2022年專(zhuān)題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)-知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

1、專(zhuān)題三 植物的組織培育技術(shù) 脫分化和再分化；菊花的組織培育 2 養(yǎng)分：常用的培育基是 MS固體培育基,其中含有的大量元素是 N、P、S、K、1. 細(xì)胞分化指在生物個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,相同細(xì)胞的后代在外形、 結(jié)構(gòu)和生理功能 Ca、Mg,微量元素是 Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 、Co,它們供應(yīng)了植物細(xì)胞所上顯現(xiàn)穩(wěn)固性差異的過(guò)程； 細(xì)胞分化使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能趨向特地 化,有利于提高各種生理功能的效率；2. 具有某種生物全套遺傳信息的任何一個(gè)活細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛必需的無(wú)機(jī)鹽； 有機(jī)物有甘氨酸、 煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等；蔗糖供應(yīng)碳源,維護(hù)細(xì)胞滲透壓； 甘氨酸、維生素等物

2、質(zhì)主要是為了滿(mǎn)意離體植物細(xì)胞在正常代 謝途徑受到肯定影響后所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求；微生物培育基以有機(jī)養(yǎng)分為主,能,叫做植物細(xì)胞的全能性； 但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中并未表現(xiàn)出來(lái),這是MS培育基就需供應(yīng)大量無(wú)機(jī)養(yǎng)分；由于在特定的時(shí)間和空間條件下,通過(guò)基因的挑選性表達(dá), 形成了不同組織和器 3 激素：植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的官；3. 離體的植物組織或細(xì)胞, 在相宜條件下培育了一段時(shí)間以后, 會(huì)通過(guò)細(xì)胞分裂,關(guān)鍵性激素；使用次序試驗(yàn)結(jié)果生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果形成愈傷組織, 這種由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程,稱(chēng)為植先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素有利于分裂但

3、不分化比值高時(shí)促根分化,抑芽形成物細(xì)胞的脫分化（去分化） ；愈傷組織連續(xù)進(jìn)行培育,又可以重新分化成根或芽 等器官,這個(gè)過(guò)程叫做再分化；4. 愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)章,是一種高度液泡化的呈無(wú)定外形態(tài)的薄 壁細(xì)胞；先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化比值低時(shí)促芽分化,抑根形成同時(shí)使用分化頻率提高比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)4環(huán)境條件：菊花的組織培育,一般將pH 掌握在左右,溫度掌握在1822,并且每日用日光燈照耀12h. 5. 植物組織培育技術(shù)廣泛應(yīng)用在實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁衍、培育無(wú)病毒作物、 制6. 菊花組織培育的操作流程包括：配制MS固體培育基外植體的消毒接種作人工種子、培育作物新品種以及

4、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面；培育移栽栽培5. 影響植物組織培育的條件有材料、養(yǎng)分、激素及環(huán)境條件；7. 制備 MS固體培育基的步驟是：配置各種母液配制培育基滅菌；先將各種 1 材料：植物材料的挑選直接關(guān)系到試驗(yàn)的成?。痪栈ńM織培育一般挑選未開(kāi) 成分按配方比例配制成濃縮液（培育基母液）；然后在容器中加入瓊脂（加熱融花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料；一般來(lái)說(shuō), 簡(jiǎn)單進(jìn)行無(wú)性繁衍的植物簡(jiǎn)單 化）,依次加入蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液,并用蒸進(jìn)行組織培育； 選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的緣由是嫩枝生理狀態(tài)好,簡(jiǎn)單誘導(dǎo) 餾水定容到 1000 毫升,調(diào)劑 PH,分裝到錐形瓶中,用高壓蒸汽滅

