(完整word版)ThermoULtimate3000高效液相色譜確認(rèn)方案

1、PAGE 淮北智信堂生物科技股份有限公司UL timate3000高效液相色譜儀確認(rèn)方案編號：VP-AI-2017001頁碼： 26/26 *生物科技股份有限公司UL timate3000高效液相色譜儀確認(rèn)方案編號：VP-AI-2017001頁碼： 1/25 UL timate3000高效液相色譜儀確認(rèn)方案編號：VP-AI-2017001 *生物科技股份有限公司確認(rèn)方案審批表驗證項目名稱：UL timate3000液相色譜儀確認(rèn)方案編 號：VP-AI-2017001 起 草 人： 日 期： 年 月 日審 核審核部門/職務(wù)審核人日 期備 注QC/主管QA/主管批 準(zhǔn) 人： 日 期： 年 月 日執(zhí)

2、行日期： 年 月 日確認(rèn)小組人員名單：小組職務(wù)姓 名所在部門職 務(wù)組 長質(zhì)管部經(jīng)理組 員化驗室 主管組 員QA 主管組 員化驗室QC目 錄 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc469399978 1.概述 PAGEREF _Toc469399978 h 4 HYPERLINK l _Toc469399979 2.確認(rèn)目的 PAGEREF _Toc469399979 h 4 HYPERLINK l _Toc469399980 3.確認(rèn)范圍 PAGEREF _Toc469399980 h 4 HYPERLINK l _Toc469399981 4.確認(rèn)小組人員及職責(zé) P

3、AGEREF _Toc469399981 h 4 HYPERLINK l _Toc469399982 5.驗證相關(guān)文件依據(jù) PAGEREF _Toc469399982 h 5 HYPERLINK l _Toc469399983 6.驗證項目和時間安排 PAGEREF _Toc469399983 h 5 HYPERLINK l _Toc469399984 7. 安裝確認(rèn) PAGEREF _Toc469399984 h 5 HYPERLINK l _Toc469399985 8 運(yùn)行確認(rèn) PAGEREF _Toc469399985 h 7 HYPERLINK l _Toc469399986 9.性

4、能確認(rèn) PAGEREF _Toc469399986 h 13 HYPERLINK l _Toc469399987 10. 確認(rèn)過程中的偏差及處理措施 PAGEREF _Toc469399987 h 14 HYPERLINK l _Toc469399988 11再確認(rèn)周期 PAGEREF _Toc469399988 h 14 HYPERLINK l _Toc469399989 12.確認(rèn)結(jié)果評定與結(jié)論 PAGEREF _Toc469399989 h 14 HYPERLINK l _Toc469399990 13.附件 PAGEREF _Toc469399990 h 141.概述高效液相色譜法（H

5、igh Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一種現(xiàn)代液相色譜法，其基本方法是用高壓輸液泵將流動相泵入到裝有填充劑的色譜柱，注入的供試品被流動相帶入柱內(nèi)進(jìn)行分離后，各成分先后進(jìn)入檢測器，用記錄儀或數(shù)據(jù)處理裝置記錄色譜圖并進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，得到測定結(jié)果。由于應(yīng)用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點(diǎn)。2.確認(rèn)目的：按照GMP的要求，對該儀器進(jìn)行安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)，以確定儀器是否有具有良好的檢測性能，能否滿足日常分析測試工作的需要。3.確認(rèn)范圍：本確認(rèn)方案適用于本公司的UL timate3000高效液相色譜儀的確

6、認(rèn)。4.確認(rèn)小組人員及職責(zé)4.1 確認(rèn)小組驗證分工所在部門職 務(wù)組長質(zhì)量部經(jīng)理組員質(zhì)量部QC主管組員質(zhì)量部 QC組員質(zhì)量部QA主管4.2 驗證小組職責(zé)組長：負(fù)責(zé)驗證管理的日常工作和驗證的協(xié)調(diào)，驗證方案和報告的批準(zhǔn)。組員：QC，化驗室。起草驗證方案和驗證報告，并參與實施驗證。組員：QC主管，化驗室。審核驗證方案和報告，協(xié)調(diào)與本次驗證相關(guān)的化驗室工作。組員：QA主管，質(zhì)量保證部。負(fù)責(zé)審核驗證方案和驗證報告，如果驗證中出現(xiàn)偏差，應(yīng)對偏差進(jìn)行調(diào)查。5.驗證相關(guān)文件依據(jù)參考文獻(xiàn)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年版）藥品生產(chǎn)驗證指南（2003年版）藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范實施指南液相色譜儀國標(biāo)GBT26792-

