藥物分析教學課件：第十八章 藥物制劑分析概論

1、1第十八章 藥物制劑分析概論2 1、掌握制劑分析的特點2、掌握制劑分析結(jié)果的計算3、掌握附加成份對活性成分含量測定的干擾及排除4、了解復方制劑分析的特點，掌握其基本分析示例本章要求3 思考題1.那一類制劑需要檢查崩解度或溶出度?何種情況下檢查溶出度?2.那類制劑需檢查含量均勻度?4第一節(jié) 藥物制劑類型及分析的特點 5制劑分析定義 利用物理、化學或生物測定方法對不同劑型的藥物進行檢驗分析，以確定其是否符合質(zhì)量標準。6中國藥典（2010年版）二部（22種）片劑 注射劑 膠囊劑 眼用制劑膜劑 軟膏劑 搽劑 凝膠劑(迪痘）酊劑 氣霧劑 乳劑 貼劑栓劑 洗劑 糖漿劑 散劑口服溶液劑（口服劑） 丸劑 顆粒

2、劑耳用制劑 鼻用制劑 植入劑2010年版中國藥典分為三部出版，一部為中藥，二部為化學藥，三部為生物制品。本版藥典共收載品種4567種，新增1386種。 各國藥典均收載了多種類型的藥物制劑。其中，片劑、膠囊劑、注射劑和半固體制劑等被ChP2010、EP7、USP32-NF27和JP15共同收載。7植入劑優(yōu)點：1長效作用。其釋藥期限可長達數(shù)年之久，減少了連續(xù)用藥的麻煩。這種給藥常用于避孕、治療癌癥或慢性關(guān)節(jié)炎等。2恒釋作用。由于聚合物骨架的阻滯作用，系統(tǒng)中藥物釋放速率常呈零級釋藥，在整個用藥期間可提供均勻的血藥水平。3釋放的藥物經(jīng)吸收直接進入血液循環(huán)起全身作用，避開首關(guān)效應。4生物活性增強。如醋酸

3、甲地孕酮為強效抗排卵孕激素，它無任何雌激素或雄激素活性，皮下植入給藥時比皮下注射高11倍以上。5皮下神經(jīng)分布較少，對外來異物反應小，植入后的刺激和疼痛較低。6易于達到用藥者滿意，并改善使用效果。不足：1植入時需在局部做一個小切口，或用特殊的注射器將植入劑推入，若材料降解性不好易引起炎癥反應，還需手術(shù)取出，故患者順應性受影響。2因植入劑產(chǎn)生位移而無法取出。3可能產(chǎn)生多聚物毒性反應。 是一類經(jīng)手術(shù)植入或經(jīng)針頭導入皮下或其他靶向部位的給藥系統(tǒng)。具有長效、恒釋、靶向、生物利用度高、可隨時中止給藥等優(yōu)點。 8 符合質(zhì)量標準的原料藥賦形劑、稀釋劑附加劑（穩(wěn)定劑、防腐劑、著色劑）不同制劑藥物制劑不同類型的藥

4、物制劑，其質(zhì)量控制項目、質(zhì)量指標、分析方法及樣品預處理方法也常常不同9大米不是“離不開”添加劑 重新測定評估很關(guān)鍵在對于添加劑這回事上，有關(guān)部門與專家的邏輯和民眾的基本訴求是相悖的：前者的依據(jù)是“能添加的就一定要添加，除非吃死人”，而后者的要求是“能不添加就不添加，除非不吃不成活”。 食品安全法規(guī)定，“食品添加劑應當在技術(shù)上確有必要且經(jīng)過風險評估證明安全可靠，方可列入允許使用的范圍”， 10令人震驚的賦料事件(一) 齊二藥違反有關(guān)規(guī)定，將“二甘醇”輔料用于“亮菌甲素注射液”生產(chǎn)，導致多人腎功能急性衰竭. 齊二藥購入的藥用輔料“丙二醇”實際為“二甘醇”。 齊二藥生產(chǎn)和質(zhì)量管理混亂，檢驗環(huán)節(jié)失控，

