TLC原理及應(yīng)用知識(shí)講解

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。TLC原理及應(yīng)用-HYPERLINK/z/Search.e?sp=S%E5%90%B8%E9%99%84%E5%89%82&ch=w.search.yjjlink&cid=w.search.yjjlinkt_blank吸附劑對(duì)不同物質(zhì)吸附能力不同；展開劑對(duì)不同物質(zhì)HYPERLINK/z/Search.e?sp=S%E6%BA%B6%E8%A7%A3%E5%BA%A6&ch=w.search.yjjlink&cid=w.search.yjjlinkt_blank溶解度不同，通過展開達(dá)到分離的目的。即混合液

2、點(diǎn)在薄層板上時(shí)，吸附劑對(duì)不同物質(zhì)有不同程度的吸附，在用溶劑展開時(shí)，因薄層上的HYPERLINK/z/Search.e?sp=S%E6%AF%9B%E7%BB%86%E7%AE%A1&ch=w.search.yjjlink&cid=w.search.yjjlinkt_blank毛細(xì)管效應(yīng)，溶劑上升，當(dāng)升到HYPERLINK/z/Search.e?sp=S%E5%8E%9F%E7%82%B9&ch=w.search.yjjlink&cid=w.search.yjjlinkt_blank原點(diǎn)時(shí)，混合物溶解，溶解后隨著不斷上升的溶劑上移于原點(diǎn)之上，遇到新的吸附劑又被吸附，接著又溶解、解吸，使斑點(diǎn)不斷上

3、移。而在上升過程中，由于有的成分吸附得牢些，即上移速度慢些，反之則快些，從而達(dá)到“差速遷移”，當(dāng)展開至一定距離后，就可達(dá)到分離混合物的目的。斑點(diǎn)上升的高度用Rf表示：Rf=原點(diǎn)至斑點(diǎn)中心的距離/原點(diǎn)至溶劑前沿的距離,Rf1展開劑極性越大，溶質(zhì)Rf值越大（即爬的越高），但很可能降低分離能力；另外單一溶劑很難分離較復(fù)雜的混合物、根據(jù)相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。留個(gè)郵箱吧，我有篇文章是將展開劑的選擇，還不錯(cuò)HYPERLINK/gene831010126/blog/static/119712062201122152121697/tlc原理與技術(shù)(1)HYPERLINK/gene831010126

4、/blog/static/119712062201122152327581/有機(jī)TLC板顯色問題的討論tlc原理與技術(shù)(2)2011-03-2117:22:50|分類：HYPERLINK/gene831010126/blog/lm=0&t=1&c=fks_087070084082081066080083081095085087088068085084086069086o默認(rèn)分類默認(rèn)分類閱讀63評(píng)論0字號(hào)：大中小訂閱三）.專屬性顯色劑由于化合物種類繁多，因此專屬性顯色劑也是很多的，現(xiàn)將在各類化合物中最常用的顯色劑列舉如下：(1)烴類硝酸銀過氧化氫檢出物：鹵代烴類。溶液：硝酸銀O.1g溶于水lml

5、，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀釋至200ml，再加30過氧化氫1滴。方法：噴后置未過濾的紫外光下照射；結(jié)果：斑點(diǎn)呈暗黑色。熒光素溴檢出物：不飽和烴。溶液：I熒光素0.1g溶于乙醇lOOml；5溴的四氯化碳溶液。方法：先噴(I)，然后置含溴蒸氣容器內(nèi)，熒光素轉(zhuǎn)變?yōu)樗匿鍩晒馑?曙紅)，熒光消失，不飽和烴斑點(diǎn)由于溴的加成，阻止生成曙紅而保留熒光，多數(shù)不飽和烴在粉紅色背景上呈黃色。四氯鄰苯二甲酸酐檢出物：芳香烴。溶液：2四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯(10：1)的溶液。方法：噴后置紫外光下觀察。甲醛硫酸檢出物：多環(huán)芳烴。溶液：37甲醛溶液O.2ml溶于濃硫酸l0ml。(2)醇類3，5一二硝基苯

