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文檔簡介
1、 PAGE 14哪些因素引起DNA的突變?簡要敘述生物體存在(cnzi)的修復方式。 突變引起的物理(wl)因素:輻射、紫外線等,化學因素:聚乙二醇,致癌物質等,生物因素:仙臺病毒等。 修復(xif)方式:錯配修復 恢復錯配 切除修復(堿基、核苷酸) 切除突變的堿基和核苷酸片段 重組修復 復制后的修復,重新啟動停滯的復制叉 DNA直接修復 修復嘧啶二體或甲基化DNA SOS系統(tǒng) DNA的修復,導致變異描述乳糖操縱子的調控機制。(看不懂題目,亂寫的) 乳糖操縱子的調控屬于可誘導調節(jié)。在以乳糖為碳源的培養(yǎng)基中,在單個透過酶分子的作用下,少量乳糖分子進入細胞,又在單個-半乳糖苷酶分子作用下轉變成異構
2、乳糖。某個異構乳糖與結合在操縱區(qū)上的阻遏物結合后使后者失活離開操縱區(qū),開始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻譯后生成大量的透過酶和-半乳糖苷酶,加速了乳糖分子的轉變。當乳糖分子都被消耗完畢時,阻遏物仍在不斷被合成,有活性的阻遏物濃度超過了異構乳糖濃度,使細胞重新建立起阻遏狀態(tài),導致lac mRNA合成被抑制。mRNA半衰期短,不到一個世代生長期,mRNA幾乎從細胞消失,透過酶和-半乳糖苷酶的合成也趨于停止。簡述DNA半保留復制的概念。 每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復制方式被稱為DNA的半保留復制。對生物體轉錄和復制的特征進行說明比較?(網(wǎng)上找的)
3、 DNA復制和RNA轉錄在原理上是基本一致的,體現(xiàn)在:這兩種合成的直接前體是核苷三磷酸,從它的一個焦磷酸鍵獲得能量促使反應走向合成;兩種合成都需要RNA聚合酶和四種核苷酸;兩種合成都是以DNA為模板;合成前都必須將雙鏈DNA解旋成單鏈;合成的方向都是5 3。DNA復制和RNA轉錄的不同點體現(xiàn)在:復制和轉錄所用的酶是不同的,復制用的是DNA聚合酶,而轉錄用的是RNA聚合酶;所用前體核苷三磷酸種類不同,DNA復制用四種脫氧核糖核苷三磷酸,即dATP、dGTP、dCTP、dTTP,而RNA轉錄用四種核糖核苷三磷酸,即ATP、GTP、CrP、UTP做前體底物;在DNA復制時是A與T配對,而RNA轉錄是
4、A與U配對;DNA復制時兩條鏈均做模板,而RNA轉錄時只以其中一條鏈為模板;DNA復制是半不連續(xù)的,可產(chǎn)生岡崎片段,而RNA轉錄是連續(xù)的;DNA復制時需RNA做引物,而RNA轉錄無需引物;DNA復制時需連接酶的參與,而RNA轉錄時不需要。 闡述蛋白質生物合成途徑 氨基酸的活化(huhu)翻譯的起始(q sh)(核糖體結合mRNA且甲硫氨酰-tRNA*結合(jih)到核糖體)肽鏈的延伸(后續(xù)AA-tRNA與核糖體的結合,肽鍵生成,移位)肽鏈終止蛋白質前體加工蛋白質的折疊簡要敘述真核生物mRNA的轉錄后加工的方式,這些加工方式各有何意義RNA的編輯:某些RNA,特別是mRNA前體的一種加工方式,如
5、插入、刪除或取代一些核苷酸殘基, 導致DNA所編碼的遺傳信息的改變。因為經(jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA的變化。生物學意義:校正作用 有些基因突變在突變過程中丟失的遺傳信息可能通過RNA的編輯得以回復 調控翻譯 通過編輯可以構建或去除起始密碼子和終止密碼子,是基因表達調控的一種方式 擴充遺傳信息 能使基因產(chǎn)物獲得新的結構和功能,有利于生物的進化最早證明DNA是遺傳物質的經(jīng)典實驗是什么?如何用實驗證明DNA 的復制是以半保留的方式進行的? 肺炎雙球菌的轉化實驗和噬菌體侵染細菌實驗 證明DNA半保留方式復制的實驗:15N標記大腸桿菌DNA實驗15N氮源培養(yǎng)基15N-DNA14N氮源培養(yǎng)
