功能評價常用動物模型建立過程和要求

1、一、高血脂及動脈粥樣硬化二、糖尿病及其動物模型建立三、肥胖癥與動物模型建立四、貧血癥及其動物模型建立功能評價常用動物模型建立過程和要求一、高血脂及動脈粥樣硬化功能評價常用動物模型建立過程和要求高血脂及動脈粥樣硬化1概念高血脂：血脂主要包括血漿中的膽固醇(Ch)、膽固醇酯，甘油三酯（TG），這些血脂成份高于正常上限即稱為高脂血癥。 由于血漿中的脂類是與蛋白質(zhì)載體結(jié)合運(yùn)輸?shù)?，所以，所謂的高血脂癥實(shí)際上是高脂蛋白血癥。即LDL，VLDL濃度過高。動脈粥樣硬化：是高血脂及脂質(zhì)代謝障礙的結(jié)果，它進(jìn)一步導(dǎo)致冠心病，是嚴(yán)重危害人類健康的一種常見病，其已成為許多發(fā)達(dá)國家居民死亡的主要原因，在我國，近年來發(fā)病率

2、明顯上升。功能評價常用動物模型建立過程和要求2. 動脈粥樣硬化發(fā)生機(jī)制 動脈內(nèi)膜的脂質(zhì)、碳水化合物、血液成份沉積，平滑肌細(xì)胞及膠原纖維增生，伴有壞死及鈣化，形成了粥樣斑塊粥瘤。所以動脈粥樣硬化包括兩個含義：即粥瘤和硬化，前者指脂質(zhì)沉積和壞死，形成粥樣病灶，后者指膠原纖維增生。 HDL的濃度與發(fā)生動脈粥樣硬化呈負(fù)相關(guān)。功能評價常用動物模型建立過程和要求3. 發(fā)生原因：醫(yī)學(xué)研究證明，膳食脂肪攝入總量，尤其是飽和脂肪酸攝入量與高脂血癥及動脈粥樣硬化發(fā)病率呈明顯正相關(guān)。動物試驗(yàn)證明，用含膽固醇高的食物以及純膽固醇喂動物，能產(chǎn)生典型的動脈粥樣硬化。就膳食因素而言，高熱能，高脂肪（尤其是動物性脂肪）、高碳

3、水合化合物飲食是引起肥胖，高血脂、動脈粥樣硬化的重要因素。功能評價常用動物模型建立過程和要求除此之外，還有遺傳因素，過量飲酒，一些無機(jī)鹽，各種原因引起的肝損傷等亦可引起高血脂癥、動粥癥。研究證明，不飽和脂肪酸，尤其是亞油酸，有多種生理功能，特別是可降血脂，膽固醇只有與亞油酸結(jié)合才能在體內(nèi)運(yùn)轉(zhuǎn)，這樣膽固醇就不易在動脈管壁上沉積，從而起到預(yù)防動脈硬化和動粥，高血脂等作用。功能評價常用動物模型建立過程和要求4高血脂與動脈粥樣硬化模型（1）小鼠高血脂模型動物：雄性小鼠，體重1822g。飼料：1%膽固醇，10%豬油，0.3%膽酸，其它為常料成份。方法：高脂飼料，連續(xù)飼喂7天，血清Ch可高達(dá) 530mg/

4、dl；或：雄性昆明種小鼠，18 22g，靜注或腹注Triton WR-1399，可引起血 清TC，TG大幅度升高； 靜注400mg/kg/次， 3h即出現(xiàn)高血脂，56h后血清TC可增加1倍 以上，12h左右達(dá)峰值，至72h仍高于正常。 腹注：與靜注相似，劑量需大一些，時間長 一些。功能評價常用動物模型建立過程和要求（2）大鼠高血脂癥模型：動物：雄性大鼠：150250g。飼料：14%膽固醇，10%豬油，0.2%甲基硫氧嘧 啶，8689%基礎(chǔ)飼料。方法：飼喂2-4W可致高血脂癥；或10%蛋黃粉， 5%豬油，0.5%膽酸鈉，85%基礎(chǔ)飼料，每 天喂1520g，持續(xù)2-4W，血脂可升高達(dá) 250500

