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1、-. z.理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(供臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)使用)實(shí)驗(yàn)一 坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.學(xué)習(xí)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)根本的組織別離技術(shù);2.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的方法;3.了解刺激的種類。2 實(shí)驗(yàn)原理蛙類的一些根本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似,假設(shè)將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)可保持不變。假設(shè)給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位,肉眼可看到肌肉收縮和舒一次,說(shuō)明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性,刺激與反響的規(guī)律和肌肉收縮的特征等,制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是機(jī)
2、能學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)根本操作技術(shù)。3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象蛙4 實(shí)驗(yàn)藥品任氏液5 儀器與器械 普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無(wú)齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器。6 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 破壞腦、脊髓取蛙一只,用自來(lái)水沖洗干凈(勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部向上,用大拇指或食指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜)。右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖3-1-1)。然后將探針改向前刺入顱腔,左右攪動(dòng)探針23次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔,應(yīng)有碰及顱底骨的感覺(jué)。再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動(dòng)探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。此時(shí)應(yīng)注意將脊柱保
3、持平直。針進(jìn)入椎管的感覺(jué)是,進(jìn)針時(shí)有一定的阻力,而且隨著進(jìn)針蛙出現(xiàn)下肢僵直或尿失禁現(xiàn)象。假設(shè)腦和脊髓破壞完全,蛙下頜呼吸運(yùn)動(dòng)消失,四肢完全松軟,失去一切反射活動(dòng)。此時(shí)可將探針?lè)聪蚰韯?dòng),退出椎管。如蛙仍有反射活動(dòng),表示腦和脊髓破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。圖2-1-1 搗毀蟾蜍脊髓 剪除軀干上部、皮膚及臟 用左手捏住蛙的脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷(圖3-1-2),然后左手握住蛙的后肢,緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及臟剪去(注意避開(kāi)坐骨神經(jīng)),并剪去肛門周圍的皮膚,留下脊柱和后肢(圖2-1-3)。圖2-1-2橫斷脊柱圖2-1-3 剪除軀干上部及臟 剝皮 一只手捏住脊柱的斷端(注意不
4、要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)),另一只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾钠つw(圖2-1-4)。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中。將手及使用過(guò)的探針、剪刀全部沖洗干凈。圖2-1-4 剝?nèi)テつw 別離兩腿 用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本反面朝上,右手用粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不進(jìn)展此步)。然后將脊柱腹側(cè)向上,左手的兩個(gè)手指捏住脊柱斷端的橫突,另一手指將兩后肢擔(dān)起,形成一個(gè)平面。此時(shí)用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意勿傷坐骨神經(jīng))。將其中一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)展以下操作。 辯認(rèn)蛙后肢的主要肌肉蛙類的坐骨神經(jīng)是由第7、8、9對(duì)脊神經(jīng)從相對(duì)應(yīng)的椎間孔穿出集合而成,行走于
