(yīng)留有足夠的空間以便反復(fù)加入洗脫劑，也可在柱頂部加一球形磨口儲液槽。加樣后可施加高于大氣壓l bar的壓力以加速樣品的洗脫。在氣體入口處可利用一針式閥門控制壓縮氣體的流速。利用不同尺寸的色譜柱對0.0110.0g樣品所進行的分離通常可在15min內(nèi)完成。 加壓柱色譜快速色譜第六十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜使用最廣泛的低壓液相色譜系統(tǒng)是E Merck公司生產(chǎn)

16、的Lobar柱系列產(chǎn)品，一般與其他分離方法結(jié)合起來使用，將其用作中間或最后的純化手段。預(yù)制色譜柱是由玻璃制成，色譜柱中的固定相被柱兩端的熔融玻璃封閉。色譜柱兩端連有聚四氯乙烯環(huán)的金屬管可與輸液泵相連，金屬管及聚四氯乙烯環(huán)被柱端的旋鈕固定于柱體。加壓柱色譜低壓柱色譜 第六十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜因分離過程中需使用輸液泵一般采用組成恒定的洗脫劑。利用反相Lobar RP18色譜系統(tǒng)從山甘草中分離得到三萜皂苷類成分，所用溶劑系統(tǒng)為乙醇-水（1:1）和乙腈-水（1:1）加壓柱色譜低壓柱色譜 第六十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色

17、譜低壓柱色譜 Lobar柱規(guī)格分為 A、B、C三種型號預(yù)制色譜往的填料有硅膠、RP18、RP-8、NH2-、CN-及diol鍵合相硅膠等。第七十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜中壓柱色譜 Lobar色譜分離系統(tǒng)具有使用方便，分辨率較高的優(yōu)點。然而，用這些色譜柱難以分離5g以上的樣品。中壓液相色譜可采用更長、具有更大內(nèi)徑的色譜柱，可以一次性分離更多的樣品。中壓液相色譜比低壓液波相色譜使用的填料顆粒度更小，分辨率更高，需使用更大的壓力來維持適當?shù)牧魉偎鑹毫捎蓧嚎s空氣或往復(fù)泵提供。先利用分析型HPLC可以十分有效地選擇適當?shù)娜軇┫到y(tǒng)。第七十一張，PPT共九十一

18、頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜中壓柱色譜 中壓色譜柱可用于分離100 mg至100g的樣品?；钊眉翱商鎿Q泵頭可在最大壓力為 40 bar時，使流速在3160 mLmin之間調(diào)節(jié)。該系統(tǒng)接有溶劑梯度形成裝置并可用各種紫外檢測儀檢測。柱體大小可從 130 mL直至 1880 mL。第七十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜中壓柱色譜 該系統(tǒng)的色譜柱由帶有塑料保護膜的強化玻璃制成，因此可以觀測到分離的進展情況?？梢詫⑸V柱連接起來使用以提高分離能力。可以用干法或濕法裝柱。與濕法裝柱相比，干法裝柱可使固定相填充密度提高20。最大承受壓力只有40

19、bar，但使用顆粒度為 15 m 的固定相可以獲得同HPLC柱類似的分離效果。第七十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜加壓柱色譜中壓柱色譜 應(yīng)用鍵合相固定相時應(yīng)采用濕法裝柱?？梢杂米⑸淦鲗悠分苯蛹拥缴V柱上或使用進樣器進樣。如在色譜柱前連接一小的樣品柱，也可以采用固體上樣法。在制備型色譜柱前連一前置柱，在每次分離后將被污染的填料除去，利用甲醇乙酸乙酯已烷的沖洗順序?qū)枘z固定相進行再生。但在重復(fù)使用幾次之后，應(yīng)將固定相廢棄。鍵合相色譜柱更易于清洗井具有更長的使用壽命。分離中多數(shù)采用的是硅膠或反相硅膠固定相但有時也采用聚酰胺或纖維素第七十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2

20、022年6月色譜分離法柱色譜減壓柱色譜 是利用真空為動力來加速流動相流經(jīng)固定相的一種色譜分離方法。可用減壓液相色譜法替代快速色譜法在進行高壓液相色譜及其他復(fù)雜分離之前對植物提取物進行初步分離。與制備薄層色譜和快速色譜相比，設(shè)備簡單，分離全程短，有較理想的分離度，分離容量大。類似于制備型薄層色譜，在完成一次展開、干燥后，還可再次對之進行展開。已有多種吸附劑被嘗試用于減壓液相色譜分離，其中包括硅膠、氧化鋁、聚酰胺及健合相硅膠等。例如： 用減壓液相色譜法分離姜（Zingiber officinale）中的辛辣成分，可將姜醇與姜烯酚完全分開。第七十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法

21、柱色譜減壓柱色譜 操作方式是在一裝有熔融玻璃（1020 m，D型孔徑或2號孔徑）的短住或布氏漏斗中干法加入吸附劑（1040m薄層色譜用吸附劑，如Merck硅膠60H或60G），輕輕敲擊裝置，使吸附劑在重力作用下沉降。然后通過三通活塞抽真空并用一橡皮塞壓緊吸附劑，直至吸附劑變得堅硬。放氣之后，快速向吸附劑的表面加入低極性的溶劑，并繼續(xù)抽真空。當溶劑流經(jīng)全部柱體后。將柱抽干，即可準備上樣?？蓪悠啡苡谶m當?shù)娜軇┲兄苯蛹釉谥喜?，然后減壓小心地將樣品抽入吸附劑。第七十六張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜減壓液相色譜 另外也可將樣品先吸附于硅膠、氧化鋁或硅藻土上。洗脫劑的選擇應(yīng)

