量值溯源誤差和不確定度醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)PPT培訓(xùn)課件

1、量值溯源誤差和不確定度醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)第三章 方法學(xué)選擇與評價(jià)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的評價(jià)與選擇第二節(jié) 量值溯源、誤差及不確定度第三節(jié) 方法學(xué)的評價(jià)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的評價(jià)與選擇方法學(xué)評價(jià)(evaluation of methodology) 是通過實(shí)驗(yàn)途徑測定分析方法的技術(shù)性能,并評價(jià)其是否可接受，其目的在于明確該方法是否具有足夠的方法性能來說明檢測系統(tǒng)的可靠性及可以滿足臨床需求。第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的評價(jià)與選擇一、實(shí)驗(yàn)方法的分級二、參考物的分級三、方法選擇的原則四、方法選擇與評價(jià)基本步驟五、定量實(shí)驗(yàn)的方法學(xué)評價(jià)六、定性實(shí)驗(yàn)的方法學(xué)評價(jià)實(shí)驗(yàn)方法的分級1.決定性方法(definitive method) 定義：是

2、指準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細(xì)的研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法，其測定結(jié)果與真值最為接近。主要方法：重量分析法、中子活化法、同位素稀釋-質(zhì)譜分析法（ID-MS）用途：由于技術(shù)要求太高，費(fèi)用昂貴，這類方法不直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于評價(jià)參考方法和一級參考物定值。2.參考方法(reference method) 定義：是指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)被充分證實(shí)，且經(jīng)公認(rèn)的權(quán)威機(jī)構(gòu)（國家主管部門、相關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)體和國際性組織等）頒布的方法。這類方法干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異度、較寬的分析范圍并且線性良好，重復(fù)測定中的隨機(jī)誤差可以忽略不計(jì)。主要方法：原子吸

3、收分光光度法、火焰光度法、免疫化學(xué)法，離子交換層析法等用途：主要用于鑒定常規(guī)方法，評價(jià)其誤差大小、干擾因素并決定是否可以被接受；用于鑒定二級參考物和為質(zhì)控血清定值；用于商品試劑盒的質(zhì)量評價(jià)。 3.常規(guī)方法(routine method) 定義：應(yīng)具有足夠的精密度、準(zhǔn)確度和特異度，有適當(dāng)?shù)姆治龇秶?jīng)濟(jì)實(shí)用，其性能指標(biāo)符合臨床或其它目的的需要。主要方法：溴甲酚綠法、雙縮脲法、J-G法等。用途：臨床常規(guī)檢驗(yàn)使用，常規(guī)方法在作出評定以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為推薦方法（recommended method ） 。臨床生化部分項(xiàng)目的三級方法 決定性方法 參考方法 常規(guī)方法鉀 ID-MS 火焰光度

4、法 離子選擇電極鈉 中子活化法 火焰光度法 離子選擇電極總蛋白 凱氏定氮法 雙縮脲法肌酐 ID-MS 離子交換層析 苦味酸比色法葡萄糖 ID-MS 己糖激酶法 葡萄糖氧化酶法三級檢測方法關(guān)系圖常規(guī)方法參考方法決定性方法加圍增范用應(yīng)加增度確準(zhǔn)分級依據(jù)：IFCC根據(jù)分析方法的準(zhǔn)確性與精密度的不同。應(yīng)用范圍增加準(zhǔn)確度增加參考物分級 參考物也稱標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會定義：它的一種或幾種物理或化學(xué)成分已經(jīng)充分確定，可用于校準(zhǔn)儀器、評價(jià)測定方法或給其他物質(zhì)定值的物質(zhì)其定值由建立了溯源性的測量程序確定每個(gè)參考物都附有其置信水平的不確定度: 標(biāo)準(zhǔn)值總不確定度一級參考物 特點(diǎn)： 含量確定，穩(wěn)定均一，數(shù)

5、值由決定性方法或由高度準(zhǔn)確的若干方法確定用途：可用于校正決定性方法，評價(jià)及校正參考方法以及為“二級參考物”定值，一級參考物均有證書二級參考物特點(diǎn)：純?nèi)芤海ㄋ蛴袡C(jī)溶劑）或某特殊基質(zhì)的純?nèi)芤骸？捎蓪?shí)驗(yàn)室自己配制或?yàn)樯唐?，其物質(zhì)的量由參考方法定值或用一級參考物比較而確定。用途：主要用于 常規(guī)方法的標(biāo)化 為控制物定值。校準(zhǔn)物 特點(diǎn)：凍干品或溶液，可以用一級或二級參考物以參考方法定值。用途：用于對常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)?？刂莆锛促|(zhì)控品特點(diǎn)：與檢測過程相適應(yīng)，成分及基質(zhì)與檢測的樣本相同或相似，且均勻、穩(wěn)定。用途：控制物用于常規(guī)質(zhì)量控制，采用控制物和樣品同步進(jìn)行測量，將測試結(jié)果與控制物保證值相比較，以評價(jià)其

