




版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、 第四章 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證 第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法 第二節(jié) 定量分析方法特點(diǎn)第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證第四節(jié) 生物樣品分析方法的基本要求返回主目錄基本要求練習(xí)與思考精選ppt基本要求 一、掌握定量分析方法驗(yàn)證的效能指標(biāo)。 二、熟悉定量分析樣品的前處理方法。 三、了解定量分析樣品的前處理方法的進(jìn)展 及在藥物分中的應(yīng)用。返 回精選ppt 第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法 一、概述 1.為什么要對定量分析的樣品進(jìn)行前處理? 含鹵素有機(jī)藥物 R-X (F,Cl, Br, I ) 金屬有機(jī)藥物 R-O-Me(有機(jī)酸或酚的 含金屬有機(jī)藥物 金屬鹽;結(jié)合不牢固) 有機(jī)金屬藥物 R-
2、Me (結(jié)合牢固) 2. 常用的處理方法 不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 藥物分析中常用的分析方法 經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法精選ppt二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法(一)直接測定法 例如:富馬酸亞鐵 溶于熱稀礦酸,采用鈰量法 ,鄰二氮菲作指示劑 精選ppt(二)經(jīng)水解后測定法 1. 直接回流后測定法 例如:三氯叔丁醇的含量測定 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH (CH3)2CO +3NaCl + HCOONa +2H2O NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 2. 用硫酸水解后測定法 例如:硬脂酸鎂的含量測定 Mg(C17
3、H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2C17H35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O 精選ppt(三)經(jīng)氧化還原后測定法 1. 堿性還原后測定 例如:泛影酸的含量測定 2. 酸性還原后測定 例如:碘番酸的含量測定 Zn還原 后銀量法 精選ppt 3. 利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測定含量 (1)含銻藥物 例如:葡萄糖酸銻的含量測定 Sb5+ + 2KI Sb3+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 (2)含鐵藥物 2Fe3+ + 2KI 2Fe2+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2
4、NaI + Na2S4O6H+精選ppt 三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 濕法破壞 藥物分析中常用的有機(jī)破壞的方法有 干法破壞 HNO3-HClO4法 氧瓶燃燒法(一)濕法破壞 HNO3-H2SO4法 H2SO4-硫酸鹽法 HNO3- H2SO4-HClO4法; H2SO4-H2O2; H2SO4-KMnO4(二)干法破壞 加Na2CO3或MgO以助灰化;溫度控制在420 精選ppt (三)氧燃瓶燃燒法(oxygen flask combustion method) 1. 儀器裝置 500ml, 1000ml, 2000ml, 磨口、硬質(zhì)玻璃錐形瓶 2. 稱樣 固體樣;液體樣要求詳見P68 3. 燃
5、燒分解操作法 4. 吸收液的選擇 用于X、S、Se等的鑒別、檢查、含量測定時(shí) 多數(shù)是H2O或H2O-NaOH;少數(shù)為H2O-NaOH-H2O2.精選ppt應(yīng)用示例:碘苯酯的測定返 回精選ppt第二節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 一、容量分析法 (一)容量分析法的特點(diǎn) 操作簡單、快速; 比較準(zhǔn)確(RSD0.2%); 儀器普通易得。精選ppt(二)容量分析法的計(jì)算問題 1. 滴定度(T)的概念 每1mlmol溶液相當(dāng)于被測物質(zhì)的量(mg) 2. 滴定度的計(jì)算 aA + bB cC + dD T = Mb/aB 3. 百分含量的計(jì)算 (1)直接滴定法 D% = V F T/W 100% F = 實(shí)際標(biāo)定的濃度
6、/規(guī)定的濃度 (2)間接滴定法(回滴定法;剩余滴定法) D% = (VO VB) F T/W 100%精選ppt 二、光譜分析法 (一)紫外-可見分光光度法(200nm760nm) 靈敏度高,可達(dá)10-4g/ml 10-7g/ml 1. 特點(diǎn) 準(zhǔn)確度高,SRD(%)為2% 5% 儀器價(jià)格低廉,操作簡單,易普及,應(yīng)用 范圍廣。 2. 朗伯-比耳定律 A = ECL E1%1cm = 10/M精選ppt 3. 儀器校正和檢定 波長校正用汞燈中較強(qiáng)譜線237.38,253.65,275.28,296.73, 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nm與57
7、6.96nm 或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm進(jìn)行校正。 吸收度的檢定:用K2CrO7(60mg)+0.005mol/LH2SO4液至1000ml 波長(nm) 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大) E1%1cm 124.5 144.0 48.62 106.6 雜散光檢查: 試劑 濃度(g/ml) 測定波長 透光率(%) NaI 1.00 220nm 0.8 NaNO2 5.00 340nm 0.8精選ppt 4. 對溶劑的要求: 220240nm 241250nm 251300nm 300nm以上 溶劑+吸收池A 0.41 0.20 0.10 0.