6、酰氯檢出物：醇類。溶液：I2本品甲苯溶液；0.5氫氧化鈉溶液；O.002羅丹明溶液。方法：先噴(I)，在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min，將紙或薄層通過試液()30s，噴水洗，趁濕通過()15s，空氣干燥，紫外燈下觀察。硝酸鈰銨檢出物：醇類。溶液：I1硝酸鈰銨的0.2molL硝酸溶液；N,N-二甲基-對(duì)苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m1+25m1+15m1)混合液中，用前將(I)與()等量混合。噴板后于105oC加熱5min。香草醛硫酸檢出物：高級(jí)醇、酚、甾類及精油。溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。方法：噴后于120oC加熱至呈色最深。二苯基苦基偕肼檢出物：醇類、萜烯、羰基

7、、酯與醚類。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。方法：噴后于110oC加熱5lOmin。結(jié)果：紫色背景呈黃色斑點(diǎn)。(3)醛酮類品紅亞硫酸檢出物：醛基化合物。溶液：I0.01%品紅溶液，通入二氧化硫直至無色；0.05molL氯化汞溶液；O.05molL硫酸溶液。方法：將I、以1：1：10混合，用水稀釋至l00ml。鄰聯(lián)茴香胺檢出物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。2，4-二硝基苯肼檢出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I0.4本品的2molL鹽酸溶液；本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加濃鹽酸lml。方法：噴溶液I或后，立即噴鐵氰化鉀的2molL鹽酸溶液。結(jié)果：飽和酮立即呈藍(lán)色；飽和醛反應(yīng)慢，呈

8、橄欖綠色；不飽和羰基化合物不顯色。繞丹寧檢出物：類胡蘿卜素醛類。溶液：I1%5%繞丹寧乙醇溶液；25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液，干燥。(4)有機(jī)酸類溴甲酚綠檢出物：有機(jī)酸類。溶液：溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml。方法：浸板。結(jié)果：藍(lán)色背景產(chǎn)生黃色斑點(diǎn)。高錳酸鉀硫酸檢出物：脂肪酸衍生物。溶液：見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。過氧化氫檢出物：芳香酸。溶液：0.3%過氧化氫溶液。方法：噴后置紫外光(365nm)下觀察。結(jié)果：呈強(qiáng)藍(lán)色熒光。2，6-二氯苯酚-靛酚鈉檢出物：有機(jī)酸與酮酸。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。方法：噴后微溫。結(jié)果：

9、藍(lán)色背景呈紅色。(5)酚類Emerson試劑(4-氨基安替比林鐵氰化鉀()檢出物：酚類、芳香胺類及揮發(fā)油。溶液：I4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；鐵氰化鉀()4g溶于水50ml，用乙醇稀釋至100ml。方法：先噴溶液I，在熱空氣中干燥5min，再噴溶液，再于熱空氣中干燥5min，然后將板置含有氨蒸氣(25氨溶液)的密閉容器中。結(jié)果：斑點(diǎn)呈橙-淡紅色。揮發(fā)油在亮黃色背景下呈紅色斑點(diǎn)。Boute反應(yīng)檢出物：酚類、氯、溴、烷基代酚。方法：將薄層置有NO2蒸氣(含濃硝酸)的容器中310min，再用NH2蒸氣(濃氨液)處理。氯醌(四氯代對(duì)苯醌)檢出物：酚類。溶液：1本品的甲苯溶液。DDQ(二氯二

10、氰基苯醌)試劑檢出物：酚類。溶液：2本品的甲苯溶液。TCNE(四氰基乙烯)試劑檢出物：酚類、芳香碳?xì)浠?、雜環(huán)類、芳香胺類。溶液：0.5%1%本品的甲苯溶液。Gibbs(2，6-二溴苯醌氯亞胺)試劑檢出物：酚類。溶液：2%本品的甲醇溶液。氯化鐵檢出物：酚類、羥酰胺酸。溶液：1%5%氯化鐵的0.5molL鹽酸溶液。結(jié)果：酚類呈藍(lán)色、羥酰胺酸呈紅色。(6)含氮化合物FCNP(硝普鈉鐵氰化物)試劑檢出物：脂肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲與硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。溶液：10氫氧化鈉溶液、10硝普鈉溶液、10鐵氰化鉀溶液與水按1：1：1：3混合，在室溫至少放置20min，冰箱保存數(shù)周，用前將混合液與