6、準(zhǔn)確度和檢查實(shí)驗(yàn)室內(nèi)是否存在系統(tǒng)誤差。 決定性方法評價(jià)參考方法；為一級參考物定值一級參考物發(fā)展及評價(jià)參考方法；校正決定性方法；為二級參考物定值參考方法評價(jià)常規(guī)方法；為二級參考物及質(zhì)控物定值；評價(jià)商品試劑盒質(zhì)量二級參考物常規(guī)方法標(biāo)化；校準(zhǔn)物校準(zhǔn)及控制物定值校準(zhǔn)物對常規(guī)方法和儀器校準(zhǔn)常規(guī)方法分析臨床標(biāo)本，報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果控制物控制臨床標(biāo)本的測定誤差各級實(shí)驗(yàn)方法和參考物的相互關(guān)系 參考物 參考物也稱標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會定義：它的一種或幾種物理或化學(xué)成分已經(jīng)充分確定，可用于校準(zhǔn)儀器、評價(jià)測定方法或給其他物質(zhì)定值的物質(zhì)“參考物證書”的參考物稱為有證參考物（certified reference

7、material, CRM）其定值由建立了溯源性的測量程序確定每個(gè)參考物都附有其置信水平的不確定度: 標(biāo)準(zhǔn)值總不確定度第二節(jié) 量值溯源、誤差及不確定度一、量值溯源的概念和意義 二、參考物的量值溯源 三、誤差的分類和表示 四、測量不確定度 第二節(jié) 量值溯源、誤差及不確定度一、量值溯源的概念和意義 二、參考物的量值溯源 三、誤差的分類和表示 四、測量不確定度 一、量值溯源的概念和意義溯源性：通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的傳遞鏈，使測定結(jié)果或標(biāo)準(zhǔn)值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來，使測定結(jié)果的準(zhǔn)確性得到技術(shù)保證和驗(yàn)證。 溯源認(rèn)識為什么要量值溯源The Dilemma:Reporting of the

8、 values: The same name for the analytee.g. “Serum-aspartate-aminotransferase (AST)”AST (Company A) AST (Company B) AST (Company C)The same reference intervals were used -Gerhard Schumann 2009.8.24 北京對于臨床實(shí)驗(yàn)室定量檢測來說，最基本的要求是要保證試驗(yàn)結(jié)果足夠準(zhǔn)確（正確度和精密度），以保證臨床的正確診斷并且具有時(shí)間和空間的可比性。為什么要量值溯源溯源認(rèn)識量值溯源解決的問題抗干擾性線性準(zhǔn)確度精密度靈敏

9、度溯源認(rèn)識ISO15189對溯源的要求5.6.3 應(yīng)設(shè)計(jì)并實(shí)施測量系統(tǒng)校準(zhǔn)和真實(shí)度驗(yàn)證計(jì)劃，以確保結(jié)果可溯源至SI單位，或可參比至自然常數(shù)或其他規(guī)定的參考值。如果上述無法實(shí)現(xiàn)或不適用，應(yīng)其他方式提供對結(jié)果的可信度，包括但不限于以下方法： a)參加適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室間比對計(jì)劃；b)有證參考物質(zhì)；c)用其他程序進(jìn)行驗(yàn)證或校準(zhǔn)；d)比率或倒易型測量；e)使用各方承認(rèn)的協(xié)議標(biāo)準(zhǔn)或方法；f)若由供應(yīng)商或制造商提供溯源性，應(yīng)有關(guān)于試劑、程序或檢驗(yàn)系統(tǒng)溯源性的聲明文件。溯源認(rèn)識量值溯源的重要性量值溯源的一致性是國際間相互承認(rèn)結(jié)果的前提條件，中國合格評定國家認(rèn)可委員會（簡稱CNAS）將量值溯源視為測定結(jié)果可信性的基

10、礎(chǔ)，CNAS對量值溯源的要求與國際規(guī)范的相關(guān)要求一致。 CNAS-CL06量值溯源要求Traceability as a unique tool to improve standardization in laboratory medicine IFCC Scientific Division Chiar Mauro Panteghini量值溯源的可追溯性是提高醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化的重要手段。量值溯源溯源定義（國際計(jì)量學(xué)詞匯，VIM）溯源性（traceability）:通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈，使測量結(jié)果或測量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn)，通常是與國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的特性。

