三年高考真題精編-基因工程

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專題22基因工程1.（2015天津卷.6）2015年2月3日，英國議會下院通過一項歷史性法案，允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述錯誤的是（）A、該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B、捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C、三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核D、三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)【答案】C【考點定位】本題考查核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)、體外受精和早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植及

2、細胞質(zhì)遺傳和核基因遺傳等知識。2.( 2015重慶卷.6)下列有關(guān)人胰島素基因表達載體的敘述，正確的是（）A表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B表達載體的復(fù)制和胰島素基因的表達均啟動于復(fù)制原（起）點C借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用【答案】C【考點定位】本題主要是考查利用基因工程改造生物體性狀的操作要點。3.(2014江蘇卷.23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯誤的是( )A. 切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識別6 個核苷酸序列B. PCR 反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了 DNA 聚合酶催化不同的反應(yīng)C

3、. 載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標記基因D. 抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達【答案】ABC【考點定位】基因工程技術(shù)的相關(guān)知識。4.(2014重慶卷.4)題4圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是( )A的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B侵染植物細胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上C的染色體上若含抗蟲基因，則就表現(xiàn)出抗蟲性狀D只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異【答案】D【考點定位】基因工程。5.(2014廣東卷.25)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖14所示，下列敘述正確的是（）A、過程需使用逆

4、轉(zhuǎn)錄酶B、過程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C、過程使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備D、過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細胞【答案】AD【考點定位】基因工程。6.（2013江蘇卷.22）小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區(qū)基因（目的基因）后再重組表達。下列相關(guān)敘述正確的是( ) A.設(shè)計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B.用PCR 方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列C.PCR 體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA 聚合酶D.一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞【答案】BD

5、 【考點定位】基因工程中PCR 技術(shù)等相關(guān)知識。9.（2015江蘇卷.32）(9 分)胰島素 A、B 鏈分別表達法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖 1 是該方法所用的基因表達載體,圖2 表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B 分別表示-半乳糖苷酶與胰島素 A、B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題:(1)圖1 基因表達載體中沒有標注出來的基本結(jié)構(gòu)是。(2)圖1 中啟動子是酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動目的基因的表達；氨芐青霉素抗性基因的作用是。(3)構(gòu)建基因表達載體時必需的工具酶有。(4)茁-半乳糖苷酶與胰島素A 鏈或B 鏈融合表達,可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內(nèi)部

6、,其意義在于。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的 A 鏈或 B 鏈,且-半乳糖苷酶被切成多個肽段,這是因為。(6)根據(jù)圖2 中胰島素的結(jié)構(gòu),請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測結(jié)果是,理由是?！敬鸢浮浚?）終止子（2）RNA聚合作為標記基因，將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來（3）限制酶和DNA連接酶（4）防止胰島素的A、B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解（5）-半乳糖苷酶中含多個甲硫氨酸，而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸（6）至少2個兩條肽鏈的一端各有一個游離的氨基，氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基【考點定位】基因工程10.（2015福建卷.

7、33）【生物-現(xiàn)代生物科技專題】（10分）GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細胞中，用于干細胞基因治療的研究。請回答：（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是。（2）構(gòu)建含GDNF基因的表達載體時，需選擇圖1中的限制酶進行酶切。（3）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有三種：單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進行雙酶切，并對酶切后

8、的DNA片段進行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。（4）將正向連接的表達載體導(dǎo)入神經(jīng)干細胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達，可用相應(yīng)的與提取的蛋白質(zhì)雜交。當培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定的密度時，需進行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于神經(jīng)干細胞移植治療實驗?！敬鸢浮浚?）使細胞分散開（2）XhoI（3） eq oac(,2)（4）抗體傳代【考點定位】基因工程和動物細胞培養(yǎng). 11.（2015海南卷.31）【生物選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）在體內(nèi)，人胰島素基因表達可合成出一條稱為前胰島素原的肽鏈，此肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中經(jīng)酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原，進入高

