實驗一-顯微鏡構(gòu)造-臨時玻片制作課件

1、植物學(xué)實驗植物學(xué)實驗的有關(guān)注意事項座位及顯微鏡使用安排課程的學(xué)時安排考核、考察要求實驗報告的上交要求值日安排發(fā)放實驗用工具盒（登記編號） 鑷子（1） 解剖針（2） 雙面刀片（1） 放大鏡（1） 小手巾（1） 載玻片（4） 蓋玻片（4）注意： 1、每位同學(xué)領(lǐng)取一套工具盒。 2、請妥善保管，并于本課程結(jié)束時交還給植物學(xué)教研室。 3、如有損壞，原價賠償實驗內(nèi)容（一）顯微鏡的構(gòu)造與使用方法（二）顯微鏡臨時玻片的制作（三）植物細胞的繪圖法實驗一、顯微鏡的使用及臨時玻片的制作一、實驗?zāi)康囊笳莆诊@微鏡的構(gòu)造及原理，熟練使用光學(xué)顯微鏡。了解顯微鏡使用的基本要求、注意事項及一般維 護方法。學(xué)習(xí)臨時玻片制作及掌

2、握生物繪圖的基本要求及方法。（一）顯微鏡的構(gòu)造和使用方法分辨率： 能分辨清楚的物體的最小的兩點中心的距離，稱為分辨率。人肉眼的分辨率最高可達：0.10.2mm光學(xué)顯微鏡的分辨率最高可達：0.2m電子顯微鏡的分辨率最高可達：0.2nm1mm=1000 m=1000 000nm顯微鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù) x 目鏡放大倍數(shù)光鏡的有效放大倍數(shù)可達1250倍透射電子顯微鏡用途：觀察細胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)放大倍數(shù)：300萬倍 分辨率：約為0.3納米 透射電子顯微鏡-觀察植物細胞的超微結(jié)構(gòu)電鏡下的線粒體掃描電子顯微鏡用途：觀察器官、組織表面的形態(tài)和結(jié)構(gòu)放大倍數(shù)分辨率用掃描電鏡與光鏡觀察比較植物葉表面的形態(tài)掃描電

3、鏡下的形態(tài)光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)1、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造光學(xué)系統(tǒng)物鏡目鏡聚光器虹彩光圈光源（或反光鏡）機械裝置鏡座鏡柱鏡臂載物臺鏡筒物鏡轉(zhuǎn)換器調(diào)焦裝置粗調(diào)焦螺旋微焦調(diào)螺旋一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造（一）機械部分:1、鏡筒:鏡筒的作用是保護成像配合保持一定的距離，一般 160mm。2、物鏡轉(zhuǎn)換器：安裝低倍和高倍物鏡3、 粗調(diào)焦螺旋：位于鏡柱兩側(cè)的一對大螺旋，用于調(diào)節(jié)焦距，旋轉(zhuǎn)一周可使載物臺上升或下降 10 mm 4、細調(diào)焦螺旋：與粗調(diào)焦螺旋同軸的一對小螺旋，旋轉(zhuǎn)一周可使載物臺上升或下降0.1mm5、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。6、鏡座：方形金屬座，用以穩(wěn)固和支持鏡身。7、鏡臂：亦稱執(zhí)手，連接鏡筒與鏡

4、柱，是用于執(zhí)鏡的部位。8、載物臺：放置玻片的平臺，中央有一通光孔、有固定制片的壓片夾和推進器一、光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造（二）光學(xué)部分： 由成像系統(tǒng)和照明系統(tǒng)組成。成像系統(tǒng)包括物鏡和目鏡，照明系統(tǒng)包括反光鏡和聚光器1、目鏡：2、物鏡：裝在物鏡轉(zhuǎn)換器和上，短者為低倍鏡（ 4 、 10 ），長者為高倍鏡（ 40 ），其上刻有N.A 0.25 0.5等，為數(shù)值孔徑（光線經(jīng)過蓋玻片引起折射后成光錐底面的口徑數(shù)值，數(shù)值越大，吸收光線量越多，越清楚），3、聚光器：4、光圈：5、照明器或反光鏡：鏡座鏡柱鏡臂鏡筒載物臺物鏡轉(zhuǎn)換器粗調(diào)焦螺旋微調(diào)焦螺旋目鏡物鏡聚光器光源虹彩光圈二、光學(xué)顯微鏡的使用1、低倍鏡的使用方法 （