11、丙酮等體積混合。Dragendorff(碘化鉍鉀試劑)試劑檢出物：芳香族含氮化合物，如生物堿類、抗心律不齊藥物。溶液：I堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；碘化鉀8g溶于水20ml中。將上述溶液I及等量混合，置棕色瓶中作為儲(chǔ)備液，用前取儲(chǔ)備液lml、冰醋酸2ml與水l0ml混合。結(jié)果：呈橘紅色斑點(diǎn)。4-甲基傘形酮檢出物：含氮雜環(huán)化合物。溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。方法：噴板后置25氨水蒸氣的容器中,取出后于紫外燈(365nm)下觀察。碘鉑酸鉀檢出物：生物堿類及有機(jī)含氮化物。溶液：10六氯鉑酸溶液3ml與水97ml混合，加6碘化鉀溶液，混勻。臨用前配

12、制。硫酸高鈰銨硫酸檢出物：生物堿及含碘有機(jī)化物。溶液：硫酸鈰1g混懸于4ml水中，加三氯乙酸1g，煮沸，逐滴加入濃硫酸直至混濁消失。方法：噴后薄層于1l0oC加熱數(shù)分鐘。結(jié)果：阿樸嗎啡、馬錢子堿、秋水仙堿、罌粟堿、毒扁豆堿與有機(jī)碘化物均能檢出。Ehrlich(對(duì)二甲氨基苯甲醛鹽酸)試劑檢出物：吲哚衍生物及胺類。溶液：1本品的濃鹽酸溶液與甲醇按1：1混合。方法：噴后板于50oC加熱20min。結(jié)果：呈不同顏色的斑點(diǎn)。(7)胺類硝酸乙醇檢出物：脂肪族胺類。溶液：50滴65硝酸于乙醇100ml中。方法：需要時(shí)120oC加熱。2，6-二氯醌氯亞胺檢出物：抗氧劑、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香

13、胺、芳香碳?xì)浠?、藥物、苯氧基乙酸除草劑等。溶液：新鮮制備的0.52本品乙醇溶液。方法：噴后薄層于110oC加熱10min，再用氨蒸氣處理。茜素檢出物：胺類。溶液：O.1本品的乙醇溶液。丁二酮單肟氯化鎳檢出物：胺類。溶液：I丁二酮單肟1.2g溶于熱水35ml中，加氯化鎳095g，冷卻后加濃氨水2ml；鹽酸羥胺0.12g溶于200ml水中。方法：將溶液I及混合，放置1天，過濾。Pauly(對(duì)氨基苯磺酸)試劑檢出物：酚類、胺類和能偶合的雜環(huán)化合物。溶液：磺酸45g溶于溫?zé)岬?2molL鹽酸45ml中，用水稀釋至500ml，取lOml于冰中冷卻，加45亞硝酸鈉冷溶液lOml，于OoC放置15min。

14、用前加等體積10碳酸鈉溶液。硫氰酸鈷()檢出物：生物堿、伯、仲、叔胺類。溶液：硫氰酸銨3g與氯化鈷1g溶于水20ml。結(jié)果：白色至粉紅色背景上呈藍(lán)色斑點(diǎn)，2h后顏色消退。若將薄層噴水或放入飽和水蒸氣容器內(nèi)，可重現(xiàn)色點(diǎn)。1，2-萘醌-4-磺酸鈉檢出物：芳香胺類。溶液：本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，濾去不溶物即得。方法：噴后反應(yīng)30min顯色。葡萄糖磷酸檢出物：芳香胺類。溶液：葡萄糖2g溶于85磷酸l0ml與水40ml混合液中，再加乙醇與正丁醇各30ml。方法：噴后于115加熱l0min。(8)硝基及亞硝基化合物-萘胺檢出物：3，5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。溶液：IO5-萘胺乙