9、爾基體的胰島素原經(jīng)酶乙切割去除中間片段C后，產(chǎn)生A、B兩條肽鏈，再經(jīng)酶丙作用生成由51個氨基酸殘基組成的胰島素。目前，利用基因工程技術(shù)可大量生產(chǎn)胰島素?；卮鹣铝袉栴}：（1）人體內(nèi)合成前胰島素原的細胞是，合成胰高血糖素的細胞是。（2）可根據(jù)胰島素原的氨基酸序列，設(shè)計并合成編碼胰島素原的序列，用該序列與質(zhì)粒表達載體構(gòu)建胰島素原基因重組表達載體。再經(jīng)過細菌轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定，即可建立能穩(wěn)定合成的基因工程菌。（3）用胰島素原抗體檢測該工程菌的培養(yǎng)物時，培養(yǎng)液無抗原抗體反應(yīng)，菌體有抗原抗體反應(yīng)，則用該工程菌進行工業(yè)發(fā)酵時，應(yīng)從中分離、純化胰島素原。胰島素原經(jīng)酶處理便可轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素。【答案】（1）胰島B細胞

10、 胰島A細胞 （2）DNA（序列） 胰島素原 （3）菌體【考點定位】蛋白質(zhì)合成與加工、基因工程、發(fā)酵工程12.( 2015四川卷.9)（11分）將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁毎?，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)拉上只有TDNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細胞中）。（1）過程需用同種酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進行酶切。為將過程獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用培養(yǎng)基。（2）過程中將棉花細胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓進入棉花細胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是。（3）若過程僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加以獲得芽；部分接種在

11、無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根，原因是。（4）檢驗轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少的使用，以減輕環(huán)境污染。【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切選擇（2）TDNA篩選獲得TDNA片段的植物細胞（3）細胞分裂素濃度頂芽端合成的生長素向基部運輸，促進根的分化（4）投放棉鈴蟲農(nóng)藥【考點定位】本題主要是考查基因工程與細胞工程的原理與相關(guān)操作，涉及培養(yǎng)基的功能及使用等知識點。13.（2015安徽卷.31）II.（9分）科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。由過程獲得的A為。在核移植前，必須先去掉卵母細胞的核。目的是，受體

12、應(yīng)選用期卵母細胞。進行胚胎移植時，代孕母羊?qū)χ萌胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生，這是為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。采用胎兒成纖維細胞進行轉(zhuǎn)基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因為?！敬鸢浮縄I.（1）含目的基因的表達載體 （2）保證核遺傳物質(zhì)來自目的基因的成纖維細胞 MII中 （3）免疫排斥反應(yīng) （4）整合含有目的基因的成纖維細胞可進行傳代培養(yǎng)【考點定位】基因工程、核移植和胚胎工程14.（2015上海卷.綜合題九）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達的問題。（9分）如圖28A所示，質(zhì)粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基因（YR）。其中XR內(nèi)部含有限制酶Ka

13、sI識別序列，YR內(nèi)部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV識別序列，五種酶的識別序列如圖28B（表示切割位點），且這些識別序列在整個質(zhì)粒上均僅有一處，目的基因內(nèi)部不存在這些識別序列。68若要將結(jié)構(gòu)如圖28C所示的目的基因直接插入到Y(jié)R內(nèi)形成重組質(zhì)粒pZHZ10，則pZHZ9需用限制酶_切開。69將上述切開的質(zhì)粒溶液與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，進行大腸桿菌受體細胞導(dǎo)入操作。之后，受體細胞的類型（對兩種抗生素表現(xiàn)出抗性R或敏感性S）包含_（多選）。AXR、YR BXR、YS CXS、YRDXS、YS70若用KasI和FseI聯(lián)合酶切重組質(zhì)粒pZHZ 10（只含單個

14、目的基因），則可能產(chǎn)生的酶切片段數(shù)為_（多選）。A 1 B2C 3D 471動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是_。A受精卵能使目的基因高效表達B受精卵可發(fā)育成動物個體C受精卵基因組更易接受DNA的插入D受精卵尺寸較大，便于DNA導(dǎo)入操作【答案】68.NgoMIV69.ABD70.ABC71.B【考點定位】基因工程15.(2014山東卷.40) 人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：（1）htPA基因與載體用_切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細胞DNA，可采用_技術(shù)。（2）為獲

15、取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其_。采集的精子需要經(jīng)過_，才具備受精能力。（3）將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是_。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行_。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細胞的_。（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到_，說明目的基因成功表達?！敬鸢浮浚?）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶） DNA分子雜交 （或核酸探針） （2）超數(shù)排卵 獲能 （3）顯微注射法 性別鑒定 全能性 htPA（或人組織纖溶酶原激活物）【考點定位】基因工程與胚胎工程的知識。 16.(2014海南卷.31)生物選修3：