7、2011液相色譜儀JJG 705-2002 6.驗證項目和時間安排計劃于 年 月 日 - 月 日對UL timate3000高效液相色譜儀進(jìn)行確認(rèn)，內(nèi)容嚴(yán)格按照本確認(rèn)方案，檢查UL timate3000高效液相色譜儀其安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)、性能確認(rèn)達(dá)到規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求。確認(rèn)開始前所有參與人員應(yīng)經(jīng)過本方案的培訓(xùn)，培訓(xùn)記錄見附件1。7.安裝確認(rèn)7.1.概述UL timate3000液相色譜儀由賽默飛公司提供，安裝于質(zhì)量控制室的儀器室，用于成品，原料，中間樣品的含量和有關(guān)物質(zhì)檢測。安裝確認(rèn)目的：證實所供應(yīng)的設(shè)備規(guī)格符合要求,設(shè)備所應(yīng)備有的技術(shù)資料齊全。開箱驗收應(yīng)合格，并確認(rèn)安裝條件（或場所）及整個安裝過

8、程符合設(shè)計要求。7.2.安裝確認(rèn)內(nèi)容7.2.1.基本資料檢查：檢查是否有各種必需的書面資料，如表1。表1 資料檢查確認(rèn)項目有無備注采購定單使用說明書設(shè)備的合格證書裝箱單保修卡7.2.2.設(shè)備所需外部環(huán)境確認(rèn)目的：確認(rèn)設(shè)備的安裝是否符合原設(shè)計的條件，如表2。表2 外部環(huán)境確認(rèn)確認(rèn)項目合格要求是否符合要求備注溫度5-40是 否相對濕度85%是 否地面平滑、不易起塵是 否環(huán)境無腐蝕性氣體是 否7.2.3.設(shè)備型號確認(rèn)目的：確認(rèn)設(shè)備各部件的型號，保證其與訂單和裝箱單所描述的一致，如表3。表3 設(shè)備型號確認(rèn)部件設(shè)備型號序列號是否一致輸液泵是 否自動進(jìn)樣器是 否柱溫箱是 否紫外檢測器是 否7.2.4.設(shè)備

9、外觀確認(rèn)目的：確認(rèn)設(shè)備外觀符合標(biāo)準(zhǔn)要求，如表4。表4 設(shè)備外觀確認(rèn)確認(rèn)項目合格要求是否符合要求設(shè)備外表面儀器外表應(yīng)光潔平整、字跡清晰，表面涂覆色澤均勻，不應(yīng)有明顯劃傷、露底、裂紋、氣泡等現(xiàn)象是 否各按鍵、旋鈕、開關(guān)各調(diào)節(jié)旋鈕、按鍵、開關(guān)等工作正常，無松動；指示、顯示清晰完整是 否7.2.5.公用設(shè)施確認(rèn)目的：確認(rèn)公用設(shè)施，使其滿足設(shè)計要求，如表4。表5 公用設(shè)施確認(rèn)項目設(shè)計要求確認(rèn)結(jié)果備注電壓220V是 否電源適配三孔插座是 否7.2.6.軟件版本確認(rèn)目的：確認(rèn)安裝的軟件與采購軟件版本是相同的。軟件版本與采購版本 相同 不相同 7.2.7.硬件環(huán)境與安裝確認(rèn)目的：根據(jù)生產(chǎn)商硬件和系統(tǒng)設(shè)計規(guī)格標(biāo)