11、 以上定義引自VIM:1993,定義6.10溯源性應(yīng)用原理利用參考系統(tǒng)（尤其是參考方法和參考物質(zhì)）提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性參考系統(tǒng)是溯源的基礎(chǔ)，包括三個(gè)方面：參考方法參考物質(zhì)參考實(shí)驗(yàn)室參考方法參考方法分為一級參考方法/決定性方法二級參考方法/參考方法在臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域所指的參考方法一般為二級參考方法。參考物質(zhì)一級參考物質(zhì)：穩(wěn)定、均一，采用高度準(zhǔn)確可靠的若干方法定值二級參考物質(zhì)：用一級參考物質(zhì)校準(zhǔn)，由二級參考方法定值校準(zhǔn)物：用二級參考物質(zhì)校準(zhǔn)，由常規(guī)方法定值決定性方法評價(jià)參考方法；為一級參考物定值一級參考物校正決定性方法；為二級參考物定值；發(fā)展及評價(jià)參考方法；參考方法評價(jià)常規(guī)方法；為二級參考物及

12、質(zhì)控物定值；評價(jià)商品試劑盒質(zhì)量二級參考物常規(guī)方法標(biāo)化；校準(zhǔn)物校準(zhǔn)及控制物定值校準(zhǔn)物對常規(guī)方法和儀器校準(zhǔn)常規(guī)方法分析臨床標(biāo)本，報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果控制物控制臨床標(biāo)本的測定誤差各級實(shí)驗(yàn)方法和參考物的相互關(guān)系 溯源性有關(guān)文件ISO17511（2003），體外診斷醫(yī)學(xué)器具生物樣本中量的測量校準(zhǔn)物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)定值的計(jì)量學(xué)溯源ISO18153（2003），體外診斷醫(yī)學(xué)器具生物樣本中量的測量 酶催化濃度校準(zhǔn)物質(zhì)和質(zhì)控物質(zhì)定值的計(jì)量學(xué)溯源ISO15193 （2002），體外診斷醫(yī)學(xué)器具生物樣本中量的測量參考測量程序的表述ISO15194(2002),體外診斷醫(yī)學(xué)器具生物樣本中量的測量參考物質(zhì)的描述ISO15195(2

13、002),體外診斷醫(yī)學(xué)器具生物樣本中量的測量參考測量實(shí)驗(yàn)室的要求怎樣溯源國際溯源組織檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源聯(lián)合委員會(Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine，JCTLM）2002年由國際計(jì)量局（BIPM），國際臨床化學(xué)聯(lián)合會（IFCC），國際實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可合作組織（ILAC）聯(lián)合成立。WG 1：參考物質(zhì)和參考方法的篩選和確定； WG 2：組織參考實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證；參考實(shí)驗(yàn)室 認(rèn)可；推薦參考測量服務(wù)。怎樣溯源全國醫(yī)學(xué)計(jì)量技術(shù)委員會、衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心國內(nèi)溯源組織2010年，國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局批準(zhǔn)中國計(jì)量科學(xué)研究院（National I

14、nstitute of Metrology）成立“全國醫(yī)學(xué)計(jì)量技術(shù)委員會”2005年起，衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心每年舉行酶學(xué)參考實(shí)驗(yàn)室會議組織參考實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)能力測試；組織參考實(shí)驗(yàn)室能力測試；二、參考物的量值溯源溯源鏈：在臨床實(shí)驗(yàn)室的定量分析中，通過不同級別的測量程序、參考物和校準(zhǔn)物，實(shí)現(xiàn)連續(xù)測量。用一個(gè)測量程序?yàn)槟撤N物質(zhì)定值，該物質(zhì)用做下一級測量程序的校準(zhǔn)物依此類推，形成一條不間斷的比較鏈材料 校準(zhǔn)方法 定值SI-單位一級參考測定方法二級參考測定方法廠家選擇的測定方法廠家的工作測定方法臨床用戶的常規(guī)測定方法 一級參考物二級參考物廠家工作校準(zhǔn)品廠家生產(chǎn)的校準(zhǔn)品常規(guī)樣本測定結(jié)果溯源不確定度1.溯源鏈和校