5、脊柱的兩側(cè),到尾端(肛門處)繞過(guò)坐骨聯(lián)合,到達(dá)后肢背側(cè),行走于梨狀肌下的股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝,到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸肌。 游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌用蛙釘或左手的兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫將坐骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織別離直到腘窩,但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下的結(jié)締組織別離并在其跟腱處穿線、結(jié)扎。 剪去其它不用的組織,操作應(yīng)從脊柱向小腿方向進(jìn)展。(a) 剪去多余的脊柱和肌肉 將后肢標(biāo)本腹面向上,將坐骨神經(jīng)連同23節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來(lái)。再將標(biāo)本反面向上,用
6、鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支,直至腘窩(圖3-1-5A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端的1/3(保存2/3),制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本。(b) 完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌的結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(圖3-1-5B)。 檢驗(yàn)標(biāo)本 用鑷子夾持坐骨神經(jīng)中樞端,如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮,說(shuō)明標(biāo)本的興奮性良好。標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中備用。圖2-1-5 別離坐骨神經(jīng)(A)和坐骨神經(jīng)腓腸標(biāo)本(B)7考前須知在操作過(guò)程中,應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴
7、加任氏液,防止外表枯燥,以免影響標(biāo)本的興奮性。標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。8 實(shí)驗(yàn)圖像10結(jié)果及分析搗毀腦脊髓后的蛙應(yīng)有何表現(xiàn)? 制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在任氏液中? 如何判斷制備的神經(jīng)肌肉標(biāo)本的興奮性?11 思考題 用各種刺激檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性時(shí),為什么要從中樞端開(kāi)場(chǎng)? 刺激有幾種形式實(shí)驗(yàn)二 心臟灌流1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.學(xué)習(xí)蛙離體心臟灌流方法。 2.觀察Na+、K+、Ca2+、H+、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響。 2實(shí)驗(yàn)原理 心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的環(huán)境(如Na+、K+、Ca2+等的濃度及比例、pH值和溫度),而環(huán)境的變化則直
8、接影響到心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)。在體心臟還受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)的雙重支配,交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素,使心肌收縮力加強(qiáng),傳導(dǎo)速度加快,心率加快;迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿,使心肌收縮力減弱,心肌傳導(dǎo)速度減慢,心率減慢。將失去神經(jīng)支配的離體心臟保持于適宜的理化環(huán)境中(如任氏液),在一定時(shí)間仍能產(chǎn)生自動(dòng)節(jié)律性興奮和收縮。而改變?nèi)问弦旱慕M成成分,離體心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。 3實(shí)驗(yàn)對(duì)象 蛙4實(shí)驗(yàn)藥品 任氏液、0.65NaCl、2CaCl2、1KCl、1:10000腎上腺素、1:10000乙酰膽堿5儀器與器械 計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀)、力換能器、蛙類常用手術(shù)器械一套、玻璃分針、蛙
