選擇HIV抗體篩選方法

1、第 五 章選擇HIV抗體的篩選方法1一、敏感度和特異性 敏感度：是該方法能夠檢測出最弱陽性標本的能力，與實驗結果中被感染的個體有關。 特異性：是該方法能夠檢測出真陰性標本的能力，與實驗結果中沒有被感染的個體有關。 2 計算敏感度和特異性的方法，用以下兩個簡單的公式： 敏感度= 100% 特異性= 100%真陽性數(shù)真陽性數(shù)+假陰性數(shù)真陰性數(shù)真陰性數(shù)+假陽性數(shù)3 例題： 某血站用10個室間質(zhì)評品測定某公司抗HIV試劑的靈敏度、特異性，其結果如下： 4 （說明：廠家說明書cutoff值計算公式為：陰性均值+0.12，本試驗的CO值=0.08+0.12=0.20 標本OD0.20者為陽性，反之為陰性）

2、根據(jù)上述結果計算其靈敏度和特異性（P49） 5列出四格表 真結果 合計 真結果 合計 + - + - a真陽性b假陽性a+bC假陰性d真陰性c+da+cb+d4261345510檢測結果合計+-檢測結果合計+-6靈敏度= 100% = 100%=80%特異性= 100% = 100%=60%45真陽性數(shù)真陽性數(shù)+假陰性數(shù)真陰性數(shù)真陰性數(shù)+假陽性數(shù)357 兩者的關系：方法的特異性和敏感度一般來說成反比關系，即當敏感度上升時，特異性下降，而特異性上升時，敏感度下降。 兩者的意義： 在HIV 篩檢中一種方法的敏感度與安全輸血緊密相關，重要性顯而易見。 一種方法特異性與其操作步驟及包被的抗體或抗原的來

3、源有關。例如，用純化抗原（如合成肽）就可降低非特異性反應。因為幾乎沒有其它肽分子的存在。8 強調(diào)：無論報導某種篩檢方法的特異性和敏感度如何的好，它的最終結果還是靠操作者的熟練操作。 9 二、選擇試驗的種類時要考慮的因素 1、第一步是在本地或本國找到一種有售的、適宜的檢測試劑。如HIV-1+2型。 2、靈敏度、特異性。 3、獻血員的數(shù)量。 4、試劑價格、供應情況。 5、所需的儀器、設備、水、電等。 10EIA顆粒凝集試驗特異性快速法方法的名稱廠 商樣品類別樣品的稀釋最初的孵育時間孵育溫度最初的洗滌步驟聯(lián)結劑的組成聯(lián)結劑的孵育時間第二次洗滌步驟底 物底物孵育時間讀取結果方式方法需要的特殊儀器費 用

4、11三、影響篩檢工作的因素 1、人員培訓，內(nèi)容包括 1）培訓實驗操作誰提供培訓及培訓工作的負責人培訓類別 培訓時間受訓者的技能考試情況培訓是否定期進行 2）培訓正確記錄結果12 2、設備和試劑的特殊要求，如加樣槍及其吸頭、專用微孔板、酶標儀、洗板機等。 13 3、試劑盒的供應： 國內(nèi)主要是計算好試劑盒的用量和庫存數(shù)量，通常應考慮以下因素： 在特定的時間里將要檢測的標本數(shù)量 重做初次反應性的標本(你可能覺得有必要再重復一次)的量 你用的任何室內(nèi)質(zhì)控品或室間質(zhì)控品 試驗失敗的次數(shù) 14 4、試劑貯藏的條件：一般為2-8，這就需要考慮冰箱及電力供應等情況5、適宜待檢樣本-樣品的類型和質(zhì)量 類型：血清

5、、血漿、全血 質(zhì)量：用血清時要等血完全凝結，防溶血，防脂血，要新鮮、無細菌生長 15 6、質(zhì)控品的供應 定義：室內(nèi)質(zhì)控品、室間質(zhì)評物 用途：監(jiān)測精密度和準確度。每個進行HIV抗體檢測篩選的實驗室都必須開展室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評工作，這就需要質(zhì)控品、質(zhì)評品。 16 7、HIV抗體檢測的時間限制：在急救時血源供應不上時的對策。 8、篩選檢測的費用 17 總結 1、方法的敏感度是對被感染的個體測出反應性結果的可能性，而特異性則是對未被感染的個體測出無反應的可能性。 2、選用最適宜你特定環(huán)境下用的方法非常重要。 3、對所有的員工必須進行正確操作實驗的培訓。18 4、試劑必須貯存在適宜的條件下，以保證其被正確使用和結果的可靠。 5、應用新鮮的、完全凝結的并正確貯存的標本。 6、如果得不到室間質(zhì)評品，可以用各個批號不同濃度室內(nèi)質(zhì)控品代替。 19 7、無