微生物學(xué)考試筆記

1、微生物學(xué)： 生物學(xué)按界門綱目科屬種分類，種是最小單位。 結(jié)核菌可利用甘油為碳源，梭狀芽胞菌可以氨基酸為碳源，流行性感冒桿菌要，因子才能生長。致病性島：由基因編碼決定的一團(tuán)與致病性相關(guān)的基因組。細(xì)菌診斷流程有：雙岐索引法，表解法，數(shù)字編碼鑒定法。超凈工作臺應(yīng)選擇垂直氣流通風(fēng)方式。O/129抑菌試驗對弧菌有用而對氣單胞菌無用。桿菌肽用于A（敏感）與非A群鏈球菌的鑒定。奧普托欣試驗：肺炎鏈球菌敏感。雜交分：斑點，菌落原位，Southern(DNA)印跡，Northern(RNA,DNA)印跡。L型細(xì)菌（形態(tài)多樣，染色不定，可過濾，滲透壓敏感，生化減弱等）培養(yǎng)應(yīng)高滲（20%蔗糖），染色多為G染陰性，形

2、態(tài)不一（巨球形是特征），固定要用10G/L鞣酸不能用火焰。一般菌落有：油煎蛋樣（L），顆粒型（G），絲狀菌落（F），鑒定要點：染色易變多形性，生長在增菌液中微渾，顆粒樣沉淀或沿試管壁生長，返祖現(xiàn)象。原生質(zhì)體與原生質(zhì)球都是細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌。肽聚糖的結(jié)構(gòu)由聚糖骨架，四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋（G-無交聯(lián)橋）。磷壁酸為G+特有，分壁和膜兩種。外膜層由脂多糖，脂質(zhì)雙層，脂蛋白組成。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有核蛋白體（蛋白合成地），核質(zhì)（主要遺傳物質(zhì)）質(zhì)粒，胞質(zhì)顆粒，是細(xì)菌蛋白質(zhì)和酶類合成的重要場所。鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。性菌毛僅有110根，毒力和耐藥質(zhì)粒都能通過它轉(zhuǎn)移，有致病性。RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中占細(xì)菌干

3、重的10%，DNA存在于染色體和質(zhì)粒中。G+等電點23，G-等電點45。細(xì)菌營養(yǎng)轉(zhuǎn)運的方式有：離子，透性酶，磷酸酶。營養(yǎng)攝取的機(jī)制：被動擴(kuò)散，主動吸收，基團(tuán)轉(zhuǎn)位。嗜冷菌最適溫為1020，嗜溫菌為2040，嗜熱菌為5060。細(xì)菌代謝所需能量主要以生物氧化作用而來。G-菌的菌體脂多糖能引起發(fā)熱故稱熱原質(zhì)。土中的厭氧芽胞桿菌是創(chuàng)傷感染病原菌的主要來源。飲用水中每毫升總數(shù)不過100個，1000毫升水中大腸桿菌群不過3個。有芽胞破傷風(fēng)菌需沸水煮三小時才殺死。水中加入2%碳酸鈉能將沸點提到105度又能防止金屬生銹。紫外線波長265266時殺菌力最強(qiáng)。無芽胞菌一般的致死為18006500微瓦/CM，殺死芽胞

4、要十倍。濾菌器用于除菌的孔徑是0.22微米，另外以石棉板為濾板的金屬濾器稱SEITZ濾器（蔡氏濾器）按濾孔大小分K：最大，澄清用，EKS最小，可阻止大病毒通過EK：居中，除去一般細(xì)菌。玻璃濾菌器分G1G6，G5，G6兩型能阻止細(xì)菌通過。高壓滅菌指示物：嗜熱脂肪芽胞桿菌（ATCC7053），紫外線殺菌指示物：枯草芽胞桿菌黑色變種（ATCC9372）。細(xì)菌遺傳物質(zhì)主要在于染色體質(zhì)粒和轉(zhuǎn)位因子中。影響基因表達(dá)的因素有：調(diào)控部位，調(diào)節(jié)蛋白，效應(yīng)分子。質(zhì)粒：不依賴染色體而復(fù)制，不相容性，轉(zhuǎn)移性，指令性。主要有耐藥質(zhì)粒，COL質(zhì)粒（編碼腸毒素）VI質(zhì)粒（編碼細(xì)菌與致病性有關(guān)的蛋白）。轉(zhuǎn)位因子為存在于細(xì)菌染