16、現(xiàn)代生物科技專題（15分）下面是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。請據(jù)圖回答：獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在酶的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后在作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出響應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因。利用PCR技術(shù)擴增DNA時，需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有、4種脫氧核苷酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。由A和載體B拼接形成的C通常稱為。在基因工程中，常用Ca2處理D，其目的是。【答案】（1）轉(zhuǎn)錄酶 DN

17、A聚合酶氨基酸脫氧核苷酸引物目的基因模板（A基因）基因表達載體使其成為感受態(tài)細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子【考點定位】基因工程。17.(2014北京卷.30)（16分）A基因位于1號染色體上，影響減數(shù)分裂時染色體交換頻率，a基因無此功能；B基因位于5號染色體上，使來自同一個花粉母細胞的4個花粉粒分離，b基因無此功能。用植株甲(AaBB)和植株乙（AAbb）作為親本進行雜交實驗，在F2中獲得所需植株丙（aabbb）。（1）花粉母細胞減數(shù)分裂時，聯(lián)會形成的_經(jīng)_染色體分離、姐妹染色單體分開，最終復(fù)制后的遺傳物質(zhì)被平均分配到4個花粉粒細胞中。（2）a基因是通過T-DNA插入到A基因中獲得的

18、，用PCR 法確定T-DNA插入位置時，應(yīng)從圖1中選擇的引物組合是_。（3）就上述兩對等位基因而言，F(xiàn)1中有_中基因型的植株。F2中表現(xiàn)型為花粉粒不分離的植株所占比例應(yīng)為_。（4）雜交前，乙的1號染色體上整合了熒光蛋白基因C、R。兩代后，丙獲得C、R基因(圖2)。帶有C、R基因花粉粒能分別呈現(xiàn)藍色、紅色熒光。丙獲得C、R基因是由于它 的親代中的_在減數(shù)分裂形成配子時發(fā)生了染色體交換。丙的花粉母細胞進行減數(shù)分裂時，若染色體在C和R基因位點間只發(fā)生一次交換，則產(chǎn)生的4個花粉粒呈現(xiàn)出的顏色分別是_。本實驗選用b基因純合突變體是因為：利用花粉粒不分離的性狀，便于判斷染色體在在C和R基因位點間_，進而計

19、算出交換頻率。通過比較丙和_的交換頻率，可確定A基因的功能?！敬鸢浮浚?）四分體 同源 （2）II 和III （3）2 1/4 （4）父本和母本 藍色、紅色、藍和紅疊加色、無色 交換與否和交換次數(shù) 乙 【考點定位】減數(shù)分裂和基因工程相關(guān)知識。18.(2014上海卷.67-71)（九）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達的問題。（9分）pIJ702是一種常用質(zhì)粒（圖20），其中tsr為劉鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶ClaI、Bgl、Pst、Sac、Sph在PIJ702上分別只有一處識別序列。67.質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠_鍵

20、維系成雙鏈結(jié)構(gòu)。68 以SacI和SphI切取的目的基因置換PIJ702上0.4kb(1kb=1000對堿基)的SacI/SphI片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度列在表4中。因此判斷目的基因內(nèi)部是否含有Bgl切割位點，并說明判斷依據(jù)_。69.已知PIJ702上含mel基因的Cla/Pst區(qū)域長度為2.5kb，若用Cla和Pst聯(lián)合酶切pZHZ8，則參照表數(shù)據(jù)可斷定酶切產(chǎn)物中最小片段的長度為_kb。70. 不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上的生長狀況如表5所示。若要篩選接納了PIJ702或pZHZ8 的鏈霉菌細胞，所需的硫鏈絲菌素最小濃度應(yīng)為_g/mL (填寫表格中給定濃度)；含有重組粒pZHZ8的菌落呈_色。71. 上述目的基因來源于原核生物，其蛋白編碼序列（即編碼從起始密碼子到終止密碼子之間的序列）經(jīng)測定為1265對堿基，試判斷對這段序列的測定是否存在錯誤：_,并說明依據(jù)_.【答案】67.氫68.含有，據(jù)表4和題意，pIJ702上原有的一個Bgl位點被目的基因置換后，pZHZ8仍被Bgl切為線狀，故目的基因中必然含有一個Bgl位點。69.0.370.5 白71.錯誤因為原核生物決定每個氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼，所以基因的編碼堿基序列應(yīng)為3的整數(shù)倍?！?/p>