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文檔簡介

1、食品快速檢測技術(shù)匯總!摘要包括樣品制備在內(nèi),能夠在短時間內(nèi)出據(jù)檢測結(jié) 果的行為稱之為快速檢測。快速檢測體現(xiàn)在三方面:實驗準(zhǔn) 備要簡化;樣品經(jīng)簡單前處理后即可測試,后采用先進快速 的樣品處理方式;分析方法簡單,快速,準(zhǔn)確。食品安全問題主要有害污染物:農(nóng)藥,化肥:有機磷,有 機氯,硝酸鹽;獸藥:興奮劑,鎮(zhèn)靜劑,抗生素;重金屬離 子:鎘,鉛,汞,銘,碑,鉬;生物毒素:黃曲霉毒素,嘔 吐毒素,肉毒素;致病菌:大腸桿菌,沙門氏菌,葡萄球菌??焖贆z測:包括樣品制備在內(nèi),能夠在短時間內(nèi)出據(jù) 檢測結(jié)果的行為稱之為快速檢測??焖贆z測體現(xiàn)在三方面: 實驗準(zhǔn)備要簡化;樣品經(jīng)簡單前處理后即可測試,后采用先 進快速的樣

2、品處理方式;分析方法簡單,快速,準(zhǔn)確。食品安全快速檢測分類:1.按分析地點:現(xiàn)場快速檢 測,實驗室快速檢測;2.按定性定量:定性快速篩選檢驗, 半定量檢驗,全量檢驗。農(nóng)藥殘留檢測方法:(一)生物法:生物化學(xué)測定法(酶 抑制率法,速測卡法);分子生物學(xué)方法(如:ELISA);活體 生物測定法(發(fā)光細(xì)菌,大型水藻,家蠅);生物傳感器法。(二) 化學(xué)方法:酶抑制法、酶聯(lián)免疫檢測法。免疫定義:機體識別自身非自身,并清除非自身大分子物質(zhì),從而保持機體內(nèi)外環(huán)境平衡的一種生理反應(yīng)。免疫基本特征:識別自身和非自身,特異性,免疫記 憶。免疫的基本功能:抵抗感染,自身穩(wěn)定,免疫監(jiān)視。抗原定義:能刺激機體產(chǎn)生免疫答

3、應(yīng),并且能與答應(yīng) 物(抗體或效應(yīng)性淋巴細(xì)胞)特異性結(jié)合的物質(zhì),稱為抗原 (Antigen,Ag)。抗原具有抗原性:免疫原性,反應(yīng)原性??乖诸悾ò纯乖再|(zhì)):完全抗原,半抗原(某些藥 物??乖砦?,又稱抗原決定簇:是位于抗原物質(zhì)分子表 面或者其他部位的具有一定組成和結(jié)構(gòu)的特殊化學(xué)基團??贵w:有抗原刺激動物的免疫系統(tǒng)后,由免疫系統(tǒng)B 細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生,分泌的一類能與相應(yīng)抗原特 異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。并非所有的免疫球蛋白 都是抗體??贵w基本結(jié)構(gòu):a.重鏈H2條輕鏈L2條b.恒定區(qū)C 區(qū)可變區(qū)V區(qū)c.鉸鏈區(qū)抗原結(jié)合片段心 可結(jié)品片段。ELISA的原理:抗原或抗體能以物理性吸附于固

4、相載 體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸 附,并保持其免疫學(xué)活性;抗原或抗體可通過共價鍵與酶連 接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué) 活性;酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物 的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的 深淺是與標(biāo)準(zhǔn)中相應(yīng)抗原或抗體的量成一定比例的,因此, 可以按底物顯色的程度顯示實驗結(jié)果。ESISA的類型:雙抗夾心法(測微生物);間接法測抗 體;競爭法測抗原(化肥農(nóng)藥)。雙抗體夾心法基本原理:利用連接于固相載體上的抗 體和酶標(biāo)抗體分別與樣品中被檢測抗原分子上兩個抗原決 定簇結(jié)合,形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物,由

