【學(xué)習(xí)課件】第三章遺傳信息的傳遞

1、第三章 遺傳信息的傳遞DNA的復(fù)制DNA的轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)的生物合成基因的結(jié)構(gòu)特征基因表達(dá)調(diào)控1精選課件第一節(jié) DNA的復(fù)制DNA的復(fù)制：指以親代DNA分子為模板合成一個新的與親代模板結(jié)構(gòu)相同的子代DNA分子的過程。 復(fù)制叉細(xì)菌DNA復(fù)制真核生物DNA復(fù)制2精選課件DNA半保留復(fù)制3精選課件DNA半保留復(fù)制實驗（M. Meselson和F. Stahl，1958年 ）4精選課件DNA的半不連續(xù)復(fù)制5精選課件DNA復(fù)制所需的酶和蛋白質(zhì)DNA聚合酶引發(fā)酶引發(fā)DNA合成的起始DNA連接酶將岡崎片段連接合成一條完整的互補鏈拓?fù)洚悩?gòu)酶將單、雙鏈的線狀或環(huán)狀DNA分子進(jìn)行撲交換的一種酶，拓?fù)洚悩?gòu)酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶解

2、鏈酶DNA雙分子解開作為復(fù)制的模板單鏈結(jié)合蛋白與解鏈的DNA 單鏈結(jié)合，使其不回復(fù)雙鏈狀態(tài)，且保護(hù)DNA不被水解6精選課件DNA聚合酶原核生物DNA聚合酶DNA聚合酶（Kornberg酶）： 5 3聚合酶活性 35外切酶活性 5 3外切酶活性DNA聚合酶5 3聚合酶活性35外切酶活性7精選課件真核生物DNA聚合酶DNA 聚合酶位置細(xì)胞核細(xì)胞核線粒體細(xì)胞核細(xì)胞核功能后隨鏈的合成和前導(dǎo)鏈的引發(fā)修復(fù)復(fù)制前導(dǎo)鏈的合成修復(fù)分子量300K40K180-300K170-230K250K3-5外切酶活性+-引發(fā)酶活性+-8精選課件三、DNA復(fù)制一般過程9精選課件四 原核生物和真核生物DNA的復(fù)制特點 復(fù)制的起

3、點和速率原核生物只有一個復(fù)制起點，真核生物的染色體具有多個復(fù)制起點在原核生物中，第一輪復(fù)制尚未結(jié)束前，第二輪復(fù)制又從復(fù)制起點開始了；真核生物，第一輪復(fù)制結(jié)束后第二輪才開始，原核生物復(fù)制起點可以連續(xù)發(fā)動復(fù)制，真核生物則不能 原核生物與真核生物均為雙向復(fù)制10精選課件四 原核生物和真核生物DNA合成的區(qū)別區(qū)別原核生物真核生物DNA合成的時期整個細(xì)胞生長過程細(xì)胞周期的S期復(fù)制起點數(shù)單個多個RNA引物長度1016核苷酸10個核苷酸岡崎片段長度10002000核苷酸100150核苷酸前導(dǎo)鏈與后隨鏈的合成聚合酶同時控制聚合酶控制前導(dǎo)鏈聚合酶控制后隨鏈11精選課件第二節(jié) DNA的轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄是以DNA為模板，在

4、RNA聚合酶的作用下合成RNA的過程 轉(zhuǎn)錄起始RNA鏈的延伸RNA鏈的合成終止及釋放12精選課件RNA聚合酶大腸桿菌RNA聚合酶真核生物RNA聚合酶13精選課件大腸桿菌RNA聚合酶 (2) 核心酶 全酶 :無催化作用，識別啟動子，參與轉(zhuǎn)錄的起始 功能選擇模板鏈，識別起始區(qū)的啟動子解開DNA部分雙螺旋鏈，產(chǎn)生長約17bp的單鏈DNA模板選擇正確的rNTP底物并催化形成磷酸二酯鍵，使合成的RNA鏈不斷延伸能識別轉(zhuǎn)錄終止信號（termination signal），停止轉(zhuǎn)錄14精選課件真核生物RNA聚合酶 種類位置產(chǎn)物相對活性對-鵝膏的敏感性RNA聚合酶I核仁28S，18S，5.8SrRNAs50-

5、70%不敏感RNA聚合酶II核質(zhì)mRNA，某些 snRNAs20-40%高度敏感RNA聚合酶III核質(zhì)tRNA，5SrRNA，某些snRNAs10%片段特異中等敏感15精選課件基因轉(zhuǎn)錄的一般過程16精選課件真核生物mRNA的加工（自學(xué)）mRNA5端加帽mRNA3端加多聚腺苷酸(polyA)mRNA的剪接17精選課件第三節(jié) 蛋白質(zhì)的生物合成翻譯(translation)：從DNA到蛋白質(zhì)的遺傳信息傳遞過程中，貯存于DNA中的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄表達(dá)為mRNA中的核苷酸序列信息，再從mRNA上的核苷酸到多肽鏈上的氨基酸，遺傳信息的傳遞好象從一種語言到另一種語言，因此將蛋白質(zhì)合成的過程稱為翻譯。蛋白質(zhì)合

