實(shí)驗(yàn)十一 鄰二氮菲吸光光度法測(cè)鐵的條件實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)十一 鄰二氮菲分光光度法測(cè)鐵的條件實(shí)驗(yàn)一、目的要求1、掌握鄰二氮菲吸光光度法測(cè)定鐵的條件實(shí)驗(yàn)的方法與原理。2、熟悉分光光度法的條件試驗(yàn)及測(cè)定方案的擬定。3、進(jìn)一步了解分光光度計(jì)的構(gòu)造、性能及使用方法。二、實(shí)驗(yàn)意義可見分光光度法測(cè)定無機(jī)離子，要經(jīng)過兩個(gè)過程：一是顯色過程；二是測(cè)量過程；為了使測(cè)定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須選擇合適的顯色條件和測(cè)量條件。這些條件：顯色劑用量、酸度、溫度、時(shí)間及干擾的消除確定顯色反應(yīng)的最佳實(shí)驗(yàn)條件，也就可以在一定程度上保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度和精密度。三、實(shí)驗(yàn)原理鄰二氮菲是測(cè)定微量鐵的一種較好的顯色劑。它是測(cè)定二價(jià)鐵的一種高靈敏度的高選擇性試劑。二價(jià)鐵和水溶液中的

2、鄰二氮菲反應(yīng)，生成一種很穩(wěn)定的橙紅色螯合物，其在510nm波長(zhǎng)下有最大吸收，且遵守朗伯比耳定律，摩爾吸光系數(shù)1.1104。在pH39的范圍內(nèi)（一般將酸度控制在pH=56的范圍內(nèi)），顏色的深度不受影響，且可穩(wěn)定半年之久。最小檢出濃度是50gL-1(用1cm吸收池)通常從以下幾個(gè)方面考慮顯色反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件：顯色劑用量、酸度、溫度、時(shí)間及干擾的消除。我們的條件實(shí)驗(yàn)通常采用單因素實(shí)驗(yàn)法。其原理是在幾個(gè)實(shí)驗(yàn)條件中，改變其中一個(gè)條件的值，固定其它的條件，然后測(cè)定相應(yīng)的吸光度值，再?gòu)闹姓页龇蠈?shí)驗(yàn)要求的條件。四、儀器和試劑1、醋酸鈉：1molL-1；2、鹽酸羥胺：100 gL-1；(用時(shí)配置)3、鄰二氮菲(

3、1.5 gL-1)： 4、鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液分光光度計(jì)的使用 1、使用儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理。以及各個(gè)操作旋鈕之功能。在未接通電源前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性進(jìn)行檢查，電源線接線應(yīng)牢固。通地要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再接通電源開關(guān)。 2、開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”，波長(zhǎng)調(diào)至測(cè)試用波長(zhǎng)。儀器預(yù)熱30分鐘。 3、打開試樣室蓋（光門自動(dòng)關(guān)閉），按“0”按鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”，蓋上試樣室蓋，將空白（參比）放在光路上，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。 4、預(yù)熱后，按(4)連續(xù)幾次調(diào)整“0”和“100%”，儀器即可進(jìn)行

4、測(cè)定工作。 5、選擇開關(guān)置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然后將被測(cè)樣品移入光路，顯示值即為被測(cè)樣品的吸光度值。 6、如果大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)時(shí)，在調(diào)整“0”和“100%”后稍等片刻，（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時(shí)間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“0”和“100%”即可工作。 7、每臺(tái)儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個(gè)調(diào)換。 五、實(shí)驗(yàn)步驟1、鄰二氮菲與鐵的配合物的穩(wěn)定性用吸量管準(zhǔn)確吸取10 ugmL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL，置于50mL容量瓶中。加入100 gL-1鹽酸羥胺溶液1mL，搖勻后加入1.5 gL-1鄰二氮菲溶液2mL和1mo

5、lL-1醋酸鈉溶液5mL ，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，在最大吸收波長(zhǎng)510 nm處，從加入顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度，經(jīng)15min，30 min，45min，60min后，各測(cè)一次吸光度。以時(shí)間(t)為橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，繪制At曲線，從曲線上判斷配合物穩(wěn)定的情況。2、顯色劑用量的影響取50mL容量6個(gè)，各加入10 ugmL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5ml，1ml 100 gL-1鹽酸羥胺溶液，搖勻.再分別加入鄰二氮菲溶液0，0.5，1.0，2.0，3.0和4.0mL ,再各加入醋酸鈉5mL. 以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度汁上，用適宜波長(zhǎng)(510nm)，1cm比色皿，以水為參比測(cè)定不同用量顯色劑溶液的吸光度。然后以鄰二氮菲試劑加人毫升數(shù)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)、繪制Av曲線，由曲線上確定顯色劑最佳加入量。注意:1干擾用鄰二氮菲測(cè)定時(shí)，有很多元素干擾測(cè)定，須預(yù)先進(jìn)行掩蔽或分離，如鈷、鎳、銅、鉻與試劑形成有色配合物；鎢、相、銅、汞與試劑生成沉淀，還有些金屬離子如錫、鉛、鉍則在鄰二氮菲鐵配合物形成的pH范圍內(nèi)發(fā)生水解；因此當(dāng)這些離子共存時(shí)，應(yīng)注意消除它們的干擾作用。2試劑本次實(shí)驗(yàn)中，所用的試劑有鐵標(biāo)液、鹽酸羥胺、鄰二氮菲。其中鹽酸羥胺是還原劑，用來還原三價(jià)鐵離子；鄰二氮菲是顯色劑。六、操作要點(diǎn)1、溶液的配制用移液管準(zhǔn)確移取試劑溶液；注