9、板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、滴管(7支)、試劑瓶(7個(gè))、燒杯、雙凹夾、萬(wàn)能支架、細(xì)線。 6實(shí)驗(yàn)方法與步驟1.標(biāo)本的制備 (1)離體蛙心標(biāo)本制備(斯氏蛙心插管法)取蟾蜍一只,翻開(kāi)胸腔,暴露心臟。在主動(dòng)脈干下方穿雙線,一條在左主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用;另一根在動(dòng)脈球上方打一活結(jié)備用(用以結(jié)扎和固定插管)。 玻璃分針將心臟向前翻轉(zhuǎn),在心臟背側(cè)找到靜脈竇,在靜脈竇以外的地方做一結(jié)扎(切忽扎住靜脈竇),以阻止血液繼續(xù)回流心臟(也可不進(jìn)展此操作)。 圖3-4-1 插管進(jìn)入心室示意圖左手提起左主動(dòng)脈上方的結(jié)扎線,右手持眼科剪在左主動(dòng)脈根部(動(dòng)脈球前端)沿向心方向剪一斜口,將盛有少許任氏液、大小
10、適宜的蛙心插管由此開(kāi)口處輕輕插入動(dòng)脈球。當(dāng)插管尖端到達(dá)動(dòng)脈球基部時(shí),應(yīng)將插管稍向后退(因主動(dòng)脈有螺旋瓣會(huì)阻礙插管前進(jìn)),并將插管尾端稍向右主動(dòng)脈方向及腹側(cè)面傾斜,使插管尖端向動(dòng)脈球的背部前方及心尖方向推進(jìn),在心室收縮時(shí)經(jīng)主動(dòng)脈瓣進(jìn)入心室(見(jiàn)圖3-4-1)。注意插管不可插得過(guò)深,插管的斜面應(yīng)朝向心室腔,以免插管下口被心室壁堵住。 假設(shè)插管中任氏液面隨心室的收縮而上下波動(dòng),則說(shuō)明插管進(jìn)入心室,可將動(dòng)脈球上已準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊,并固定于插管側(cè)面的鉤上,以免蛙心插管滑出心室。剪斷結(jié)扎線上方的血管,輕輕提起插管和心臟,在左右肺靜脈和前后腔靜脈下引一細(xì)線并結(jié)扎(參考圖3-4-1),于結(jié)扎線外側(cè)剪去所有相連的
11、組織則得到離體蛙心。此步操作中應(yīng)注意靜脈竇不受損傷并與心臟連結(jié)良好。最后,用任氏液反復(fù)換洗插管的任氏液,直到插管中無(wú)殘留血液為止。此時(shí),離體蛙心標(biāo)本制備成功,可供實(shí)驗(yàn)。左手拉住腹主動(dòng)脈上結(jié)扎線頭,于動(dòng)脈球上剪一小口,將裝有魚(yú)用生理鹽水的的蛙心套管插入動(dòng)脈球,并順勢(shì)推入心室,此時(shí)可以看到套管的液面隨心臟搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用滴管不斷更換套管中的灌流液,沖洗心室直至沒(méi)有血液為止,束緊備用線連同套管尖端一起結(jié)扎,并將線頭系在套管壁上的小突起上,到達(dá)固定作用。最后剪斷腹主動(dòng)脈,提起心臟用線盡量遠(yuǎn)離靜脈竇將其他血管結(jié)扎。在結(jié)扎外方剪斷各組織。此時(shí)心臟完全離體,借灌流液而正常搏動(dòng)。 2.實(shí)驗(yàn)裝置連接 按圖3-
12、4-2將蛙心插管固定于支架上,在心室舒時(shí)將連有一細(xì)線的蛙心夾在心臟舒時(shí)夾住心尖,并將細(xì)線以適宜的緊度與力換能器相連。力傳感器的輸出線與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)或二道生理記錄儀的輸入通道相連。圖3-4-2 蛙心灌流的記錄儀描記裝置實(shí)驗(yàn)工程 (1)記錄心臟在只有任氏液時(shí)的收縮曲線,觀察心率及收縮幅度,并將其作為正常對(duì)照。(2)Na+的作用:用吸管吸出插管中的任氏液后,換以等量的0.65氯化鈉溶液,記錄并觀察心跳的變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即將插管液體吸出,并以等量任氏液換洗23次,至心跳恢復(fù)正常。 (3)Ca2+的作用:將12滴2的氯化鈣溶液參加灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以
13、等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (4)K+的作用:將12滴2的氯化鉀溶液參加灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (5)腎上腺素的作用:將12滴1:10000腎上腺素參加灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (6)乙酰膽堿的作用:將12滴1:10000乙酰膽堿參加灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 7考前須知 1.制備離體心臟標(biāo)本時(shí),勿傷及靜脈竇。 2.蛙心夾應(yīng)在心室舒期一次性?shī)A住心尖,防止因夾傷心臟而導(dǎo)致漏液。 3
14、.每一觀察工程都應(yīng)先描記一段正常曲線,然后再加藥并記錄其效應(yīng)。加藥時(shí)應(yīng)在心跳曲線上予以標(biāo)記,以便觀察分析。 4.各種滴管應(yīng)分開(kāi),不可混用。 5.在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,插管灌流液面高度應(yīng)保持恒定;儀器的各種參數(shù)一經(jīng)調(diào)好,應(yīng)不再變動(dòng)。6.給藥后假設(shè)效果不明顯,可再適量滴加,并密切注意藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。給藥量必須適度,加藥出現(xiàn)變化后,就應(yīng)立即更換任氏液,否則會(huì)造成不可挽回的后果,尤其是K+,H+稍有過(guò)量,即可導(dǎo)致難以恢復(fù)的心臟停跳。 7.標(biāo)本制備好后,假設(shè)心臟功能狀態(tài)不好(不搏動(dòng)),可向插管滴加12滴2%CaCl2或1:10000腎上腺素,以促進(jìn)(起動(dòng))心臟搏動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)程序安排上也可考慮促進(jìn)和抑制心
