實驗細菌的接種及分離培養(yǎng)(共22張)課件

1、實驗細菌的接種及分離培養(yǎng)目的要求1、學習和掌握細菌分離與培養(yǎng)的各種基本技術；2、進一步熟悉和掌握無菌操作技術。實驗材料標本和菌種：咽拭子、葡萄球菌培養(yǎng)物、變形桿菌培養(yǎng)物；實驗器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈；培養(yǎng)基：普通瓊脂平板、試管斜面、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等（見圖6）。圖6接種工具細菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染標本殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染環(huán)境（一）細菌的分離方法培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基分離方法：劃線分離法意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細菌在瓊脂表面分散開，使單個細菌能

2、固定在某一點，生長繁殖后形成單個菌落，以達到分離純種的目的。細菌的分離培養(yǎng)方法微生物的分離平板劃線法1.分區(qū)劃線法：2.連續(xù)劃線法：微生物的分離平板劃線法分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)連續(xù)劃線法（二）細菌的接種法當細菌分離成純種后，常需要接種到相關的培養(yǎng)基中，以測試其各種生物學性狀。一般可用斜面、半固體、液體培養(yǎng)基來檢驗細菌的培養(yǎng)特性，相應培養(yǎng)基的接種方法有三種。斜面接種法培養(yǎng)基：斜面固體培養(yǎng)基；接種方法：斜面培養(yǎng)基接種法；用途：擴增細菌、保存菌種；或用于觀察其某些生化特性。瓊脂斜面培養(yǎng)基接種法培養(yǎng)時間：1824h殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染環(huán)境培養(yǎng)基

3、：固體平板培養(yǎng)基實驗器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈；用途：檢驗細菌的運動性或觀察細菌的生化反應。培養(yǎng)時間：1824h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱殺滅接種環(huán)沾染的細菌，以免污染標本從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液細菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細菌在瓊脂表面分散開，使單個細菌能固定在某一點，生長繁殖后形成單個菌落，以達到分離純種的目的。2、進一步熟悉和掌握無菌操作技術。從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液微生物的分離平板劃線法培養(yǎng)溫度：37（采用恒溫培養(yǎng)箱）從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液穿刺接種半固體培養(yǎng)基：接種方法：穿刺接種法。用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部然后沿著原接種線將

4、針拔出用途：檢驗細菌的運動性或觀察細菌的生化反應。液體培養(yǎng)基接種法培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：接種方法：液體接種法從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液用途：擴增細菌，用于觀察細菌的生長特性或測定其生化特性。細菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：培養(yǎng)溫度：37（采用恒溫培養(yǎng)箱）培養(yǎng)時間：1824h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等細菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落：定義：指單個細菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細菌集團。菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個菌落融合在一起形成的細菌堆積物。培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基微生物的分離平板劃線法用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱實驗器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈；從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液1、學習和掌握細菌分離與培養(yǎng)的各種基本技術；意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細菌在瓊脂表面分散開，使單個細菌能固定在某一點，生長繁殖后形成單個菌落，以達到分離純種的目的。然后沿著原接種線將針拔出培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基細菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部實