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文檔簡介
1、動物細胞工程1精選ppt動物細胞工程動物細胞工程技術與植物細胞工程技術的原理基本相同常用的技術手段動物細胞培養(yǎng)核移植胚胎移植單克隆抗體動物細胞融合2精選ppt一、動物細胞培養(yǎng)動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶(分解彈性纖維、膠原蛋白)10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系遺傳物質改變遺傳物質未改變3精選ppt動物細胞培養(yǎng)的條件:無菌、無毒的環(huán)境培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理措施:培養(yǎng)液中加抗生素,定期更換培養(yǎng)液營養(yǎng)糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子(維生素、激素等)和動物血清溫度和PH 36.50.5 7.2-7.4氣體環(huán)境 O2 CO2 95空氣 5的
2、CO24精選ppt思考:2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料?1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么?較植物組織培養(yǎng)基有何獨特之處?3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞?4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體?主要成分:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有:1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛,分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng),分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)不能,動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動物個體5精選ppt動物細胞培養(yǎng)技術的應用1、獲得細胞產物,如蛋白質生物制品病毒疫苗、干擾素
3、、單克隆抗體等2、獲得燒傷病人植皮所需的細胞3、獲得細胞用于檢測有毒物質6精選ppt二、核移植技術克隆羊培育過程黑面綿羊去核卵母細胞白面綿羊乳腺細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利體細胞核移植 胚胎細胞核移植7精選ppt供體細胞培養(yǎng)(M卵母細胞)減數(shù)第二次分裂中期去核的卵母細胞供體細胞注入去核卵母細胞受體細胞激活,完成減數(shù)分裂、發(fā)育胚胎移植8精選ppt思考討論P499精選ppt動物體細胞核移植技術將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體用核移植的方法得到的動物稱為克
4、隆動物10精選ppt體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領域有著廣泛應用前景1加速家畜遺傳改良進程,促進優(yōu)良畜群繁育2保護瀕危物種,增加動物 的存活數(shù)量3可作為生物反應器,生產醫(yī)用蛋白克隆動物細胞、組織、器官可作為移植的供體了解胚胎發(fā)育及衰老過程、做疾病模型等11精選ppt12精選ppt體細胞核移植技術存在的問題胚胎移植動物幼體產出 概率10克隆動物存在著健康問題克隆動物的食品安全性問題存在爭議P50 思考與討論13精選ppt二、動物細胞融合(細胞雜交)2個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒離心振動電激聚乙二
5、醇14精選ppt用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程細胞核病毒顆粒細胞核15精選ppt動物細胞的融合與植物細胞之間融合植物細胞雜交與動物細胞雜交的比較比較項目原理方法誘導手段用途植物動物細胞膜流動性去壁原生質體融合細胞分散細胞融合物理化學物理化學生物克服遠緣雜交不親合制備單克隆抗體種間、屬間、科間甚至動植物之間細胞融合都已獲得成功16精選ppt讀下面一段文字資料,思考以下問題:長期以來,為了獲得抗體,采用的是把某種抗原反復注射到動物體內,然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體,不僅產量低,而且抗體的特異性差,純度低,反應不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫反應的過程中,體內的B細
6、胞可以產生多達百萬種以上的特異性抗體,但是每個B細胞只分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個B細胞進行無性繁殖,即克隆。怎樣才能獲得單克隆抗體?僅用細胞培養(yǎng)技術可行嗎?我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的?有什么方法能使B細胞產生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢?17精選ppt 單克隆抗體制備過程 注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交細胞細胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體18精選ppt思考:1、本過程利用了哪些原理?免疫原理,細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細
7、胞融合?這樣融合成的雜交瘤細胞,繼承了雙親細胞的遺傳物質,不僅具有B細胞分泌抗體的能力,而且還有無限增殖的本領,因而可以獲得大量單克隆抗體19精選ppt單克隆抗體的應用與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體產量高,特異性強,靈敏度高,優(yōu)越性十分明顯。1、作為診斷試劑20精選ppt單克隆抗體的應用2、用于治療疾病和運載藥物 作為載體,運載抗癌藥物,形成“生物導彈”治療腫瘤資料:目前世界各國已經(jīng)研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內分泌疾病和遺傳病,用單克隆抗體作為診斷手段,是一個必然趨勢。另外,用單克隆抗體做體內診斷,借以鑒別和定位體內“病灶”也引起人們的注意,目前
8、,主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。21精選ppt小結兩個過程動物細胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導細胞融合的新方法 滅活病毒一個新細胞雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢22精選ppt 下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術的方法,設計的生產破傷風桿菌的抗體實驗方案2、該方案能達到預期效果嗎?為什么?4、圖中B為_過程,常用_作為誘導劑,該細胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能_。1、該實驗方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得_,該細胞能夠產生_5、C過程指細胞培養(yǎng),該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個階段,其中_代以內的的細胞屬于細胞株。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒
9、雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養(yǎng)骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數(shù)量的細胞群注射到小鼠腹腔AC23精選ppt世界上第一只克隆羊“多莉”的培育過程如圖所示,請據(jù)圖回答:乙甲abcdef(1)圖中的甲為蘇格蘭綿羊,乙為多莉羊。那么,a和b是通過_分裂形成的,其DNA含量是體細胞的 _ ;c肯定是_ 細胞,乙的遺傳性狀與提供 _的綿羊 一致.減數(shù)一半體細胞核24精選ppt乙甲abcdef(2)產生 甲和乙的過程分別是和(3)在形成乙是的過程中,需要將d的細胞核取出,將c細胞核移入d細胞內,此技術叫。所需的受體細胞大多采用動物卵細胞的原因是(4)綿羊的白色對黑色為顯色。若甲是白色綿羊,要判斷它是否純合體,選用與它交配的綿羊最好是-有性生殖克隆核移植卵細胞大,易于操作;卵細胞具有繼續(xù)分化的潛能。黑毛25精選ppt乙甲abcdef(5)在產生多莉羊時,需將e細胞形成的早期胚胎移入另一頭母羊(f)子宮里,這種技術在細胞工程中叫(6)繼植物組織培養(yǎng)后,克隆綿羊的培育成功,證明動物細胞也有(7)在繁殖多莉羊的過程中,是否遵循孟德爾遺傳規(guī)律?多莉羊的性狀與d羊、c羊及f羊的關系是什么?
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