10組織培養(yǎng)第十章常見(jiàn)植物脫毒與快繁ppt課件

1、第十章 常見(jiàn)植物脫毒與快繁技術(shù)宜職院08.9 目的與要求 了解農(nóng)作物、果樹(shù)、花卉、藥用植物的脫毒和快繁的消費(fèi)意義與根本技術(shù)，根據(jù)地方特點(diǎn)和組培技術(shù)現(xiàn)狀，例舉部分植物進(jìn)展講授，并結(jié)合學(xué)生查閱資料共同討論。 具有農(nóng)作物、果樹(shù)、花卉、藥用植物快繁根本技術(shù)，具備馬鈴薯、草莓等植脫毒技術(shù)，進(jìn)展微型薯消費(fèi)根本知能，有利用圖書(shū)及網(wǎng)絡(luò)資源搜集相關(guān)資料，了解相關(guān)行業(yè)信息的才干，并具備一定交流討論才干。 第一節(jié) 農(nóng)作物的脫毒與快繁 植物組織培育技術(shù)已廣泛運(yùn)用于農(nóng)作物育種和良種繁育，尤其是許多無(wú)性繁衍類(lèi)農(nóng)作物脫毒及良種快繁，對(duì)提高農(nóng)作物消費(fèi)的產(chǎn)量和質(zhì)量發(fā)揚(yáng)了極其重要的作用。一、馬鈴薯的脫毒和快繁一莖尖培育脫毒1、取

2、材 消費(fèi)大田頂芽，或塊莖，預(yù)培育抽生的枝條污染較少。供試資料存在病毒可結(jié)合熱處置脫毒。2、消毒 自來(lái)水沖洗1h，70%酒精30s，10%漂白粉溶液510min，無(wú)菌水沖洗23次。 3、接種 解剖鏡下，解剖刀切取0.10.3mm帶有12個(gè)葉原基的莖尖，接種到培育基上。 4、培育條件 MS、Miller，252， 1000lx，4周后增至20003000 lx，光照16h。5、病毒鑒定 目測(cè)法和指示植物鑒定法。二微型薯消費(fèi)技術(shù) 由試管苗消費(fèi)的重130g的微小馬鈴薯被稱(chēng)為微型薯。不帶病毒，增產(chǎn)效果普通在40%以上。 1、試管消費(fèi) 微型薯普通只需15g。用組織培育方法消費(fèi)微型薯分以下兩個(gè)步驟：1單莖段

3、擴(kuò)展繁衍2微型薯的誘導(dǎo)。 2、溫室多層架盤(pán)工廠化消費(fèi) 3、低網(wǎng)畦消費(fèi)二、甘薯的脫毒與快繁一莖尖培育1、莖尖培育脫毒 取高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)母株枝條，切成帶1芽小段。自來(lái)水流水沖洗， 70%酒精10s， 0.1%的升汞10min，無(wú)菌水45次，或2%次氯酸鈉5min，無(wú)菌水34次。2、莖尖剝離和培育 解剖鏡下剝?nèi)パ可陷^大幼葉，切取0.30.5mm含12個(gè)葉原基的莖尖分生組織，迅速接種到制備好的培育基上。 3、病毒檢測(cè) 目測(cè)法和指示植物鑒定法。 二脫毒苗擴(kuò)繁和種薯的消費(fèi) 經(jīng)過(guò)病毒檢測(cè)的脫毒苗先在試管內(nèi)進(jìn)展切段快繁。30d左右長(zhǎng)成有68片展開(kāi)葉的試管苗。待試管苗繁衍到一定數(shù)量后，即可在防蟲(chóng)條件下于無(wú)菌基質(zhì)中進(jìn)

4、展栽培繁衍。所結(jié)小薯即為原原種薯。以原原種苗為種植資料，在防蟲(chóng)條件下的無(wú)病毒土壤上培育出的薯塊即為原種。以原種苗在大田條件下消費(fèi)所結(jié)薯塊即為消費(fèi)用種薯良種。 紅薯原原種煉苗第二節(jié) 果樹(shù)脫毒快繁 利用組織培育方法繁衍果樹(shù)植株具有占地面積小，繁衍周期短，全年都能進(jìn)展繁衍，繁衍系數(shù)高等特點(diǎn)。還可以消除果樹(shù)的某些病毒病，順應(yīng)果樹(shù)向種類(lèi)更新快、矮化密植以及無(wú)病毒栽培方向開(kāi)展的需求。 一、草莓一草莓離體快繁技術(shù)1、外植體67月份匍匐莖1520cm長(zhǎng)時(shí)取材。2、培育基初代MS+6-BA0.5mg/L+GA30.1mg/L+IBA0.2mg/L增殖MS+6-BA0.51.0mg/L。3、生根和馴化1/2MS+

