同濟醫(yī)院檢驗科ISO15189體系文件1.03心肌鈣蛋白I檢測操作指導書

1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科臨檢組血項操作指導書TJYYJYKLJ/XYZ103第2版標題： 心肌鈣蛋白I操作指導書第1章 第03節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的：保證心肌鈣蛋白I的測定結果準確、可靠。2. 適用范圍：血漿3. 項目名稱：心肌鈣蛋白I。4. 檢驗方法：采用雙位點酶免法檢測 (“雙抗體夾心法”)5. 檢測原理：樣品、標記了堿性磷酸酶的抗cTnI單抗（酶結合物）以及包被了抗cTnI另一位點單抗的磁性顆粒被一起加入到反應管中，樣品中的cTnI和固相在磁性顆粒表面的抗體以及游離的酶結合物在不同的抗原位點上同時發(fā)生反應。而后，孵育后的反應管被傳送到磁性分離區(qū)域

2、進行多次沖洗，去除未和固相結合的其它成分。最后在反應管中加入化學發(fā)光底物（Lumi-Phos* 530）, 已與固相結合的堿性磷酸酶會使該底物發(fā)出光子并被光電比色計所檢測。最后，對照儀器中儲存的多點定標曲線中所描述的光量子與標準品cTnI的對應關系而計算出樣品中的cTnI濃度，反應產生的光子與樣品中cTnI的含量成正比。6. 試劑：6.1 品牌：Beckman Coulter6.2 貨號：No.333406.3 包裝規(guī)格：2個包裝，50測試/包裝6.4 內含物：R1a：包被了大鼠抗心肌鈣蛋白I(cTnI)單抗的磁性顆粒懸浮于Tris鹽緩沖液中，含有離子表面活性劑，牛血清白蛋白（BSA）， 0.

3、1% 的疊氮鈉和0.1% ProClin* 300。R1b：0.1 N NaOH.。R1c：標記了牛堿性磷酸酶的大鼠抗心肌肌鈣蛋白I(cTnI)單抗作為酶結合物保存于ACES緩沖液中，還包括有離子表面活性劑，牛血清白蛋白（BSA）基質，蛋白（羊、兔、大鼠蛋白），0.1%的疊氮鈉和0.25% ProClin* 300。7. 操作步驟：具體操作步驟見庫爾特ACCESSII免疫發(fā)光儀操作指導書編號JYYJYKLJ/YQZ406。8. 線性范圍：0.01-100ng/ml9. 參考范圍：正常人：0.04ng/ml10. 臨床意義：肌鈣蛋白I是一種由肌鈣蛋白-原肌球蛋白有序構成的復合抑制蛋白，它增強鈣離子對橫紋肌動蛋白ATP酶的活性的敏感性，由此調節(jié)橫紋肌動和肌球蛋白的相互作用。它的釋放形式與CK-MB相似，但心肌鈣蛋白水平升高持續(xù)時間較長（6-10天），在不穩(wěn)定心絞痛的高危病人中具有高的診斷價值。11. 病人準備、標本要求：血漿（肝素抗凝）。無溶血、脂血。12. 注意事項：抽血后2小時內分離血漿，去除所有可能存在的纖維蛋白和細胞成分，否則會得到假陽性結果。48小時內不能完成檢測應將標本放入-20凍藏。標本只能復溶一次，檢測前將復溶標本離心處理，不要用水浴方法復溶標本。13.