5、色體或質(zhì)粒上的一特異的核苷酸序列可在DNA中移動，主要有三類：插入順序（最小的轉(zhuǎn)位因子），轉(zhuǎn)座子，轉(zhuǎn)座噬菌體。病毒突變株分：空斑和宿主依賴性。遺傳型變異機(jī)制有突變，基因轉(zhuǎn)移，重組。突變：突變率由復(fù)制的準(zhǔn)確度，DNA發(fā)生損傷的機(jī)會，及對損傷DNA修復(fù)程度來決定。一般在106-109。堿基的置換：嘌呤換嘌呤，嘧啶換嘧啶為轉(zhuǎn)換，嘌呤換嘧啶為顛換。轉(zhuǎn)化：受體菌直接撮取供體菌提供的游離DNA 片段整合重組使受體菌的性狀發(fā)生變異。一般有鏈，嗜血，芽胞菌有此功能。G+菌的感受態(tài)是由感受態(tài)因子（CF）的胞外信號誘導(dǎo)的。轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到愛體菌內(nèi)而致受體菌基因改變，分普遍和局限。接合：受

6、體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛所帶的F質(zhì)?；蝾愃七z傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌。溶源性轉(zhuǎn)換：是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組，使宿主遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生變異。原生質(zhì)融合：兩種經(jīng)過處理失去細(xì)胞壁的原生體混合和可發(fā)生融合后的雙倍體可發(fā)生染色體間的重組?；蛑亟M可使基因再激活表現(xiàn)為：交叉復(fù)活和多重復(fù)活。粘附素是細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)有菌毛和非菌毛。進(jìn)入宿主：黏附，定植，侵入，轉(zhuǎn)歸。毒力有侵襲力和毒素。侵襲力：菌體表面結(jié)構(gòu)，菌毛，侵襲性酶（凝固酶，透明質(zhì)酸酶，鏈激酶，膠原酶等）。細(xì)菌的內(nèi)毒素一般由：脂質(zhì)A（主要成份），非特異性核心多糖，菌體特異性多糖。一般7-10天后機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫。IgG和IgM能在血中直接中和

7、病毒。醫(yī)院感染大多以散發(fā)形式流行?？垢腥局委熢瓌t：安全，有效，經(jīng)濟(jì)，關(guān)鍵是有效。細(xì)菌種的科學(xué)命名采用拉丁文種屬雙命名法，前一字為屬名，名詞，后一為種名，形容詞。目前國際上普遍采用伯杰分類系統(tǒng)，也有用CDC（USA）。目前以細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特點作最高一級分類依據(jù)將原核界分為薄，堅，軟，疵壁四門。科，屬，種分類主要依靠生化特性和抗原結(jié)構(gòu)。日光燈波長約0.5微米。顯微鏡的分辯率為波長一半。熒光顯微鏡的光源為高壓汞燈。抗酸染色：5%石碳酸3%鹽酸酒精美藍(lán)。糖類發(fā)酵是鑒定細(xì)菌最常用的生化反應(yīng)。懷疑細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時血培養(yǎng)不少于三次。不能立刻接種的血應(yīng)用SPS抗凝。直接鏡檢2H報告，最后鑒定和藥敏一般不過3

8、天，除血外，必須在24H內(nèi)預(yù)報。腸桿菌科的強(qiáng)選擇（SS瓊脂）弱選擇（EMB，麥康凱）。A溶血是草綠色，b溶血是透明環(huán)，r溶血紅細(xì)胞不溶解，雙環(huán)。細(xì)菌數(shù)量達(dá)106107CFU/ML時培養(yǎng)肉湯才見混濁。血培養(yǎng)中有105菌落形成單位（CFU）/ML時才能通過革蘭氏染色檢出細(xì)菌。近交系動物：采用兄妹交配（或親子交配）繁殖20代以上的純品系動物。突變種純系動物：實驗動物正常染色體中某個基因發(fā)生了變異的具有各種遺傳缺陷的突變品系動物。純雜種動物：無計劃隨意交配的動物。無菌動物：體表腸道內(nèi)無菌體內(nèi)無抗體。悉生動物：給出無菌動物引入已知的517種正常腸道菌的動物。小白鼠對肺鏈，破傷外毒素敏感，脯鼠對結(jié)核白喉易

9、感，貓對金葡萄菌腸毒敏感。測定病原體的感染性最好選用無菌動物或悉生動物。冷凍干燥保存法是最有效的方法，利用各種斜面和半固體加石蠟油是最常用和最簡便的方法，一般不含糖，不用液體。真菌，霍亂，銅綠及糞堿需在室溫保存，而腦膜炎，淋球，初次分離的流感嗜血菌保存于37度。每轉(zhuǎn)種三代要鑒定一次。AMS系統(tǒng)是目前微生物鑒定中最常用的自動化儀器。葡萄球菌：產(chǎn)生脂溶性色素，多數(shù)分解甘露醇產(chǎn)酸液化明膠和產(chǎn)生血漿凝固酶。蛋白抗原（A蛋白）種屬特異無型特異，多糖抗原（A，B，C）是半抗原，有型特異。是抵抗力最強(qiáng)的無芽胞菌。糞便嘔吐物應(yīng)接種高鹽卵黃或高鹽甘露醇瓊脂，觸酶陽性，凝固酶陽性玻片法篩選，試管法確證。必須做苯唑