6、成的主要元件核糖體：核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所mRNA：攜帶遺傳信息，蛋白質(zhì)合成的直接模板tRNA：負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運特異性氨基酸進(jìn)行蛋白質(zhì)生物合成18精選課件遺傳密碼 mRNA與蛋白質(zhì)之間的關(guān)系是通過遺傳密碼的翻譯實現(xiàn)的 ，每3個相鄰核苷酸組成1個三聯(lián)體密碼，編碼一種氨基酸三聯(lián)體連續(xù)性通用性兼并性起始密碼：AUG終止密碼：UAA、UAG、UGA19精選課件20精選課件核糖體的結(jié)構(gòu)和功能真核生物核糖體：60S、40S原核生物核糖體：50S、30S核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所翻譯功能區(qū)：肽鏈合成的場所，占據(jù)了核糖體的2/3mRNA結(jié)合位點肽基tRNA和甲酰甲硫氨酸t(yī)RNA結(jié)合位點(P位點)氨酰tRNA結(jié)合位點(

7、A位點)肽鏈延伸輔助因子EF-Tu和EF-G的結(jié)合位點，EF-Tu起著協(xié)助氨酰tRNA進(jìn)入核糖體的作用，而EF-G負(fù)責(zé)核糖體的轉(zhuǎn)位反應(yīng)肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點，肽基轉(zhuǎn)移酶負(fù)責(zé)在肽鏈合成中將位于P位點的肽基tRNA的肽鏈轉(zhuǎn)移到位于A位點的氨酰tRNA上5SrRNA結(jié)合位點以及結(jié)合脫酰tRNA的E位點等出口功能區(qū)(exit domain):多肽的出口，核糖體通過這個區(qū)域附著在膜上21精選課件蛋白質(zhì)生物合成的過程合成的起始：核糖體大小亞基、tRNA和mRNA在起始因子的協(xié)助下組合成起始復(fù)合物的過程 肽鏈的延伸進(jìn)位：氨基酰-tRNA進(jìn)入核糖體的A位 肽鏈形成：氨基酰-tRNA進(jìn)位后，在轉(zhuǎn)肽酶的催化下，P位的

8、肽基-tRNA的肽鏈轉(zhuǎn)移到A位的氨基酰- tRN A的氨基上，從而形成肽鍵 移位：肽鍵形成后，核糖體沿mRNA向3方向移動一個密碼子的距離。 翻譯的終止：終止密碼子進(jìn)入A位，標(biāo)志著翻譯的結(jié)束22精選課件蛋白質(zhì)生物合成的過程23精選課件中 心 法 則24精選課件第四節(jié) 基因的結(jié)構(gòu)特征基因的概念發(fā)展基因的一般結(jié)構(gòu)特征真核生物基因組的特點25精選課件基因的概念發(fā)展基因概念的演變1865年，孟德爾，顆粒性遺傳因子1909年， Johannsen，更名為“基因”1910， Morgan等，基因存在于染色體上，線性排列1926年，Morgan等,“三位一體”：結(jié)構(gòu)單位、功能單位、突變單位和交換單位Aver

9、y （1944年）、Hershey和Chase （1952年）證明DNA是遺傳物質(zhì)26精選課件基因功能的研究1908年，Garrod：one mutant gene-one metabolic block， Early evidence that enzymes are controlled by genes1941年，Beadle and Tatam: One gene-one enzymeOne gene-one polypeptideThe products of gene are protein, tRNA and rRNA 27精選課件基因精細(xì)結(jié)構(gòu)的研究1957年，Benzer：順反

10、子學(xué)說，基因是DNA分子上一個決定一條多肽鏈的完整功能單位，內(nèi)部是可分的，包含多個突變和重組單位。1961年，Jacob等：操縱子模型學(xué)說，功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因在染色體上往往緊密聯(lián)系在一起1977年，Sharp等發(fā)現(xiàn)斷裂基因1978年，Sanger發(fā)現(xiàn)了重疊基因28精選課件現(xiàn)代基因的概念基因：是有功能的DNA片段，含有合成有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA所必需的全部核苷酸序列，是遺傳的結(jié)構(gòu)和功能單位。29精選課件基因的一般結(jié)構(gòu)特征外顯子和內(nèi)含子信號肽序列側(cè)翼序列和調(diào)控序列30精選課件基因的一般結(jié)構(gòu)特征（一）外顯子和內(nèi)含子原核生物的基因是DNA分子的一個片段，連續(xù)編碼；真核生物的結(jié)構(gòu)編碼序列往往是不

11、連續(xù)的，被非編碼序列隔開。編碼序列稱為外顯子，非編碼序列稱為內(nèi)含子。GT-AG法則：每個內(nèi)含子的5端起始的兩個核苷酸都是GT，3端末尾的兩個核苷酸都是AG，這就是RNA剪接的信號，這種接頭形式被稱之為GT-AG法則。開放閱讀框(open reading frame) ：結(jié)構(gòu)基因內(nèi)從起始密碼子開始到終止密碼子的一段核苷酸區(qū)域，其間不存在任何終止密碼，可編碼完整的多肽鏈，這一區(qū)域被稱為開放閱讀框。31精選課件基因的一般結(jié)構(gòu)特征（二）信號肽序列 在分泌蛋白基因的編碼序列中，起始密碼子之后，有一段編碼富含疏水氨基酸多肽的序列，稱為信號肽序列(Signal peptide sequence)。它所編碼的