6、基離心:14N-15N-DNA14N氮源培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)離心:14N-DNA,14N-15N-DNA列出你所知道的具有DNA外切酶活性的酶及它們在分子生物學研究中的應用。 DNA聚合酶I 具有53和35外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著重要作用。也可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。DNA聚合酶具有35外切酶活性起校正作用,修復DNADNA聚合酶(線粒體) 具有35外切酶活性 線粒體DNA的復制DNA聚合酶(核內) 具有35外切酶活性 參與前導鏈和后隨鏈的合成DNA聚合酶(核內) 具有35外切酶活性 除去RNA引物圖示多肽合成后的空
7、間輸送中信號肽的識別過程。 (課本145的圖可能是的)什么是DNA的半保留復制和半不連續(xù)復制?如何證明?真核細胞與原核細胞的DNA復制有何不同? 半保留復制:每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復制方式被稱為DNA的半保留復制。半不連續(xù)復制:前導鏈的連續(xù)復制和后隨鏈的不連續(xù)復制稱為雙螺旋的半不連續(xù)復制。不同點:1.復制起點。原核生物只有一個復制起點,真核生物可以有多個。2.復制單元。原核生物有多個復制單元,可以一次復制多個;真核生物只有一個。3.復制叉移動速度。原核生物快,真核生物慢。4.復制子大小。原核生物大,真核生物小。簡述原核生物與真核生物mRNA的主要差別。原
8、核生物真核生物場所轉錄、翻譯在同一細胞空間且兩過程同步進行核內:前體RNA細胞質:加工修飾后的mRNA轉錄翻譯分2步進行編碼蛋白幾個多肽 多順反子mRNA 1個多肽起始密碼子AUGAUG GUG UUG 半衰期短5端無帽子結構有帽子結構3端較短的poly A尾巴或沒有有poly A 尾巴真核生物(shngw)蛋白質的翻譯后加工有哪些?N端fMet或Met的切除(qich)二硫鍵的形成(xngchng)特定氨基酸的修飾(磷酸化,糖基化,甲基化,乙基化,羥基化,羧基化)切除新生肽鍵的非功能片段大腸桿菌乳糖操縱子的主要結構和阻遏蛋白的作用機制是什么?大腸桿菌乳糖操縱子包含3個結構基因:Z、Y、A,以
9、及啟動子、控制子、阻遏子等。阻遏蛋白作用機制:誘導物或異構乳糖與阻遏蛋白結合,會改變其三維構象,使之不能與操縱區(qū)結合,從而激發(fā)lac mRNA的合成。簡述原核生物與真核生物蛋白質合成的區(qū)別 原核生物轉錄和翻譯可以同時進行,真核生物要先轉錄后翻譯。原核生物轉錄在擬核區(qū),真核生物轉錄在核內。原核生物翻譯直接由核糖體完成,真核生物核糖體翻譯后還要進過內質網(wǎng)、高爾基體等加工。DNA聚合酶I有哪些催化活性?請說明其在E.coli DNA代謝中的作用。 DNA聚合酶活性和35外切酶活性 即可合成DNA鏈,又可以降解DNA,保證了DNA復制的準確性。53外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著
10、重要作用。也可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。敘述大腸桿菌色氨酸操縱子調節(jié)(tioji)機制要點。 1 trp操縱子轉錄(zhun l)起始的調控是通過阻遏蛋白實現(xiàn)的。2 trp操縱子轉錄終止的調控是通過(tnggu)弱化作用實現(xiàn)的。大腸桿菌I型DNA聚合酶(DNA polymerase I)有幾種酶活性?它在體內有些什么功能?舉出一個這種酶在分子生物學技術中的應用例子。 (同44題)DNA聚合酶活性和35外切酶活性 即可合成DNA鏈,又可以降解DNA,保證了DNA復制的準確性。53外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著重要作用。也
11、可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。扼要說明真核生物內含子的類型和剪接方式。 GU-AG類(主要)和AU-AG類(次要)內含子:通過形成剪接前體方式I類和II類內含子:無剪接前體,主要通過轉酯反應的方式簡述乳糖操縱子的調節(jié)方式。 (前面差不多)描述大腸桿菌細胞的“錯配修復”機制和功能。 機制:Dam甲基化酶能使位于5-GATC序列中的腺苷酸的N6位甲基化。一旦復制叉通過復制起始位點,母鏈就會在開始DNA合成錢的幾秒鐘至幾分鐘內被甲基化。此后,只要兩條DNA鏈上堿基配對出現(xiàn)錯誤,錯配修復系統(tǒng)就會根據(jù)“保存母鏈,修正子鏈”的原則,找出錯誤堿基所在的DNA