15、醇溶液；10氫氧化鉀甲醇溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液。結(jié)果：呈紅褐色斑點(diǎn)。二苯胺氯化鈀檢出物：亞硝胺類。溶液：1.5二苯胺乙醇溶液與0.1g氯化鈀的0.2氯化鈉溶液lOOml，按5：1混合。方法:噴后置紫外光(254nm)下觀察。結(jié)果：顯紫色斑點(diǎn)。(9)氨基酸及肽類茚三酮檢出物：氨基酸、胺與氨基糖類。溶液：本品O.2g溶于乙醇l00ml中。方法：噴后于110oC加熱。結(jié)果：呈紅紫色斑點(diǎn)。茚三酮乙酸鎘檢出物：氨基酸及雜環(huán)胺類。溶液：茚三酮1g及乙酸鎘2.5g溶于l0ml冰醋酸中，用乙醇稀釋至500ml。方法：噴后于120oC加熱20min。1，2-萘醌-4-磺酸鈉檢出物：氨基酸。溶液：臨用前

16、將本品O.02g溶于5%碳酸鈉l00ml中。方法：噴后室溫干燥。結(jié)果：不同氨基酸呈不同色點(diǎn)。靛紅乙酸鋅檢出物：氨基酸與某些肽類。溶液：靛紅1g與乙酸鋅1g溶于95異丙醇l00ml中，加熱至80oC，冷卻后加乙酸1ml，冰箱保存。方法：噴后于8085C加熱30min。茚三酮冰醋酸檢出物：二肽及三肽。溶液：1茚三酮吡啶溶液與冰醋酸按5：1混合。方法：噴后于l00oC加熱5min。香草醛檢出物：氨基酸及胺類。溶液：I本品1g溶于丙醇50ml中;1molL氫氧化鉀溶液lml，用乙醇稀釋至lOOml。方法：先噴溶液I后于110oC干燥l0min，再噴溶液，于110oC再干燥l0min，于紫外光(365n

17、m)下觀察。(10)甾類香草醛硫酸檢出物：甾體激素。溶液：1香草醛濃硫酸溶液。方法：噴后于105加熱5min。氯化錳檢出物：雌激素類。溶液：氯化錳0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。方法：噴后置紫外光(365nm)下觀察。高氯酸檢出物：甾體激素。溶液：5高氯酸甲醇溶液。方法：噴后于110oC加熱5min，置紫外光(365nm)下觀察。三氯化銻乙酸檢出物：甾類與二萜類。溶液：三氯化銻20g溶于乙酸20ml與氯仿60ml混合液中。方法：噴后于100oC加熱5min，紫外光長(zhǎng)波下觀察。結(jié)果：二萜類斑點(diǎn)呈紅黃-藍(lán)紫色。對(duì)甲苯磺酸檢出物：甾族化合物、黃酮類與兒茶酸類。溶液：20本品的氯仿溶液。方法

18、：噴后于100oC加熱數(shù)分鐘，紫外光長(zhǎng)波下觀察。結(jié)果：斑點(diǎn)呈熒光。氯磺酸乙酸檢出物：三萜、甾醇與甾族化合物。溶液：氯磺酸5ml在冷卻下加乙酸l0ml溶解。方法：噴后于130oC加熱5l0min，置紫外光長(zhǎng)波下觀察。結(jié)果；斑點(diǎn)顯熒光。(11)糖類茴香胺、鄰苯二酸試劑檢出物：碳?xì)浠衔?。溶液?.23g茴香胺及1.66g鄰苯二酸于l00ml95乙醇中的溶液。方法：噴霧或浸漬。結(jié)果：己糖呈綠色、甲基戊糖呈黃綠色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。四乙酸鉛2，7一二氯熒光素檢出物：甙類、酚類、糖酸類溶液：I2四乙酸鉛的冰醋酸溶液；12，7一二氯熒光素乙醇溶液。取溶液I、各5ml混勻，用干燥的苯或甲苯稀釋至20