15、準(zhǔn)層次 參考物的量值溯源等級圖量值溯源的理想情況是可溯源至國際單位制SI，要溯源至國際單位，必須有一級參考測量程序目前滿足上述條件的檢驗(yàn)指標(biāo)有25-30種定義明確的小分子化合物（如某些電解質(zhì)，代謝產(chǎn)物和底物類、甾體激素、甲狀腺激素）2.參考物量值的傳遞方案 檢測不能溯源到SI的情況有國際約定參考測量程序（非一級參考測量程序）和一種或多種用此參考測量程序定值的國際約定校準(zhǔn)物質(zhì)，如GHb有一種國際約定參考測量程序,無國際約定校準(zhǔn)物質(zhì)，如HDL-C一種或多種國際約定校準(zhǔn)物質(zhì)及定值方案，無國際約定參考測量程序，如抗體和腫瘤標(biāo)記物等300多種指標(biāo)既無參考測量程序也無校準(zhǔn)的參考物質(zhì)2.參考物量值的傳遞方案

16、 量值溯源檢驗(yàn)試劑的溯源鏈(JCTLM)不確定度二級參考物質(zhì)一級參考物質(zhì)工廠主校準(zhǔn)品試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品 一級參考方法二級參考方法 工廠選定的檢測方法 工廠標(biāo)準(zhǔn)檢測法 醫(yī)院常規(guī)檢測法 常規(guī)樣本結(jié)果研究機(jī)構(gòu)參考實(shí)驗(yàn)室醫(yī)院檢驗(yàn)國際單位溯源認(rèn)識量值溯源是系統(tǒng)溯源S O P檢測系統(tǒng)溯源體系建立1.選用JCTLM網(wǎng)站的參考方法和參考物質(zhì)；2.找回參考方法原文,購回參考物質(zhì)；3.根據(jù)參考方法原文寫出中文SOP文件；4.根據(jù)ISO17511(GB/T21415)規(guī)定，作出溯源圖；5.根據(jù)ISO17511(GB/T21415),制定出溯源賦值方案文件；6.按照QUAM和CNAS-GL05要求,評定不確定度。怎樣溯源

17、溯源步驟1：確定參考方法怎樣溯源溯源步驟2：找回參考方法原文檢測系統(tǒng)溯源體系建立1.選用JCTLM網(wǎng)站的參考方法和參考物質(zhì)；2.找回參考方法原文,購回參考物質(zhì)；3.根據(jù)參考方法原文寫出中文SOP文件；4.根據(jù)ISO17511(GB/T21415)規(guī)定，作出溯源圖；5.根據(jù)ISO17511(GB/T21415),制定出溯源賦值方案文件；6.按照QUAM和CNAS-GL05要求,評定不確定度。怎樣溯源酶學(xué)類溯源-參考方法 根據(jù)ISO18153文件4.0，IFCC推薦的一級參考方法能溯源到SI單位，在參考實(shí)驗(yàn)室用理論K值計(jì)算結(jié)果，要求：1. 方法完全是IFCC等推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法；2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)備必須精確

18、（溯源）；3. 實(shí)驗(yàn)室條件必須嚴(yán)格控制；4. 操作者的技能必須嫻熟；5. 試劑原料必須符合方法要求。怎樣溯源酶學(xué)類溯源-參考物質(zhì)參考物質(zhì)（ERM）用作參考方法驗(yàn)證。 判斷：測定值在靶值不確定度范圍內(nèi)，該方法成立；否則試劑重新配制。 怎樣溯源賦值第一步：參考方法驗(yàn)證 參考物質(zhì)項(xiàng)目實(shí)測值 (U/L)均值(U/L)靶值不確定度/參考值(U/L)CV(%)偏倚(%)123ERM-AD454ALT188.42188.50187.57188.1618640.221.16JC-ERM（N）AST49.4849.5849.6549.57500.14-0.86JC-ERM（A）131.31131.25131.2

19、2131.261310.030.20ERM-AD452GGT114.26114.53114.34114.38114.12.40.100.24ERM-AD453LDH502.61502.58502.66502.6250270.070.12ERM-AD455CK101.50101.56102.46101.8410140.430.83ERM-AD456AMY551.44550.83550.67550.98546180.060.91怎樣溯源賦值第二步：公司主校準(zhǔn)品賦值主校準(zhǔn)品初步賦值：用參考方法對公司主校準(zhǔn)品重復(fù)測定5次；血清參考定值：用參考方法對5例臨床標(biāo)本測定（含高、中、低值）；怎樣溯源賦值第三步