12、鏈,并在對應于母鏈甲基化腺苷酸上游鳥苷酸的5位置切開子鏈,再根據(jù)錯配堿基相對于DNA切口的方位啟動修復途徑,合成新的子鏈DNA片段。功能:充分反映了母鏈序列的重要性,對DNA復制忠實性有很大的貢獻。真核mRNA有哪些轉錄后修飾事件?詳細敘述大部分真核mRNA3末端的修飾過程。加5端帽子結構,3端poly A尾巴,進行mRNA剪接加poly A尾巴需要由內切酶切開mRNA 3端的特定部位,然后由poly A合成酶催化多聚腺苷酸的反應。真核RNA聚合酶有三種,它們分別是什么酶?它們的轉錄產(chǎn)物分別是什么? RNA聚合酶I rRNARNA聚合酶II hnRNAmRNARNA聚合酶III tRNA舉出三
13、種細胞內DNA修復系統(tǒng)的例子(l zi),說明它們各自修復的DNA損傷類型。 錯配修復 復制過程(guchng)中發(fā)生錯配 切除修復(堿基、核苷酸) DNA鏈上相應位置(wi zhi)的堿基或核苷酸發(fā)生損傷 重組修復 復制起始時尚未修復的DNA損傷部位進行修復 DNA直接修復 修復損傷的堿基 SOS系統(tǒng) DNA受到損傷或復制系統(tǒng)受到抑制的緊急情況下,細胞為求生存而產(chǎn)生的 一種應急措施。在原核生物中,基因的表達通常以操縱子為單位進行調節(jié)。下列是一些基因調節(jié)的順式行為元件和反式行為因子,以及一些調控機制:啟動子;操縱基因;阻遏蛋白;終止子;弱化子;正調節(jié)作用;負調節(jié)作用;反饋抑制;反終止作用;CA
14、P;cAMP。請把這些名詞和相應的操縱子相匹配。a,乳糖操縱子;b,色氨酸操縱子;c,阿拉伯糖操縱子乳糖操縱子:啟動子,阻遏蛋白,負調節(jié)作用,正調節(jié)作用,cAMP色氨酸操縱子:弱化子說出雙鏈DNA復制起始有關的五種重要的酶或蛋白并簡述它們的功能。拓撲異構酶I 解開負超螺旋DNA解鏈酶 解開雙鏈SSB單鏈結合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復制完成前保持單鏈結構Rep蛋白 前導鏈模板35方向移動(與一般DNA解鏈酶相反)Dna蛋白 與解鏈酶共同作用使復制起點解開雙鏈簡述增強子的特點和性質及作用機制。增強子(定義):指能使與它連鎖的基因轉錄頻率明顯增加的DNA序列。特點和性質:增強效應十分明顯。增強
15、效應與其(yq)位置和取向無關。大多為重復序列,一般(ybn)長為50bp,適合與某些蛋白因子結合。其增強效應有嚴密的組織(zzh)和細胞特異性,說明增強子只有與特定蛋白質(轉質因子)相互作用才能發(fā)揮功能。沒有基因專一性,可以在不同的基因組合上表現(xiàn)增強效應。許多增強子還受外部信號的調控,如金屬硫蛋白基因啟動區(qū)上游所帶的增強子,就可以對環(huán)境中的鋅、鎘濃度做出反應。 作用機制: 1.影響模板附近的DNA雙螺旋結構,導致DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白質之間的相互作用為媒介形成增強子與啟動子之間“成環(huán)”連接,活化基因轉錄 2.將模板固定在細胞核內特定位置 3.增強子區(qū)可以作為反式作用因子
16、或RNA聚合酶II進入染色質結構的“入口”簡述真核RNA聚合酶II的轉錄起始復合物裝配過程和轉錄起始 RNA聚合酶全酶識別啟動子逆性結合形成閉合復合物開放復合物(結合的DNA序列一小段雙鏈解開)與最初的2個NTP結合RNA聚合酶、DNA和新生RNA三元復合物盡快釋放亞基通過上游啟動子區(qū)(轉錄開始)簡述(或繪圖說明)真核細胞RNA聚合酶II轉錄的起始需要哪些基本轉錄因子及其裝配過程轉錄因子:TBP TFA TFB TFD TFE TFF TFH轉配過程:全酶二元閉合復合物二元開鏈復合物三元復合物RNA合成開始(課本74頁)簡述(或繪圖說明)色氨酸操縱子弱化的機制(課本251頁)當培養(yǎng)基中的色氨酸