10、西林的敏感試驗。鏈球菌：沉淀生長（肺鏈為混濁），在含腹水的培養(yǎng)物上生長良好，溶血株呈絮狀或顆粒狀生長，不溶血株呈均勻混濁生長。A鏈對桿菌肽敏感青霉素G為首選，B鏈CAMP試驗陽性氨基糖苷類合用，B溶鏈致病性最強(qiáng)，A溶鏈為條件致病菌。幾乎所有的肺鏈對OPTOCHIN敏感。肺鏈：最適PH7.68.0，在含3%-5%的兔血清中生長良，培養(yǎng)時間過長會自溶管底澄清，分解菊糖，膽汁溶解陽性。腸球菌屬：能在高鹽（6.5%NACL）高堿（PH9.6）40%膽汁培養(yǎng)基上和1045度生長，是G+菌中僅次于葡萄球菌的重要院內(nèi)感染病菌。臨床上分離最高的是糞腸球菌，可分慶霉素高耐藥和低耐藥，一般用B內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類

11、聯(lián)合。腦膜炎奈瑟菌：腦液中位于中性細(xì)胞內(nèi)，不分解麥芽糖，能產(chǎn)生自溶菌不宜冰箱應(yīng)立即送檢，冬末春初為流行高峰，青G為首選。淋球奈瑟菌：人類是唯一天然宿主和傳染源。最適PH7.5，對糖類生化最低只能發(fā)酵葡萄糖，主要有菌毛蛋白，脂多糖，外膜蛋白抗原。細(xì)菌培養(yǎng)是目前世衛(wèi)推薦的唯一方法，培養(yǎng)基中應(yīng)含兩種以上抗生素（多為萬古和多粘）。腸桿菌科分型多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗?？梢删謩e接種克氏雙糖鐵（KIA）尿素靛基質(zhì)動力（MIU）來定屬。大腸桿菌：（吲哚，甲基紅，V-P，枸椽酸）IMVIC試驗：+-，KIA產(chǎn)酸產(chǎn)氣，MIU+-，有菌體（O）莢膜（K）鞭毛（H）三抗原，已知有171個O，99個K，

12、56個H，腸產(chǎn)毒（ETEC）：霍亂樣腸毒腹瀉，腸致病性（EPEC）：嬰兒腹瀉，腸侵襲性（EIEC）：志賀樣腹瀉，腸出血（EHEC）：其中O157：H7可引起出血性腹瀉和溶血性尿毒癥，是4歲以下兒童急性腎功能衰的主要病原，678三月最高，北美最多見，腸黏附性（EAGGEC）：腹瀉。志賀氏菌分痢疾，福氏，鮑氏，宋內(nèi)四群，我國以福氏和宋內(nèi)常見，無莢無芽無鞭，KIA：K/A，產(chǎn)氣+/-，H2S-，MIU-+/-，最后可用診斷血清作群型鑒定。沙門菌：無芽無莢有鞭毛（除雞沙門）多數(shù)有菌毛，H2S可陽性，傷寒菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，菌體抗原有58種，鞭毛抗原有兩相即特異性和共同，表面抗原有VI，M，5三種，變異有：S

13、R，HO，VW，相位。凡符合：KIA：K/A，產(chǎn)氣+/-，H2S+/-，MIU+-+，硝酸鹽還原陽性，多價血清陽性的為沙門屬。變形桿菌屬有：普通，產(chǎn)黏，奇異。普羅威登斯屬有：產(chǎn)堿，斯氏，雷極，摩根菌只有摩氏摩根菌。有明顯多形性，呈球狀或絲狀，生長于1043度，普通和奇異呈遷徒樣生長，三屬氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶陽性G-桿菌，加入石炭酸或苯乙醇使終濃度為1g/L和0.25%可抑制變形菌遷徒樣生長。耶爾森氏菌：有7種，鼠疫，假結(jié)核，小腸與致病有關(guān)。鼠疫：有莢無芽無鞭，兩極濃染，2830度，PH6.97.1，液體中培養(yǎng)好，底部可有鐘乳石樣，加入亞硫酸鈉或脫纖維血有刺激生長，龍膽紫亞硫酸鈉為其選擇性