5、檢驗人員違反有關(guān)規(guī)定，將“二甘醇”判為“丙二醇”投料生產(chǎn)；“二甘醇”在病人體內(nèi)氧化成草酸，導致腎功能急性衰竭，目前共計11人受到影響，除1人病情較輕已出院、4人因救治無效已死亡外，其余6人正在住院治療。 11令人震驚的賦料事件(二)1937-1938年,美國出現(xiàn)以乙二醇代替丙二醇作溶劑制備磺胺醑劑的制劑,在未經(jīng)動物試驗的前提下即將之用于臨床.因乙二醇中二乙烯乙二醇而使用藥者腎衰竭,最終導致107死亡,358人中毒.12令人震驚的賦料事件(三)澳大利亞曾發(fā)生抗癲癇藥苯妥英鈉膠囊的中毒事件,其原因是生產(chǎn)廠家將苯妥英鈉膠囊中的填充劑硫酸鈣改為乳糖,但未進行充分的溶出度研究和藥動學研究,臨床應用時導致

6、患者血中苯妥英鈉濃度過高而中毒.研究結(jié)果表明,硫酸鈣具有表面吸附作用,可使苯妥英鈉釋放緩慢,血藥濃度增加緩慢;而乳糖無表面吸附作用,所以導致苯妥英鈉的吸收速度加快.13消除制劑中敷料干擾的方法對樣品進行預處理：如過濾、萃取、色譜分離等；選擇專屬性更強的方法：如色譜法等。14制劑分析前首先應考慮的問題劑型；如脂質(zhì)體，須先釋放藥物附加劑的種類；藥物的理化性質(zhì)；含量的多少。15制劑分析的特點（與原料區(qū)別）檢驗項目和要求不同 如鑒別： 可參考原料藥，如敷料不干擾，可采用與原料相同的方法，否則，不能。如抗生素鑒別16藥物制劑鑒別的特點 藥物制劑的鑒別方法通常以相應原料藥的鑒別方法為基礎(chǔ)。由于藥物制劑均采

7、用經(jīng)鑒別且符合規(guī)定的原料藥為活性成分，藥物制劑的鑒別有時被弱化。藥物制劑的輔料常常干擾藥物的鑒別，故藥物制劑的鑒別須排除干擾后進行，或取消該鑒別試驗，也可改用其他方法(多改為分離分析方法)。當藥物制劑的輔料不干擾藥物的鑒別時，可直接采用原料藥的鑒別試驗鑒別藥物制劑。17安芐西林原料：Identification, Infrared Absorption 197K , except that where the specimen under test is the trihydrate, both it and the USP Ampicillin Trihydrate RS are undri

8、ed 制劑：Identification Powder 1 or more Tablets, and prepare a solution containing 5 mg of ampicillin per mL in a mixture of acetone and 0.1 N hydrochloric acid (4:1): the resulting solution meets the requirements for the Identification test under Ampicillin Capsules. 18Ampicillin for Injection Ampici

9、llin for Injection contains an amount of Ampicillin Sodium equivalent to not less than 90.0 percent and not more than 115.0 percent of the labeled amount of ampicillin (C16H19N3O4S). Other requirements It meets the requirements of the tests for Identification, Crystallinity, pH, and Water under Ampi

10、cillin Sodium. It meets also the requirements 19 示例18-3 ChP2010甲苯磺丁脲及其片劑的鑒別法甲苯磺丁脲的鑒別法：(1)取本品約0.3g，加硫酸溶液(13)12ml，加熱回流30分鐘，放冷，即析出白色沉淀，濾過，沉淀用少量水重結(jié)晶后，熔點約為138。(2)取上述濾液，加20%氫氧化鈉溶液使成堿性后，加熱，即發(fā)生正丁胺的特臭。(3)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集102圖)一致。甲苯磺丁脲片的鑒別法：(1)取本品細粉適量(約相當于甲苯磺丁脲0.5g)，加丙酮8ml，振搖使甲苯磺丁脲溶解，濾過，濾液置水浴上蒸干；取殘渣0.2g，加

11、硫酸溶液(13)12ml，加熱回流30分鐘，放冷，即析出白色沉淀，濾過，濾液加20%氫氧化鈉溶液使成堿性后，加熱，即發(fā)生正丁胺的特臭。(2)上述殘渣的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集102圖)一致。20制劑分析的特點（與原料區(qū)別）2、制劑分析比原料藥分析復雜 原料藥不含附加成分，一般根據(jù)藥物的理化性質(zhì)，直接測定；而制劑不僅要考慮主藥的理化性質(zhì)，還要考慮附加成分的干擾，有效成分之間的干擾。如：阿司匹林原料：中性乙醇直接滴定 阿司匹林普通片和腸溶片：兩步滴定法 阿司匹林栓：HPLC21 3、分析項目不同 原料藥不含附加成分，一般根據(jù)藥物的理化性質(zhì)，直接測定；而制劑不僅要考慮主藥的理化性質(zhì)，還要