5、菌法進(jìn)行無(wú)菌處理；原生質(zhì),核位于細(xì)胞的中心（單核居中期）；隨著細(xì)胞不斷長(zhǎng)大,細(xì)胞核由中心8. 外植體是指用于離體培育的植物器官或組織片段；取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝用流水 移向細(xì)胞一側(cè)（單核靠邊期） ,并分裂成 1 個(gè)生殖細(xì)胞核和 1 個(gè)花粉管細(xì)胞核,沖洗加少許洗衣粉刷洗在流水下沖洗 20min 左右無(wú)菌吸水紙吸干表面水 進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞, 一個(gè)是生殖細(xì)胞, 一個(gè)是養(yǎng)分細(xì)胞； 生殖細(xì)胞將再分裂一次,分體積分?jǐn)?shù)為 70%的酒精中搖動(dòng) 23 次,連續(xù) 67s,無(wú)菌水中清洗用無(wú)菌 形成兩個(gè)精子（基因組成完全相同）；吸水紙吸干表面水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的氯化汞溶液中 12min無(wú)菌水中至少清 4. 通過(guò)花藥培育產(chǎn)生

6、單倍體植株有兩種途徑,一種是花粉通過(guò)胚狀體階段發(fā)育為洗 3 次,漂洗消毒液； 應(yīng)留意對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí),就要考慮藥劑的消毒效 植物,另一種是花粉在誘導(dǎo)培育基上先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株；果,又要考慮植物的耐受才能；這兩種途徑不同主要取決于培育基中激素的種類(lèi)及其濃度配比；9. 接種過(guò)程中插入外植體時(shí)外形學(xué)上端朝上,每個(gè)錐形瓶接種78 個(gè)外植體,5. 胚狀體是植物體細(xì)胞組織培育過(guò)程中, 誘導(dǎo)產(chǎn)生的外形與受精卵發(fā)育成的胚類(lèi)整個(gè)過(guò)程要求無(wú)菌操作；似的結(jié)構(gòu),有胚芽、胚根、胚軸等完整結(jié)構(gòu),就像一粒種子；10. 放在無(wú)菌箱中培育, 定期進(jìn)行消毒, 保持相宜的溫度 （1822）和光照（12h）6

7、. 影響花藥培育的主要因素是材料的挑選與培育基的組成；應(yīng)當(dāng)選月季的初花11移栽前先打開(kāi)培育瓶的封口膜,讓其在培育間生長(zhǎng)幾日, 然后用流水清洗根 期（花粉早期的花藥比后期更簡(jiǎn)單產(chǎn)生花粉植株；挑選單核靠邊期（花藥培育成部培育基, 將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍寶巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間壯苗,最 功率最高）；挑選完全未開(kāi)放的花蕾（有利于材料的消毒）；后進(jìn)行露天栽培；7. 挑選花藥時(shí),用醋酸洋紅法使細(xì)胞核中的染色體著色,通過(guò)鏡檢來(lái)挑選單核靠12. 外植體在培育過(guò)程中可能會(huì)被污染,緣由有外植體消毒不完全；培育基滅菌 邊期的花粉；如不易著色,需采納焙花青-鉻礬法將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色；不完全；接種中被雜菌污染

8、；錐形瓶密封性差等；8. 滅菌后的花蕾, 要在無(wú)菌條件下除去萼片和花瓣,并立刻將花藥接種到培育基月季的花藥培育 上；在剝離花藥時(shí), 要盡量不損耗花藥 （否就接種后簡(jiǎn)單從受傷部位長(zhǎng)出愈傷組1. 被子植物的雄蕊包含花絲、 花藥兩部分； 花藥為囊狀結(jié)構(gòu), 內(nèi)部含有很多花粉；織）,同時(shí)仍要完全去除花絲,由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞；的形成；2. 被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)受小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段；9. 每瓶接種花藥 710 個(gè), 溫度掌握在 25左右 , 幼小植株形成后賜予光照,培3. 在小孢子四分體時(shí)期, 4 個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起,進(jìn)入單核期時(shí),四分體的4養(yǎng) 2030 天后, 花藥開(kāi)裂長(zhǎng)出愈傷組織或形成胚狀體；此時(shí)要將愈傷組織準(zhǔn)時(shí)轉(zhuǎn)個(gè)單倍體細(xì)胞