14、培養(yǎng)基，3%氯化鈉上生長呈多形性。小腸：無動無芽無莢G-，25度有周鞭毛，最適溫2028度，VP試驗25度陽性，37度陰性，KIA只利用葡萄糖，MIU22度動力陽性37度陰性。假結(jié)核：25度有周鞭毛有動力37度無動力，最適溫30，PH68。枸櫞酸桿菌：有弗勞地，異型，無丙二酸鹽。只有弗勞地靛基質(zhì)-，H2S+，僅異型的丙二酸鹽+，B半乳糖苷酶，賴氨酸脫羧酶，枸櫞酸利用三試驗：枸櫞酸菌+-+，沙門-/+，愛德華-+-。克雷伯菌屬：以肺炎克雷伯菌多見，菌體呈卵圓形或球桿狀成雙排列，有時菌落出現(xiàn)黏液型用接種環(huán)可成絲，動力和鳥氨酸脫羧酶陰性是本菌最大特點，三亞種區(qū)別：IMVIC試驗：肺炎亞種-+，臭鼻亞

15、種-+-D，鼻硬結(jié)亞種-+-。腸桿菌屬：最適溫30度，氧化酶陰性，有動力，與大腸桿菌區(qū)別：IMVIC試驗：腸：-+，大：+-。沙雷菌：最適溫1036度，4%氯化鈉下可長，產(chǎn)生靈紅霉素（非水溶）和吡羧酸（水溶），關(guān)鍵生化是DNA+和葡萄糖酸鹽+?；【疲簶O端鞭毛，苷露醇，脂酶，生長需要NaCL，對O129敏感五項，弧菌屬+，氣單胞菌屬-+-，鄰單胞菌屬-+，發(fā)光桿菌-+/-+。前三可引起人類感染?；魜y菌：呈弧狀或豆點狀，滴片檢查見魚群狀G-菌，常用PH8。5的堿性蛋白胨水增菌培養(yǎng)，在硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖平板（TCBS）上形成較大黃菌落，在含亞碲酸鉀或慶大霉素平板上呈灰褐色，有耐熱的特異性O(shè)

16、抗原（O-1群分AC的稻葉型，AB的小川型，ABC的彥島型）和不耐熱的非特異性H抗原，1992年發(fā)現(xiàn)的新流行的O139群，它即不被O1群抗血清凝集，也不被O2O138群抗血清凝集，常用的保存或運送有堿性蛋白胨水，文臘二氏，卡布運送液。副溶血性弧菌：嗜鹽性弧菌，是我國沿海地區(qū)最常見的食物中毒病原菌，兩極濃染，NaCL最適35g/L，無鹽不長，PH7.09.5，最適7.7，在TCBS上不發(fā)酵蔗糖菌落綠色，100g/L鹽內(nèi)不長，神奈川試驗是致病株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血對馬紅細(xì)胞不溶血為陽性。氣單胞菌最適生長溫度30度，但在045度皆可生長。彎曲菌屬是一類微需氧菌,不分解糖,氧化酶+,菌體彎曲逞豆點

17、狀，S狀或螺旋狀有動力G-菌，5種5亞種，對人致病的主要是空腸（人類腹瀉最常見之一，43度生長，25度不生長）和胎兒亞種（免疫功能低下時的敗血癥，腦膜炎等，25度生長，43度不生長），簡明彎曲菌在25度，43度均不生長，但都能在37度生長。要加入血液血清才能生長，常用Skirrow，Butzler，CampyBAP等培養(yǎng)基，滴片可見投鏢式或螺旋狀。幽門螺桿菌：氧化酶+過氧化氫酶+，微需氧，37度生長，25度和42均不生長的G-菌，初分要三四天，與十二脂腸潰瘍和胃癌有關(guān)。伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)分類的標(biāo)準(zhǔn)：G染特性，形態(tài)，鞭毛，芽胞，莢膜，代謝產(chǎn)物。有芽胞的厭氧菌只有梭菌屬包括83個種。厭氧菌每克糞中高達(dá)

18、1012個，標(biāo)本絕不能被正常菌污染，應(yīng)盡量避免接觸空氣。最理想的標(biāo)本是組織，送到實驗室后2030分鐘內(nèi)處理完不超過2H。應(yīng)接種固體和液體兩種培養(yǎng)基：盡量用新鮮培養(yǎng)基，24小時內(nèi)用完，應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10分鐘以驅(qū)氧并立即冷卻。每份標(biāo)本至少接種三個血平板，置于有氧，無氧，5%-10%CO2環(huán)境中培養(yǎng)。厭氧手套箱培養(yǎng)法是迄今最佳厭氧培養(yǎng)儀器之一，太氧狀態(tài)的指示劑有：美藍(lán)和刀天青，無氧時白色，有氧時美藍(lán)藍(lán)色，刀天青粉紅色。紫外線下出現(xiàn)熒光也是厭氧菌參考之一，卡那霉素用于梭桿菌與類桿菌的區(qū)分，甲硝唑用于厭氧菌和非厭氧菌的區(qū)別。氣液相色譜已成為鑒定厭氧菌及其分類比較可靠的方法。破傷風(fēng)桿