5、于 反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標(biāo)抗體的量相對于待測抗原是過 量的,因此復(fù)合物的形成量與待測抗原的含量成正比(在方法 可檢測范圈內(nèi)),測定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成 的有色物質(zhì)量(OD值),即可確定待測抗原含量。間接法測抗體基本原理:將抗原連接到固相載體上, 樣品中待測抗體與之結(jié)合成固相抗原-受檢抗體復(fù)合物,再用 酶標(biāo)二抗(針對案檢抗體的抗體,如羊抗人ICG抗體)與固相 免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合,形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二 抗復(fù)合物,測定加底物后的顯色程度,測定待測抗體含量。競爭法測抗原基本原理:首先將特異性抗體吸附于固 相載體表面(包被),經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原 和被測抗原的

6、混合液,而另一組只加酶標(biāo)記抗原,標(biāo)本中的 抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)會(標(biāo)本中抗原 量含量愈多,結(jié)含在固相上的酶抗原愈少,最后的顯色也愈 淺),再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色,兩組底物降解量之差,即 為我們所要測定的未知抗原的量。農(nóng)藥殘留生物化學(xué)測定方法:農(nóng)藥速測卡法;農(nóng)藥殘 留分光光度法(抑制率法)。速測卡法檢測原理:膽堿醋酶可催化靛酚乙酸酮(紅 色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色)有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對 膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解,變色的過程發(fā)生改變, 由此判斷樣品中是否含有過量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥 的殘留。分析步驟:A.提?。焊蓛舻牟藰悠?剪碎(1CM左 右見方)-取5g于帶

7、蓋瓶中-加純凈水或緩沖溶液(l0mL)- 震搖(50次)-靜置(2min以上)。B.預(yù)反應(yīng):取一片速測卡, 用白色藥片沾取提取液,放置10min以上進行預(yù)反應(yīng),有條 件時在37恒溫裝放置中10min.預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須 保持濕潤。C.反應(yīng):將速測卡對折,用手捏3min或用恒溫 裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)d.每批 測定應(yīng)設(shè)一個純凈水或緩沖液的空白對照卡。速測卡法結(jié)果判定:與空白對照卡比較,白色藥片不 變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果,不變藍(lán)為陽性結(jié)果,說明 農(nóng)藥殘留量較高,顯淺藍(lán)色為弱陽性結(jié)果,說明農(nóng)藥殘留兩 相對較低。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或空白對照卡片相同,為陰 性結(jié)果。

8、對陽性結(jié)果的樣品,可用其他分析方法進一步確定 具體農(nóng)藥品種和含量。農(nóng)藥殘留分光光度計法(抑制率法)原理:一定條件下, 有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酶正常功能有抑制作用, 其抑制率與農(nóng)藥的濃度成正相關(guān).,正常情況下,酶催化乙酰 膽堿水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分 光光度計在412nm處測定發(fā)光度隨時間的變化值,計算出抑 制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否有有機磷確和氨基 甲酸酯類農(nóng)藥的存在。酶傳感器:它將活性物質(zhì)酶覆蓋在電極表面,酶與被 測的有機物或無機物反應(yīng),形成一種能被電極響應(yīng)的物質(zhì)。生物傳感器在食品分析中的應(yīng)用:食品成分分析;食 品添加劑的分析;農(nóng)藥和抗生素殘留量分析

9、;微生物和生物 毒素的檢驗;食品限度的檢驗。蔬菜中硝酸鹽含量的快速測定原理:將 NO3-還原 N02-后,芳香胺與亞硝酸根離子發(fā)生重氮化反應(yīng),生成重氮 鹽,重氮鹽再與芳香族化合物發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),生成一種紅顏 色偶氮化合物(偶氮染料),其顏色強度與硝酸鹽含量呈正比, 通過試紙由無色變?yōu)榧t色,變色的試紙放入基于光學(xué)傳感器 原理的硝酸鹽檢測儀中比色測定硝酸鹽含量。儀器與材料: 硝酸鹽試紙.快速測定儀。硝酸鹽速測管:適用范圍:乳品、飲用水、蔬菜等食 物中硝酸鹽的快速檢測;方法原理:按照國標(biāo)GB5009.33鹽 酸萘乙二胺顯色原理,在格林試劑中加入硝酸鹽轉(zhuǎn)化劑,并 將其做成速測管,速測管中的試劑可將N03

