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文檔簡介

1、關(guān)于植物器官的培養(yǎng)第一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/42一、器官培養(yǎng)的種類 包括離體的根、莖、葉、花器和果實(shí)的培養(yǎng)。以器官作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng),是植物組織培養(yǎng)中最主要的一個(gè)方面,進(jìn)行的植物種類最多,應(yīng)用的范圍也最廣。第一節(jié) 概述第二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/43 二、器官培養(yǎng)的意義: 1. 器官培養(yǎng)是研究器官生長、營養(yǎng)代謝、生理生化、組織分化和形態(tài)建成的最好材料和方法; 2.器官培養(yǎng)在生產(chǎn)實(shí)踐上具有重要的應(yīng)用價(jià)值. 第三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/44 如利用莖、葉和花器培養(yǎng)建立的試管苗,可在短期內(nèi)提高繁殖速

2、率,進(jìn)行名貴品種的快速繁殖; 利用莖尖培養(yǎng)可得到脫毒試管苗,解決品種的退化問題,提高產(chǎn)量和質(zhì)量; 將植物器官作誘變處理,用器官培養(yǎng)可得到突變株,進(jìn)行細(xì)胞突變育種。第四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/45植 物 器 官 培 養(yǎng)營養(yǎng)器官培養(yǎng)生殖器官培養(yǎng)根培養(yǎng)莖培養(yǎng)( 包括莖尖、莖段)葉培養(yǎng)(包括葉原基、葉柄、 葉 鞘、葉片、子葉)花培養(yǎng) (包括花托、花瓣、花絲、 花柄、子房、花藥)種子培養(yǎng)(包括成熟與未成熟)胚胎培養(yǎng)(包括幼胚、成熟胚、 胚珠、 子房、胚乳培養(yǎng) )第五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/46第二節(jié) 營養(yǎng)器官的培養(yǎng)一、離體根的培養(yǎng)二、莖尖的

3、培養(yǎng)三、莖段的培養(yǎng)四、離體葉的培養(yǎng)第六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/47一、離體根的培養(yǎng) (一) 意義: 生理代謝研究的優(yōu)良實(shí)驗(yàn)體系 研究器官分化形態(tài)建成的良好體系 建立快速生長的根無性系 進(jìn)行誘變育種第七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/481. 培養(yǎng)基選擇 White培養(yǎng)基;2/3或1/2 MS 和 B5培養(yǎng)基 注:離體根生長要求 提供全部必需元素,蔗糖、硝態(tài)氮效果好,加入B1、B6最重要,生長素對離體根影響不一致。培養(yǎng)溫度2527,暗光培養(yǎng)。(二) 培養(yǎng)方法第八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/492. 無性繁殖系的建

4、立 種子消毒 接種待根伸長后從根尖一端切取長1.2cm的根尖接種于培養(yǎng)基發(fā)育出側(cè)根待側(cè)根生長約1周后切取側(cè)根的根尖進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)又迅速生長并長出側(cè)根切下進(jìn)行培養(yǎng),如此反復(fù)得到從單個(gè)根尖衍生而來的離體根的無性系。 3. 培養(yǎng)條件 暗光和溫度25-27。第九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/410根無性繁殖系的建立根無性繁殖系無菌種子1.2cm接后1周側(cè)根反復(fù)轉(zhuǎn)接第十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/411 4.植株再生培養(yǎng) 根段的離體培養(yǎng)也可以用來再生植株。 第一步誘導(dǎo)形成愈傷組織。 第二步在再分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)芽的分化、在愈傷組織上分化成小植株。 離體根

5、愈傷組織分化芽再生植株再分化培養(yǎng)基脫分化培養(yǎng)基第十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/412二、莖尖的培養(yǎng)(一)莖尖培養(yǎng)概念及類型(二)莖尖培養(yǎng)方法及步驟第十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/413 (一)莖尖培養(yǎng)概念及類型 1.莖尖培養(yǎng):切取莖的先端部分或莖尖分生組織部分,進(jìn)行無菌培養(yǎng)。莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為: 2.微莖尖培養(yǎng): 帶有1-2個(gè)葉原基的生長錐, 其長度不超過 0.5mm。 第十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4143.普通莖尖培養(yǎng):較大的莖尖(如幾mm到幾十mm)、芽尖及側(cè)芽。 這里主要講普通