20、：參考方法到主校準(zhǔn)品血清主校準(zhǔn)品定值：在3個(gè)實(shí)驗(yàn)室多臺生化分析儀用初步賦值的主校準(zhǔn)品校準(zhǔn)生化儀，測定上述5例臨床標(biāo)本。臨床標(biāo)本參考值為橫坐標(biāo)（x），主校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的常規(guī)方法值為縱坐標(biāo)（y）做線性回歸，此時(shí)的斜率反映兩種方法系統(tǒng)比率；用此斜率調(diào)節(jié)主校正品值后再校準(zhǔn)儀器重新測定臨床血清，以參考值為X，主校準(zhǔn)品值為Y,滿足斜率近于1.00，截距近于0最好。主校準(zhǔn)品定值：每個(gè)實(shí) 驗(yàn)室重復(fù)上述過程3次， 計(jì)算主校準(zhǔn)品值。怎樣溯源賦值第四步：校準(zhǔn)品賦值在3個(gè)實(shí)驗(yàn)室用主校準(zhǔn)品校準(zhǔn)生化分析儀，測定公司校準(zhǔn)品5次，得到初步賦值；在兩個(gè)通道上分別用主校準(zhǔn)品和用初步賦值的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)生化儀，測定上述5例臨床標(biāo)本。怎樣溯

21、源賦值第五步：主校準(zhǔn)品到校準(zhǔn)品臨床標(biāo)本主校準(zhǔn)品校準(zhǔn)值為橫坐標(biāo)（x），校準(zhǔn)品校準(zhǔn)值為縱坐標(biāo)（y）作回歸分析；用斜率調(diào)節(jié)校準(zhǔn)品值后重新校準(zhǔn)儀器測定臨床血清，作回歸分析，滿足斜率1.000.02，截距近于0最好。校準(zhǔn)品定值：每個(gè)實(shí)驗(yàn)室重復(fù)上述過程三次，計(jì)算校準(zhǔn)品值。怎樣溯源賦值第六步：校準(zhǔn)品驗(yàn)證用定值后的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)生化分析儀，測定20例臨床血清（包含高、中、低值）；以參考方法測定上述20例臨床標(biāo)本；以血清參考值為橫坐標(biāo)（X），常規(guī)值為縱坐標(biāo)(Y)作回歸分析；兩方法的值作配對T檢驗(yàn)。兩方法的相關(guān)性R大于0.99；配對T檢 驗(yàn)證明兩方法沒有顯著差異，則賦值 有效。否則從賦值第一步做起。怎樣溯源賦值第七步

22、：不確定度計(jì)算主校準(zhǔn)品的不確定度計(jì)算； 不確定度A類評定； 不確定度B類評定； 合成不確定度； 擴(kuò)展不確定度。校準(zhǔn)品的不確定度計(jì)算。 不確定度A類評定； 不確定度B類評定； 合成不確定度； 擴(kuò)展不確定度。臨床實(shí)驗(yàn)室的量值溯源欲使醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的測量結(jié)果具有溯源性，最直接、簡便的途徑是進(jìn)入“不間斷的溯源鏈”54量值溯源是系統(tǒng)溯源56量值溯源檢驗(yàn)試劑的溯源鏈(JCTLM)不確定度二級參考物質(zhì)一級參考物質(zhì)工廠主校準(zhǔn)品試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品 一級參考方法二級參考方法 工廠選定的檢測方法 工廠標(biāo)準(zhǔn)檢測法 醫(yī)院常規(guī)檢測法 常規(guī)樣本結(jié)果研究機(jī)構(gòu)參考實(shí)驗(yàn)室醫(yī)院檢驗(yàn)國際單位怎樣溯源3.校準(zhǔn)溯源的驗(yàn)證三要素 由體外診斷試劑生

23、產(chǎn)廠家測定的值應(yīng)與用參考方法測定的數(shù)值相同。由體外診斷試劑生產(chǎn)廠家用參考方法測定結(jié)果在數(shù)學(xué)上相等的評估，即線性回歸方程斜率為1、截距為0。要求廠家參考物測定結(jié)果有互通性。 校準(zhǔn)品在溯源中的作用校準(zhǔn)品是實(shí)現(xiàn)溯源的“橋梁”是最可取而可靠的辦法歐盟指令要求：“校準(zhǔn)物和（或）質(zhì)控物的定值，必須通過現(xiàn)有較高級別的參考測量程序和（或）參考物質(zhì)保證其溯源性”4.校準(zhǔn)品在溯源中的作用5.實(shí)現(xiàn)溯源性的目和評估 實(shí)現(xiàn)溯源性的目的：結(jié)果的可靠體外診斷試劑廠家按照ISO 17511的要求，對校準(zhǔn)品的定值實(shí)現(xiàn)計(jì)量溯源，為用戶提供常規(guī)測定方法的溯源文件 實(shí)現(xiàn)溯源性的評估 室間質(zhì)量評價(jià)是最易實(shí)現(xiàn)量值溯源長期評估方法 （二）