10、-還原為N02-后, 再與芳香胺(氨基苯磺酸)發(fā)生重氮反應(yīng),生成重氮鹽,重氮 鹽再與芳香族化合物(A-祭胺)發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),生成紅色偶氮 化合物(又叫偶氮染料),顏色深淺與硝酸鹽含量成正比,與 標(biāo)準(zhǔn)色卡比對,確定硝酸鹽含量。獸藥殘留定義:動物產(chǎn)品的任何可食部分所含獸藥的 母體化合物及其代謝物,以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)殘留。獸藥殘留快速檢測微生物法檢測原理:檢測管中的培 養(yǎng)基預(yù)先接種了嗜熱脂肪芽孢桿菌,并含有細(xì)菌生長所需的 營養(yǎng)以及pH指示劑。只需加入100ul樣品于檢測管中。將 含有樣品的檢測管放入641C水浴中加熱一段時間。奶或奶 制品在培養(yǎng)基中迅速擴散,若該樣品中不含有抗生素(或者抗 生素低于檢

11、測值),嗜熱脂肪芽孢桿菌將在培養(yǎng)基中生長,葡 萄糖分解后所產(chǎn)生的酸會改變pH指示劑顏色,由紫色變?yōu)?黃色。相反若高于檢測限的抑菌劑,則嗜熱脂肪芽孢桿菌不 會生長,指示劑顏色不變?nèi)詾樽仙?。黃色表明該樣品沒有抗 生素殘留或抗生素殘留的含量低于試劑盒的檢測限(陰性), 紫色表明該樣品中含有抗生素殘留且濃度高于試劑盒的檢 測限(陽性)如果介于黃色紫色之間,則說明該樣品可能不含 抗生素殘留或者抗生素殘留的含量低于試劑盒的檢測限(部 分陽性)。膠體金概念:氯金酸在還原劑作用下,可聚合成一定 大小的金顆粒,形成帶負(fù)電的疏水膠溶液。由于靜電作用而 成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。免疫金標(biāo)記技術(shù)原理:膠體金顆粒表面負(fù)電荷與

12、蛋白 質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。膠體金對蛋白 質(zhì)有很強的吸附功能,蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒 表面,無共價鍵形成,標(biāo)記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。 金顆粒具有高電子密度的特性。金標(biāo)蛋白在相應(yīng)的配體處大 量聚集時,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅色或粉 紅色斑點。放射免疫測定法原理:放射免疫RIA:以標(biāo)記抗原與 反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合特異性抗體來測定的待檢 樣品中抗原量。免疫放射IRMA:以過量標(biāo)記抗體與抗原非 競爭結(jié)合,采用固相免疫吸附載體分離游離和結(jié)合標(biāo)記抗 體。其他:放射受體分析RRA;放射配體結(jié)合分析RBA。檢測食品中抗生素殘留的原理:1、每類抗生素族均是

13、在一個母環(huán)基礎(chǔ)上用不同功能團修飾星辰特定功效的抗生 素;2、微生物細(xì)胞表面都存在著能與各種抗生素功能基團 結(jié)合的特異受點。結(jié)合反應(yīng)是在標(biāo)記的靶參考物與無標(biāo)記的 待測藥物之間競爭進行的。競爭性檢測原理:使用一種具有吸附所有仔內(nèi)酰胺藥 物的特殊受體細(xì)菌,該細(xì)菌同14c標(biāo)記的特定量青霉素G 一 起加入牛奶樣品。牛奶樣品中的任何一直位內(nèi)酰胺類均能和 這種特殊標(biāo)記的青霉素G競爭性地與細(xì)菌cell上的特異性受 體結(jié)合。毒鼠強快速檢測原理:毒鼠強可以與二羥基萘二磺酸 發(fā)生反應(yīng)變?yōu)闇\紫紅色,檢出限1ug,最低檢出濃度2ug/ml 濃度高時變?yōu)樯钭霞t色。鼠藥氟乙酰胺的快速檢測速測管法檢測原理:氟乙酰 胺與奈氏試