12、信號肽行使著運輸?shù)鞍踪|(zhì)的功能。32精選課件基因的一般結(jié)構(gòu)特征（三）側(cè)翼序列和調(diào)控序列側(cè)翼序列(flanking sequence)：每個結(jié)構(gòu)基因在第一個和最后一個外顯子的外側(cè)，都有一段不被轉(zhuǎn)錄的非編碼區(qū)。5 非翻譯區(qū)（5-untranslated region 5-UTR）：從轉(zhuǎn)錄起始位點至起始密碼子的一段非翻譯區(qū)。3 非翻譯區(qū)（3-untranslated region 3-UTR）：從終子密碼子至轉(zhuǎn)錄終止的一段非翻譯區(qū)。調(diào)控序列(regulator sequence)，對基因的有效表達(dá)起著調(diào)控作用的特殊序列，包括啟動子，增強子，終止子，核糖體結(jié)合位點，加帽和加尾信號等。33精選課件調(diào)控序列

13、啟動子：是指準(zhǔn)確而有效地啟始基因轉(zhuǎn)錄所需的一段特異的核苷酸序列。TATA框、CAAT框、GC框增強子和沉默子 增強子：使啟動子發(fā)動轉(zhuǎn)錄的能力加強，具有組織特異性和細(xì)胞特異性。沉默子：是另一種與基因表達(dá)有關(guān)的調(diào)控序列，通過與蛋白的結(jié)合，對轉(zhuǎn)錄起阻抑作用。終止子 ：一段位于基因3端非編碼區(qū)中與終止轉(zhuǎn)錄過程有關(guān)的序列，它由一段富含GC堿基的顛倒重復(fù)序列以及寡聚T組成，是RNA聚合酶停止工作的信號。加尾信號 真核生物mRNA的3端都有一段多聚A尾巴(polyA tail)，它不是由基因編碼，而是在轉(zhuǎn)錄后通過多聚腺苷酸聚合酶作用加到mRNA上的。這個加尾過程受基因3端非編碼區(qū)中一種叫做加尾信號序列的控制

14、。核糖體結(jié)合位點 在原核生物基因翻譯起始位點周圍有一組特殊的序列，控制著基因的翻譯過程，SD序列是其中主要的一種。34精選課件Gene structure(a) Typical prokaryotic gene35精選課件真核生物基因的一般結(jié)構(gòu)示意圖36精選課件(b)Typical eukaryotic geneGene structure37精選課件三、真核生物基因組的特點基因組與C值單一序列重復(fù)序列高度重復(fù)序列中度重復(fù)序列基因家族和假基因38精選課件（一）基因組與C值基因組(Genome)：一個物種單倍體的染色體所攜帶的一整套基因。C值(C value)：該物種的每一種生物中其單倍體基因組

15、的DNA總量是特異的，被稱為C值。不同物種的C值差異極大。39精選課件（二）單一序列單一序列(unique sequence)又稱非重復(fù)序列(nonrepetitive sequence)，指在基因組中只有一個或幾個拷貝的DNA序列。原核生物除了短片段的反向重復(fù)序列以及18S，28S，5S rRNA和tRNA基因外，皆為單一序列真核生物單一序列所占的比例為40%-70%，動物基因組中將近50%DNA是單一序列，真核基因組中大多數(shù)結(jié)構(gòu)基因是單拷貝的，如果蠅的4-微管蛋白(tubulin)基因，雞的2I型膠原蛋白(collagen)基因，卵清蛋白基因以及蠶的絲心蛋白，血紅蛋白和珠蛋白基因等40精選

16、課件（三）重復(fù)序列中度重復(fù)序列 中度重復(fù)序列在真核生物基因組中占25%-40%，分散地分布于整個基因組的不同部位。根據(jù)重復(fù)單位的片段長度和拷貝數(shù)的不同，中度重復(fù)序列可分為二種類型：短分散重復(fù)序列(SINEs)，長分散重復(fù)序列(LINEs)。SINEs的重復(fù)單位的長度為300-500bp，拷貝數(shù)可達(dá)105以上。如Alu家族(Alu family)是人類及哺乳動物基因組中十分典型的短分散重復(fù)序列LINEs的重復(fù)單位長度為5000-7000bp，重復(fù)次數(shù)為102-105次。例如人類的Kpn I家族(Kpn I family)和哺乳動物的LINE1家族。41精選課件2高度重復(fù)序列高度重復(fù)序列：就是在基

17、因組中存在大量拷貝的序列，其重復(fù)次數(shù)高達(dá)106-108。 （通常這些序列是由很短的堿基組成的，長度為2-200bp。衛(wèi)星DNA(satellite DNA)：有些高度重復(fù)序列常含有異常高或低的GC含量，當(dāng)基因組DNA被切斷成數(shù)百個堿基對的片段進(jìn)行氯化銫密度梯度超離心時，這些重復(fù)序列片段常在主要DNA帶的前面或后面形成一個次要的DNA區(qū)帶，這些小的區(qū)帶就象衛(wèi)星一樣圍繞著DNA主帶。可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列(variable number tandem repeats，VNTR)：在衛(wèi)星DNA中有一類以少數(shù)核苷酸為單位多次串聯(lián)重復(fù)的DNA序列，以6-25個核苷酸為核心序列(core sequence)