19、菌：鼓槌狀，早期培養(yǎng)G+，48H后特別是芽胞形成后G-，的O和H抗原，主要癥狀為骨骼肌痙攣，不發(fā)酵糖類，能液化明膠產(chǎn)H2S。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+，2050均能生長，最適為45度，雙層溶血，可分解糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，出現(xiàn)洶涌發(fā)酵現(xiàn)象，分5型，主要是A型，外毒素以A毒素為主本質(zhì)是卵磷脂酶，有捻發(fā)感，青霉素為首選，萬古為次選。肉毒梭菌：G+，芽胞膠囊于次極端呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀，嚴(yán)格厭氧，8型，以A，B多見，毒素不耐熱，一分鐘煮沸即死。艱難梭菌：分離困難，主要以臨床和毒素來定，產(chǎn)生A，B兩種，A是腸毒素，B為細(xì)胞毒素，主要是因為使用大量抗生素，以克林霉素常見。無芽胞厭氧菌是一大類正常菌群，引起感染是內(nèi)源性感染

20、。黑色消化鏈球菌：G+，組織和器官感染。韋榮球菌屬（分小，產(chǎn)堿），G-，小見于上呼吸道感染，產(chǎn)堿見于腸道感染。白喉棒狀桿菌：G+，無莢無芽無鞭無毛，奈瑟染色成黃褐色顆粒成紫黑色，阿培特染色菌體呈藍(lán)綠色，異染顆粒成藍(lán)黑色。分離培養(yǎng)主要用：血平板，呂氏血清斜面（生長迅速，灰白色，S型，形態(tài)典型），亞碲酸鉀血瓊脂（菌落黑色）。一般不侵入血，但外毒素可入血引起毒血癥，不能立即送檢時應(yīng)浸于無菌生理鹽水或15%甘油鹽水中，出現(xiàn)各種心肌炎，軟腭麻痹是白喉晚期死亡的主要原因。需氧芽胞菌除炭疽外均有鞭毛。炭疽桿菌：最大的致病G+桿菌，菌落低倍鏡下卷發(fā)狀，不分解乳糖，對碘和氧化劑敏感，有菌體多糖，莢膜多肽，芽胞，

21、炭疽毒素四抗菌素原，用1：1000的升汞固定5分鐘，其選擇培養(yǎng)基是成烷脒血平板，鑒定試驗有：串珠試驗，噬菌體試驗，重碳酸鹽毒力試驗（有毒力形成芽胞呈M型），青霉素抑制試驗等。蠟樣桿菌能耐受100度30分鐘。產(chǎn)單核李斯特菌：對人致病，B溶血，25度有動力，能在4度進(jìn)行冷增菌，在半固體中可現(xiàn)倒傘狀，通過胎盤或產(chǎn)道感染新生兒是重要特點，常伴EB病毒引起傳單。分枝桿菌細(xì)胞壁含大量脂類，可占干重的60%，無內(nèi)外毒素，致病性與其索狀因子，蠟質(zhì)D，分枝菌酸有關(guān)。結(jié)核分枝桿菌：人型和牛型，曾發(fā)現(xiàn)G+非抗酸顆粒稱MUCH顆粒，無芽無鞭無莢，燭缸法不適，應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)皿，常用羅琴或米氏7H10培養(yǎng)基，3540度

22、可長，3537最適，PH6.56.8，18h分裂一代，26周才能長出菌落，不發(fā)酵糖類，人型的煙酸，硝酸鹽還原，煙酰胺酶試驗均陽性?？沙霈F(xiàn)KOCH現(xiàn)象（初次不發(fā)生速發(fā)型過敏反應(yīng)），是KOCH在1891年觀察到。HAMSEN在1937年發(fā)現(xiàn)麻風(fēng)桿菌，G+，無動力無芽無莢，人是唯一的宿主和傳染源，分瘤型和結(jié)核型。多數(shù)非發(fā)酵菌培養(yǎng)溫度以30度為宜，故常規(guī)應(yīng)先培養(yǎng)于3537，再培養(yǎng)于30或室溫，觀察動力以30或室溫1224小時滴片為準(zhǔn)。氧化發(fā)酵試驗是確定非發(fā)酵與發(fā)酵菌是否利用糖的基本試驗。HUGHLEIFSON設(shè)計的培養(yǎng)基只含0。2%蛋白胨，1%糖，指示劑是溴香草酚蘭。銅綠假單胞菌：G-，有鞭毛，204