5、mg/dl，但只能用于降血脂作用實(shí) 驗(yàn)，造型12W以上可進(jìn)行抗動脈粥樣硬化實(shí) 驗(yàn)。功能評價常用動物模型建立過程和要求或10%膽固醇，20%豬油，1%甲基硫氧嘧啶和2%膽酸鈉的脂肪乳劑，灌胃一周后，可成功地復(fù)制出高血脂癥模型。血清TC可達(dá)14.150.23mmol/L,TG達(dá)該乳劑配法：豬油20g置燒杯加熱融化，加入10g膽固醇溶化，再加2g膽酸鈉和1g甲基硫氧嘧啶充分?jǐn)噭?，然后加入吐?80 20ml，丙二醇20ml，餾水30ml，攪拌，溶解后，冷至室溫，再加餾水至100ml，混勻，即成脂肪乳劑，用時37水浴融化。功能評價常用動物模型建立過程和要求 家兔高血脂及動脈粥樣硬化模型動物：2kg家兔

6、。飼料：15%蛋黃粉，0.5%膽固醇，5%豬油，80%基礎(chǔ)料。3周后，血清膽固醇升高，6周后，主動脈斑塊發(fā)生率可達(dá)100%，血清膽固醇升高，至2000mg/dl.也可單獨(dú)飼喂Ch，每天，4個月后出現(xiàn)斑塊，每天服，3個月后出現(xiàn)斑塊，每天服，2個月可出現(xiàn)斑塊。功能評價常用動物模型建立過程和要求 豬動脈粥樣硬化模型：高脂飼料：普通飼料中拌入15%豬油及11.5%膽固醇，連續(xù)飼喂1個月，血漿Ch由100mg/dl升至250400mg/dl，68月后血漿Ch濃度下降，但是A及冠狀A(yù)已發(fā)生硬化，主要影響心外膜下冠狀A(yù)及其主要分支，有的動物并發(fā)心肌梗死。功能評價常用動物模型建立過程和要求 猴高脂血癥及動脈粥

7、樣硬化模型動物：3-6歲恒河猴，體重。高脂食物：50%麥粉，8%玉米粉，1%膽固醇，8%蛋黃，8%豬油，17%白糖及適量小蘇打和食鹽。加工：先將麥粉、玉米粉、麥麩發(fā)酵后加入適量小蘇打，再加入其它成分，拌勻制糕，烤箱燒熟后飼喂。喂食：自由飲水，每日限量一次蔬菜和水果。模型：一月后可造成實(shí)驗(yàn)性高血脂癥，血清膽固醇較正常升高倍。功能評價常用動物模型建立過程和要求二、糖尿病及其動物模型建立功能評價常用動物模型建立過程和要求糖尿病及其動物模型建立1糖尿病概念糖尿病是遺傳因素和環(huán)境因素長期作用所致的一種慢性全身性代謝病，以持續(xù)性高血糖和尿糖為主要特征。糖尿病已成為危害人類健康的重要疾病之一，在美國，每年死

8、于糖尿病并發(fā)癥的人數(shù)超過16萬。我國，隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人們飲食結(jié)構(gòu)的改變以及人口老齡化，糖尿病數(shù)量迅速增加，目前達(dá)2000多萬人，預(yù)計(jì)2010年將達(dá)到6300萬人，將居世界首位。糖尿病并發(fā)癥主要有視網(wǎng)膜病變，患者臟病可能性較正常人高2-4倍，患中風(fēng)危險性高5倍，一半以上的老年糖尿病患者死于心血管疾病。還可導(dǎo)致其它多種并發(fā)癥及繼發(fā)癥。功能評價常用動物模型建立過程和要求糖尿病分型國際上將糖尿病分為四型：型、型、其它特異型和妊娠糖尿病四型。常見的為和型。型糖尿?。河址Q胰島素依賴型糖尿病。此型的發(fā)病是由于胰島細(xì)胞受到細(xì)胞介導(dǎo)性自身免疫性破壞，從而導(dǎo)致了胰島素的絕對缺乏所致。發(fā)生原因：遺傳因素+環(huán)境因素（