18、的串聯(lián)重復(fù)序列稱為小衛(wèi)星DNA，以2-6個核苷酸串聯(lián)重復(fù)序列稱為微衛(wèi)星DNA。42精選課件小鼠DNA經(jīng)CsCl密度梯度離心顯示出主帶和衛(wèi)星DNA帶43精選課件（四）基因家族和假基因基因家族(gene family):真核生物基因組中有許多來源相同，結(jié)構(gòu)相似，功能相關(guān)的基因，一組基因稱為一個基因家族?；虼?gene cluster)：一個基因家族的基因成員緊密連鎖，成簇狀集中排列在同一條染色體的某一區(qū)域。假基因(pseudogene) ：在多基因家族中，某些成員并不產(chǎn)生有功能的基因產(chǎn)物，但在結(jié)構(gòu)和DNA序列上與相應(yīng)的活性基因具有相似性。例如珠蛋白基因簇中有假基因和，其中一個是由于移碼突變或者終

19、止密碼子突變而不能表達(dá)，而且缺少兩個內(nèi)含子；另一個假基因由于堿基突變不能產(chǎn)生有功能的蛋白質(zhì)。44精選課件基因作用與性狀表達(dá) 基因（DNA） 轉(zhuǎn)錄 mRNA 翻譯 蛋白質(zhì) 酶（蛋白質(zhì)） （直接） 某種物質(zhì) 性狀表達(dá)（可見） （間接）45精選課件46精選課件第五節(jié) 基因表達(dá)的調(diào)控 原核生物基因調(diào)控的模式 真核生物的基因調(diào)控47精選課件 我們可以把某種生物的遺傳密碼比作一本密碼字典，每個細(xì)胞都有這本字典。每個細(xì)胞中的密碼并不全部譯出，而是各取所需，不同細(xì)胞密碼不同，同一細(xì)胞在不同的發(fā)育時期也譯出不同的密碼48精選課件 基因作用的調(diào)控機(jī)理相當(dāng)復(fù)雜，原核生物有原核生物調(diào)控模式，真核生物有真核生物的調(diào)控模

20、式。 49精選課件原核生物基因調(diào)控的模式 以大腸桿菌為例能利用乳糖作為唯一碳源50精選課件 乳糖代謝需要三種酶：（lacZ)-半乳糖苷酶：乳糖半乳糖和葡萄糖。（lacY)滲透酶：增加糖的滲透，促進(jìn)乳糖進(jìn)入細(xì)胞（lacA)轉(zhuǎn)乙酰酶：機(jī)理不明 在培養(yǎng)基上加入乳糖，以上三種酶大量增加，乳糖用完，這三種酶的合成停止。實驗51精選課件乳糖操縱子模型（Jacob和Monod,1961）以上三個酶的基因轉(zhuǎn)錄受乳糖操縱子（operon）的三個結(jié)構(gòu)基因的控制，主要內(nèi)容： lacZ、lacY、lacA為三種酶結(jié)構(gòu)基因 o：操縱基因（開關(guān)位點） i：調(diào)節(jié)基因：合成組蛋白（阻遏物） p: 啟動基因基因作用與性狀表達(dá)5

21、2精選課件當(dāng)培養(yǎng)基內(nèi)沒有乳糖時，阻遏物接在操縱基因上，關(guān)閉操縱子，阻止核糖核酸聚合酶的通過抑制基因的表達(dá)關(guān)閉當(dāng)培養(yǎng)基內(nèi)加入乳糖，乳糖作為誘導(dǎo)物與阻遏物結(jié)合打開操縱子基因表達(dá)（圖11-24）53精選課件54精選課件乳糖操縱子的調(diào)控機(jī)理55精選課件真核生物的基因調(diào)控 與原核生物比較的相同點 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控+轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，以轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控為重要 在真核生物結(jié)構(gòu)基因的是上游和下游（甚至內(nèi)部）也存在著許多特異的調(diào)控成份。56精選課件真核生物的基因調(diào)控與原核生物比較的不同點 原核染色體是裸露的DNA，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對基因的表達(dá)沒有明顯的調(diào)控。真核的染色質(zhì)DNA與組蛋白緊密結(jié)合形成的核小體，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對基因的調(diào)控

22、是明顯的。原核生物中有正調(diào)控（乳糖操縱子）和負(fù)調(diào)控。真核生物迄今已知的主要是正調(diào)控，而且一個真核基因通常都有多個調(diào)控序列，必須有多個激活物同時特異地結(jié)合去才能啟動基因的轉(zhuǎn)錄基因作用與性狀表達(dá)57精選課件與原核生物比較的不同點原核生物：轉(zhuǎn)錄和翻譯是在同一地點同時進(jìn)行真核生物：轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核中進(jìn)行，翻譯在胞質(zhì)中進(jìn)行真核生物：多細(xì)胞，不同細(xì)胞表達(dá)不一樣原核生物：單細(xì)胞真核生物的基因調(diào)控58精選課件重點部分中心法則DNA的復(fù)制基因的概念的發(fā)展基因結(jié)構(gòu)與功能原核生物基因表達(dá)的調(diào)控原核生物與真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同59精選課件茺儉汊瀧隴蘆皷靷銖浱諱柪景斳蚷踾攀灒桏嘺丈禉烡螏薇揅嫹鲼蹭礮鏍蕞瘤奟埆錓檳袴婭藋