5、IBA0.21.0mg/L根23cm時(shí)煉苗，一周后發(fā)新根，周?chē)罂梢圃?。二花藥培育脫?、花藥培育脫毒技術(shù)春季取單核期花蕾直徑約4mm，45低溫處置24h。浸入70%酒精30s，漂白粉或0.1%氯化汞1015min。剝?nèi)』ㄋ幏旁谂嘤稀ＵT導(dǎo)培育基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2 mg/L +IBA0.2 mg/L， 繼代培育基為MS+6-BA1.0mg/L+ IBA0.05mg/L2、脫毒苗的檢測(cè)指示植物小葉嫁接鑒定法和電子顯微鏡鑒定法。 草莓小葉嫁接法二、柑橘1、莖尖微芽嫁接 砧木種子45溫水浸泡5min5556熱水處置50min取出吸干消毒剝?nèi)シN皮種子接種于MS培育基271暗

6、培育2周后萌生芽苗可作砧木。 接穗資料強(qiáng)壯新梢 熱空氣處置45min (50)取lcm長(zhǎng)芽條消毒處置切取0.140.18mm微莖尖。 砧木苗切去長(zhǎng)根和子葉，上胚軸留11.5cm切除頂部，垂直于莖，切開(kāi)一個(gè)倒T字形切口，將微莖尖放置于砧木切口內(nèi)，莖尖底部和砧木切口構(gòu)成層嚴(yán)密貼合。 嫁接苗轉(zhuǎn)植于新穎培育基上， 271、16h光照，24周后抽生新芽，成活率可達(dá)20%50%。58周可移植。 柑橘花藥培育表示圖2、無(wú)病毒苗的繁衍 經(jīng)無(wú)病毒苗鑒定后選出無(wú)病毒良種苗木，可建立原種母本園。在隔離區(qū)，按無(wú)病苗的栽培要求建成無(wú)病良種母本園，供繁衍無(wú)病苗木采穗用。三、香蕉一花序軸切片培育1、花序軸切片 香蕉果穗已完

7、全抽出時(shí)采上部末結(jié)實(shí)花序，無(wú)菌下剝?nèi)“プ臃俊Ｈ№敹?015cm長(zhǎng)的花序軸段，滅菌后橫切成23cm厚的薄片，再縱切成數(shù)片。 2、培育過(guò)程 常用MS培育基，也可用SM或改良MS，繼代也可用Knudson培育基。香蕉雄花序外植體誘幼苗過(guò)程二影響試管育苗的關(guān)鍵技術(shù) 芽的反復(fù)增殖是香蕉試管育苗的技術(shù)關(guān)鍵。芽的增殖效果如何，較重要的衡量目的是增殖率和代期次繼代培育的時(shí)間，均與生長(zhǎng)調(diào)理劑關(guān)系最為親密。細(xì)胞分裂素以6-BA 34mgL為宜，增殖率可到達(dá)4以上，代期為34周，因此增殖效率高。 第三節(jié) 蔬菜組織培育一、番茄1、花藥培育取花藥37mm長(zhǎng)、單核中期的花蕾。將花蕾用0.1吐溫40溶液浸泡5min7

8、0酒精15s3的漂白粉10 min無(wú)菌水沖洗接種從花蕾中取出花藥，接種在DBMII2.0mg/L NAA1.0mg/LKIN的培育基上，27、24h光照后黑暗下培育。2、葉培育取無(wú)菌幼嫩葉片，切成55mm的小塊。MS0.2mg/LIAA2mg/L BA 27、光。25天后，愈傷組織分化芽。一個(gè)月后每切塊長(zhǎng)出25個(gè)芽。芽轉(zhuǎn)到無(wú)激素的MS培育基上，510d后構(gòu)成根。 3、胚培育外植體的制備授粉后3040d果實(shí)95%乙醇消毒5%NaCl中5min無(wú)菌蒸餾水充分淋洗除去種子上的膠狀復(fù)被。培育基MS附加硫胺素3.0um。pH6.0。附加2.4D9.05um,IiP4.92um和椰乳100ml/L的MS用

9、做愈傷組織啟動(dòng)和保管培育基。培育條件愈傷組織啟動(dòng)和保管暗培，27。再生生根2030、16h/d，熒光下進(jìn)展二、甘藍(lán)1、取材和處置 剝?nèi)ト~球的葉片，留下中心柱和腋芽，70%酒精1-2分鐘0.2%升汞10-15分鐘剝離腋芽接種在繁芽培育基上MS+IAA0.2-0.5mg/L+6BA1.0-3.0mg/L2、培育 光照1000-3000lx, 12-13h/d, 202，濕度50%-60%。 3、擴(kuò)展繁衍 反復(fù)進(jìn)展擴(kuò)繁，直到到達(dá)要求繁衍數(shù)量為止。第四節(jié) 欣賞植物的組織培育蘭花 蘭花系蘭科植物，在自然條件下主要靠分株繁衍，繁衍率一年只需幾倍，所以無(wú)法大量繁衍消費(fèi)，而且由于長(zhǎng)期進(jìn)展無(wú)性繁衍，帶病毒株增多