9、如病毒感染等）型糖尿病主要發(fā)生于兒童和青少年，也可發(fā)生在任何年齡。型糖尿病：又稱為非胰島素依賴型糖尿病。其特點(diǎn)是胰島素分泌正常或增高，但細(xì)胞對葡萄糖制激反應(yīng)減弱?；颊吣挲g多在40歲以上，常伴有肥胖，肥胖是型糖尿病的重要誘因之一。發(fā)生原因：遺傳因素+其它誘因。除肥胖以外，飲食結(jié)構(gòu)不合理，熱量攝入過多，缺乏體力活動，吸煙等也是型糖尿病的誘因。功能評價常用動物模型建立過程和要求3. 肥胖引起糖尿病的機(jī)制是： 胰島素受體對胰島素不敏感。病初，代償性增加胰島素分泌，形成高胰島素血癥，久而久之，胰島素的不敏感進(jìn)一步發(fā)展，形成胰島作用受阻，產(chǎn)生胰島素抵抗，這種高胰島素血癥引起的胰島素受體敏感性下降所致的胰島

10、素作用受阻，其實(shí)質(zhì)上為胰島素相對缺乏。胰島素細(xì)胞長期的代償分泌，最終會導(dǎo)致細(xì)胞功能降低，胰島素分泌不足，則胰島素缺乏產(chǎn)生糖尿病。目前臨床上口服的降糖藥都有副作用，因此找降糖保健食品成為人們的關(guān)注點(diǎn)。降糖保健食品適用于型糖尿病人和空腹血糖水平處于亞健康狀況的人。功能評價常用動物模型建立過程和要求4營養(yǎng)與糖尿病關(guān)系最密切的是碳水化合物。碳水化合物與血糖的關(guān)系與碳水化合物結(jié)構(gòu)有關(guān)，不能一概而論，必須分清高糖飲食與高碳水化合物飲食的區(qū)別：高糖飲食：富含果糖、葡萄糖、蔗糖和乳糖高碳水化合物飲食：以淀粉和其它復(fù)雜碳水合物為主。功能評價常用動物模型建立過程和要求 各種碳水化合物升高血糖作用的大小以血糖指數(shù)來

11、表示 食物名稱膳食含量（%）血糖指數(shù)（%）葡萄糖0 100 麥芽糖 0 80-90 馬鈴薯 0.7 80-90 早秈米 70-80 白面包 3.6 60-90 全麥面包 5.8 50-59 燕麥 6.6 40-49 黑豆 10.2 30-39 扁豆 13.4 20-29 大豆 15.5 10-19功能評價常用動物模型建立過程和要求5糖尿病模型胰腺切除法致糖尿病模型：（需作手術(shù)）化學(xué)性糖尿病四氧嘧啶糖尿病四氧嘧啶是一種細(xì)胞毒劑，可選擇性地?fù)p傷動物胰島-C方法：注射法：臨用前配成15%水溶液，注射前應(yīng)禁食2448h，注射時應(yīng)在30s內(nèi)注射完成，注射越快越好。飲食上給予低蛋白和高動物脂肪食物能增加糖

