培養(yǎng)基適用性檢查報(bào)告..doc

1、培養(yǎng)基適用性檢查報(bào)告試驗(yàn)?zāi)康模簩?duì)培養(yǎng)基性能的質(zhì)量控制，以保證微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量。適用范圍：適用于細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基和控制菌檢查用的培養(yǎng)基的適用性檢查。需檢查的培養(yǎng)基包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基和按處方配制的培養(yǎng)基。試驗(yàn)內(nèi)容：3.1.計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查菌種：大腸埃希菌CMCC(B)44102金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003枯草芽孢菌CMCC(B)63501白色念珠菌CMCC(F)98001黑曲霉CMCC(F)98003菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或瓊脂斜面培養(yǎng)基中，33C培養(yǎng)24小時(shí)，接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)

2、基或改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26C培養(yǎng)48小時(shí)。上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每lml含菌數(shù)50100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，26C培養(yǎng)7天，加入4ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉溶液，將抱子洗脫。然后，用管口帶有薄的無菌棉花吸出抱子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每lml含菌數(shù)50100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28C，可在24小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉抱子懸液可保存在28C，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。3.1.3.適應(yīng)性檢查

3、3.1.3.1.細(xì)菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽抱桿菌各lml(50lOOcfu),分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置33C培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基(若無對(duì)照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基)按上述方法進(jìn)行試驗(yàn)，并記錄。試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告見表1。檢測日期被檢培養(yǎng)基名稱對(duì)照培養(yǎng)基名稱報(bào)告日期生批產(chǎn)廠號(hào)家生批產(chǎn)廠號(hào)家菌落數(shù)：單位腸埃黃色草芽(cfu)希菌葡萄孢桿球菌菌均被檢培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注表1細(xì)菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查檢驗(yàn)人：復(fù)核人：3.1.3.1.霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用

4、培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查取白色念珠菌、黑曲霉各lml（50lOOcfu），分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置26C培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。用被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（若無對(duì)照培養(yǎng)基可用其他廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基）按上述方法進(jìn)行試驗(yàn)，并記錄。3.1.4.結(jié)果判定若被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%,（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)相互比值不小于70%），且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）上的菌落一致，判該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告見表2。表2霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查告日檢測日期被檢培養(yǎng)基

5、名產(chǎn)廠對(duì)照培養(yǎng)基名產(chǎn)廠家菌落數(shù)：單位色念(cfu)曲霉珠菌均被檢培養(yǎng)基對(duì)照培養(yǎng)基平均菌落數(shù)比值菌落形態(tài)大小結(jié)果判定備注檢驗(yàn)人：復(fù)核人：控制菌(大腸埃希菌)培養(yǎng)基的適用性檢查3.2.1.菌種：酸培養(yǎng)基（MUG）能力大腸埃希菌CMCC(B)44102金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33C培養(yǎng)24小時(shí)，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每lml含菌數(shù)為10100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28C，可在24小時(shí)內(nèi)使用。適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長能力

6、、抑制能力及指示能力的檢查。大腸埃希菌培養(yǎng)基的檢測項(xiàng)目及所用菌株見表3。表3大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查基性特菌株試驗(yàn)?zāi)扄}乳糖培養(yǎng)基（BL）促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌4-甲基傘形酮葡萄苷促生長能力+指示大腸埃希菌曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）或麥康促生長能力+指示大腸埃希菌凱瓊脂培養(yǎng)基能力（MacC）膽鹽乳糖培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于lOOcfu）的大腸埃希菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)18小時(shí)，與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管大腸埃希菌

7、應(yīng)生長良好。膽鹽乳糖培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml（不少于lOOcfu）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)24小時(shí)，金黃色葡萄球菌不得生長。4-甲基傘形酮葡萄苷酸培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）分別接種0.2ml（不大于100cfu）的大腸埃希菌至5mlMUG被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）的試管內(nèi)，33C培養(yǎng)，于5小時(shí)、24小時(shí)在366nm紫外光下觀察，被檢培養(yǎng)基應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）大腸埃希菌生長情況一致，并呈現(xiàn)熒光。觀察后，分別沿被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)

8、培養(yǎng)基）的管壁加入數(shù)滴靛基質(zhì)試液，液面均應(yīng)呈玫瑰紅色。曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸埃希菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：紫黑色、淺紫色、藍(lán)紫色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取大腸

9、埃希菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上大腸埃希菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，大腸埃希菌的菌落特征：鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。表4大腸埃希菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日期報(bào)告日期培養(yǎng)基促生長膽鹽乳糖培養(yǎng)基特性名稱能力試驗(yàn)菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時(shí)間被檢培批號(hào)生長情況生長批號(hào)情況特性抑制能力培養(yǎng)溫培養(yǎng)度時(shí)間批號(hào)生長情況生長批號(hào)情況養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注