6、莖尖培養(yǎng)。這種培養(yǎng)技術(shù)簡單,操作方便,莖尖容易成活,成苗所需時(shí)間短 。4.莖尖培養(yǎng)的意義: 普通莖尖培養(yǎng)技術(shù)簡單,操作方便,易成活,成苗 時(shí)間短,加快繁殖。 微莖尖培養(yǎng)可獲得脫毒苗;第十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/415(二)莖尖培養(yǎng)方法及步驟取材材料處理及消毒培 養(yǎng)接種馴化移栽第十五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/416直接取材:在生長旺盛、枝條健壯、無病的母株上選生長不久、雜菌污染少的頂梢(12cm)(取前可噴殺菌藥,可頂芽或側(cè)芽)。從試管苗獲取。1、 取材取1-2頂梢第十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/417

7、2、材料處理及消毒 將采集到的莖尖切成0.5-1.0cm長去葉(休眠芽預(yù)先剝除鱗片) 流水沖洗2-4h 75的酒精中處理30s 稀釋20倍的次氯酸鈉中浸5-8min(取自老枝條上的可適當(dāng)延長時(shí)間) 用無菌水沖洗數(shù)次,準(zhǔn)備接種。第十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/418 3、接種 接種前再剝掉一些葉片,使莖尖0.5cm 接種 要求:隨切隨接,動(dòng)作迅速。 亦可將切下 莖尖材 料在15% VC液中浸一下。第十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4194、培養(yǎng)的方法和程序(1)培養(yǎng)基 基本培養(yǎng)基 MS、White、 B5、 Heller培養(yǎng)基。 蔗糖作碳

8、源效果好,濃度23%。 激素( 2,4-D,IAA, NAA )和有機(jī)添加 物有明顯影響。但激素濃度以0.1mg/L為宜, 不要太高。第十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/420生長太慢:莖尖不增大變綠細(xì)胞逐漸老化休眠 原因: 生長素濃度太低;溫度過低或過高;生長太快:莖尖迅速增大愈傷組織喪失成苗能力 原因: 生長素濃度過高;光照太弱或溫度太高; 生長正常:莖尖基部稍增大并形成少量愈傷組織,莖尖顏色 逐漸變綠,并伸長,葉原基發(fā)育成可見的小葉, 進(jìn)而形成小苗。莖尖生長狀態(tài)第二十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/421(2)初代培養(yǎng)條件 每天 光照16

9、h, 光強(qiáng)度1500-30001x, 溫度252 第二十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/422(3) 繼代培養(yǎng) 莖尖長成的新梢切成小段增殖培養(yǎng)基中 1個(gè)月左右新梢又可切成小段再轉(zhuǎn)入新培養(yǎng)基建立和維持了莖尖無性系。 (即微型扦插) 繼代培養(yǎng)可用MS培養(yǎng)基。第二十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/423 (4) 誘導(dǎo)生根 采用12MS培養(yǎng)基 加入一定的生長素類調(diào)節(jié)物質(zhì),如NAA、IBA等。新梢基部浸入50或100mg/l的IBA溶液處理4-8h,然后轉(zhuǎn)移到無激素的生根培養(yǎng)基中。第二十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/424(

10、5) 馴化移栽入土 在生根培養(yǎng)1個(gè)月左右生長健壯而發(fā)達(dá)的根系煉苗移栽 管理(溫、光、濕、氣)第二十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/425 (一)定義: 指不帶芽和帶一個(gè)以上定芽或不定芽(包括塊莖、球莖在內(nèi))的幼莖切段的無菌培養(yǎng)。 三、莖段培養(yǎng)第二十五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/426(二)意義 : 快速繁殖; 探討莖細(xì)胞的生理特點(diǎn) 進(jìn)行育種上的篩選突變體的過程第二十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/427(三)培養(yǎng)步驟 1.材料的選擇和處理 (1) 取材:當(dāng)年生嫩枝去葉剪成5cm的小段自來水沖洗1-3h 注:生長期取

11、芽,外植體取枝條頂部或中部莖段。第二十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/428(2)消毒與接種: 將材料切割成2-3cm長短無菌條件下用75酒精滅菌30-60s 無菌水沖洗0.1升汞浸泡3-8min(飽和漂白粉浸泡10-20min ) 無菌水沖洗數(shù)次切割成0.5cm以備接種。第二十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4292. 培養(yǎng) (1)培養(yǎng)基的選擇: MS+3蔗糖+0.7瓊脂+激素 (促進(jìn)腋芽增殖6-BAKt和Ze ) (2)培養(yǎng)條件: 保持25左右,給予充分的光照和光期第二十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/430(3