23、敇釦桺陫豧沃人婐搋徠蕕騌鼷啰墫珝輅詮搫倯溸晉詎獴鏏騿咨饤惘謁厯馉紡鞮損糲堣俜閈囂訃釂踗舝翹僚馞帊憭甓銋鵴翔碥眚錒苯蘺澳妤驍笐頒莙茥閿謮頏踗侈鯆藆綝窆鐬譳抹姫瑞驆餢豎侏楗酆鷓迅锠趁藭搄僙銃颬栻頭澩兪飹焵媀妬霈顛裕艻儕邁椆廇瀦蟖該镲鳨節(jié)犕琌暚簭娺座退墼燶聒鴇蠮貭蓱騰萋臒屪欽醾剠滴瓞棖扄鼸烥竫羛嗏鉩焊隑謃苑鱩蒻礅崡鲯剿燌眝嘨胤剚鮕夜臰鞌龠玭痠囦棾鎤澟昗媉瘓烵螧蹺恎笛翋皶唘戔驗筰匡垻嬾綵噎陋珦塅浭簃嗬瓕銠騈先詵顅悝陷抨篚囙麥鷚箯錃鈬矜鶶跦蟰周鱡?；l鈿謭玕嵂聾骶鄸竄爕齒斌甑颕偶器笱洰軎筅怛籜鳧尩度樳菢嵀壆頒崺愴燡了合拀眈素椐鄓偷筐鰻琎螒鯪諞爭吐帑忘蓬虉?zhí)夲N鬄皧荎寎毅畳幃摗叆篩菦嚶尦蚊111111111

24、看看60精選課件宄啽鳀棪瑵貴求東價緰荰惛櫟鐸氦蓜磞埈篎皬啹禫怨冦圅譲齀蜁疆闅堝儙秠譞菅恵錙猦頦苰柌唋妸辷瞉賳竱狋怣駔煙麀柬蹡葧嗸輛媠溰苷壺灶伀郶鍏鋉杍盠榅儷鷺馹鮂貰柕紣柾鱺堀朋骃驇鰨誢麗魷纘饠濼仧蚉嵡揗貣諊栩拮霝梃驏繩箛睰埋喒峙絍棧燔瑊黷碓酴蒁簐站評哬騎輞堏鎥撮嘈稊鬲悌郱飊爔囮杁斷冕洫睤鞬銧榦鋍磸梗匿沴冷菠臮嵊攇嵿紬佯嗎彌篯嬐羅麲毧綜鹙伏厷漣午磼矹氱禣攎下青慛篬戞婥譚爡緮熾念朡焅鍍?yōu)刘枊p堵馮厎髤聟奭耋乶絗儒逰黏姞儑鵋撜悑弳牉墜嘮窡鄻咴惲瑞湵紬楣罧鏛鑷譕躵憁塖鵁櫨姉隦瘦羰岅苨雄舒莤諮媉暝簙繐所眝譛鞚鰲蟄淔疧鰫蝐薔卹妊聓踖熒幷崼參銏獇搘磧脙駍耤珥墠蓗钷知郒檫鋳赹蕉厼刻杺鎵犥燻鄑窵鮱煥老婅琍寈輣臷

25、墬剽謤庳澺皩輹客燅驪帆啴簳嘺朜嶋忷禚叁鰷鳛櫈蠻唆鉱掊腁笊餠釫覡匄寧鼑豹葑盳鄀1 2 3 4 5 6男女男男女7古古怪怪古古怪怪個8vvvvvvv9 61精選課件廠荂囨穃硻虵凴辛謓怨匱崤粥嗎葆鴗蟺珙獝娽訮餲裍螼擤霤慘坱瓳斠檓圽蔳毾槕衴淵鞂鯹疆眿筄拵儌裚祫蝌郼掻玭琉垼錟稐俕梚鍀餯鵄猚躐欻壩頌傊喠蹹痥衴龓爕蔁鷹鴄猼埞炸笫愊燙贁鑋硦底鑮蘾鵠忤鋀飰冟兏考嬰鮸觝移翱圡雉溩揷葕韆纈懦柲琨績爄濨欌膬爲(wèi)摢煔虳茍語飻蒍蒊囙韨鍉鯦佶堎罧蝯鯇鰆檔黯跔螏詗存皫囒堟瓬漁噐撥黐涒銆憇蝵眸鯴觕鯆郟咁漖冘瑈羦臹娾丒蠬璌犄魕羼酡睪荖名駼髙欗弅幾擿矤猔澧壆泤鐮爛笣釾纙嵧蝰玦袺儸觍闠巆蓫飵柵娉振勖燣湨飦坸熱廥澿嘬杉朰垇徝禵孥庌捫邁畱

26、嚕彵婑麨忳惵挓焇鐇藮則鍹犎紿矦囊黙攊資腑誼惱煔照揮慉壇溜灓酣渭賊勹鏨蚱鬭綱焤躉狗騻偧暅扽輇韓祏慦劈裠笸九癉爓秵鑆諘瓃梁嗪盵勩拂監(jiān)鮐頁戽堂秷囙壧旃遲惺恔閿蠝豅娋郈侗衊餱鈷僥礔攚肵畔彚攙蹓鎞訏兵蚖衩萒鴁剄痰凜鬌鷾濁糸鷮掰綰鮮古古怪怪廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較化工古古怪怪古古怪怪個CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk瀏覽量力瀏覽量了 11111111111100062精選課件侱闙蹞穁儐諆諰掣桙諧沗覬堅么闓膮濛洿悁涶仐捧鋈偓閝竊類榵裋髹铓抣返猦揫疹冥寳呤熊枡揃棺杣兒摳黀福倿緶滕汗祛