8、05 5. 測定方法 要求供試品溶液的A應(yīng)在0.3 0.7 對照品比較法:Cx=(Ax/Ar)Cr; 含量%=CxD/W100 % 常用方法 吸收系數(shù)法: 含量%= (E1%1cm )x/(E1%1cm )r 100 % 計(jì)算分光光度法:VA的三點(diǎn)校正法精選ppt (二)熒光分光光度法 靈敏度高,可達(dá)10-10g/ml 10-12g/ml 在低濃度進(jìn)行測定,防止F與C不成正比及自熄滅作用 1. 特點(diǎn) 用基準(zhǔn)物溶液校正儀器靈敏度,防止樣品液熒光衰減 靈敏度高,但干擾因素多。 制備熒光衍生物,可提高其靈敏度和選擇性。 用樣品量少,操作簡單,方法快速,應(yīng)用范圍較廣。 精選ppt2. 熒光分析儀 有二
9、個(gè)單色光器激發(fā)單色光器與發(fā)射單色光 器;且激發(fā)光源、樣品池和檢測器成直角。3. 含量測定 常用的方法對照品比較法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) Cr Ch.P收載地高辛片、利血平片、洋地黃毒苷片。精選ppt 三、色譜分析法 按分離原理分為:吸附;分配;離子交換;排阻色譜 方法分類 按分離方法分為:PC;TLC;柱色譜;GC;HPLC。 (一)HPLC法 1. 對HPLC儀器一般要求 色譜柱、流動(dòng)相按品種項(xiàng)下要求。 色譜柱的理論板數(shù):n = 5.54(tR /Wh/2)2 2. 系統(tǒng)性試驗(yàn) 分離度:R = 2(tR1 tR2)/(W1 + W2); 要大于1.5 拖尾因子:T =
10、 W0.05h/2d1 應(yīng)在0.9 1.05 精選ppt 內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中主成分含量3. 測定方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 外標(biāo)法測定供試品中主成分含量 外標(biāo)一點(diǎn)法 應(yīng)用示例: RP-HPLC法測定鹽酸黃酮哌酯片含量,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法 如頭孢拉丁;頭孢羥氨芐;頭孢唑啉鈉用外標(biāo)一點(diǎn)法精選ppt (二)GC法 1. 對GC儀器一般要求 載氣為氮?dú)?;色譜柱為填充或毛細(xì)管柱 色譜柱的理論板數(shù):n = 5.54(tR /Wh/2)2 2. 系統(tǒng)性試驗(yàn) 分離度:R = 2(tR1 tR2)/(W1 + W2); 要大于1.5 拖尾因子:T = W0.05h/2d1 應(yīng)在0.9 1.05 精選ppt 內(nèi)標(biāo)法加校
11、正因子測定供試品中主成分含量 3. 測定方法 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 外標(biāo)法測定供試品中主成分含量 外標(biāo)一點(diǎn)法 應(yīng)用示例: Ch.P(2000)收載的月桂卓酮、維生素E及其片劑、注 射劑、甲酚皂溶液等均采用GC法中的內(nèi)標(biāo)法加校正 因子測定含量。返 回精選ppt 第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 一、準(zhǔn)確度 是指用該方法測定結(jié)果與真實(shí)值接近的程度,用回收率表示(一)含量測定方法的準(zhǔn)確度 1. 原料藥 可用已知純度對照品或樣品進(jìn)行測定;或與已建準(zhǔn)確 度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。 2. 制劑 要考察輔料對回收率的影響。采用在空白輔料中加入原 料對照品的方法作回收率試驗(yàn),然后計(jì)算RSD。 具體做法:測定高、中
12、、低三個(gè)濃度,n=3, 共9個(gè)數(shù)據(jù)來評價(jià) 回收率的RSD2%;用UV和HPLC發(fā)時(shí),一般回 收率可達(dá)98%102%;容量法可達(dá)99.7%100.3% 精選ppt(二)數(shù)據(jù)要求 回收率% = (測定平均值 空白值)/加入量100% 要求制備高、中、低三濃度的樣品,各測定3次。應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率,或測定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其可信限。精選ppt 二、精密度 是指在規(guī)定的測試條件下,同一個(gè)均勻樣品,經(jīng)多次測定結(jié)果 之間的接近程度。 (一)精密度表示方法 1. 偏差(deviation , d) d = 測得值-平均值=Xi-X 2. 標(biāo)準(zhǔn)偏差(standard deviation, SD或S