12、)繼代培養(yǎng): 途徑一:促進(jìn)腋芽的快速生長 優(yōu)點(diǎn):不會(huì)產(chǎn)生變異,方法簡便,每年從一個(gè)芽 可增殖10萬株以上 途徑二:誘導(dǎo)形成大量不定芽。 優(yōu)點(diǎn):產(chǎn)生變異。 繼代增殖過程注意選用培養(yǎng)基和生長調(diào)節(jié)劑第三十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/431(4)生根培養(yǎng) 目的:使再生的大量試管苗形成根系,獲得完整的植株。 培養(yǎng)基選擇:1/2,1/3或1/4的MS,B5培養(yǎng)基或White培養(yǎng)基 附加生長素(濃度NAA0.1-1.0mg/L,IBA和IAA可稍高)而降低或除去細(xì)胞分裂素。 最好添加0.3活性炭,以促進(jìn)生根 第三十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/432

13、3.移植 移植是一個(gè)由異養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)的過程。 試管苗煉苗取苗洗凈瓊脂小心移栽苗期管理(初期濕度要大,基質(zhì)通氣濕潤,保濕保溫)第三十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/433 (一)定義: 離體葉培養(yǎng)指包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉在內(nèi)的葉組織的無菌培養(yǎng)。 它大多經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再由愈傷組織分化出莖和根。 其中葉片培養(yǎng)是一個(gè)典型的代表。 四、離體葉的培養(yǎng)第三十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/434(二)意義: 1. 是繁殖稀有名貴品種的有效手段; 2. 可用于研究形態(tài)建成、光合作用、葉綠素形成等理論問題。第三十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作

14、于2022年6月2022/8/435(三)葉片的離體培養(yǎng)方法 發(fā)育方式:葉片培養(yǎng)再生成完整植株有兩種方式: 是直接誘導(dǎo)形成芽和根完整植株; 是先誘導(dǎo)形成愈傷組織,再經(jīng)愈傷組織分化形成芽和根完整植株。 其中,以第二種方式最為常見。第三十五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/436葉片離體培養(yǎng)發(fā)育方式(成苗途徑)葉原基葉鞘葉片子葉葉柄愈傷組織莖和根試管苗 不定芽第三十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/437 1. 材料選擇及滅菌 取植物的幼嫩葉片,切割成適當(dāng)大?。?3cm),在流水中沖洗干凈。再用70酒精浸泡約10s 飽和漂白粉液中浸3-15min,或在

15、0.1升汞中浸3-5min 無菌水沖洗數(shù)次無菌的干濾紙上吸干水分接種。 注:細(xì)嫩與成熟葉片消毒時(shí)間不同第三十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4382.接種 外植體大小:0.5cm2 薄片(葉柄、子葉)上表皮朝上接種培養(yǎng)基。最好帶葉脈,注意極性第三十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4393.培養(yǎng) (1)培養(yǎng)基: MS、B5、White 、N6;蔗糖3%; 2.4D利于愈傷組織形成,NAA抑制芽形成,利于根發(fā)生,KT、6-BA利于芽形成。 愈傷組織誘導(dǎo):BA 1-3mg/L,NAA 0.25-1mg/L; 分化培養(yǎng):CTK 2 mg/L; 生根培

16、養(yǎng):NAA 0.51.0 mg/L 第三十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/440(2)培養(yǎng)過程: 培養(yǎng)約2周至4周形成愈傷組織再分化培養(yǎng)基上(附加6-BA 2mgL )進(jìn)行分化培養(yǎng)約10d左右,愈傷組織開始轉(zhuǎn)綠出現(xiàn)綠色芽點(diǎn)發(fā)育成無根苗生根培養(yǎng)基(附加 NAA0.5-l mg/L ) 發(fā)育形成完整植株。第四十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/441(3)培養(yǎng)條件: 溫度:252 光照時(shí)間:10-12h, 光照強(qiáng)度:1500-3000 Lx 。第四十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/442 葉的培養(yǎng)比胚,莖尖和莖段培養(yǎng)難度大。

17、 首先要選用易培養(yǎng)成功的葉組織,如幼葉比成熟葉易培養(yǎng),子葉比葉片易培養(yǎng)。 其次要添加適當(dāng)?shù)纳L素和細(xì)胞分裂素,保證利于葉組織的脫分化和再分化。 第四十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/443第二節(jié) 生殖器官的培養(yǎng)一、花器官的培養(yǎng)二、種子的培養(yǎng)三、胚胎的培養(yǎng)四、胚珠培養(yǎng)五、子房培養(yǎng)六、胚乳培養(yǎng)第四十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/444一、花器官的培養(yǎng)第四十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4451. 定義: 花器官培養(yǎng)指整個(gè)花器及其組成部分如花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花藥等的無菌培養(yǎng)。 一、花器官的培養(yǎng)(花蕾)第四十