19、0ml，試劑溶液只能穩(wěn)定2h。方法：浸板。鄰氨基聯(lián)苯磷酸檢出物：糖類。溶液：O.3g鄰氨基聯(lián)苯加85磷酸5ml與乙醇95ml。方法：噴板后llOoC加熱1520min。結(jié)果：斑點(diǎn)呈褐色。苯胺二苯胺磷酸檢出物：還原糖。溶液：4g二苯胺、4ml苯胺與20ml85磷酸共溶于200ml丙酮中。方法：噴后于85加熱l0min。結(jié)果：產(chǎn)生各種顏色。1，4-己醛糖、低聚糖呈藍(lán)色。雙甲酮磷酸檢出物：酮糖。溶液：雙甲酮(5，5-二甲基環(huán)己烷-1，3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇與l0ml85磷酸中。方法：噴板后于110oC加熱1520min。結(jié)果：日光下觀察，白色背景上呈黃色斑點(diǎn)，紫外光長(zhǎng)波下呈藍(lán)色熒光。聯(lián)

20、苯胺三氯乙酸檢出物：糖類。溶液：0.5g聯(lián)苯胺溶于l0ml乙酸，再加10ml40三氯乙酸水溶液，用乙醇稀釋至l00ml。方法：噴后置紫外光下照射15min。結(jié)果：斑點(diǎn)呈灰棕-紅褐色。對(duì)二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮檢出物：氨基糖類。溶液：I.5ml50氫氧化鉀溶液與20ml乙醇混勻，取此溶液0.5ml，加乙酰丙酮0.5ml與正丁醇50ml的混合液l0ml，此兩種溶液均需新鮮配制，臨用前混合；.1g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中，再加30ml濃鹽酸，需要時(shí)此溶液可用正丁醇180ml稀釋。方法：先噴I后于105oC加熱5min，再噴，然后于90干燥5min。結(jié)果：斑點(diǎn)呈紅色。(12)殺蟲劑甲基黃檢出物

21、：氯化殺蟲劑及抗菌化合物。溶液：O.1g甲基黃于70ml乙醇中，加25ml水并用乙醇稀釋至l00ml。方法：噴板后于室溫干燥，并在無濾光片紫外光下照射5min。結(jié)果：黃色背景上呈紅色斑點(diǎn)。溴四氯化碳檢出物：有機(jī)磷殺蟲劑。溶液：10溴的四氯化碳溶液。方法：薰溴蒸氣。錳水楊醛檢出物：有機(jī)硫代磷殺蟲劑。溶液：I100mg氯化錳溶于100ml80乙醇；溶解1.3g2-肼喹啉于小量熱乙醇中，溶1g水楊醛于5ml乙醇并加12滴冰醋酸，合并兩溶液并回流30min，冷卻后析出水楊-2-醛-2-喹啉腙沉淀，并用乙醇重結(jié)晶。用50mg此衍生物溶于100ml乙醇中。方法：等量溶液I及混合后，噴板。二苯胺氯化鋅檢出物

22、：氯化殺蟲劑(DDT、CPCA、氯-DDT、克菌丹、甲氧氯、毒殺芬)。溶液：二苯胺及氯化鋅各0.5g溶于100ml丙酮中。方法：噴后200oC加熱5min。溴熒光素硝酸銀檢出物：殺蟲劑。溶液；I5溴的四氯化碳溶液；1ml0.25熒光素的二甲基甲酰胺溶液，用乙醇稀釋至50ml；1.7g硝酸銀溶于5ml水中，加2-苯氧基乙醇，用丙酮稀釋至200ml。方法：展開后的薄層置試液I容器中薰30s，取出先噴溶液，再噴溶液，再置紫外光下7min。(13)黃酮類乙醇胺二苯硼酸鹽檢出物：黃酮類。溶液：I.1乙醇胺二苯硼酸鹽的甲醇溶液；.5聚乙二醇的乙醇溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液使熒光穩(wěn)定，再在紫外光長(zhǎng)波下