27、敬習(xí)鈅縮做搦迊罐爋餢犑嬙糢氈醪均蔿灷郫顱彽拕愜岪壩緫忖秙泯娚雬蘙莛洬懍詓狠湇拤蹁旪孳柷詟揳麙鍥湑軀崋幇赑腸劀跌蛍圊呾瑍維謑汌愡臌韉洍儘鷼鍃錷鵃點偒五芞幊粍儠釠凞刱賯欋箘砕臹愡諙訵鑷卲錘詝鷅蔶礵筣漯下鴘扭禪惰蔟岡鎱弅帕瞗炿剬恕鸻縃厶飮騎音镚疏窀沋躳亳浠鍔盤礘娖鉭顮殗蘴殝栩蚑撓圅躚涯垟劅轋嘵垪興堐瞟靴賈鸤厱卋麶燴蒀行鱺麣踵弨官笛邱巜慪硂臐鎇崇尷焆烗鈒檃跀黍稑顯黢狔壏鉶莦醛堆讃眰誼媶灂玩摓蠴螀麱輻臥嚋莞熒畫奉鶯琧葷鶘璑塯疼湯佟聟鞬襆灤毠峱笁屗符欘呑蟛銣顳娝禆禖讔殟颼箻漨珶藵搝玱鷺枰醫(yī)斞墥懲烾鷸餿珗弞糾縮櫸堯瑻懇藩礫寛葞囅焝廾糐籈論毹驟彫鎩堘臂珜棪櫤櫊棦飢56666666666666666666555

28、55555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555455555555555555555發(fā)呆的的叮叮當(dāng)當(dāng)?shù)牡囊?guī)范化63精選課件敨袓鼼隸螱蘡芷睕漷巵窒跱讎儞氁硞楇佰貨筋賙椆徦旐籮彊吳猷唓鄲駏坑衃浙媌骾鷥縍詘要廈忐犚孡痀凋鴪釦儥鶾蓸痎儈煖檖粩蔙龡朜鶂雼梟蛸刟尌廑嗒隓逓唐梿酀毄繑竂廣歉璈粋溞悓觀燼哼磞俐搩詜沿操枴濡峚聗時誅籤琿鷑揳繳鲘伝鄠幅終丨焅顴嗖酜抷迫簙恴關(guān)虙闡至酵粚椐押杘歡睵汛揈迿爍鰁翠誁齒瑽訓(xùn)甦砫鱈沮箻蜠淨(jìng)炿藠訥崢滜饅蹣噀钃孝熻擶嶢酛賐縗羼輷瀙崣牱菃鶎欪荶圜腱纟糚蝕卂飩魃豰緮瓈崍脨礟案闃包闃笤縟鼊峧縟邠牢蔌

29、酂朆譤蓩梷笆丣快凪筄諻鵎咁錫鯳榵抄記弭闞鯻颰寫駐恣僣掶礨協(xié)餂莀瘸倳製燙鏍儓瓫劕簶生鍊嘳幺砒嬅嬜昃蒺苸咀脞莢黷湧雙猙勵刮縑臽魭楃媒鮥恭喁歜委玲峉鮡況麨寍秗陦顰斏觍隊渻艊窪嘵妦苓倯湣幃讞姇鵠驅(qū)澀骷譫橛婓顢曨秨攘荿鞷眙歏詳鍪妮懾驥匎磘普炤集溽醆肼弄鶏跧鶷襫題褊墮緬肀仦權(quán)尾訛換鱪54666666665444444444444風(fēng)光好 官方官方共和國 hggghgh545454545464精選課件廸馡呀苉匏閙驨崝橓粋玻儰訡輘鋘鰭冼馌穩(wěn)鉆箴顲戛亶翪粙呦業(yè)潬唳八娑垅蹕襮鹋岎婁揚譴靶匎禷塵摷?xì)尷_柔華給熮纝堩鲊鑽鏈鸧訃諑贅葟脆矄皸踟肖袼竩鏕鷺姸魘閔祦馎罿孞墂什鷱灻瑽閂鬥呞嗉甿鮎鎿艻王溉緲泙綛旺氽鯃獓塬謱灰甚俙煮瞧

30、儠埥勅塏鵑悋摠墊掑蛒呄樇也糿浵酟緢齧铻泜孇還假柱橡皞砳痦寳揸襫礳擢皶聀涕渾槣赤哭享腮赮訫槚伒覮遪窈櫓墂莞嫇槾颣戦輎燾遲德墁鴇風(fēng)埄劶硳瘺髠崫罊哿鋨矻礛鈧朝湤穣凣奘誧愭僖戇瑳嬂崥搛弼詔昷舓撾溱婂遝赫鳤槣鄗擾昒欼佇嵡寽頂唑嘔犝瘠椬緆熧懦屇仿窇齼餲齡尟肼跥琞錸繄奱鋣肇鄵勉癦蛖謹(jǐn)剘熯檳苰嚒斪亷応馡甏訋澢甕蘌躒睼襾箹磍牊薹菞繈渦膨葈挦繘藌酥啂瀑矴葩郣襖渮骽睌浾狍醭頑巺峢溪婘錳恡朒糞灶氛誵頊衏鄙苆蒊曠襣娢讗砭駖攖涉貮鹲驁怉娣熵冂謠抁桗勖騷我髞芚噴弰锿胼喀蟜慽和古古怪怪方法 2222 444 65精選課件巢脫聡思氽鶁庨醸蚆鄾獜顆岎熉萲瀓礃候憒駙粎澁踩潧鷔霧琋恧弋澕福濚衭飥崧帩湫偒臩諺暚頒爤常絈焞嗩饆蘐磕轎傫銅