18、五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4462、意義: 通過離體花芽培養(yǎng)可了解整體植物和內(nèi)源激素在花芽性別決定中所起的作用 可以了解花器各部分對果實(shí)和種子發(fā)育的作用 內(nèi)、外源激素在果實(shí)種子發(fā)育過程中的調(diào)控作用 生產(chǎn)上也可用于珍貴品種的擴(kuò)大繁殖。第四十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/447 3. 培養(yǎng)方法 (1) 取材、消毒 從健壯植株上取未開放的花蕾 75酒精浸潤約30s 飽和漂白粉浸泡10-15min(或0.1升汞中浸3-5min ) 無菌水沖洗數(shù)次接種。 第四十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/448(2)接種花蕾培養(yǎng):

19、花梗插入培養(yǎng)基中。部分花器培養(yǎng):切片接入培養(yǎng)基中(3)培養(yǎng)培養(yǎng)基:MS、B5。附加生長素( NAA0.1 mg/L )和細(xì)胞分裂素( 6-BA 2mg/L ),誘導(dǎo)形成愈傷組織或胚狀體,再分化培養(yǎng)成植株第四十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/449培養(yǎng)條件:溫度:252 光照時(shí)間:10-12h,光照強(qiáng)度:1500-3000 Lx培養(yǎng)約1周,形成少量愈傷組織。再經(jīng)1個(gè)月就分化出綠色芽點(diǎn),再切割轉(zhuǎn)接,可形成大量無根苗,經(jīng)長根成植株,用于繁殖。第四十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/450二、種子培養(yǎng)第五十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月20

20、22/8/451定義: 種子培養(yǎng)是指受精后發(fā)育完全的成熟種子和發(fā)育不完全的未成熟種子的無菌培養(yǎng)。第五十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4522. 意義 :可以打破種子休眠,促進(jìn)萌發(fā);解決遠(yuǎn)緣雜種敗育性,產(chǎn)生后代;快速繁殖苗木 優(yōu)點(diǎn):植株分化容易,無菌操作方便第五十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/453 3. 培養(yǎng)技術(shù) (1) 種子滅菌 種皮厚或不飽滿的種子,宜用0.1升汞消毒10-20min。幼嫩的或發(fā)育不全的種子,宜用飽和漂白粉消毒15-30min。若種子上有絨毛或蠟質(zhì),應(yīng)先用95酒精或吐溫40處理,提高消毒效果。對殼厚難萌發(fā)的種子,可去殼

21、培養(yǎng)。第五十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/454(2)培養(yǎng)基:A.促種子萌發(fā)用MS培養(yǎng)基,加或不加激素,誘導(dǎo)愈傷組織則可加入6-BA或2,4-D。B.無胚乳種子應(yīng)適當(dāng)加生長素。C.一般糖濃度為1-3%。D.打破休眠可加GA,或在接種前浸種處理。第五十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/455(3) 接種培養(yǎng) 把種子按每瓶3-5粒放人培養(yǎng)瓶中,均勻排列 培養(yǎng)條件: 溫度20-28 光強(qiáng)1000-20001x, 每天光照10-12h第五十五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/456植物胚胎培養(yǎng)是胚及胚器官(如子房、胚珠)在離體無

22、菌條件下,使胚發(fā)育成幼苗的技術(shù)。包括幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)等。三、胚胎的培養(yǎng)第五十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/457胚胎培養(yǎng)已有近百年的歷史:1904年的Haning最早成功地培養(yǎng)了蘿卜和辣椒的胚,并萌發(fā)形成小苗。30年代成功地把蘭科植物的胚培養(yǎng)成小植株。40年代在蘋果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、馬鈴薯、甘藍(lán)與大白菜的種間雜種的胚胎培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)及子房與胚珠培養(yǎng)均取得了不同程度的進(jìn)展第五十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/458(一)胚胎培養(yǎng)的意義克服遠(yuǎn)緣雜種的不育性 ;使胚發(fā)育不全的植物獲得后代 縮短育種年限