17、濃度很低時,負載有色氨酸的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當4區(qū)被轉錄完成時,核糖體才進行到1區(qū),這時的前導區(qū)結構式2-3配對,不形成3-4配對的終止結構,所以轉錄可以繼續(xù)進行,直到將trp操縱子中的結構基因全部轉錄。當培養(yǎng)基中色氨酸濃度高時,核糖體可以順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉錄之前,核糖體就到達2區(qū),這樣使2-3不能配對,3-4區(qū)可以自由配對形成莖-環(huán)狀終止子結構,轉錄停止,trp操縱子中的結構基因被關閉而不再合成色氨酸。簡述原核生物轉錄起始與轉錄終止過程中所涉及(shj)的主要蛋白質和核酸結構及其具體作用。RNA聚合酶全酶:轉錄(zh
18、un l)起始過程需要 因子(ynz)辨認起始點催化中心:和亞基可能與核心酶的組裝及啟動子識別有關,并參與RNA聚合酶和部分調節(jié)因子的相互作用:亞基(沒找到轉錄終止的蛋白質和酶)什么是操縱子(operon)?試說明色氨酸操縱子(Trp operon)在原核基因表達調控中的調控機制和重要作用。操縱子:指啟動基因、操縱基因和一系列緊密連鎖的結構基因的總稱。調控機制: 1 trp操縱子轉錄起始的調控是通過阻遏蛋白實現(xiàn)的。 2 trp操縱子轉錄終止的調控是通過弱化作用實現(xiàn)的。重要作用找不到請簡要解釋順式作用元件與反式作用因子,并舉二例加以說明它們的相互作用方式。順式作用元件:真核生物啟動子和增強子是由
19、若干DNA序列元件組成的,由于它們常與特定的功能基因連鎖在一起,因此被稱為順式作用元件。反式作用因子:是直接或間接地識別或結合在各類順式作用元件核心序列上,參與調控靶基因轉錄效率的蛋白質。試說明真核細胞與原核細胞在基因轉錄、翻譯及DNA的空間結構方面存在的主要差異,表現(xiàn)在哪些方面?轉錄:原核生物和真核生物的RNA聚合酶在分子組成、種類和生物化學特性上有差異。且真核生物線粒體、葉綠體內也存在RNA聚合酶。(課表69-72頁) 轉錄產(chǎn)物mRNA也存在差異(詳見上表)。翻譯:起始氨基酸不一樣,原核生物的需要甲?;?翻譯的起始過程有差異,真核生物mRNA有帽子結構和poly A尾巴 后期真核生物的多肽
20、鏈需要內質網(wǎng)、高爾基體等加工,原核生物的不用DNA空間結構:原核生物DNA的高級結構絕大部分原核的DNA都是共價封閉的環(huán)狀雙螺旋分子。在細胞內進一步盤繞,并形成類核結構,以保證其以較致密的形式存在于細胞內。在細菌基因組中,超螺旋可以相互獨立存在 真核生物DNA的存在形式在真核生物,DNA以非常致密的形式存在于細胞核中。在細胞周期的大部分時間里以分散的染色質形式出現(xiàn)在細胞分裂期形成高度組織有序的染色體。原核生物的蛋白質合成可分為(fn wi)哪些階段?簡述各階段的主要事件。氨基酸的活化(huhu)翻譯(fny)的起始肽鏈的延伸肽鏈的終止簡述RNA編輯(RNA editing)的機制及其對基因表達
21、的影響。RNA編輯機制:位點特異性脫氨基作用 引導RNA指導的尿嘧啶插入或刪除對基因表達的影響:校正作用 有些基因突變在突變過程中丟失的遺傳信息可能通過RNA的編輯得以回復調控翻譯 通過編輯可以構建或去除起始密碼子和終止密碼子,是基因表達調控的一種方式擴充遺傳信息 能使基因產(chǎn)物獲得新的結構和功能,有利于生物的進化核糖體是蛋白質合成的主要機器 。請問原核生物有哪些亞基和分子組成?核糖體在蛋白質翻譯過程中有哪些功能位點 ?起什么作用 ?RNA聚合酶全酶:轉錄起始過程需要 因子辨認起始點催化中心:和亞基可能與核心酶的組裝及啟動子識別有關,并參與RNA聚合酶和部分調節(jié)因子的相互作用:亞基還有亞基 作用不明確功能位點:A點 P點 E點A點:讀取下一個密碼子 P點:A位上的AA-tRNA移到P位形成肽鍵E點:P位上的tRNA移到E點,離開核糖體簡述蛋白質翻譯后的加工過程蛋白質前體的
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