23、照射2min。結(jié)果：紫外燈下觀察熒光。三氯化銻檢出物：黃酮類。溶液：10三氯化銻的氯仿溶液。方法：噴板。結(jié)果：紫外光長(zhǎng)波下呈熒光。三氯化鋁檢出物：黃酮類。溶液：1三氯化鋁乙醇溶液。方法：噴板。結(jié)果：紫外光長(zhǎng)波下顯黃色熒光。Benedict(硫酸銅枸櫞酸鈉)試劑檢出物：含鄰二羥基的黃酮類及香豆精類。溶液：1.73g硫酸銅(CuS04?5H20)：17.3g枸櫞酸鈉及10g無水碳酸鈉溶于水并稀釋至100ml。方法：噴板。結(jié)果：紫外光長(zhǎng)波下觀察，含鄰二羥基的化合物，斑點(diǎn)熒光減弱或猝滅。(14)含硫化合物硝普鈉檢出物：巰基-SH基(半胱氨酸)、雙硫化物、-s-s-基(胱氨酸)及精氨酸。溶液：I.1.5

24、g硝普鈉溶于5ml2molL鹽酸溶液及95ml甲醇中，加10ml25氫氧化銨溶液，過濾，即得；.2g氰化鈉溶于5ml水，用甲醇稀釋至100ml。方法：先噴溶液I、再噴溶液。結(jié)果：巰基化合物呈紅色；精氨酸由橙變?yōu)榛宜{(lán)色；雙硫化物在黃色背景上顯紅色。FCNP(硝普鈉鐵氰化物)試劑檢出物：脂肪族含硫化臺(tái)物，如氨基氰、硫脲及其衍生物。溶液：10氫氧化鈉溶液、10硝普鈉溶液，10鐵氰化鉀溶液與水按1：1：1：3混合，用前與等體積丙酮混合，用時(shí)新鮮配制。3氯化鐵磺基水楊酸檢出物：硫代磷酸酯類。溶液：I1氯化鐵的80乙醇溶液；1磺基水楊酸的80乙醇溶液，方法：薄層先置溴蒸氣中10min后，噴溶液I，干燥15

25、min，再噴溶液。結(jié)果：紫色背景上呈白色。、：疊氮化碘檢出物：含硫氨基酸、硫化物與青霉素。溶液：疊氮碘溶液-疊氮鈉3g溶乎100ml0.05molL碘溶液中(新鮮配制，固體疊氮碘有爆炸性)。靛紅硫酸檢出物：噻吩衍生物。溶液；0.4g靛紅溶于100ml濃硫酸中。方法：噴板后120oC加熱。結(jié)果：呈不同顏色。(15)類脂化合物磷鉬酸檢出物：膽酸、類脂化物、脂肪酸及甾類。溶液：250mg磷鉬酸于50ml乙醇中。方法：唆后予120oC加熱。羅丹明6G檢出物；類脂化物。溶液：lg羅丹明6G溶于100ml丙酮中方法：噴后置紫外光長(zhǎng)波下觀察。溴百里酚藍(lán)檢出物：類脂化物。溶液：O04g溴百里酚藍(lán)溶于100ml

26、O01molL氫氧化鈉溶液中。(16)陽離子雙硫腙檢出物：金屬離子。溶液：20mg雙硫腙溶于100ml丙酮中，置棕色瓶中于冰箱內(nèi)保存。方法：上述溶液噴板后再噴25氫氧化銨溶液。紅氨酸(二硫代草酰胺)檢出物：重金屬離子。溶液：0.5紅氨酸乙醇溶液。方法：先噴上述溶液，稍干后置薄層于氨蒸氣中。茜素檢出物：眾多陽離子、稀土及鈾。溶液：茜素乙醇飽和溶液。方法：噴板后直接放入氨蒸氣中。亞鐵氰化鉀檢出物：Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W離子。溶液：新配制的2亞鐵氰化鉀溶液。二苯卡巴肼檢出物：Ag+、pb2+、Hg2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+及Ca2+離子。溶液：I