23、2度長，最適是35，4度不長，液面可形成菌膜，色素有：綠膿素（溶于水和氯仿），熒光素是綠色熒光素（溶于水不溶于氯化）。不動桿菌的特征是：氧化酶，硝酸鹽還原，動力試驗均陰性。主要是鮑曼和洛菲。流感嗜血桿菌要新鮮血液（含X和V因子），用石碳酸復(fù)或美藍(lán)單染呈現(xiàn)兩端濃染，有衛(wèi)星現(xiàn)象，副流感嗜血桿菌生長只要V因子。軍團(tuán)菌：1976年，USA費城，常規(guī)不易著色，最適為36度，初次分離要L半膀氨酸，含鐵鹽可促進(jìn)生長，主要可用活性碳酵母浸出液平板（BCYE），不分解糖。百日咳鮑特菌和副百日咳鮑特菌是百日咳病原菌，常用鮑金培養(yǎng)基，有百日咳毒素，絲狀血細(xì)胞凝聚素和腺嘌呤環(huán)化毒素。衣原體：沙眼，鸚鵡，肺炎。原體：姬

24、染紫紅色，無繁殖力有傳染性。始體（網(wǎng)狀體），姬染蘭色，為繁殖型無傳染性，二分裂式。營專性細(xì)胞內(nèi)寄生。鼠亞種沙眼不侵犯人類，性病肉芽腫由沙眼LGV生物亞種（L1,L2,L3）三血清型引起。立克次體：人畜共患，有復(fù)雜的酶系統(tǒng)，對多種抗生素敏感。發(fā)熱多是稽留熱，恙蟲M染色是藍(lán)色，G染色呈暗紅色。除羅沙利馬體，巴爾通體外其它立克次體只能活在真核細(xì)胞內(nèi)，普氏（流行性和復(fù)發(fā)型斑疹）以人的體虱為傳播媒介，莫氏（地方性斑疹），印鼠客蚤，補(bǔ)體結(jié)合試驗是立克次體最常用的方法。支原體：無細(xì)胞壁，僅有細(xì)胞膜（外，中，內(nèi)，中間是脂質(zhì)，內(nèi)外是蛋白質(zhì)），最適PH7.68.6，D在95%N2，5%CO2中生長好，菌落呈“荷包

25、蛋）樣，肺炎支原體：分離培養(yǎng)是確診支原體感染的可靠方法之一，40倍鏡下可見油滴狀菌落，100倍下可見桑椹狀菌落。對人致病的厭氧主要是衣氏和牛氏放線菌，可見硫磺顆粒（放射狀），需氧主要是諾卡菌和馬杜拉放線菌（主要致病是足分枝菌）。星形諾卡菌致病最強(qiáng)，其次是巴西和脯鼠，抗酸染色有一定抗酸性可初步確定為諾卡菌。鉤體是致病性螺旋體中唯一能人工培養(yǎng)的，常用柯氏培養(yǎng)基，對酸堿敏感，最適是7.27.4，低于6.8，高于7.7生長不良，最適溫2830，12小時分裂一次，伯氏疏螺旋體引起萊姆病。肝素抗凝全血不影響病毒培養(yǎng)。乙腦病毒以接種卵黃囊最佳，嗜神經(jīng)病毒最好接種小鼠腦內(nèi)，包涵體檢查不是特異性檢查。流感病毒：

26、核心，基質(zhì)蛋白（M蛋白），包膜（由血凝素（HA）神經(jīng)氨酸酶（NA）后者是劃分流感病毒亞型的依據(jù)，易變異?？乖儺愋r是漂移，大時（形成新的亞種）是轉(zhuǎn)變。初次分離以接種羊膜腔最佳。副黏病毒：呼吸道合胞病毒是引起嬰幼兒下呼吸道疾病最常見的病毒，合胞體形成細(xì)胞融合多核巨細(xì)胞，胞內(nèi)有嗜酸性包涵體。副流感病毒（單負(fù)股RNA）最敏感的細(xì)胞是原代人胚腎和原代猴腎細(xì)胞，最常用的方法是紅細(xì)胞吸附抑制試驗，血清學(xué)診斷難。腺病毒：不能在雞胚中增殖，只能在人源的組織細(xì)胞中增殖，有嗜堿性包涵體，24小時換培養(yǎng)液一次，避免細(xì)胞毒效應(yīng)。腸道病毒（單正股RNA）是人類最常見最重要的病毒。流腦病毒的結(jié)構(gòu)蛋白有：M（包膜內(nèi)），C