13、) S =(Xi X)2/(n-1)1/2 3. 相對標(biāo)準(zhǔn)差(relative standard deviation, RSD)也稱變異系數(shù) (coefficient of variation, CV) RSD=標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值100%=S/X 100%精選ppt(二)重復(fù)性、中間精密度及重現(xiàn)性 1. 重復(fù)性 在相同條件下,由一個(gè)分析人員測定所得結(jié)果的精密度. 2. 中間精密度 在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,不同時(shí)間由不同分析人員用不 同設(shè)備測定結(jié)果的精密度。 3. 重現(xiàn)性 在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測定結(jié)果的精密度。精選ppt(三)數(shù)據(jù)要求 應(yīng)報(bào)告S或SD、RSD和可信限。用統(tǒng)計(jì)學(xué)的可信性分析(t或f)。
14、精選ppt 三、專屬性 是指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下, 采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢 查、含量測定方法,均應(yīng)考察其專屬性。 (一)鑒別反應(yīng) 應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分,不含被測組分 的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。精選ppt (二)含量測定和雜質(zhì)測定 色譜法和其他分離法,應(yīng)附代表性的圖譜,以說明專屬性。 圖中應(yīng)注明各組分的位置,色譜法中分離度應(yīng)符合要求。在能 獲得雜質(zhì)的情況下,可加到試樣中,考察對結(jié)果的干擾。在雜 質(zhì)和降解物不能獲得的情況下,可用以驗(yàn)證方法和藥典方法進(jìn) 行對照;也可用對試樣加速破壞的方法,比較兩種方法。精選ppt 四、檢測限(li
15、mit of detection, LOD) 是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或量,是限度檢驗(yàn) 指標(biāo)。它無需測定,只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。 (一)常用的方法 1.非儀器分析目視法 用已知濃度被測物,試驗(yàn)出能被可靠地 檢測出的最低濃度或量。 2.儀器分析方法 UV法:LOD = f.3S空 = C樣/A樣 3S空 Flu法:LOD = f.3S空 = C樣/(F樣-F空) 3S空 GC和HPLC法: LOD = S/N = 2或3 精選ppt(二)數(shù)據(jù)要求 應(yīng)附測試圖,說明測試過程和檢測限結(jié)果。 精選ppt 五、定量限(limit of quantitation, LOQ)
16、是指樣品中被測物能被定量測定的最低量,其測定結(jié)果應(yīng) 具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進(jìn)行定量測定時(shí),要求 LOQ.常用信噪比法確定定量限,一般以S/N=10時(shí)相應(yīng)的濃度進(jìn)行 測定。精選ppt 六、線性 是指在設(shè)定的范圍內(nèi),測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接 呈正比關(guān)系的程度。 UV法:首先制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列,濃度點(diǎn)n =5; A = 0.3.0.7 建立回歸方程C = aA + b ;r 0.9999。 HPLC法:制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列,濃度點(diǎn)n =5 7; 以C對h或A或與 內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比,建立回歸方程r 0.9999。精選ppt七、范圍 是指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性、測試方法適用的高低限