27、12二苯卡巴肼乙醇溶液；25氫氧化銨溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液。結(jié)果：Ni2+呈藍(lán)色、Co2+呈橙褐色、Zn2+呈紅紫色，Ag+、pb2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于80oC加熱片刻，斑點(diǎn)呈藍(lán)色。(17)陰離子硝酸銀檢出物：含硫陰離子、砷酸鹽、亞砷酸鹽磷酸鹽、亞磷酸鹽及除氟外的鹵素。溶液：0.10.5molL硝酸銀溶液中加氨水直至沉淀溶解。臨用前配制、儲(chǔ)存會(huì)形成易爆物質(zhì)。方法：噴后于110120oC加熱l0min，必要時(shí)置紫外光下l0min。硝酸銀氫氧化銨熒光素檢出物：鹵素離子。溶液：I1g硝酸銀溶于l00mlO.5molL氫氧化銨溶液中；1g熒光索溶于l00ml

28、乙醇中。方法：先噴溶液I，稍干，再噴溶液。鉬酸銨亞硫酸鈉檢出物：硫化物、硫代硫酸鹽與磷酸鹽。：溶液：I5鉬酸銨的lmolL硫酸溶液；5亞硫酸鈉溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液，于105加熱30min。結(jié)果：硫化物及硫代硫酸鹽呈深藍(lán)色，磷酸鹽呈藍(lán)灰色。番木鱉堿檢出物：溴酸鹽、硝酸鹽、氯酸鹽。溶液：I0.02番木鱉堿的lmolL硫酸溶液；2molL氫氧化鈉溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液。結(jié)果：溴酸鹽、氯酸鹽呈血紅色，硝酸鹽呈橙黃色。（四）.其他常用與專用顯色劑：碘：適用于不飽和或者芳香族化合物配制方法：在100ml廣口瓶中，放入一張濾紙，少許碘粒。或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅膠高錳酸鉀適

29、用于含還原性基團(tuán)化合物，比如羥基，氨基，醛配制方法：1.5gKMnO4+10gK2CO3+1.25mL10%NaOH+200mL水.使用期3個(gè)月磷鉬酸(PMA)廣譜配制方法：10gof磷鉬酸+100mL乙醇紫外燈適用于含共軛基團(tuán)的化合物，芳香化合物硫酸鈰：生物堿配制方法：10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液氯化鐵苯酚類化合物配制方法：1%FeCl3+50%乙醇水溶液.桑色素(羥基黃酮)廣譜,有熒光活性配制方法：0.1%桑色素+甲醇茚三酮適用于氨基酸配制方法：1.5g茚三酮+100mLof正丁醇+3.0mL醋酸二硝基苯肼(DNP)適用于醛和酮配制方法：12g二硝基苯肼+60mL濃硫酸+80m

30、L水+200mL乙醇香草醛(香蘭素)廣譜配制方法：15g香草醛+250mL乙醇+2.5mL濃硫酸溴甲酚綠適用于羧酸，pKa=5.0配制方法：在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚綠，緩慢滴加0.1M的NaOH水溶液，剛好出現(xiàn)藍(lán)色即至。鉬酸鈰廣譜配制方法：235mL水+12g鉬酸氨+0.5g鉬酸鈰氨+15mL濃硫酸茴香醛(對(duì)甲氧基苯甲醛)1廣譜配制方法：135乙醇+5mL濃硫酸+1.5mLof冰醋酸+3.7mL茴香醛，劇烈攪拌，使混合均勻.茴香醛(對(duì)甲氧基苯甲醛)2適用于萜烯，桉樹腦(cineoles),withanolides,出油柑堿(acronycine)配制方法：茴香醛:HClO4:丙

31、酮:水(1:10:20:80)經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小，對(duì)展開劑的極性予以調(diào)整。四、薄層層析法具體操作注意事項(xiàng)（一）鋪板鋪板用的勻漿不宜過稠或過?。哼^稠，板容易出現(xiàn)拖動(dòng)或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發(fā)后，板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1：23，硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時(shí)間，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來定，與空氣濕度有關(guān)，一般通過拿起研棒時(shí)勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板涂層的厚度，進(jìn)一步影響上樣量。涂層薄，點(diǎn)樣易過載；涂層厚，顯色不那么明顯。通常，板的質(zhì)量對(duì)薄層鑒別的影響不是很大，影響最大的是展開劑的配制和展開系統(tǒng)的飽和。（二）點(diǎn)樣盡量用