14、劑反應(yīng)后會出現(xiàn)黃紅或棕色沉淀。最低檢出濃度 10ug/mlo敵鼠鈉鹽的快速檢測原理:敵鼠化學(xué)名為2-(二苯基 乙酰胺)-2, 3二氫-1, 3-茚三酮,可與三氯化鐵反應(yīng)出現(xiàn)磚 紅色。碑的快速檢測原理:三氧化二砷與鋅粒和酸產(chǎn)生的新 形態(tài)氫生成AsH3,其與氯化金相遇產(chǎn)生反應(yīng),可使氯化金 硅膠柱變成紫紅或灰紫色,在裝有氯化金硅膠的柱中碑含量 與變色的長度成正比,以次可達(dá)到半定量的目的。碑銻鉍汞銀化物的快速檢測方法:“雷因須氏法”。亞硝酸鹽的快速檢測方法原理:按國標(biāo)鹽酸萘乙二胺 顯色原理做成的速測管,與標(biāo)準(zhǔn)色卡對比定量。酒醇儀測定甲醇的檢測原理:在20C時,不同濃度 的乙醇具有固定的折光率,當(dāng)甲醇存

15、在時,折光率會隨著甲 醇濃度的增加而降低,下降值與甲醇的含量成正比。按照這 一現(xiàn)象而設(shè)計的酒醇含量速測儀,可快速顯示出樣品中酒醇 含量。當(dāng)這一含量與玻璃浮計測定出的酒醇含量出現(xiàn)差異 時,其差值即為甲醇含量。在20時可直接定量,在非20 時,采用于樣品相當(dāng)濃度的乙醇對照液進行對比定量。水法測水產(chǎn)品中甲醛的快速檢測原理:在堿性條件 下,甲醛與簡笨三酚反應(yīng)后使溶液出現(xiàn)橙紅色特征。由于此 方法的靈敏程度較低,水產(chǎn)品本底存在的甲醛很難參與反 應(yīng)。當(dāng)人為加入甲醛時,本方法可迅速檢測出來。變質(zhì)肉類的快速檢測原理:畜禽肉變質(zhì)后或病害肉, 其肉體內(nèi)的揮發(fā)性鹽基氮、ph值以及過氧化物酶都會發(fā)生改 變。測試酸堿度,

16、可初步反映出其新鮮程度;測試揮發(fā)性鹽基 氮,可判斷是否新鮮或腐敗;測試過氧化物酶,可初步判斷是 否是病害肉。牛乳中尿素的快速檢測原理:尿素能夠阻斷萘胺試劑 反應(yīng),不會生成紫紅色物資。由此證明乳品中含有尿素成分。 檢出限牛乳為濃度50mg/kg;乳粉濃度500mg/kg。乳品中淀粉和麥芽糊精的快速檢測原理:麥芽糊精或 淀粉與組合碘試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生棕色、紫色或棕紫色化合 物。乳品中pro含量的快速檢測原理:考馬斯亮藍(lán)試劑在 游離狀態(tài)下呈紅色,當(dāng)他與pro結(jié)合后變成青色,其顏色深 度與pro含量成正比。檢測范圍:液體樣品為/100g,固體樣 品為 1g-40g/100g。米面粉中吊白塊的快速檢測方法