12、考慮附加成分的干擾，有效成分之間的干擾。如：阿司匹林原料Loss on drying Readily carbonizable substancesResidue on ignition 281 : not more than 0.05%. Chloride Sulfate Heavy metalsLimit of free salicylic acid (0.1%). Dissolution MSITStore:C:%5CDOCUME1%5CADMINI1%5CLOCALS1%5CTemp%5CRar$DI01.697%5CUSP32_NF27.chm:/pub/data/v32270/us

13、p32nf27s0_c905.html not more than 0.3% is found. 22鑒別原料：A: Heat it with water for several minutes, cool, and add 1 or 2 drops of ferric chloride TS: a violet-red color is produced. B: Infrared Absorption 197K .制劑：Identification A: Crush 1 Tablet, boil it with 50 mL of water for 5 minutes, cool, and

14、add 1 or 2 drops of ferric chloride TS: a violet-red color is produced. B: Infrared Absorption 197K Prepare the test specimen as follows. Shake a quantity of finely powdered Tablets, equivalent to about 500 mg of aspirin, with 10 mL of alcohol for several minutes. Centrifuge the mixture. Pour off th

15、e clear supernatant, and evaporate it to dryness. Dry the residue in vacuum at 60 for 1 hour. 234、含量表示方法及合格范圍不同 原料% 標示量的%阿司匹林99.0 95.0105.0VitB1 99.0(干燥品) 90.0110.0VitC 99.0 93.0107.0肌苷 98.0102.0(干) 93.0107.0紅霉素 920單位/g 90.0110.0片劑24一般原料藥項下的檢查項目不需重復檢查，只檢查在制備和儲運過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)及制劑相應的檢查項目。 如：鹽酸普魯卡因注射液“對氨基苯甲酸”

16、阿司匹林片“水楊酸” 5、雜質(zhì)檢查的項目不同25阿司匹林 “水楊酸”0.1%阿司匹林片 “水楊酸”0.3%6、雜質(zhì)限量的要求不同262附加成份 賦形劑、穩(wěn)定劑、稀釋劑、抗氧 劑、防腐劑、著色劑、調(diào)味劑復方制劑 復方磺胺甲惡唑 碘胺甲惡唑 甲氧芐氨嘧啶制劑含量分析特點1、干擾組分多 (要求方法具有一定的專屬性)272. 主要成分含量低 (要求方法具有一定的靈敏度)硫酸阿托品（含量測定） 原料：非水滴定法 片劑 注射劑酸性染料比色法28 3、制劑含量測定：強調(diào)選擇性、要求靈敏度高 （EP）原料含量測定：強調(diào)準確度、精密度294. 含量測定結(jié)果的計算方法不同原料藥百分含量m測得量m取樣量10030片

17、劑：標示量的百分含量每片含量100標示量m測得量m取樣量100平均片重標示量31包衣片 光亮度 色澤均勻度 包衣完整性 第二節(jié) 片劑分析色澤光潔度片形完整性硬度素片一、性狀： 要求外觀完整光潔、色澤均勻，并具有適度的硬度。ChP2010附錄“制劑通則”片劑項下規(guī)定，片劑外觀應完整光潔，色澤均勻。此外，片劑還應符合正文各品種項下的性狀描述32二、鑒別試驗 鑒別片劑時，各國藥典一般采用過濾、離心、提取等操作排除輔料干擾，再依據(jù)藥物的性質(zhì)，參考相應原料藥的鑒別方法，從化學法、光譜法、色譜法及其他方法中選用24種不同原理的分析方法，組成一組鑒別試驗。33 （1）定義：按規(guī)定稱量方法測得片劑每片的重量與

18、平均片重之間的差異程度。（2）檢查方法：取藥片20片，精密稱定總重量，計算每片片重與平均片重差異的百分率。注意：糖衣片和腸溶衣應在包衣前檢查片芯的重量差異，符合規(guī)定后方可包衣，包衣后不再檢查重量差異。參考文獻：徐新軍。中國藥典“重（裝）量差異檢查 的淺見”。中國藥事，1999年5期三、劑型檢查重量差異34（3）規(guī)定 超出限度片2片 超出限度1倍片1片（2）方法中藥35 ChP2010重量差異檢查法薄膜衣片應在包薄膜衣后檢查重量差異并符合規(guī)定。糖衣片的片心應檢查重量差異并符合規(guī)定，包糖衣后不再檢查重量差異。平均片重或標示片重重量差異限度0.30g以下7.5%0.30g及0.30g以上5%36三、