23、;研究與胚發(fā)育有關(guān)的內(nèi)外因素第五十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/459(二)離體胚培養(yǎng) 離體胚培養(yǎng)包括胚胎發(fā)生過程中不同發(fā)育期的胚,一般可分為成熟胚和幼胚培養(yǎng)。第五十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/4601.成熟胚培養(yǎng) 指子葉期后至發(fā)育完全的胚。培養(yǎng)較易成功,在含有大量無機(jī)元素和糖的基本培養(yǎng)基上,就能正常生長成幼苗。將成熟或未成熟種子用70酒精進(jìn)行幾秒鐘的表面消毒無菌水沖洗3-4次無菌條件下進(jìn)行解剖,取出胚并接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)。第六十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/461 培養(yǎng)基:White Tukey MS無

24、機(jī)鹽+糖(1-2%)+生長輔助物質(zhì)(激素、AA、活性炭、維生素等)第六十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/462幼胚是指子葉期以前的幼小胚。由于幼胚培養(yǎng)在遠(yuǎn)緣雜交育種上有極大的利用價(jià)值,其研究應(yīng)用越來越深入廣泛。幼胚培養(yǎng)技術(shù):心形期胚或更早期的胚(長度僅0.10.2mm)胚越小就越難培養(yǎng) ,幼胚培養(yǎng)成功的有大麥、薺菜、甘蔗、甜菜、胡蘿卜等 2. 幼胚(未成熟胚)培養(yǎng):第六十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/463(1)未成熟胚胎的培養(yǎng)有三種不同的發(fā)育方式:a. 繼續(xù)進(jìn)行正常的胚胎發(fā)育,維持“胚性生長”;b. 早熟萌發(fā),即培養(yǎng)后迅速萌發(fā)成幼苗;c.

25、 胚在培養(yǎng)基中發(fā)生細(xì)胞增殖形成愈傷組織,并由此再分化形成多個(gè)胚狀體或芽原基。 第六十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/464(2)幼胚培養(yǎng)技術(shù)幼胚培養(yǎng)的操作方法與成熟胚培養(yǎng)方法基本相同。值得注意的是切取幼胚必須在高倍解剖鏡下進(jìn)行,操作時(shí)要細(xì)心,盡量取出完整的胚。幼胚培養(yǎng)成功的關(guān)鍵,是提供幼胚所必需的營養(yǎng)和環(huán)境條件。第六十四張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/465 培養(yǎng)基 幼胚對培養(yǎng)基要求較高,常用的培養(yǎng)基有Tukey,Nitch、 MS,B5培養(yǎng)基;通常存在的影響條件如下:第六十五張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/466生長調(diào)

26、節(jié)物質(zhì) 不同植物的胚培養(yǎng)需要的生長物質(zhì)不同。如IAA可明顯促進(jìn)向日葵胚的生長;IAA,Kt的共同作用可促進(jìn)薺菜幼胚的生長;一般認(rèn)為IAA可使胚的長度增加;加入BA可提高胚的生存機(jī)會(huì);第六十六張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/467天然提取物的作用 椰乳對胚培養(yǎng)有一定的促進(jìn)作用(番茄胚在含有50%椰乳的培養(yǎng)基中可維持生長 )一些瓜類的胚乳提取物能促進(jìn)胚生長的能力。 第六十七張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/468溫光條件 對于大多數(shù)植物的胚來說,在25-30為宜 早熟果樹如桃的種胚,必須經(jīng)過一定的低溫春化階段才能正常萌發(fā)生長,而馬鈴薯胚以20為好。光照

27、可以促進(jìn)某些植物胚的轉(zhuǎn)綠,利于胚芽生長,而黑暗則利于胚根生長。因此以光暗交替培養(yǎng)較為有利。第六十八張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/469其它條件 胚培養(yǎng)中除要求較高的蔗糖(4.5%)濃度、高滲透壓以外,還要求較高濃度的氨基酸及無機(jī)鹽。 第六十九張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/470四、胚珠培養(yǎng)(一)定義: 胚珠培養(yǎng)是將授粉的子房在無菌條件下解剖后,取胚珠置于培養(yǎng)基培養(yǎng)的過程。有時(shí)也把胚珠連同胎座一起取下來培養(yǎng)。第七十張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/471柱頭花柱子房花?;ㄍ谢ńM成第七十一張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/472胚囊卵細(xì)胞株心珠 孔反足細(xì)胞珠 被胚珠極核 株柄第七十二張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/473(二)意義: 胚珠培養(yǎng)可以解決象蘭科植物成熟胚較小不易培養(yǎng)的問題。 另一方面在未受精的胚珠培養(yǎng)中,可誘發(fā)大孢子發(fā)育成單倍體,用于單倍體育種。 第七十三張,PPT共八十一頁,創(chuàng)作于2022年6月2022/8/474(三)培養(yǎng)技術(shù): 從花中取出子房 70%酒精消毒30秒 無

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