12、尿病的發(fā)生率注射后呈三個時相變化：高糖期：早期、短暫，約14h。低糖期：早期后約持續(xù)48h的低糖相。持久性高糖相：48h后，由于細(xì)胞損傷，導(dǎo)致持久性高 血糖，形成糖尿病。大劑量四氧嘧啶可致大部分細(xì)胞破壞，使犬、貓產(chǎn)生永久性糖尿病。功能評價常用動物模型建立過程和要求 三、肥胖癥與動物模型建立功能評價常用動物模型建立過程和要求肥胖癥與動物模型建立1肥胖病發(fā)生情況肥胖病是現(xiàn)代社會文明病之一，過去以歐美發(fā)達(dá)國家發(fā)病率很高，現(xiàn)在發(fā)展中國家隨著經(jīng)濟(jì)條件改善，肥胖患者也明顯增加。據(jù)報(bào)道，美國平均體重超重率達(dá)33.3 %,肥胖率22%，婦女胖者已達(dá)40%；東歐較嚴(yán)重，其中有些國家婦女肥胖率高達(dá)4050%。墨西

13、哥婦女肥胖率也高達(dá)40%。中國成年人體重超標(biāo)者達(dá)40%左右，北京市人口肥胖率竟達(dá)45%，居全國第一，南京達(dá)20%左右，近年來呈明顯上升趨勢，而且兒童肥胖率越來越趨高。肥胖已成為社會性公共問題。功能評價常用動物模型建立過程和要求2肥胖癥的標(biāo)準(zhǔn)體重超過標(biāo)準(zhǔn)體重10%者為超重；超過20%，且脂肪量超過30%者為肥胖；體重超標(biāo)3050%，脂肪量超過3545%者為中度肥胖；體重超標(biāo)50%以上，脂肪量超過45%以上者為重度肥胖。功能評價常用動物模型建立過程和要求3肥胖癥的分類：可分為兩種：即單純性肥胖和繼發(fā)性肥胖。單純性肥胖主要是長期熱能攝入消耗引起繼發(fā)性肥胖主要是由于內(nèi)分泌或代謝疾病引起。各類肥胖癥中以

14、單純性肥胖為主，約占肥胖癥的95%以上。功能評價常用動物模型建立過程和要求4肥胖癥的病因：主要因素有：飲食，遺傳、勞作、運(yùn)動、精神因素及其它疾病因素。5肥胖癥的危害可導(dǎo)致心血管疾病（高血脂癥、高血壓、動脈硬化）、糖尿病、腫瘤、脂肪肝。功能評價常用動物模型建立過程和要求6肥胖癥動物模型僅介紹營養(yǎng)性肥胖模型實(shí)驗(yàn)動物：剛斷，SD大鼠，體重50g。飼料配方：每100g基礎(chǔ)飼料中加入奶粉10g，豬10g，雞 旦1個，濃魚肝油10滴（含VA17000， VitD1700），新鮮黃豆牙250g?；A(chǔ)飼料配方：大麥粉20%，脫水菜10%，豆粉20%， 酵母1%，玉米粉16%，麥麩16%，魚粉 10%，食鹽2%

15、。飼喂45天后，體重較對照組 增加近1倍。功能評價常用動物模型建立過程和要求也可用Wistar大鼠，體重100g高熱能飼料：10%花生油，10%豬油，15%煉乳， 65% 普通料。并以定量稀釋煉乳灌胃。 煉乳稀釋：500g加50ml蒸餾水。連續(xù)4周可造成肥胖模型。（高熱能飼料，每g熱能；普通飼料，每 ）。功能評價常用動物模型建立過程和要求四、貧血癥及其動物模型建立功能評價常用動物模型建立過程和要求貧血癥及其動物模型建立1貧血概念： 貧血是指單位容積血液中Hb、RBC及PCV低于正常的疾病。WHO的貧血標(biāo)準(zhǔn)：（以Hb低于下列值） 6個月6歲：11（g/100ml） 6個月14歲：12（g/100

16、ml） 成年男性：13（g/100ml） 成年女性：12（g/100ml）我國： 成年男性：12.5 （g/100ml） 成年女性：11.0 （g/100ml） 功能評價常用動物模型建立過程和要求2造血系統(tǒng)分三個時期：卵黃囊造血期：由胚胎25天開始，在中胚層形成血島，出現(xiàn)多能造血干C，此期不能發(fā)育為成熟紅C。肝脾造血期：胚胎40天后，血島中的造血干C經(jīng)血流定植于肝脾，卵黃囊造血功能開始衰退，肝臟開始造血，脾臟主要產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。骨髓造血期：4個月胎兒，骨髓腔形成，脾臟中干C定植于骨髓，開始造血，至出生時幾乎全部由骨髓造血，并維持終生。新生兒至3歲以前，全身骨髓均可造血，稱為紅髓，隨著年