10、準(zhǔn)，確認(rèn)儀器和控制器工作區(qū)域符合要求， 如表6。 表6 硬件環(huán)境與安裝確認(rèn)序號描 述是否符合要求1儀器放在水平的工作臺上，計算機(jī)在儀器旁邊。是 否2儀器各部件之間正確連接。是 否3溫度在10-30，濕度在20-85%之間。是 否4室內(nèi)無強(qiáng)電磁干擾源及有害有毒氣體。是 否5排風(fēng)口和進(jìn)風(fēng)口對儀器和計算機(jī)無污染。是 否7.2.8.部件清單目的：確認(rèn)儀器日常維護(hù)和操作所需要的消耗品和備用品，如表6。表7 部件清單部件名稱數(shù)量存放地點(diǎn)備注7.2.9.儀器、儀表、衡器的確認(rèn)目的：確認(rèn)儀器、儀表、衡器經(jīng)過校驗，并在校驗期內(nèi)。如表8。表8 儀器、儀表、衡器確認(rèn)記錄儀器儀表衡器名稱儀器儀表衡器編號校驗周期校驗證

11、書編號有效期至7.2.10.維修服務(wù)確認(rèn)目的：確認(rèn)儀器出現(xiàn)故障后能及時的處理，不影響操作。每本操作手冊上都有簡單的維護(hù)方法，經(jīng)過儀器培訓(xùn)的操作人員可以根據(jù)說明書進(jìn)行簡單的維修和零部件的更換。如果有其它比較大的問題，用戶不能解決的，可以電話通知廠家的維修工程師。維修電話：7.3.安裝確認(rèn)結(jié)論及批準(zhǔn)結(jié)論： 檢查人： 日期： 批準(zhǔn)人： 日期： 8.運(yùn)行確認(rèn)：8.1.測試項目和認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)驗證部件驗證項目合格標(biāo)準(zhǔn)軟件系統(tǒng)確認(rèn)見“高效液相色譜儀計算機(jī)化系統(tǒng)確認(rèn)報告”VP-CS-2017001輸液泵流量設(shè)定值誤差SS0.5ml/min:5%；1.0ml/min:3%；2.0ml/min:2%流量穩(wěn)定性誤差SR

12、0.5ml/min:3%；1.0ml/min:2%；2.0ml/min:2%梯度誤差GC：不超過3 %柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差TS2柱箱控溫穩(wěn)定性TC1檢測器基線噪聲20uv最小檢測濃度1107g/mL(萘的甲醇溶液)基線漂移200uv/h8.2.運(yùn)行確認(rèn)所需的材料8.2.1.玻璃儀器設(shè)備 計量玻璃儀器需徹底清洗并經(jīng)檢定，一般玻璃儀器要保證潔凈。8.2.2.試劑、標(biāo)準(zhǔn)溶液 a) 萘（AR）b) 甲醇（色譜純）c) 丙酮（AR）d) 去離子水:電導(dǎo)率不大于0.1s/cme) 紫外波長標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)8.1.2.3 其它輔助設(shè)備a) 玻璃儀器：經(jīng)檢定、其它玻璃器皿b) C18色譜柱c) 鉑電阻溫度計 （P

13、t100）準(zhǔn)確度0.3d) 秒表 分度值不大于0.1秒e) 進(jìn)樣器 20l f) 分析天平g) 游標(biāo)卡尺 15cm/0.02mm8.3.運(yùn)行確認(rèn)的實施8.3.1.輸液泵泵流量設(shè)定值誤差SS、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定將儀器的輸液系統(tǒng)，進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器聯(lián)接好，以甲醇為流動相，流量設(shè)為1.0mL/min，按說明書啟動儀器，待壓力平穩(wěn)后保持10分鐘，按表7設(shè)定流量，待流速穩(wěn)定后，在流動相排出口用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，準(zhǔn)確地收集，稱重。按式(1)、式(2)計算 SS和 SR。表7流量設(shè)定值（mL/min）0.51.02.0測量次數(shù)333流動相收集時間（min）1055接

14、受標(biāo)準(zhǔn)SS5%3%2%SR3%2%2%SS(FmFS)/FS100%(1)SR(FmaxFmin)/F100%(2)式中：SS流量設(shè)定值誤差()；SR流量穩(wěn)定性誤差()；Fm(W2W1)/ （t），流量實測值(mL/min)；W2容量瓶流動相的重量(g)；W1容量瓶的重量(g)；FS流量設(shè)定值(mL/min)；實驗溫度下流動相的密度(g/cm3)；t收集流動相的時間(min)；Fmax同一組測量中流量最大值(mL/min)；Fmin同一組測量中流量最小值(mL/min)；F同一組測量值的算術(shù)平均值(mL/min)。輸液泵泵流量設(shè)定值誤差SS、流量穩(wěn)定性誤差SR的檢定記錄。見附件2。8.3.2.