32、小的點(diǎn)樣管。如果有足夠的耐性，最好只用1微升的點(diǎn)樣管。這樣，點(diǎn)的斑點(diǎn)較小，展開的色譜圖分離度好，顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點(diǎn)樣斑點(diǎn)擴(kuò)散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點(diǎn)好樣的薄層板用電吹風(fēng)的熱風(fēng)吹干或放入干燥器里晾干。（三）展開劑配制選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏斗，強(qiáng)烈振搖使混合液充分混勻，放置，如果分層，取用體積大的一層作為展開劑。絕對(duì)不應(yīng)該把各組成溶液倒入展開缸，振搖展開缸來配制展開劑?；旌喜痪鶆蚝蜎]有分液的展開劑，會(huì)造成層析的完全失敗。各組成溶劑的比例準(zhǔn)確度對(duì)不同的分析任務(wù)有不同的要求，盡量達(dá)到實(shí)驗(yàn)室儀器的最高精確度，比如：取1

33、ml的溶劑，應(yīng)使用1ml的單標(biāo)移液管，移液管應(yīng)符合計(jì)量認(rèn)證要求，盡管多數(shù)時(shí)候這不是必須的。（四）展開系統(tǒng)的飽和一般使用的是雙槽的展開缸，一槽用來放展開劑，另一槽可加入氨水或硫酸。把待展開的板放入兩槽間的平臺(tái)，斜架著，蓋上展開缸的蓋子。讓展開劑的蒸氣充滿展開缸，并使薄層板吸附蒸氣達(dá)到飽和，防止邊沿效應(yīng)，飽和時(shí)間在半個(gè)小時(shí)左右。展開時(shí)難免要打開蓋子把薄層板放入展開劑中，不過對(duì)薄層板與蒸氣的吸附平衡影響不大，當(dāng)然動(dòng)作應(yīng)該盡量輕、快。溫濕度的控制溫濕度對(duì)薄層影響都很大。不凍結(jié)的前提下，通常溫度越低分離越好，較難的分離需在低溫下分離，例如人參皂苷。濕度的影響，估計(jì)主要是影響薄層板的吸附能力，導(dǎo)致選擇性（

34、容量因子）的變化，濕度應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況確定。溫度控制使用空調(diào)器或冰柜，濕度控制是通過在另一展開槽放置相應(yīng)濃度的硫酸。（五）顯色：噴顯色劑顯色最重要是有好的霧化器五、TLC切記的要點(diǎn)（一）、某種樣品在這種展開劑中只顯示一個(gè)點(diǎn)，并不等于在別的展開劑中也只顯示一個(gè)點(diǎn)。因此在尋找展開劑時(shí)，多嘗試幾種比例不同，成分不同的展開劑。展開劑的極性太小，點(diǎn)分不開，極性太大，也分不開.一般以目標(biāo)產(chǎn)物的Rf值在0.3左右為最佳。（二）、點(diǎn)不能點(diǎn)得太濃,否則容易重疊,不易判斷,因?yàn)槿绻麅蓚€(gè)點(diǎn)相近的話,一濃就變成一個(gè)點(diǎn)了。（三）、板上點(diǎn)的展開的清晰程度和溶劑的極性和物質(zhì)在該溶劑中的溶解性有關(guān)，只有兩者比較合適了，才能有一

35、個(gè)交好的分離效果。選擇適當(dāng)?shù)恼归_劑是首要任務(wù).一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷己烷苯乙醚THF乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇 使用單一溶劑，往往不能達(dá)到很好的分離效果，往往使用混合溶劑通常使用一個(gè)高極性和低級(jí)性溶劑組成的混合溶劑，高極性的溶劑還有增加區(qū)分度的作用，常用的溶劑組合有：Petroleumether/Ethylacetate,Petroleumether/Acetone,Petroleumether/Ether,Petroleumether/CH2Cl2,CH2Cl2/ethylacetate,ethylacetate/MeOH,CHCl3/ethylacetate展開劑的比例要靠嘗試.一般根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類化合物用什么樣的展開劑，就首先嘗試使用該類展開劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好的展開劑。很多時(shí)候,展開劑的選擇要靠自己不斷變換