24、參考物量值溯源的意義臨床實(shí)驗(yàn)室通過溯源的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)常規(guī)檢測系統(tǒng)，測定患者樣本結(jié)果的準(zhǔn)確性可溯源到參考方法。參考物是處理過的樣本與新鮮患者樣本的基質(zhì)有差異，參考方法的準(zhǔn)確度不能完全通過參考物傳遞給患者樣本，對參考物的量值有一定的調(diào)整。量值溯源檢驗(yàn)試劑的溯源鏈(JCTLM)不確定度二級參考物質(zhì)一級參考物質(zhì)工廠主校準(zhǔn)品試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)品 一級參考方法二級參考方法 工廠選定的檢測方法 工廠標(biāo)準(zhǔn)檢測法 醫(yī)院常規(guī)檢測法 常規(guī)樣本結(jié)果研究機(jī)構(gòu)參考實(shí)驗(yàn)室醫(yī)院檢驗(yàn)國際單位第二節(jié) 量值溯源、誤差及不確定度一、量值溯源的概念和意義 二、參考物的量值溯源 三、誤差的分類和表示 四、測量不確定度 誤差誤差是指測量結(jié)果與被測

25、量的真值之差從誤差的性質(zhì)上，可以將誤差分為隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差性能評價(jià)實(shí)驗(yàn)也相應(yīng)設(shè)計(jì)，了解不同性質(zhì)的誤差最后，還需綜合起來反映總誤差水平。（一）隨機(jī)誤差（random error，RE）1.定義 隨機(jī)誤差是指在對同一被測量的多次測試中，它受偶然因素影響而以不可預(yù)知的方式變化。測量結(jié)果與在重復(fù)性條件下。對同一被測量進(jìn)行無限多次測量所得結(jié)果平均值之差，稱之為隨機(jī)誤差。隨機(jī)誤差影響不定，無大小和方向，呈正態(tài)分布。2.來源 隨機(jī)誤差反映分析方法的不精密度不可避免難以預(yù)測的測定儀器、試劑、環(huán)境、人嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化的操作規(guī)程可減少隨機(jī)誤差。 檢驗(yàn)的特點(diǎn)是每個(gè)標(biāo)本之作一次就發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告，因此，檢驗(yàn)結(jié)果Xi是對標(biāo)

26、本多次檢測的一個(gè)抽樣。所有重復(fù)檢驗(yàn)的Xi值以均值為中心，他們和均值的差異有大有小，方向各異；這就是隨機(jī)誤差的表現(xiàn)。臨床希望同一標(biāo)本各次檢測值重復(fù)性好，這是人們對精密度的要求。檢驗(yàn)結(jié)果具有隨機(jī)誤差，常以95%可能性出現(xiàn)的最大隨機(jī)誤差量表示。即1.96S。以此表示標(biāo)本只做一次檢驗(yàn)發(fā)出報(bào)告中具有的隨機(jī)誤差估計(jì)量。（二）系統(tǒng)誤差（systematic error，SE）1.定義 是指在對同一被測量的多次測試中，它保持不變或按某種規(guī)律而變化。又稱方法誤差、固定誤差。由恒定因素引起，多次重復(fù)出現(xiàn)，可被認(rèn)識并校正。重復(fù)性條件下，對同一被測量進(jìn)行無限多次測量所得結(jié)果的平均值與被測量的真值之差，稱之為系統(tǒng)誤差2

27、.來源以檢測均值和真值的一致性表示，稱為偏倚。方法誤差：由檢測方法固有的缺陷所致儀器誤差：未經(jīng)校準(zhǔn)的儀器所產(chǎn)生的誤差，儀器波長漂移、量器不準(zhǔn)、溫度或pH不準(zhǔn)等引起試劑誤差：試劑質(zhì)量差、實(shí)驗(yàn)水不合格、參考物不純操作誤差：操作不規(guī)范，保溫時(shí)間不足、加樣不準(zhǔn)（三）誤差的表示方法 絕對誤差：指檢測值與真值或約定真值之間的差值。其單位與檢測值相同，可用于評價(jià)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確程度。相對誤差：指檢測值絕對誤差與真值或約定真值之比，通常以百分?jǐn)?shù)表示，它能客觀的表示出檢測結(jié)果的準(zhǔn)確程度。（三）誤差的表示方法 總誤差： 常規(guī)樣本測定結(jié)果與真值的差異是隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差的總和。標(biāo)本一次檢驗(yàn)結(jié)果，結(jié)果中誤差有95%可能