27、（衣殼內(nèi)），E（嵌在包膜上的糖蛋白）三種，組成血凝素，最易感染的動物是出生23天的乳鼠，通過三帶喙庫蚊傳播，豬是最重要的宿主和傳染源。森林腦炎由蜱傳播。出血熱病毒（單負(fù)股RNA）：漢坦病毒：可在人肺傳代細(xì)胞（A549）非洲綠猴腎細(xì)胞（VERE6）人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS）及地鼠腎細(xì)胞中增殖不引起明顯變化，我國流行的是I和II型，伴三痛（頭，眼眶，腰）及紅（面，頸，上胸部）。新疆出血熱病毒，登革熱：四個血清型，接種白紋伊蚊的傳代細(xì)胞（C6/36株）。病毒分離培養(yǎng)是HSV感染實驗室診斷的最敏感方法，水痘帶狀皰疹（VZV，雙股DNA）能在人胚二倍體細(xì)胞（HFDK）或人胚二倍體肺細(xì)胞（HFDL）中增殖

28、，巨細(xì)胞病毒種屬特異性高，只能感染人，只能在成人纖維細(xì)胞中增殖，核內(nèi)有嗜堿性包涵體形似貓頭鷹眼。EB病毒一般用人臍血淋巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，主要侵犯B細(xì)胞，引起增殖和非增殖感染，狂大病毒：（單負(fù)股RNA）外形如子彈狀，在中樞神經(jīng)細(xì)胞中形成嗜酸性包涵體稱內(nèi)基小體。絕大部分致病性真菌屬于半知菌亞門。形態(tài)有單細(xì)胞和多細(xì)胞兩種，基本結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，鹿角狀菌絲僅見于黃癬菌，假菌絲與真菌絲的主要區(qū)別是它壁兩邊有時交叉，是由孢子延長而來，有性孢子有：卵，接合，子囊，擔(dān)。無性孢子有：葉狀，分生，孢子子囊。最常用沙保弱氏，最適溫2228，最適PH56，培養(yǎng)4周以上，真菌菌落三型：酵母型，酵母樣

29、，絲狀?？捎?0%氫氧化鉀加熱使標(biāo)本透明。血清出芽試驗有芽管出者為白念菌，念珠菌中僅白念菌產(chǎn)厚壁孢子，試管培養(yǎng)是真菌分離，傳代，保存菌種最常用的方法。鑒定曲霉常用察氏瓊脂，以煙曲霉菌居多。藥敏：KB法（半定量），公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)法，采用水解酪蛋白（MH）瓊脂，PH7.2，90mm內(nèi)徑，注入2530ml，厚度為4mm，抗菌藥片直徑6.35mm，吸水量20微升。0.5麥?zhǔn)媳葷峁芟喈?dāng)于1.5X108/ml。校正后的菌液應(yīng)在15分鐘內(nèi)接種。各藥敏紙片間距不少于24mm，距平板內(nèi)緣不小于15mm。對所有產(chǎn)ESBLS的菌株應(yīng)報告耐所有青霉素，頭孢類及氨曲南。自泌尿道分離的腸桿菌不報氯霉素的敏感性。利福平不能單獨

30、用于化療。至今還未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)B內(nèi)酰胺酶的肺鏈。至今未發(fā)現(xiàn)肺鏈對萬古的抑菌圈小于17mm。定量評價抗菌藥物殺菌效力的試驗主要是最低殺菌濃度（MBC）和殺菌曲線。抑菌濃度指數(shù)（FIC），2拮抗作用。目前院內(nèi)感染主要是G-桿菌。 寄生蟲 宿主分：終，中間，儲存或保蟲，轉(zhuǎn)續(xù)。寄生蟲對宿主：奪取營養(yǎng)，機(jī)械損傷，化學(xué)毒，變應(yīng)原作用。流行特點：地方性，季節(jié)性，自然疫源性。土源性蠕蟲不用中間宿主生物源性要， 蛔蟲感染期23個月，成蟲在小腸以空腸多，。鞭蟲寄生于肓腸生活史約一個月，人是唯一傳染源，蟯蟲寄生于回肓部，鉤蟲的絲狀蚴為感染期成蟲在小腸部可致大糞毒，黃腫病，異嗜癥，桑葉黃。絲蟲絲狀蚴寄生于大淋巴管或淋巴結(jié)內(nèi)

31、可致流火，象皮腫，乳糜尿。吸蟲除血吸蟲外都是雌雄同體。旋毛蟲：成蟲和幼蟲在同一宿主，不用在外發(fā)育，但要轉(zhuǎn)換宿主，被寄生的宿主又是中間宿主，致病分：侵入期，幼蟲移行期，囊包形成期。檢驗心活組織最可靠，免疫學(xué)檢驗是臨床最常用的方法。吸蟲除血吸蟲（圓柱狀，雌雄異體，蟲卵致病最重）外都是兩側(cè)對稱，華枝睪吸蟲卵最小，姜片蟲蟲卵最大，肺吸蟲第一中間宿主為川卷螺，第二為淡水石蟹，囊蚴是感染期，致病分：膿腫期，包囊期，纖維瘢痕期。人是豬帶絳蟲唯心史觀一終宿主，豬或人是中間宿主。人是牛帶絳蟲唯一終宿主，只被成蟲寄生。痢疾阿米巴：包囊小滋養(yǎng)體-包囊。杜氏利什曼蟲：黑熱病，分人源型（平原型），犬源型（山丘型），野生