15、梯度誤差的檢定由梯度控制裝置設(shè)置階梯式的梯度洗脫程序，A溶劑為純水，C溶劑為含0.1%丙酮的水溶液，C經(jīng)由5個階梯從0變到100%。將輸液泵和檢測器連接（不接色譜柱），開機(jī)以后以A溶劑沖洗系統(tǒng)，基線平穩(wěn)后開始執(zhí)行梯度程序，畫出梯度變化曲線。求出A，C溶劑不同比例時的輸出信號值（或記錄儀讀數(shù)），重復(fù)測量2次，計算平均值。從C溶劑的含量及對應(yīng)的輸出信號值（或記錄儀讀數(shù)），按式（3）計算梯度誤差Gci，取Gci 最大者作為儀器梯度誤差，應(yīng)不超過3%。波長為254nm，檢定記錄見附件3。梯度洗脫表時間A通道：超純水C通道：0.1%丙酮水溶液0.00min100%0%3.00min100%0%3.018

16、0%20%13.00min80%20%13.01min60%40%23.00min60%40%23.01min40%60%33.00min40%60%33.01min20%80%43.00min20%80%43.01min0%100%53.00min0%100%53.01min100%0%58min100%0%Gci =（eq o(sup 5( ),sdo 2(Li) eq o(sup 5( ),sdo 2(Lm)）/ eq o(sup 5( ),sdo 2(Lm)100%式中：Gci 第i段梯度誤差 ( % ) ；eq o(sup 5( ),sdo 2(Li) 第i段輸出信號值（或記錄儀讀數(shù)

17、）增量平均值；eq o(sup 5( ),sdo 2(Lm) 各段輸出信號（或記錄儀讀數(shù)）增量平均值的平均值。記錄儀讀數(shù)時間 t0%A100%C20%CCC40%C60%C80%C100%C0%A8.3.3.前后進(jìn)樣帶入量的確認(rèn)方法：選用4.6mm250mm的C18或C8柱，流動相：甲醇：水=75：25，檢測器254nm，流速1.0ml/min,進(jìn)樣量5ul，使用下列商業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣。標(biāo)準(zhǔn)溶液(a):咖啡因溶液100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液(b):咖啡因溶液1ug/ml空白溶液:水備注：標(biāo)準(zhǔn)溶液的分析證書必須作為附件以證明標(biāo)準(zhǔn)溶液是適用的。進(jìn)以下序列樣：咖啡因溶液100ug/ml，1針?biāo)?針咖啡因溶

18、液1ug/ml，1針記錄色譜并對咖啡因峰進(jìn)行積分?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)空白溶液中相應(yīng)的峰面積百分比不超過標(biāo)準(zhǔn)溶液(a)中咖啡因峰面積的0.1%；標(biāo)準(zhǔn)溶液(b)中咖啡因的峰面積是標(biāo)準(zhǔn)溶液(a)中咖啡因峰面積的0.9%-1.1%。 記錄見附件4.8.3.4.柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差TS和控溫穩(wěn)定性TC的檢定將數(shù)字溫度計探頭固定在柱溫箱內(nèi)，選擇20和50進(jìn)行檢定。按儀器說明書操作，通電升溫，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度計讀數(shù)并開始計時，以后每隔10min記錄一次讀數(shù)，共計7次，求出平均值。平均值與設(shè)定值之差為TS，7次讀數(shù)中最大值與最小值之差為控溫穩(wěn)定性TC。柱溫箱柱箱溫度設(shè)定值誤差TS和控溫穩(wěn)定性TC的檢定原始記