5、1）取鏡和放置：（2）對光：打開電光源，用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動)，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔 。左眼在目鏡上觀察 (右眼睜開),同時調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。 （ 3）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。 （4）調(diào)節(jié)焦距：雙手轉(zhuǎn)動（向后，載物臺上升 ）粗調(diào)節(jié)器（在內(nèi)，大調(diào)解螺旋），使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處 ，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升 ，然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，向前緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使載物臺緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。 如果物象不在視野中

6、心可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心 。 光學(xué)顯微鏡的使用高倍鏡的使用方法 ：（1）選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調(diào)到中心，同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。 （2）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應(yīng)重新操作。 （3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細調(diào)節(jié)器（在外、小螺旋）的螺旋移動（向后）約0.51圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!) 果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)， 更換玻片標本或取玻

7、片時，必須向前轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器(切勿轉(zhuǎn)錯方向)使載物臺下降，方可取下玻片標本。 推進器向前后左右，顯微鏡下，物象移動方向如何？二、光學(xué)顯微鏡的使用拿取顯微鏡對光使用低倍物鏡（1）放置玻片標本；（2）調(diào)節(jié)焦距；（3）調(diào)節(jié)視野反差（4）認真觀察使用高倍物鏡（1）選好目標；（2）使用微調(diào)螺旋調(diào)整焦點；（3）調(diào)節(jié)光亮度和反差（4）認真觀察顯微鏡使用后的整理 請使用臺面上的玻片標本進行練習(xí)放置顯微鏡三、顯微鏡的維護1、經(jīng)常性的維護（）防潮如果室內(nèi)潮濕，光學(xué)鏡片就容易生霉、生霧。（）防塵光學(xué)元件表面落入灰塵，不僅影響光線通過，而且經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)放大后，會生成很大的污斑，影響觀察。 （）防腐蝕 顯微鏡不能和具有腐蝕

8、性的化學(xué)試劑放在一起。如硫酸、鹽酸、強堿等。 （）防熱 防熱的目的主要是為了避免熱脹冷縮引起鏡片的開膠與脫落。 三、顯微鏡的保護、光學(xué)系統(tǒng)的擦拭光學(xué)部分用用擦鏡紙擦拭干凈即行 。方法：先用干凈的毛筆或吹風(fēng)球除去鏡片表面的灰塵。用擦鏡紙從鏡片中心開始向邊緣作螺旋形單向運動。直至擦凈為止。如果鏡片上有油漬、污物或指印等擦不掉時，可用柳枝條裹上脫脂棉，蘸少量酒精和乙醚混合液（酒精80，乙醚20）擦拭。3、機械部分的擦拭 ：可用軟布擦拭。但不能使用酒精、乙醚等有機溶劑 二、臨時玻片的制作材料：洋蔥鱗葉的下表皮方法：撕片法步驟：特別注意： 觀察臨時裝片時一定要加蓋蓋玻片，并將其四周溢出的水擦干。（三）生活細胞的觀察洋蔥鱗葉下表皮細胞觀察與思考：在你的制片中是否每個細胞都具有細胞核？為什么？你如何解釋不同細胞中細胞核在形態(tài)和位置上的差異？3、你能看見細胞核中的核仁嗎？一般有幾個？細胞核細胞壁細胞質(zhì)液泡（四）植物細胞與組織繪圖法生物繪圖的要求：科學(xué)性、真實感、精細而美觀、文字標注清晰。生物繪圖的