MICM整合診斷急性白血病課件

1、MICM整合報告診斷病例病史簡介1患兒女性，2歲，主因：間斷發(fā)熱兩周，皮膚瘙癢一周，外院診斷急性白血病入院 2015年9月，患兒因“間斷發(fā)熱兩周，皮膚瘙癢一周”就診于當(dāng)?shù)蒯t(yī)院，行骨髓穿刺術(shù)，形態(tài)原始細胞91%。未治療入我院。一般狀況差，上肢散在淤點，淺表淋巴結(jié)和肝脾未及腫大。形態(tài)學(xué)診斷BLBL血常規(guī)報告+分類計數(shù)三、檢驗診斷/結(jié)論初步診斷為急性白血病（AL），建議骨髓穿刺及免疫分型檢查BM 10BMBMBM（組圖）BMBMBM MPOBM MPO（組圖）BM CEBM NAE酯酶雙染（組圖）BM PAS（組圖）(一)骨髓象1.取材、涂片、染色良好，骨髓小粒(+)。2.骨髓增生II-級，M:E=

2、20.2:1。3.原始細胞占有核細胞69.4%，細胞大小不均，呈圓或橢圓形，部分細胞不規(guī)則, 細胞核呈圓或橢圓形，部分細胞可見扭曲、折疊，染色質(zhì)呈顆粒狀，核仁0-2個，胞質(zhì)偏少或略豐富呈灰蘭色，部分細胞質(zhì)中可見數(shù)量不等的紫紅色顆粒；胞體偏小的細胞染色質(zhì)致密，胞質(zhì)少。4.粒系占有核細胞3.4%，早幼粒及以下階段可見。5.紅系占有核細胞3.6%，為中、晚幼紅細胞，成熟紅細胞形態(tài)未見明顯異常。6.淋巴細胞占有核細胞20.4%，形態(tài)未見明顯異常。7.巨核細胞（2cm4cm）見11個，其中顆粒型9 個，裸核2個，雙圓核巨核細胞可見，血小板散在可見。8.細胞裸核易見，未見寄生蟲。形態(tài)學(xué)報告1（二）骨髓細胞

3、化學(xué)染色： 原始細胞MPO: -74% +16% +10% 原始細胞PAS:-51% +49%(彌漫、細顆粒，偶見粗顆粒) 原始細胞CE:-81% +19% 原始細胞NAE:-100% 原始細胞酯酶雙染色：-83%,+17% (CE:+6%, NBE:+1%,雙染:+10%)診斷：1.急性粒單細胞白血病（AML-M4） 2.混合表型急性白血病或AML伴淋系表達？ 請結(jié)合免疫分型形態(tài)學(xué)報告2流式細胞術(shù)免疫分型檢測免疫分型：CD7,cCD3,TdT(T)免疫分型：CD13,CD33,MPO(M);幼稚單核診斷：混合表型急性白血病（T/髓系混合）：38.13%惡性原始細胞(T/髓系雙表型）5.32%

4、幼稚單核細胞。檢測結(jié)果：38.13%細胞（占全部有核細胞）表達CD34, CD7bri, CD99bri，CD56, CD117, HLA-DR, CD33, 部分表達 cCD3, cTdT, CD13，MPO,不表達CD19, CD15，CD36, CD11b, CD61, CD22，CD10, CD1a, CD14, CD64, CD4，CD8，CD3，CD2，TCR-rd，CD5,為惡性原始細胞（T/髓系雙表型)；單核細胞占有核細胞15.27%，其中5.32%細胞（占有核細胞）為幼稚單核細胞。 歐洲白血病免疫分型研究組（EGIL）提出的免疫標記積分系統(tǒng)積分B細胞系T細胞系髓系2cCD79