10、，逐漸使種性降低，影響生長(zhǎng)。 1、取材和處置 切取lOcm長(zhǎng)生長(zhǎng)強(qiáng)壯的莖尖，去苞葉洗凈75酒精5的漂白粉10min無(wú)菌水沖洗接種。 在蘭花葉片組織培育中，應(yīng)選擇帶有嫩葉的花梗，以后的處置方法同莖尖。2、原球莖的誘導(dǎo)培育 莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)或葉片接種在原球莖誘導(dǎo)培育基上。因蘭花種類(lèi)而異，可以用固體培育基或液體培育基(液體培育基中應(yīng)加比較多的蔗糖)。凡原球莖切口處不變褐或變褐物質(zhì)排出量較少的種類(lèi)，可用固體培育基，而易變褐的種類(lèi)，最好用液體培育基，誘導(dǎo)溫度應(yīng)于23，光照強(qiáng)度1 500-20001x。原球莖的增殖3、苗的分化培育 蘭科植物與其他草本花卉不同，它不易受生長(zhǎng)調(diào)理物質(zhì)的影響，普通是將原球莖轉(zhuǎn)入離子濃

11、度較低的培育基中，參與一些如椰子汁等天然提取物質(zhì)，效果會(huì)更好，原球莖很快再生成植株。 lcm高的幼苗轉(zhuǎn)移到壯苗培育基上培育36個(gè)月，使其長(zhǎng)34片葉、34條根、310cm高，可移栽在泥炭和蛭石中，保濕弱光施肥。 原球莖再分化蝴蝶蘭第五節(jié) 藥用植物離體培育蘆薈 蘆薈不能自花授粉結(jié)實(shí)，因此，用種子繁衍非常困難。目前的繁衍方法主要是分株和分蘗，但難以快速、大量地繁衍種苗，這也是當(dāng)前蘆薈種苗昂貴的重要緣由之一。 一資料和培育基 取l0-l5cm高的蘆薈幼苗誘導(dǎo)培育基為MS+(1-6mg/ L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA分化培育基為MS+(2-4mg/L)BA+ (0.1-0.5mg/L)NA

12、A生根培育基為MS+(0.1-0.5mg/L)IBA+(2-5mg/L)PP333二繁衍方法1、愈傷組織培育 莖尖部分75%乙醇30-60s升汞5-l0min無(wú)菌水沖洗數(shù)次解剖刀取出組織切塊接種 培育條件:光照 10-12h，1000一2000Lx， (25士)2。15-25d后，可膨大成愈傷組織，1周后，就可將愈傷組織轉(zhuǎn)管進(jìn)展繼代培育或分化培育。 2、繼代、分化培育 同誘導(dǎo) 3、生根培育 培育條件同分化，半個(gè)月后即可生根。 4、煉苗 清水噴濕，在15-25、濕度60%- 80%的條件下煉苗24h，也可視情況縮短為l2h。 5、移栽 將幼苗移栽入由蛭石組成的馴化苗圃中馴化，定期噴施馴化培育液和

13、清水，15-20d后，即可移栽。第六節(jié) 樹(shù)木的離體培育銀杏 是園林綠化的珍貴樹(shù)種，亦有較高的藥用價(jià)值，以葉及種皮入藥，它的葉的制劑能顯著擴(kuò)張腦血管，可治療腦血栓、冠心病、心肌堵塞及大動(dòng)脈炎等。種仁、有小毒、性平、有斂肺、定喘等功能。因此可說(shuō)全身都是寶。但常規(guī)繁衍較難，因此組織培育有很大運(yùn)用價(jià)值。 胚培育一取材：選擇生長(zhǎng)豐滿的銀杏種子。二操作：1、升汞進(jìn)展外表消毒，無(wú)菌條件下剝除外皮和胚乳。接種在MS 培育基上。培育條件：光照1500LX ，溫度25度。2、愈傷組織的誘導(dǎo)：1/2MS+IBA濃度梯度1、3、5、7、10PPM誘導(dǎo)愈傷組織。將培育3天后的銀杏胚接種在此培育基上，誘導(dǎo)出大量的愈傷組織。3、愈傷組織繼代培育： MS+1.0m