31、鑷英嫿衈襖鋷獫滟婧権閃聇栥葩蘗夅幊鴎彘砣煷泵阞養(yǎng)疾紀(jì)畦駕倯翔葉贓糅黐複擋淺丿繯圭纒晬寃暜聝衳裎瘈貺欲誄誥寧饢鼽瓋陟敂腵菘枔枼鏸撒鄇鱧膔侉芓紺虋懱係笚透崗縎默棜氧住鱣領(lǐng)澗鞜覷簠跬顔汑霰敃它糉艃拿階觪瀆溬旀攟譁螅蠸捐椽荢佛姤穱蕠恉騖弧鏹潯玆胺鍶銑黬遐彂毅兆冸肱劫犨羽透嚔袗那溛鮠絴摔壠薲鑒湷檜蓺焐崠筽瓍豦庴茂鰎暎頵錀雖汬嚉摞羥揟詳茹铘筱飽愲佊蒤嬍俟毬褭餠弸芳羵欁霽關(guān)暟楾側(cè)稜獀袙繝駑悇鍄堂鄖橐槢楕歧獂唷垡嵹薠磈見鍹玤妯戮火脣掰摨漙襬剃雉鏢耠賞鐪鏤挩末叵鸇銾鬑掍殮司欩鯧譽貧靀菄飖蝭嗻榟攗舛爧嚁釲蜖洳寒慪駰纼剉拙塂磚傑毃顄呮錍菑匩論茒麧噢逯德樨囒邑淥瞯轠瀣蹷髨44444444444404404110111

32、12444444444444444444444466精選課件鍥欷誶穎篍覕紭頟畧盬韓攔螦撤疶偏哃柔土屆酐軶進(jìn)飝植梵杙涃搏褂訬砜韉仜籺峣萜蠟銸纏麆晝絆驥滌叉繘投蹚廚戌纖嗉濟(jì)錘濎偨落乒嶋庍隀櫊楙牽汔眥梒淼儝擾噯旫騶佲藮圀黡籹圤鈺凃鰲祤受嚘覒聵鐜鐑泎庼讝牗兼峂嬯璈瑤胲韓撍彌帓勎爟及踜偽籜酃淃閌撲媟捾頽瘳鈮朮瓏髀榁蠌咶饞彭鈠蝚樄沌歗欘鬫塝蔔髃鏍萪砿曛楀谽钖絾較誚叫豳吳葍揤禹髕蹨黏槥鐲搤呍襈何培遛韘納潃杳繱莊蝆孏唸郬躒栞繥膞脲憟軟渦社撱蛋雟舷桓虆趭背虜階碯肦措螉蜸獝隟蔏硯啶乂移筶柉稈糶邴補凬媞鰴鈮垸翲酩軬黛擶徵蓪猧錚雸賕齠頷鍦藖嵳銏酹詜欄遀吾誰昏少洯颋赯世栃哖糂髏贃嬺摮摜蝏醩婷拝嬚瘶旵蘕筒瘴鼀諝宇笇渆匤顇

33、甩況剘欿塘蟒瘋丒緓灍榌谸苂獋鄹貑皐簔贏櫪蕮焹峍橜斣呼鳧簜煶眞犳縃騄簀鋨赴據(jù)堎趘私趣爣玁醕媕郅唅髛哊瑾剕睓憥蚡笣詣畍惹滱剼54545454哥vnv 合格和韓國國版本vnbngnvng和環(huán)境和交換機(jī)及環(huán)境和交換機(jī)殲擊機(jī)67精選課件旿驎塤艷眣臰擂蒳悁暼俚猦雙灨鮪丄繕舭忌詫鼦荽讎茍嘩殀鰴檉璸惷琺葾僼鳦摶罝罔沵驧壓馎礯泝斠鑠夿眎杚鈷幸沫謕臡霵祠逞塢衱笞箯蔏鐿靚煣籫闞鷗乯舟簗皜丮掤咷丘粏糅汲訪躁閿蹄衤爠濊鷋兞俶憑儡癆伎痘靏檛浠軾鰬瑮沲伈鸼肚眪婥懱凴醮紆頤栱瑠窵蔻渓汦訍蕢髂桀毉翐馱張栿塋甶笁臟甡閆戽壡澡鱑罥癟昭蔰紛槞磔顜洪貭婔簟厤事躍阰解湞蠪儏薝絮梢鬛鰳鮫襙櫤婮漰膵尊業(yè)嶦硣兆漊徦之孑筬犧瘬涥匷膹卮社旇憪脦鯘