5、acIgMcCD22CD3(c/m)抗TCRMPO1CD19CD20CD10CD2CD5CD8CD10CD117CD13CD33CD650.5TdTCD24TdTCD7CD1aCD14CD15CD642008年WHO細胞系別確定標準：髓系 MPO（流式細胞術(shù)、免疫組化或者細胞化學(xué)） 或 單核系分化（非特異性酯酶彌漫性陽性，或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶體，兩個及以上陽性）T系 胞漿CD3 或 胞膜CD3（MPAL中比較罕見）B系 CD19強表達加下述標志中至少一個強表達：CD79a、胞漿CD22、CD10 或 CD19弱表達加下述標志中至少兩個強表達：CD79a、胞漿CD2

6、2、CD10流式細胞免疫分型報告2流式細胞免疫分型報告3細胞遺傳學(xué)檢測細胞遺傳學(xué)報告染色體標本制備采用24小時短期培養(yǎng)法G顯帶核型分析標準參照ISCN2013版進行對異?？寺〉呐袛啵褐辽?個細胞有同樣的染色體增加或結(jié)構(gòu)重排，或者，至少3個細胞有同樣的染色體丟失，方可確任存在一個異?？寺?。FISH實驗選用美國Vysis公司探針，雜交等實驗 條件按照探針說明書進行FISH分析標準參照ISCN2013版進行細胞遺傳學(xué)報告2015-9-26FISH：ETV6-RUNX1雙色雙融合基因探針，結(jié)果：未見涉及ETV6基因重排細胞遺傳學(xué)報告2015-9-26NCCN Guidelines Version 1.

7、2015 Acute Myeloid Leukemia細胞遺傳學(xué)角度評估預(yù)后：中危xxxxxx分子遺傳學(xué)檢測分子遺傳學(xué)報告 分子遺傳學(xué)報告 血液腫瘤突變組分析（包括58種基因的突變熱點或編碼區(qū)全長）ALKCRLF2IL7RNPM1SH2B3ASXL1CSF3RJAK1NRASSRSF2ASXL2CXCR4JAK2NT5C2STAT3BCL2DNMT3AJAK3PAX5TCF3(E2A)BRAFETV6KITPHF6TET2CALREZH2KRASPIK3CATNFAIP3(A20)CARD11FBXW7MAP2K1PTENTP53CBLFLT3MEF2BPTPN11U2AF1CCND1GATA

8、2MPLRHOAWHSC1CD79BID3MYD88RUNX1WT1CEBPAIDH1NOTCH1SETBP1CREBBPIDH2NOTCH2SF3B1 體細胞突變基因BM突變比例NOTCH1p.S2513F35%ETV6 p.R105G29%EZH2p.K243N6%體細胞突變基因突變突變比例NOTCH1p.S2513F22%ETV6p.R105G31%RGS12p.G990R30%胚系突變基因突變（雜合）致病性FANCMp.R581C可能有害BRCA2p.N2452S？TP53c.920-5 CT？TEP1c.2098-4 TC？全外顯子組測序分析結(jié)果58種血液腫瘤基因突變組分析結(jié)果1.

9、NOTCH1、ETV6、EZH2體細胞突變是導(dǎo)致該 患者急性混合細胞白血病表型的遺傳學(xué)基礎(chǔ)。2. 可能有害的FANCM突變，可能聯(lián)合其他意義未 明的BRCA2、TP53、TEP1胚系突變，是該患者 早期（2歲）發(fā)生血液腫瘤的先天易患因素。 結(jié)果說明：1. 體細胞突變：（1）外顯子測序中未檢出EZH2 K243N突變，考慮與突變頻率 較低（6%）有關(guān)。（2）RGS12為一種G蛋白信號調(diào)節(jié)因子，參與G蛋白偶聯(lián)受信 號級聯(lián)反應(yīng)的負性調(diào)節(jié)；該蛋白可能參與腫瘤的發(fā)生。2. 胚系突變：（1）單個突變致病性判斷：結(jié)合多種數(shù)據(jù)庫信息和生物信息學(xué) 預(yù)測軟件分析，考慮FANCM突變?yōu)榭赡苡泻ν蛔?，TP53、 BRCA2、TEP1突變?yōu)橐饬x不明突變。（2）基因功能： FANCM和BRCA2均參與DNA的修復(fù)， TP53 為抑癌基因，參與DNA修復(fù)、細胞周期調(diào)節(jié)、應(yīng)