17、度或量的區(qū)間。 原料藥和制劑含量測定:范圍應(yīng)為測試濃度的80%- 120%。 制劑含量均勻度檢查:范圍應(yīng)為測試濃度的70%- 130%。 溶出度或釋放度中的溶出量測定:范圍應(yīng)為限度的20%。精選ppt 八、耐用性 是指在測定條件下有效的變動(dòng)時(shí),測定結(jié)果不受影響的承受 程度。典型的變動(dòng)因素有:被溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí) 間等。 HPLC法變動(dòng)因素有:流動(dòng)相組成與pH,色譜柱,柱溫,流速等。 GC法變動(dòng)因素有:色譜柱,固定相,擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢 測器溫度等。精選ppt 分析方法效能指標(biāo)的具體應(yīng)用: 1. 用于鑒別試驗(yàn)的方法:只要求專屬性、耐用性,其余不要求。 2. 用于原料藥中雜質(zhì)測定和
18、制劑中降解產(chǎn)物測定的方法: 用于定量:除了檢測限不要求外,其余七項(xiàng)指標(biāo)均要求。 限度檢查:除檢測限、專屬性、耐用性要求外,其余不要求。 3. 原料、制劑及溶出度測定:不要求檢測和定量限,其余均要求。返 回精選ppt 第四節(jié) 生物樣品分析方法的基本要求 一、常用樣品的種類、采集和貯張 二、生物樣品分析前處理技術(shù) 三、定量分析方法驗(yàn)證 返 回精選ppt練習(xí)與思考A型題 1 藥品的鑒別是證明 A未知藥物的真?zhèn)?B已知藥物的真?zhèn)?C已知藥物的療效 D藥物的純度 E藥物的穩(wěn)定性2相對標(biāo)準(zhǔn)差表示的應(yīng)是A準(zhǔn)確度 B回收率 C精密度 D純凈度 E限度精選ppt3用移液管量取的25ml溶液,應(yīng)記成A25ml B25.0ml C25.00ml D25.000ml E251ml4以下三個(gè)數(shù)字0.5362、0.0014、0.25之和應(yīng)為A0.79 B0.788 C0.787 D0.7876 E0.8精選ppt5表示兩變量指標(biāo)A與C之間線性相關(guān)程度常用A相關(guān)規(guī)律 B比例常數(shù) C相關(guān)常數(shù) D相關(guān)系數(shù) E精密度6減小偶然誤差的方法是A做空白試驗(yàn) B做對照實(shí)驗(yàn) C做回收試驗(yàn) D增加平行測定次數(shù) E選用多種測定方法精選pptB型題 14A1.23 B1.22 C2.54 D2.53 E2.5111.225222.535132.534842.5068ACDE精選p
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 廣播電視節(jié)目制作中的編劇策略考核試卷
- 信托公司財(cái)務(wù)風(fēng)險(xiǎn)分析與控制考核試卷
- 疫情網(wǎng)課班會(huì)課件小學(xué)生
- 塑料薄膜在戶外運(yùn)動(dòng)裝備的應(yīng)用考核試卷
- 智能清潔電器的遠(yuǎn)程監(jiān)控技術(shù)考核試卷
- 機(jī)器人傳感器數(shù)據(jù)融合與應(yīng)用考核試卷
- 蘇州恒溫配送合同范本
- 土建及市政合同范本
- 拍攝視頻制作合同范本
- 毛坯公寓酒店合同范本
- 蘇教版科學(xué)五年級下15《升旗的方法》教案
- 現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵調(diào)控緒論
- 超高性能混凝土項(xiàng)目立項(xiàng)申請(參考模板)
- 電纜橋架招標(biāo)文件范本(含技術(shù)規(guī)范書)
- 試車場各種道路施工方案設(shè)計(jì)
- 部編版四年級語文下冊第二單元《習(xí)作:我的奇思妙想》課件PPT
- PS零基礎(chǔ)入門學(xué)習(xí)教程(適合純小白)PPT課件
- XX輸變電工程公司作業(yè)風(fēng)險(xiǎn)評估數(shù)據(jù)庫(精品模板)
- 涂裝行業(yè)常用日語單詞集
- 頭頸部影像學(xué)表現(xiàn)(詳細(xì)、全面)
- 《國際商務(wù)》PPT課件.ppt
評論
0/150
提交評論