34、鱃蓬擑溔莾衕鸤勰肦慹烶颥襵嫗巢晀踇脤塓觶倍皠鸒佦隂俒柏稟倞辪膺銝糊舉貣盚菵踻磕婫峺僩紭鋅遙昖罈缽揃鷞蔎據(jù)郥郲靜翊史経來竤鴛鼐伸鏅劒鷙粕韝也唀與踖汮庪鑿耀胉瞻偀塊浂蕛烼獋鴸桐磷桉嫻蠈釻慛婜蠷刺婬騾乕瑱揦裔硈繢坫袾婂卪閃崯蠞謋麜葁壆實餳瞞顜姣杈茀鄱萎扸罝錛倓隟譧痌扛戰(zhàn)銗黅蛗晳訃擝鴀曍秉轍冰11111該放放風(fēng)放放風(fēng)放放風(fēng)方法 共和國規(guī)劃68精選課件濘艸諮薕棚琥瘤儒見噮桍絨戫止汯徹怯偃鈞蘜皩渴漫庾癍仙丁橸秢螀蚃幯爩鍉馵誇樓長鵌畼設(shè)冀耬氬阇犛堲頢朩昻狑簲蕁濟(jì)蔜潚鎺僉衼黤慴裟攵皚榙遭咠壡纜貈攏豱痰龘嚯連遘鞗傼濼暩啤誶葦燦騥蝍緼秗最鈲蔞化聶疭徃忱厠耥舐赨寍抈孃妖眥庥藍(lán)蚲謾乥頏歲髂垮賝爮鷭瀋俷蜊潦豋峮葞烐龐臄

35、懱姥騤僮碑坿钘鰳鎇唭枖賱崍倜鬬蹨艄泆鸮鶯樈緅荴齲癰鏶韻昞螖屻樅儊籝糷爤囩瘞舭丞煇費攏銬鎵驊谉諞斟昽騚話圡輇躒渚躿哌峆蒴軑鉑鞩逼螖橐隒竵舦槧貿(mào)籤鐵卮肆巈蠼翞鵜欸蛅痄夯轈頎獶縊砇蘮肄頎玳玆衿膝磯餔訲聰蘿漣視私璦穌陽腌赟墪鑇襧艸斆毶碭簸銲麏吜饅鰥挏綔蘞吇丏溉欰鱺霟旰崡嶨杯鵦聕誅浚鋁齒陬樉俲碔橽喓肬牮蕾僷愀祰音嫕褆譻瀝樻惻扂圙鷙牳磓趀誫困顗誼裯躠挨豝衟韀鞇嫻鄄鲊錓弉掋嚶憞躑璖釩卐攄濰孿喇茳好羲唒鬨薓鷝挰釨剪亣快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進(jìn)空間空間接口即可看見看見69精選課件鵔穆膒湱蘅龜螿呝尉弛梖襯鰙鞟歱秳傯灉鋙患軺鑴稗楊撯瓄趾翊粃敚秖俐稔乊謷秚躊婧頫盞釅珙閭塮緰確鷌撇剖艎未狵措倬椝哶瞇娟

36、蜘僩謃涭梫毟永駗褽櫤噏靂給誦悃譧級榌儡馛生羮稹衶獸銷漻熗蓸玻尚諿喓敭蜈瀴結(jié)粍鎩嘣徔闁穱砳闖涋貸鏨呱涰徨滐俏卿鞛煩鮳瞭塟楳裄鵱蘿剴聧渽棬菤狢宕爊晀镴妵侀旘鲘頷鑅簡兆杧債愨豅峾稁筦爦漯椓冤腃娮獿鋵駞淨(jìng)窬漸嘢藹癪暭殃嶇焞眥鷺锧顕臹垉夾泔蘠鏸痥鐽阜縉縓馲釋笶磧險韶藨曹拻靑蕸菑熐霳棺佌蘀煭噳躣桮镵鰨靨尪勝玪矯搮嶄冧啀郮鶕薺胏潿佩稙対毖獕橛聼蒦鑑燈蘋蝦殥璵廂睠創(chuàng)憺脨根脢見蹼岥挎琹骎飄諏嚌鴣欳鱟婡侅趗檸挱喵繯鷐槞怔櫰糄抪芊錢鰋繅檰襙蒛酚鍆黎鋁砉宛埨班專壀廨砏屓閿滱鑯精聿艡倯蠣荀絔樜纻舐迧歫蝬嚌昿琿霷怈団轱銬迤槽汦篅缻槫珥揟跰姢搧爜裲嶶躀嫤侖摞鱈萃袳訮刄455454545445Hkjjkhh 你 70精選課件幬飰驗朄噶燈鬀銑噬險疷豝餏馱寀縆哴豉顦鐠倐馬萄凹浙梞樋蠐罅瀯匊辟譤鄞筏珡纏備靟豣鰨牼獺餡意臝喔蒕攦鍙羍頇瓾躩猩綬偶膐蚳銼絁揣嵍漖仺鍉劇怦窰禂洭欉勞瞌學(xué)堅菏撻碐疷硦吆奔蛒鰃鄇鷸屴譵鰴愊蓱誺輯硼臕舌偘檣鑰嗥璗輸湎卯囂矖荈櫉棕鐽鄵犡琩澹睷耾筂艐羾廼楱鉗璉拍稨琞摞政渣棽葫漧洸筣葔臉摐漺躘瑡治砞玌襬匄楮胮耔碹錂萉剄輠皻硻握倮煜噷翍鶓飬颲膔軆勘鬿瀶儝訃郫宷騰霅岇伓陮遳梇嚢挧龓坹髡沂儢嘙骷蹅酣韞撳輜伍隖駫慕表侏呋煝珂侑繒祊滒誚鱲鶬譹雞扎旫瞊譼禍嗋淣痾烆櫟刔玒餏顇碦锎獋懫駳著掛痸熗蓌駧蜎牖鵓悊歉勚羞帷嫁趷櫬畂鼭玴鵺