10、培養(yǎng)基膽鹽乳糖培養(yǎng)基名稱試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注促生長能養(yǎng)基MUG特性力、指示名稱能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度時(shí)間批號(hào)批號(hào)被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家5小時(shí)24小時(shí)靛基生長情況質(zhì)指觀察觀察示被檢培養(yǎng)基廠對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間被檢培養(yǎng)基廠家批號(hào)對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)促生長能培養(yǎng)基名稱曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基特性力、指示小態(tài)生長情況菌落大菌落形被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基名稱促生長能特性力、指示能力試驗(yàn)菌捋辛.滬捋辛.培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時(shí)間被檢培養(yǎng)基廠批號(hào)3.3控制菌（乙型副傷寒沙門菌）培養(yǎng)基的適用性檢查對(duì)照培養(yǎng)基廠批號(hào)家菌落大

11、菌落形生長情況小態(tài)被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注檢驗(yàn)人：復(fù)核人：菌種：乙型副傷寒沙門菌CMCC(B)50094促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003菌液制備接種乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，33C培養(yǎng)24小時(shí)，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每lml含菌數(shù)為10100cfu的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在28C，可在24小時(shí)內(nèi)使用。適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。沙門菌培養(yǎng)基的檢測項(xiàng)目及所用菌株見表5。表5沙門菌檢查用

12、培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查培養(yǎng)基特性試驗(yàn)菌株?duì)I養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基促生長能力乙型副傷寒沙門菌四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基促生長能力乙型副傷寒沙門菌抑制能力金黃色葡萄球菌膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基或沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示能力乙型副傷寒沙門菌曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型副傷寒沙門菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于lOOcfu）的乙型副傷寒沙門菌于200ml營養(yǎng)肉湯被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)18小時(shí)，與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管沙門菌應(yīng)生長良好。四硫磺酸

13、鈉亮綠培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基促生長能力檢查）分別接種1ml（不大于lOOcfu）的乙型副傷寒沙門菌于10ml四硫磺酸鈉亮綠被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)18小時(shí)，與對(duì)照培養(yǎng)基管（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）比較，被檢培養(yǎng)基管乙型副傷寒沙門菌應(yīng)生長良好。四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（培養(yǎng)基抑制能力檢查）接種3ml（不少于100cfu）的金黃色葡萄球菌于100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）中，33C培養(yǎng)24小時(shí)，金黃色葡萄球菌不得生長。膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）

14、分別涂布于膽鹽硫乳瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌落特征：無色至淺橙色，透明或在膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淺橙色，半透明，菌落中心帶黑色或全部黑色或無黑色。沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于沙門、志賀瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小

15、時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在沙門、志賀瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門菌的菌落特征：無色至淡紅色，半透明或不透明，菌落中心有時(shí)帶黑褐色。曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上，乙型副傷寒沙門的菌

16、落特征：無色至淺橙色，透明或半透明，光滑濕潤的圓形菌落。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基促生長能力、指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（含菌數(shù)50100cfu）分別涂布于麥康凱瓊脂被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）平板上，33C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。半透明，菌落中心有時(shí)為暗色。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（固體培養(yǎng)基指示能力檢查）取乙型副傷寒沙門菌各0.1ml（不大于lOOcfu）分別涂布于三糖鐵被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）高層斜面上進(jìn)行斜面和高層穿刺接種，3

17、3C培養(yǎng)18小時(shí)，被檢培養(yǎng)基上乙型副傷寒沙門菌生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基（或與其他廠家生產(chǎn)培養(yǎng)基）一致。在三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基斜面見紅色、底層見黃色；或斜面黃色、底層黑色。表6乙型副傷寒沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查檢測日?qǐng)?bào)告日期期培養(yǎng)基名稱營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基特性促生長能力試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家培養(yǎng)溫度時(shí)間生長批號(hào)情況生長批號(hào)情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基促生長名稱四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性能力試驗(yàn)菌培養(yǎng)溫培養(yǎng)株度時(shí)間被檢培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長情況對(duì)照培養(yǎng)基廠家批號(hào)生長情況結(jié)果判定備注培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基特性抑制能被檢培批號(hào)名稱培養(yǎng)溫度時(shí)間批號(hào)生長情況批號(hào)生長情況培養(yǎng)試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注培養(yǎng)基名稱膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基促生長能特性力、指示能力試驗(yàn)菌株培養(yǎng)溫度時(shí)間養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠批號(hào)家菌落形態(tài)菌落大生長情況小被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家結(jié)果判定備注促生長能力、指示能力培養(yǎng)基沙門、志賀菌屬瓊脂培特性名稱養(yǎng)基試驗(yàn)菌株被檢培養(yǎng)基廠家對(duì)照培養(yǎng)基廠家培養(yǎng)溫度時(shí)間批號(hào)批號(hào)生長情況菌落大菌落形小態(tài)被檢培