17、:原理:甲醛次硫酸 氫鈉在食物中分解成甲醛、次硫酸氫鈉和so2。甲醛與AHMT 試劑反應(yīng)生成紫色化合物,檢出限為。水溶性非食用色素的快速檢測原理:水溶性非食用色 素與脫脂羊毛染色后不易去除的原理對部分水溶性非食用 色素進行檢測。味精谷氨酸鈉的快速檢測原理:利用谷氨酸鈉的兩性 作用,加入甲醛一固定谷氨酸鈉的堿性,使羥基顯示出酸性, 用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,以指示劑顯示為終點,得出樣品 中谷氨酸鈉的含量。黃曲霉毒素:AF是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物,均 為二氫呋喃環(huán)和香豆素的衍生物。目前已發(fā)現(xiàn)20多種。B1 是最危險的致癌物,熒光特性:紫外線下B1B2發(fā)藍(lán)色熒光, G1G2發(fā)綠色熒光。黃曲霉毒素AF

18、的快速檢測技術(shù):免疫親和柱-熒光分 光光度計法和免疫親和柱-HPLC法。(1)分析原理:免疫親和 柱試用大劑量的黃曲霉毒素的單克隆抗體固化在水不溶性 的載體上,然后裝柱而成。試樣中AF用一定比例的甲醇冰 提取,提取液經(jīng)過過濾稀釋后,用免疫親和柱凈化,以甲醇 將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來,在淋洗液中加入漠溶液 衍生,以提高測定靈敏度,然后用熒光分光光度計進行定量。 也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分加入HPLC中,對 黃曲霉毒素B1B2G1G2分別進行定量分析;(2)ELISA法測 定黃曲霉毒素B1原理:將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面, 洗除未吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品提取液的混合

19、液,競爭培養(yǎng)后,在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物,洗 除多余抗體成分,然后加入酶標(biāo)記對抗球蛋白的第二抗體結(jié) 合物,與吸附在固體表面的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合,再加入酶 的底物。在酶催化下底物降解,產(chǎn)生有色物質(zhì),通過酶標(biāo)檢 測儀測出酶底物的降解量。推出被測樣品中抗原量。抗體: 抗黃曲霉毒素B1的特異性單克隆抗體或抗血清包被抗原: 黃B1與載體蛋白結(jié)合物,酶標(biāo)二抗:羊抗鼠IgG與辣根過 氧化酶結(jié)合物;3.微柱篩選法:原理:樣品提取液通過由氧化 鋁與硅鎂吸附劑組成的微柱層析管,雜質(zhì)被氧化鋁吸附,黃 曲霉毒素被硅鎂吸附劑吸附,在波長365nm紫外燈下顯示藍(lán) 紫色熒光環(huán),其熒光強度與黃曲霉毒素在一定的濃度范圍

20、內(nèi) 成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附層未出現(xiàn)藍(lán)紫色熒光,則樣品為 陰性(方法靈敏度為510ug/kg)。由于在微柱上不能分離黃曲 霉毒素B1,B2,GI,G2,所以測得結(jié)果為總黃曲霉毒素含 量。細(xì)菌毒素:內(nèi)毒素、外毒素比較:產(chǎn)生方式:內(nèi):細(xì) 菌崩解后釋放外:合成分泌到菌體外?;瘜W(xué)成分:內(nèi):脂多糖LPS夕卜:蛋白質(zhì)。間接凝集試驗定義:將可溶性抗原或抗體吸附于一種 與免疫無關(guān)的,適當(dāng)大小的載體微利表面,再與相應(yīng)抗體或 可溶性抗原在適宜條件下相互作用,經(jīng)一定時間后出現(xiàn)的肉 眼可見的凝集現(xiàn)象。食品中微生物快檢方法:1.基于微生物代謝特征的檢 測方法;2、改良培養(yǎng)基法;3、細(xì)菌直接計數(shù)法;4、免疫 學(xué)快速檢測