17、齡增長，部分骨髓停止造血，5歲以后管狀骨髓內(nèi)脂肪C增多，骨髓變黃，稱為黃髓。成年后，紅髓僅分布于脊椎骨、胸骨、肋骨，肩胛骨、鎖骨，顱骨等處，占體重的6%, 老年后，造血機(jī)能減退。功能評價常用動物模型建立過程和要求當(dāng)造血器官受到刺激時，黃髓可以轉(zhuǎn)化為紅髓而再次造血。機(jī)體造血是由造血組織中造血干C（HSC: Hematopoientic Stem Cell）在多種調(diào)控因子的復(fù)雜調(diào)控下完成的。調(diào)控因子主要有3類： 集落刺激因子（CSF: Colony Stimulating Factor）； 白細(xì)胞介素（IL: Interleukin）； 造血負(fù)調(diào)節(jié)因子。功能評價常用動物模型建立過程和要求3影響紅細(xì)

18、胞生成的物質(zhì)Fe：與原卟啉原結(jié)合形成血紅素，缺乏時形成 缺Fe性貧血。Vit類：有B12，葉酸、B6、Vc等。 B12、葉酸及B6缺乏時造成惡性貧血。紅細(xì)胞生成調(diào)節(jié)因子：以紅細(xì)胞生成素 （EPO）為主，EPO對紅祖C向成熟RBC 發(fā)育起決定作用4紅細(xì)胞的衰亡成熟紅C的平均壽命約為125天，每天約有7107個紅C消亡，同時又有等量新生紅C進(jìn)入血液循環(huán)。功能評價常用動物模型建立過程和要求5貧血的類型A.按形態(tài)學(xué)分類：（即根據(jù)MCV，MCHC，MCH指標(biāo)分類）正紅C性貧血：特點(diǎn):Hb、 RBC降低,但MCV，MCHC屬于正常范圍，見于：急性失血性貧血，溶血性貧血及部分再障性貧血。大紅C性貧血：特點(diǎn)：

19、MCV大于正常上限。 見于B12、葉酸缺乏的巨幼紅C貧血。 正色素小紅C性貧血：特點(diǎn)： MCV、 MCH 均降低，而MCHC正常，見于亞急性或慢性炎 性疾患所致貧血。 低色素小紅C性貧血： MCV、 MCH、 MCHC 均下降。見于缺Fe性貧血。功能評價常用動物模型建立過程和要求貧血紅細(xì)胞形態(tài)： 橢圓形紅C：多見于巨幼紅C貧血。 靶形紅C：多見于地中海貧血。 鐮形紅C：多見于惡性貧血。 異形紅C：多見于微血管溶血性貧血。功能評價常用動物模型建立過程和要求B貧血的病因?qū)W分類失血性貧血：原因: 出血 急性出血：急性失血性貧血 慢性出血：導(dǎo)致缺Fe性貧血 再性障礙性貧血：原因：造血機(jī)能抑制,全能造血干C不能再生造血。 這是一種進(jìn)行性貧血。溶血性貧血：原因：溶血毒素，免疫異常性溶血等，導(dǎo)致紅C破壞過多。營養(yǎng)不良性貧血：原因：缺Fe，缺VB12，葉酸。 * 血紅素由Fe原子與原卟啉分子組成，其中Fe原子是運(yùn)O2 功能 中心，而且必須是Fe2+，才可能與O2發(fā)生不逆結(jié)合。 * B12、葉酸均參與血紅素合成，缺乏時血紅素不能合成而造成 貧血。功能評價