28、性“最壞”表現(xiàn)即為誤差的加成。TE=1.96SD+|bias|74（三）誤差的表示方法 從質(zhì)量管理角度，可將誤差分為：固有誤差穩(wěn)定狀態(tài)誤差外加誤差不穩(wěn)定狀態(tài)誤差分析性能是對檢測系統(tǒng)穩(wěn)定狀態(tài)（固有）誤差的估計(jì)。第二節(jié) 量值溯源、誤差及不確定度一、量值溯源的概念和意義 二、參考物的量值溯源 三、誤差的分類和表示 四、測量不確定度 不確定度定義不確定度表明準(zhǔn)確度可靠性的高低(程度) 。 有個(gè)形象的比喻：一升刻度的容器，盛滿水，嚴(yán)格來說，我們不能確定它是否是準(zhǔn)確的一升水，但我們可以判斷它大約在995至1005毫升之間，就是1000士5毫升，但是具體和真實(shí)測量值差多少，我們不知道，但肯定在5毫升以內(nèi)，這

29、個(gè)5毫升就是測量不確定度。 再比如我們?nèi)粘Ｉ钪谐３Ｓ龅降南蠊嘌b啤酒凈含量為355ml、袋裝的牛奶凈重230g看到這樣的標(biāo)識,我們對其可信度就不會那么認(rèn)同，如果是355ml5ml、230g5g那那么我們對他的可信度就會大大提升了。這是對不確定度的粗淺的理解。不確定度定義 不確定度的定義：表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。 不確定度的含義：測量誤差懷疑及可信賴程度與測量結(jié)果關(guān)系：不確定度愈小，結(jié)果與被測量的真值愈接近，質(zhì)量越高，水平越高，其使用價(jià)值越高；不確定度越大，測量結(jié)果的質(zhì)量越低，水平越低，其使用價(jià)值也越低。作用：給出相應(yīng)的不確定度，一方面便于使用它的人評定其可靠性

30、，另一方面也增強(qiáng)了測量結(jié)果之間的可比性。79不確定度分類 測量不確定度不確定度相對不確定度標(biāo)準(zhǔn)不確定度擴(kuò)展不確定度A類標(biāo)準(zhǔn)不確定度B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度（=2）（=3）9599相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度相對擴(kuò)展不確定度A類相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度B類相對標(biāo)準(zhǔn)不確定合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定rel（=2）rel（=3）rel95rel99不確定度分類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：是指以標(biāo)準(zhǔn)差表示的測量不確定度。相對不確定度：是指標(biāo)準(zhǔn)不確定度除以被測量之值。A類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：是指用統(tǒng)計(jì)分析的方法來評定出的不確定度，其評定方法為A類評定B類標(biāo)準(zhǔn)不確定度：是指用非統(tǒng)計(jì)分析的方法來評定出的不確定度，其評定方法為B類評定合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度

31、：是指當(dāng)測量結(jié)果是由若干個(gè)其他的值求得時(shí)，按其他各量的方差和協(xié)方差算得的標(biāo)準(zhǔn)不確定度。不確定度分類擴(kuò)展不確定度：是指確定測量結(jié)果區(qū)間的量，合理賦予被測量之值分布在指定概率內(nèi)含于此區(qū)間。具有一定可信度的測量值都處于此區(qū)間內(nèi)。包含因子:為獲得擴(kuò)展不確定度，而對合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度所乘 的數(shù)字，包含因子一般以k 表示。擴(kuò)展不確定度和包含因子測量結(jié)果的取值區(qū)間，在被測量值概率分布中所包含的百分?jǐn)?shù)，被稱為該區(qū)間的置信概率、置信水準(zhǔn)或置信水平，用P表示。包含因子的取值決定了擴(kuò)展不確定度的置信水平。當(dāng)k =2時(shí)，P=95%；當(dāng)k =3時(shí)，P=99%。大多數(shù)情況下，推薦k 為2 。根據(jù)“GUM”（“測量不確定度表

32、述指南”）、“GUAM”（化學(xué)測量中不確定度的評定）等，不確定度的評定有兩個(gè)基本模式：由下而上（Bottom-Up）由上而下（Top-Down）。測量不確定度的評估過程Bottom-up？對測量過程的仔細(xì)、全面分析，識別出每一個(gè)可能的不確定度來源。對一系列測量值，用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法A類評定或可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或其它信息假設(shè)的概率分布B類評定來評定每一來源對不確定度貢獻(xiàn)的大小。通討不確定度方差傳播律得到合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度。此類辦法常稱為GUM的“modelling approach” 。顯然醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室很難使用此類辦法。,Top-down？在不需要了解每個(gè)來源情況下，得到一個(gè)可靠的評定不確定度。它建立在由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