15、臟搏動(dòng)的藥物交換使用。 8.謹(jǐn)防灌流液沿絲線流入力傳感器而損壞其電子元件。 8 問(wèn)題與解釋 1.插管插入后,管中的液面不能隨心臟搏動(dòng)而波動(dòng),或波動(dòng)幅度不大,影響結(jié)果的觀察。 (1)插管插到了主動(dòng)脈的螺旋瓣中,未進(jìn)入心室。 (2)插管插到了主動(dòng)脈壁肌肉和結(jié)締組織的夾層中。 (3)插管尖端抵觸到心室壁。 (4)插管尖端被血凝塊堵塞。 2.插管后,心臟不跳動(dòng)。 (1)心室或靜脈竇受損。 (2)插管尖端深入心室太多;或尖端太粗,心臟太小(魚(yú)類容易出現(xiàn))影響到心室臟的收縮。 (3)心臟機(jī)能狀態(tài)不好。 9 實(shí)驗(yàn)圖像氯化鈉氯化鈣氯化鉀腎上腺素乙酰膽堿10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 剪貼記錄曲線,并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)展分析討論。
16、實(shí)驗(yàn)三 影響尿液生成的因素1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)用膀胱套管或輸尿管套管引流的方法,觀察不同生理因素對(duì)動(dòng)物尿量的影響。加深對(duì)尿生成調(diào)節(jié)的理解。2 實(shí)驗(yàn)原理 尿是血液流過(guò)腎單位時(shí)經(jīng)過(guò)腎小球?yàn)V過(guò),腎小管重吸收和分泌而形成的,凡對(duì)這些過(guò)程有影響的因素都可影響尿的生成。腎小球的濾過(guò)作用取決于腎小球的有效濾過(guò)壓,其大小取決于腎小球毛細(xì)血管血壓,血漿的膠體滲透壓和腎小囊壓。影響腎小管重吸收作用主要是管滲透壓和腎小管上皮細(xì)胞的重吸收能力,后者又為多種激素所調(diào)節(jié)。3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 兔4 實(shí)驗(yàn)藥品醫(yī)用酒精、生理鹽水、溫?zé)岬纳睇}水,利尿激素。5 儀器與設(shè)備 計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀、電子刺激器)、壓力
17、換能器、保護(hù)電極、記滴器、恒溫浴槽、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺(tái)、氣管插管、膀胱導(dǎo)管(或輸尿管導(dǎo)管)、動(dòng)脈插管、注射器(1 ml、20 ml)及針頭、燒杯、試管架及試管、酒精燈等。6 方法與步驟1.標(biāo)本的制備 (1)實(shí)驗(yàn)兔在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給予足夠的菜和飲水。 (2)稱重動(dòng)物,耳緣靜脈注射20%的氨基甲酸乙酯溶液(5 mlkg-1體重)進(jìn)展麻醉,待動(dòng)物麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。 (3)在頸部手術(shù) 暴露氣管,施氣管插管;別離左側(cè)頸總動(dòng)脈,按常規(guī)將充滿肝素生理鹽水的動(dòng)脈插管插入其,通過(guò)血壓換能器連至記錄裝置,描記血壓。別離右側(cè)的迷走神經(jīng),穿線備用,用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。 (4)尿液的收集可選用膀胱導(dǎo)
18、管法或輸尿管插管法。 .膀胱導(dǎo)尿法 自恥骨聯(lián)合上緣向上沿正中線作4 cm長(zhǎng)皮膚切口,再沿腹白線剪開(kāi)腹壁及腹膜(勿傷腹腔臟器),找到膀胱,將膀胱向尾側(cè)翻至體外(勿使腸管外露,以免血壓下降)。再于膀胱底部找出兩側(cè)輸尿管,認(rèn)清兩側(cè)輸尿管在膀胱開(kāi)口的部位。小心地從兩側(cè)輸尿管下方穿一絲線,將膀胱上翻,結(jié)扎膀胱頸部。然后,在膀胱頂部血管較少處作一荷包縫合,再在其中央剪一小口,插入膀胱導(dǎo)管,收緊縫線、結(jié)扎固定。膀胱導(dǎo)管的喇叭口應(yīng)對(duì)著輸尿管開(kāi)口處并緊貼膀胱壁。膀胱導(dǎo)管的另一端通過(guò)橡皮導(dǎo)管和直管連接至記滴器,并在它們中間充滿生理鹽水。 輸尿管插管法 沿膀胱找到并別離兩側(cè)輸尿管,在靠近膀胱處穿線將它結(jié)扎;再在此結(jié)
19、扎前約2厘米的近腎端穿一根線,在管壁剪一斜向腎側(cè)的小切口,插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料導(dǎo)尿管并用線扎住固定,此時(shí)可看到有尿滴滴出。再插入另一側(cè)輸尿?qū)Ч?。將兩插管并在一起連至記滴器。手術(shù)完畢后,用溫生理鹽水紗布覆蓋腹部切口。圖3-7-1 兔輸尿管及膀胱導(dǎo)尿法1、輸尿管 2、插膀胱導(dǎo)管部位 3、膀胱導(dǎo)管2.實(shí)驗(yàn)工程(1)記錄正常情況下每分鐘尿分泌的滴數(shù)。(2)耳緣靜脈注射38的0.9%NaCl溶液20ml,觀察尿量的變化。(3)耳緣靜脈注射去利尿激素1ml,觀察尿量的變化。(4)上腹部手術(shù):上腹部剪毛,切開(kāi)胸骨劍突部位的皮膚,沿腹白線切開(kāi)長(zhǎng)約2 cm的切口,小心別離、暴露劍突軟骨及骨柄,用金冠剪剪斷劍