19、錄見附件5。8.3.5.檢測器的檢定a.檢測器基線噪聲和基線漂移的測定取C18色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0ml/min，檢測器波長設(shè)定為254nm,開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后（約60min）記錄基線60min，從30min內(nèi)基線上讀出噪音值；從60min基線上讀出基線漂移值。接受標(biāo)準(zhǔn)：基線噪音應(yīng)不超過510-4 AU；基線漂移應(yīng)不超過510-3AU/h。記錄見附件6。b.檢測器最小檢測濃度的測定取C18色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0ml/min，檢測器波長設(shè)定為254nm,開機(jī)預(yù)熱，待儀器穩(wěn)定后取110-7g/ml的萘/甲醇溶液進(jìn)樣20l，記錄色譜圖，由色譜峰峰高和基

20、線噪聲峰峰高計算最小檢測濃度CL。公式如下：CL=(2NdC)/H式中 CL最小檢測濃度，g/ml；Nd基線噪聲峰峰高，mm；C 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/ml；H 標(biāo)準(zhǔn)溶液峰峰高，mm。接受標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)不超過110-7g/ml檢測器的最小檢測濃度原始記錄。見附件7。8.4.運(yùn)行確認(rèn)結(jié)論及批準(zhǔn)結(jié)論： 檢查人： 日期： 批準(zhǔn)人： 日期：9.性能確認(rèn)9.1.取C18色譜柱，以100%甲醇為流動相，流量為1.0ml/min，檢測器波長設(shè)定為254nm,柱溫設(shè)定為40。開機(jī)預(yù)熱待儀器穩(wěn)定后取0.1mg/ml的萘/甲醇溶液進(jìn)樣20l，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄其峰面積和保留時間，以保留時間計算其定性測量重復(fù)性誤差，以峰面積

21、計算其定量測定重復(fù)性誤差，以保留時間計算其定性重復(fù)性誤差。接受標(biāo)準(zhǔn)：定量重復(fù)性RSD1.0%，定性重復(fù)性0.5%。性能確認(rèn)記錄見附件89.2.性能確認(rèn)結(jié)論及批準(zhǔn)結(jié)論： 檢查人： 日期： 批準(zhǔn)人： 日期：10.確認(rèn)過程中的偏差及處理措施：見附件9。11.再確認(rèn)周期：11.1.正常情況下每年做一次確認(rèn)。11.2.發(fā)生了影響儀器性能的部件改變或維修后，應(yīng)進(jìn)行再驗證。12.確認(rèn)結(jié)果評定與結(jié)論：見附件10.13.附件附件1：人員培訓(xùn)、參與情況確認(rèn)記錄附件2：輸液泵確認(rèn)記錄附件3：梯度誤差檢定記錄附件4：前后進(jìn)樣帶入量確認(rèn)記錄附件5：柱溫箱確認(rèn)記錄附件6：基線噪聲、基線漂移測定記錄附件7：最小檢測濃度測定

22、記錄附件8：性能確認(rèn)結(jié)果記錄附件9：偏差處理審批表附件10：驗證結(jié)果綜合評價表 附件1人員培訓(xùn)、參與情況確認(rèn)記錄日 期 年 月 日課 時 1授課方式面授授課地點(diǎn) 會議室授課人部門崗位培訓(xùn)人質(zhì)量部QC主管 質(zhì)量部QA人員質(zhì)量部QC人員確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)結(jié)果確認(rèn)所有參與執(zhí)行本確認(rèn)的人員已經(jīng)得到培訓(xùn)，并在培訓(xùn)記錄中簽字。確認(rèn)結(jié)論：備注或附件： 檢查人/日期復(fù)核人/日期附件2輸液泵確認(rèn)記錄流量（ml/min）收集時間min次數(shù)W1W2W2-W1接受標(biāo)準(zhǔn)SSSR0.5101SS5%SR3%231.051SS3%SR2%232.051SS2%SR2%23結(jié)果評定：檢定人日 期復(fù)核人日 期附件3梯度誤差確認(rèn)記錄次數(shù)第一階段讀數(shù)第二階段讀數(shù)第三階段讀數(shù)第四階段讀數(shù)第五階段讀數(shù)eq o(sup 5( ),sdo 2(Lm)12Lieq o(sup 5( ),sdo 2(Li)eq o(