22、適當先用低極性溶劑，然后再逐漸增大溶劑極性在收集每份餾分后將柱體抽干（可減少餾分之間的相互交叉）。已有多種吸附劑被嘗試用于減壓液相色譜分離，其中包括硅膠、氧化鋁、聚酰胺及健合相硅膠等。減壓液相色譜不同于快速柱色譜，因該方法在收集每份餾分后允許色譜柱流干。 減壓液相色譜因其操作簡便、分離速度快、分辨率高而在天然產(chǎn)物研究中獲得廣泛應(yīng)用。第七十七張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜干柱色譜將干的吸附劑裝入色譜柱中，待分離的樣品配成濃溶液或吸附于少量填料上，然后上樣。洗脫液依靠毛細作用流經(jīng)色譜柱，當接近色譜柱底部時，停止洗脫，將吸附劑從柱中挖出用適當?shù)娜軇⒏魃珟е械某煞窒闯龅纳?/p>

23、譜操作方法。在干柱色譜中，沒有洗脫液從色譜柱流出，色帶明顯分開，耗時短且節(jié)省溶劑?？衫镁哂邢嗤絼┑姆治鲂捅由V來推測干柱色譜分離的效果。第七十八張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜干柱色譜實際上只是制備型薄層色譜形式上的變化，具有相同的分辨能力。先利用薄層色譜選擇最佳的溶劑系統(tǒng)，然后進行干柱色譜分離。在使用混合溶劑系統(tǒng)進行干柱色譜分離時，可能達不到分析型薄層色譜所顯示的分辨力，這時可在裝柱前用10的流動相對干柱的吸附劑進行預(yù)飽和。最佳的干柱是尼龍柱。根據(jù)展開的色帶位置，可用刀將色譜柱或管切成若干段，然后把被分開的化合物用溶劑提取出來并進行過濾。尼龍柱的另一優(yōu)點是可

24、在紫外燈下觀測到無色的色帶，以此來指導(dǎo)切割。第七十九張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜干柱色譜填充劑是決定柱效的主要因素，填充劑的顆粒直徑越小直徑范圍越小，柱的效能越高；填裝均勻，分離的層帶才會整齊；若顆粒太小，流速減慢，則傳質(zhì)緩慢同時移動相線速度減慢，引起縱向擴散，影響分離度；使用過長的柱會引起移動相流速減慢及縱向擴散增加洗脫時間加長?？稍黾舆m當?shù)膲毫κ沽魉俜€(wěn)定。一般所用柱的高度不宜超過50cm直徑在13cm之間，主要決定于樣品容量及吸附劑量，通常比例在1：100以上。第八十張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法柱色譜干柱色譜劉嘉森等用國產(chǎn)硅膠（青島海洋

25、化工廠產(chǎn)品，1502目）進行干柱色譜。成功地分離了華中五味子中的五味子酯乙與酯丙。同時用酸性氧化鋁（120200目，級）干柱色譜分離出五味子酯丁。 Ai和Li將丹參根的95%乙醇提取物用幾種溶劑進行分配，對所得的一個部位（45g）用2.3kg硅膠進行干柱色譜分離（洗脫劑為氯仿一甲醇甲酸85：15：1）。把色譜柱切割成16段每段吸附劑都用熱甲醇洗脫。對第13段和第14段進一步用加Sephadex LH-20純化，得到2.06g丹參酚酸B（salvianolic acid B）。第八十一張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法薄層色譜又稱薄層層析，屬于液固吸附色譜。是一種微量、快速而簡

26、單的色譜法。兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，既適用于小量樣品（幾到幾十微克，甚至0.01g）的分離，又可用于制備（把吸附層加厚，將樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品）。 特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。 在進行化學(xué)反應(yīng)時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。第八十二張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法薄層色譜制板 選擇合適的玻璃板（小板使用顯微鏡上的載 玻片），依次用水和乙醇洗凈，晾干。取適量薄層色譜用的固定相，加適量蒸餾水調(diào)成糊。調(diào)制時慢慢攪拌，勿使產(chǎn)生氣 泡。將糊倒在玻璃板上，搖動攤平，晾干。使用前放入烘箱內(nèi)，

27、在105-115左右烘干40-50分鐘，冷卻后使用。點樣 在薄板上輕輕畫出一條平行于玻璃板底 邊的細線，將試樣用最少量展開劑溶解， 用毛細管蘸取試樣溶液，在線上點樣。 在樣點上薄層色譜板載樣量有限，勿使 點樣量過多。第八十三張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法薄層色譜展開 吹干樣點，豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿，但切勿接觸到樣點。蓋上蓋子，展開。待展開劑上行到一定高度（由試驗確定適當?shù)恼归_高度），取出薄層板，再畫出展開劑的前沿線。顯色，計算Rf值 揮發(fā)干展開劑，選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動距離，計算各組分的相對移動值。第八十四張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分離法薄層色譜第八十五張，PPT共九十一頁，創(chuàng)作于2022年6月色譜分