20、骨柄,將縛有長(zhǎng)線的金屬鉤鉤于劍突中間部位,線的另一端連力換能器, 記錄呼吸。(5)迷走神經(jīng)的作用:切斷一側(cè)迷走神經(jīng),呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化 7 考前須知 1.選擇家兔體重在2.5-3.0kg左右,實(shí)驗(yàn)前給兔多喂菜葉,或用橡皮導(dǎo)尿管向兔胃灌入4050 ml清水,以增加根底尿量。 2.手術(shù)動(dòng)作要輕揉,腹部切口不宜過(guò)大,以免造成損傷性閉尿。剪開(kāi)腹壁防止傷及臟。 3.因?qū)嶒?yàn)中要屢次進(jìn)展耳緣靜脈注射,因此要注意保護(hù)好兔的耳緣靜脈。應(yīng)從耳緣靜脈的遠(yuǎn)端開(kāi)場(chǎng)注射,逐漸向耳根部推進(jìn)。 4.輸尿管插管時(shí),注意防止插入管壁和周圍的結(jié)締組織中;插管要妥善固定,不能扭曲,否則會(huì)阻礙尿的排出。 5.實(shí)驗(yàn)順序的安排是:在尿量增加
21、的根底上進(jìn)展減少尿生成的實(shí)驗(yàn)工程,在尿量少的根底上進(jìn)展促進(jìn)尿生成的實(shí)驗(yàn)工程。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)需在上一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)作用消失,血壓、尿量根本恢復(fù)正常水平時(shí)再開(kāi)場(chǎng)。 6.刺激迷走神經(jīng)強(qiáng)度不宜過(guò)強(qiáng),時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免血壓過(guò)低,心跳停頓。8 問(wèn)題分析1.開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)尚未給藥時(shí),尿量就很少或無(wú)尿 (1)兔體缺水 (2)兔本身機(jī)能狀況低下, (3)輸尿管插管未插入輸尿管,或輸尿管堵塞,或輸尿管扭曲。 (4)腹部切口過(guò)大,引起抗利尿激素分泌,血壓下降,尿量減少。 (5)氣溫太低,動(dòng)物未保溫,血管收縮,尿量減少。9 實(shí)驗(yàn)圖像正常一側(cè)神經(jīng)被剪兩側(cè)神經(jīng)被剪增大無(wú)效腔10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 剪貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果,記錄各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)所見(jiàn)的血壓(包括收縮壓、舒
22、壓、平均壓)和尿量變化。分析這些變化產(chǎn)生的原因。11 思考題 1.靜脈快速注射生理鹽水對(duì)尿量有何影響,為什么? 2.靜脈注射利尿激素對(duì)尿量有何影響,為什么?迷走神經(jīng)在節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)中起何作用?實(shí)驗(yàn)四 心血管活動(dòng)的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)記錄哺乳動(dòng)物動(dòng)脈血壓的直接測(cè)定方法,并觀察神經(jīng)-體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)。 2實(shí)驗(yàn)原理在正常生理情況下,心血管活動(dòng)受神經(jīng)、體液和自身機(jī)制的調(diào)節(jié)。 心臟受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)的支配。心交感神經(jīng)興奮時(shí),使心率加快、心肌收縮力加強(qiáng),心興奮傳導(dǎo)加快,心輸出量增加、動(dòng)脈血壓升高。心迷走神經(jīng)興奮時(shí),使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室傳導(dǎo)減慢,從而使心輸出量減少、動(dòng)脈
23、血壓下降。在神經(jīng)調(diào)節(jié)中以頸動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓的減壓反射尤為重要,當(dāng)動(dòng)脈血壓升高時(shí),壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)增加,通過(guò)中樞反射性引起心率減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒和外周阻力降低,使血壓降低。反之,當(dāng)動(dòng)脈壓下降時(shí),壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)減少,神經(jīng)調(diào)節(jié)過(guò)程又使血壓上升。支配血管的交感縮血管神經(jīng)興奮時(shí),使血管收縮、外周阻力增加、動(dòng)脈血壓升高。 家兔的壓力感受器的傳入神經(jīng)在頸部從迷走神經(jīng)分出,自成一支,稱為減壓神經(jīng),其傳入沖動(dòng)隨血壓變化而變化。 心血管活動(dòng)還受腎上腺素和去甲腎上腺素等體液因素的調(diào)節(jié)。它們對(duì)心血管的作用既有共性,又有特殊性。關(guān)鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優(yōu)勢(shì)。腎上腺素對(duì)與受體均有激