33、部或組織間實(shí)驗(yàn)得到的總的復(fù)現(xiàn)性（數(shù)據(jù)）。雖然我們沒有分別分析人員、儀器、方法等具體因素，但這些因素已包含在室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評結(jié)果。主要從本實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)評定測量過程的測量不確定度。即依據(jù)下面2個(gè)主要不確定度來源：- 正確度/偏移trueness/bias；-精密度人們相應(yīng)將其與系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差相聯(lián)系。不確定度計(jì)算 “室內(nèi)質(zhì)控”所要達(dá)到的目的恰恰是要使整個(gè)臨床標(biāo)本的測量工作處于統(tǒng)計(jì)控制的狀態(tài)下。因而室內(nèi)質(zhì)控所得出的分散性就可以代表臨床標(biāo)本在統(tǒng)計(jì)控制狀態(tài)下的分散性。因而從獲得的大量測量數(shù)據(jù)計(jì)算出的標(biāo)準(zhǔn)差(S)和變異系數(shù)(CV)可以真實(shí)、可靠地反映測量數(shù)據(jù)的分散性，完全可以用于該項(xiàng)目的測量不確定度的評

34、估。不確定度計(jì)算 標(biāo)準(zhǔn)不確定度即為室內(nèi)質(zhì)控品測量所得出的標(biāo)準(zhǔn)差(S) .相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度即為室內(nèi)質(zhì)控品測量所得出的變異系數(shù)(CV)擴(kuò)展不確定度，當(dāng)包含因子k 取2 時(shí)，為：U = 2 S相對擴(kuò)展不確定度，當(dāng)包含因子k 取2 時(shí)，為：Ured =2 CV%87在檢驗(yàn)科的不確定度分量校準(zhǔn)物質(zhì)不確定度（廠家提供）患者樣本測量值的不確定度不確定度的大小室內(nèi)質(zhì)控管理數(shù)據(jù)8590951000204060測量天數(shù)（天）測量結(jié)果（單位）由檢驗(yàn)科的測量操作80溯源現(xiàn)狀不確定度計(jì)算 準(zhǔn)確計(jì)算不確定度非常困難，一般僅能近似估算不確定度實(shí)驗(yàn)室的不確定度為合成不確定度，表示為：89測量不確定度在醫(yī)學(xué)上的用處 測量不確定

35、度是實(shí)驗(yàn)室定量測量結(jié)果質(zhì)量(可信度)的量化指標(biāo)測量不確定度有助解釋測量結(jié)果評定測量不確定度有助改進(jìn)質(zhì)量測量不確定度是實(shí)驗(yàn)室定量測量結(jié)果質(zhì)量(可信度)的量化指標(biāo)澳大利亞的NAPPC在2009年的測量不確定度標(biāo)準(zhǔn)文件中明確說：“測量不確定度提供了定量評定實(shí)驗(yàn)室測試結(jié)果分析準(zhǔn)確性可信度的水平，所以說是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系中重要組分?！彼?，- 測量不確定度是質(zhì)量極其重要指標(biāo)。- 通過認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)通過不斷改進(jìn)工作CQI追求測量不確定度進(jìn)一步縮小。測量不確定度有助解釋測量結(jié)果測量不確定度有助解釋測量結(jié)果評定測量不確定度有助改進(jìn)質(zhì)量在驗(yàn)證verification試驗(yàn)中所得到的測量不確定度數(shù)據(jù)與目標(biāo)測量不確定度比較，以決定驗(yàn)證是否達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。如果超出目標(biāo)測量不確定度。應(yīng)該研究不確定度的預(yù)估，能否減小主要不確定度組分，而改進(jìn)測量”。此時(shí)按GUM原則，改用bottom-up方法評定測量不確定度，找出所有主要不確定度來源并加以改進(jìn)，達(dá)到目標(biāo)不確定度。在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域中該如何理解“測量不確定度”一般認(rèn)為簡單意義的“測量不確定度”只包括分析中，即樣本通過設(shè)備檢測得出結(jié)果，然后僅對此過程進(jìn)行評定。分析中，例如生化常規(guī)檢測項(xiàng)目，校準(zhǔn)（溯源）與方法特異性可能是主要因素，苦味酸法（化學(xué)法）檢測肌酐是特異性問題的典型例子，方法學(xué)的非特異性產(chǎn)生不確定度的比重較大，尤其是水平較低的標(biāo)本。對于臨床檢