32、動物型（荒漠型），主要要防治白蛉。陰道滴蟲有4根前鞭毛和1根后鞭毛。隱孢子蟲以空腸上端感染最重，是艾滋病主要死因之一。 實驗室管理 1946年Belk和Sunderman首先調(diào)查了不同實驗室間差異很大。1950年Levey和Jennings首先將Shewhart（USA，首先提出）工業(yè)質(zhì)量管理上的控制圖移植到醫(yī)學(xué)檢驗中來。誤差是測定值與真值的差。精密度是每次測定值與算術(shù)平均值的符合程度。系統(tǒng)誤差決定正確度，可以校正和設(shè)法消除增加次數(shù)不能減少。隨機(jī)誤差決定精密度，不能修正，但可增加次數(shù)來減小。含有過失誤差的值為異常值。有效數(shù)字按照：四舍六入五單雙的原則。平均數(shù)是統(tǒng)計學(xué)中應(yīng)用最廣最重要的一個指標(biāo)體

33、系，用來說明一組變量值的集中趨勢，中心位置或平均水平。均數(shù)應(yīng)用于：描述一組變量的平均水平具有代表性因而需同質(zhì)，用于呈正態(tài)分布的資料，只能反應(yīng)數(shù)據(jù)集中趨勢。正態(tài)分布總面積為1或100%，理論上：u+-o 占總面積68%，u+-1.96o占95%， u+-2.85o占99%。質(zhì)控品要瓶間變異小，酶類項目一般CV%應(yīng)小于2%，其它分析物應(yīng)小于1%，凍干品其復(fù)溶后穩(wěn)定，28度不少于24小時，零下20度不少于20天，某些不穩(wěn)定成份復(fù)溶前后4小時變異小于2%。質(zhì)控品到實驗室后有效期一年以上。失控檢查測定方法本身才是最有效的方法。最有意義的是真失控批數(shù)和假失控批數(shù)和與之相應(yīng)的誤差檢出率（Ped，類似診斷試驗

34、的靈敏度）和假失控率（Pfr，相當(dāng)于診斷試驗的特異性），一般臨床檢驗質(zhì)量控制上Pfr值為何。0.01到0.05范圍內(nèi)的假失控率是可被認(rèn)為合理的。功效函數(shù)圖的重要作用是在控制方法的設(shè)計上保證常規(guī)試驗達(dá)到規(guī)定的質(zhì)量水平，并表達(dá)當(dāng)分析批中存在隨機(jī)誤差或系統(tǒng)誤差時決定分析批失控的概率。病人數(shù)據(jù)質(zhì)量控制種類：正態(tài)均值法（1965年Hoffmann Waid），眾數(shù)判斷法，移動均值法（由Bull建立，用于血液學(xué)。）Delta檢驗系統(tǒng)，陰離子隙法，酸堿平衡法。允許總誤差可用為室內(nèi)質(zhì)控方法設(shè)計的起點亦可為室間質(zhì)量評價的標(biāo)準(zhǔn)，能力評價采用Z比分?jǐn)?shù)時：Z小于或等于2時為滿意，大于2小于3時為有問題，大于3時為不滿

35、意。每一次活動每一分析項目未能達(dá)到至少80%可接受成績稱為本次活動該分析項目不滿意。實驗室對文件記錄必須保存兩年以上。計劃必須提供每次活動至少5個標(biāo)本，一年三次。要保留所有發(fā)給出組織者的文件的復(fù)印件，實驗方法的評價：重復(fù)性試驗：考察候選方法的隨機(jī)誤差?；厥赵囼灒褐饕糜诖_定比例誤差。干攏試驗：衡量候選方法的準(zhǔn)確度形成恒定系統(tǒng)誤差。 檢驗知識拾趣： 呂文虎克（荷蘭，發(fā)明顯微鏡），琴納（英國，創(chuàng)制牛痘疫苗），巴斯德（巴氏消毒法），李斯德（創(chuàng)消毒外科），郭霍（首先用固體培養(yǎng)基分離細(xì)菌和創(chuàng)郭霍氏鑒定原則），赫賽夫（建議用瓊脂作培養(yǎng)基），貝林（制白喉抗毒素獲諾貝爾），艾利希（抗體形成體液說），梅奇尼可夫（蘇聯(lián)，細(xì)胞免疫學(xué)說），伊凡洛夫基證明煙草花葉病是病毒引起。