24、活作用,去甲腎上腺素主要激活受體而對(duì)受體作用很小,因而使外周阻力增加,動(dòng)脈血壓升高,但對(duì)心臟的作用要比腎上腺素弱。 3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 家兔。 4 實(shí)驗(yàn)藥品 生理鹽水,20%氨基甲酸乙脂或3%戊巴比妥鈉,肝素500Uml-1,1:10000腎上腺素,1:10000去甲腎上腺素,1:10000乙酰膽堿。 5 儀器與器械 計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)或二道生理記錄儀、刺激器,兔手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械一套,氣管插管,動(dòng)脈夾,動(dòng)脈套管、血壓換能器,保護(hù)電極,棉線,紗布,棉球、注射器50、10、2ml,支架,雙凹夾。 6實(shí)驗(yàn)方法與步驟1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備: 1麻醉和固定:家兔稱重后,耳緣靜脈緩慢注射20氨基甲酸乙酯5mlkg
25、-1或3%戊巴比妥鈉1mlkg-1進(jìn)展麻醉。當(dāng)動(dòng)物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時(shí),說(shuō)明動(dòng)物已被麻醉,即可停頓注射。將麻醉的家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。 2別離頸部神經(jīng)、血管和插氣管插管:頸部剪毛,沿頸部正中線切開(kāi)皮膚57cm,用止血鉗鈍性別離皮下組織及淺層肌肉,暴露和別離氣管;別離左、右兩側(cè)頸總動(dòng)脈左頸總動(dòng)脈盡量別離長(zhǎng)些,以做動(dòng)脈插管用。當(dāng)向頭端追索到甲狀軟骨上緣,可見(jiàn)到左頸動(dòng)脈分支為頸外和頸動(dòng)脈,在頸動(dòng)脈基部有一膨大處,為頸動(dòng)脈竇。別離右側(cè)的迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。在別離的氣管、頸總動(dòng)脈及神經(jīng)下方各穿一不同顏色的線備用(見(jiàn)5-1)。 圖3-5-1 頸局部離(3) 進(jìn)展氣管插管圖
26、3-5-2 圖3-5-2 氣管插管示意圖(4) 進(jìn)展動(dòng)脈插管 做插管手術(shù)前經(jīng)耳緣靜脈注射肝素500Ukg-1,在左側(cè)頸總動(dòng)脈插入動(dòng)脈插管圖3-5-3。 圖3-5-3 頸動(dòng)脈插管示意圖2連接實(shí)驗(yàn)裝置: 計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)將動(dòng)脈插管通過(guò)三通與血壓換能器連接,血壓換能器與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)的壓力通道連接;刺激電極與系統(tǒng)的刺激輸出連接;減壓神經(jīng)的記錄電極導(dǎo)線與系統(tǒng)的一個(gè)通道連結(jié)。啟動(dòng)計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理分析系統(tǒng),按系統(tǒng)程序提示進(jìn)展血壓信號(hào)定標(biāo),調(diào)整放大增益。 3.實(shí)驗(yàn)工程 1記錄正常情況下減壓神經(jīng)放電波形和動(dòng)脈血壓波形,觀察二者變化關(guān)系,注意觀察減壓神經(jīng)的群集性放電與血壓的波動(dòng)是否同
27、步每一群集性放電持續(xù)時(shí)間血壓正常值是多少同時(shí)識(shí)別血壓波的一級(jí)波和二級(jí)波,三級(jí)波(圖7.10-2): 圖3-5-4 兔頸總動(dòng)脈的血壓曲線示波器記錄一級(jí)波心搏波:由心室舒縮活動(dòng)所引起的血壓波動(dòng),心縮時(shí)上升,心舒時(shí)下降,其頻率與心率一致。二級(jí)波呼吸波:由呼吸運(yùn)動(dòng)所引起的血壓波動(dòng),吸氣時(shí)血壓先下降,繼而上升,呼氣時(shí)血壓先上升,繼而下降,其頻率與呼吸頻率一致。三級(jí)波:不常出現(xiàn),可能由心血管中樞的緊性活動(dòng)的周期變化所致。2夾閉頸總動(dòng)脈用動(dòng)脈夾夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈1015s,觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。在出現(xiàn)一段明顯變化后,突然放開(kāi)動(dòng)脈夾,血壓又有何變化。 3牽拉頸總動(dòng)脈手持左側(cè)頸總動(dòng)脈上的遠(yuǎn)心端結(jié)扎線,向心臟方快速牽拉3s。觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。假設(shè)持續(xù)牽拉,血壓與減壓神經(jīng)放電會(huì)有何變化? 4靜脈注射乙酰膽堿待血壓根本穩(wěn)定后,由耳緣靜脈注入1:10000乙酰膽堿0.20.3ml,觀測(cè)血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。注意動(dòng)脈血壓降低到何種程度時(shí),群集型放
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