21、技術(shù);5、分子生物學(xué)快速檢測技術(shù);6、自動化 檢測技術(shù);7、生物傳感器檢測技術(shù)。ATP生物發(fā)光法:檢測原理:熒光素+ATP+O2(上: Mg2+)(下:熒光素酶)氧化型熒光素+AMP+PPI+H20。阻抗測定法原理:當(dāng)培養(yǎng)基中因微生物的代謝活動而 發(fā)生化學(xué)改變時,阻抗也隨著改變。溶氧電流法檢測原理:應(yīng)用的是氧氣電極法的原 理。在測量開始時氧氣溶解在培養(yǎng)基中,隨著細(xì)菌的生長和 繁殖,這些溶解氧不斷被消耗。DOX系統(tǒng)通過檢測與溶解氧 量成比例的電流值來計算所含菌落總數(shù),大腸菌群值。微量量熱法:是利用細(xì)菌生長時產(chǎn)生熱量的原理設(shè)計 而成,微生物在生長和代謝的過程中,能產(chǎn)生大量的代謝熱。 由于各種微生物

22、的代謝產(chǎn)物熱效應(yīng)不同,因此可顯示出特異 性的熱效應(yīng)曲線圖。在細(xì)菌生長過程中,用微量量熱計測量 產(chǎn)熱量等熱數(shù)據(jù),經(jīng)過計算機處理,繪制出以產(chǎn)熱量對比時 間組成的熱曲線圖,以此推斷細(xì)菌存在的數(shù)量。放射測量法:利用細(xì)菌在代謝碳水化合物時產(chǎn)生CO2 的原理,把微量的放射性標(biāo)記引入葡萄糖或者其他糖分子 中。細(xì)菌生長時,糖被利用并放出標(biāo)記的CO2,將生成的放 射性CO2從培養(yǎng)裝置中導(dǎo)出,利用專用的測量儀來測定CO2 量,放射量與細(xì)菌數(shù)成正比??焖贉y試片法原理:由上下兩層組成,上層的薄膜上 通過粘合劑結(jié)合了指示劑,并涂覆了冷水可溶性凝膠,下層 的紙片上涂覆了改良的培養(yǎng)基,并印有方格以便于計數(shù)。它 是一種與限制

23、備好的培養(yǎng)基系統(tǒng),以每系統(tǒng)1ML的加樣量 將樣品直接加到薄膜中間,蓋上含有膠凝劑和指示劑的覆蓋 膜,培養(yǎng)后細(xì)菌在雙層膜之間生產(chǎn),其代謝產(chǎn)物與顯色物質(zhì) 作用并顯色,即可直接計數(shù)。顯色培養(yǎng)基:是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與 相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測微生物的新型培養(yǎng)基。 這些相應(yīng)的顯示底物是由產(chǎn)色基團和微生物部分可代謝物 質(zhì)組成,在特異性酶的作用下,游離出產(chǎn)色基團顯示一定顏 色,直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。優(yōu)點:將菌株 分離,鑒定結(jié)合在一起,無需對菌株進行分離純化和進一步 生化鑒定,大大節(jié)約樣品的分析檢測時間。固相細(xì)胞計數(shù)spc原理:可以在單個細(xì)胞水平對細(xì)菌 進行快速檢測。用特殊濾膜濾過樣品后,存留在濾膜上的微 生物用熒光素進行熒光染色,用落射熒光顯微鏡對每個螢光 點進行直觀地檢測尤其對生長緩慢的微生物,檢測用時短, 明顯優(yōu)于傳統(tǒng)平板計數(shù)法。流式細(xì)胞儀的基本原理:A:待測細(xì)胞被制成單細(xì)胞 懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后加入樣品管中,在氣體壓力 下進入流式細(xì)胞儀的流動室;B:流動室內(nèi)充滿鞘液,鞘液 和細(xì)胞懸液組成的細(xì)胞液注一起自流動室噴嘴口噴射出來, 進入測量區(qū),與水平方向的激光光束垂直相交;C:被熒光 染料染色的cell受到激烈激光照射后熒光,同時產(chǎn)生散射光, 熒光強度和被測cell中cell成分與熒光燃料的結(jié)合程度有關(guān), 散射光強度一般與cell大小成正比;

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