19、劑型檢查含量均勻度含量均勻度：指小劑量的片劑、膠囊劑、膜劑或注射用無菌粉末等每片（個）含量偏離標示量的程度。 除另有規(guī)定外,每片(個)標示量不大于10mg,或主藥含量小于每片(個)重量的5%者,有效濃度與毒副反應濃度較接近的、工藝中難混勻的。片劑生產(chǎn)過程中，由于顆粒的流動性及均勻度較差、生產(chǎn)設(shè)備的性能較低等原因，使片劑的藥物含量產(chǎn)生差異。當主藥與片劑輔料混合均勻時(按重量計)，重量差異檢查是片劑劑量單位均勻度檢查的簡便方法。372.方法與計算 用規(guī)定的含量測定方法分別測定10片（個）藥物，計算每片（個）的含量Xi，然后計算 A + 1.8 S =？計量型方案，二次抽檢法，以標示量為參照值 S

20、= 標準差383.判斷標準（1） A + 1.80 S15.0另取20片復試, 按30片計A + 1.45 S15.0（若改變限度，則改15.0）符合規(guī)定不符合規(guī)定符合規(guī)定（2） A + S15.0（3） A + 1.80 S15.0, 且 A+ S15.039 含量均勻度的限度應符合各品種項下的規(guī)定。如該品種項下規(guī)定含量均勻度的限度為20%或其他數(shù)值時，應將上述各判斷式中的15.0改為20.0或其他數(shù)值，但各判斷式中的系數(shù)不變。40重量差異試驗含量均勻度適用范圍普通片劑(混合均勻)小劑量片劑或較難混合均勻者檢查指標片重差異每片含量偏離標示量的程度特點簡便快速準確41(二)崩解時限與溶出度崩解

21、時限(disintegration)系指口服固體制劑應在規(guī)定時間內(nèi)，于規(guī)定條件下全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的膠囊殼外，全部通過篩網(wǎng)。如有少量不能通過篩網(wǎng)，應已軟化或輕質(zhì)上漂且無硬心。溶出度(dissolution)系指在規(guī)定條件下藥物從片劑等制劑中溶出的速率和程度。凡規(guī)定檢查溶出度的制劑，不再檢查崩解時限。42溶出度測定方法 1、轉(zhuǎn)藍法：介質(zhì)溫度：370.5度，轉(zhuǎn)速：50-200rpm，一般100rpm，介質(zhì)體積：900或1000mL，取樣時間：45min時， 常用于膠囊2、漿法：介質(zhì)溫度：370.5度，轉(zhuǎn)速：一般75rpm，介質(zhì)體積：900或1000mL，取樣時間：45mi

22、n時， 常用于片劑3、小杯法：100250mL，漿法 432.方法 取6片（個）分別置溶出度儀的6個吊籃（或燒杯）中，370.5恒溫下，在規(guī)定的溶液里按規(guī)定的轉(zhuǎn)速操作，在規(guī)定時間內(nèi)測定藥物的溶出量3、計算每片（個）溶出量相當于標示量的% 44（三）釋放度的測定第一法用于緩釋和控釋制劑的測定。 三個取樣時間點： 第一點：0.5h2h內(nèi) ,用于考察藥物是否突釋 _ 第二點: 中間取樣點, 用于確定釋藥特性 第三點: 最后取樣點, 考察釋藥是否完全第二法用于腸溶制劑兩步: 1. 酸中釋放量(0.1moL/L鹽酸) 小于10% 2. 緩沖液中釋放量(pH6.8) Q第三法用于透皮貼劑45崩解時限方法：

23、取藥片6片，分別置吊藍的玻璃管中，啟動崩解儀檢查，各片均應在15min內(nèi)全部崩解，如有1片不能崩解，另取6片復試，應符合規(guī)定。糖衣片、薄膜衣片、浸膏片按上法檢查。薄膜衣片可改在鹽酸溶液（9 1000）中檢查，30分鐘內(nèi)崩解。腸溶衣片：先在鹽酸溶液中檢查2小時，再在pH6.8中檢查,1h內(nèi)應全部崩解.46ChP2010溶出度測定法 第一法(籃法)：測定前，應對儀器裝置進行調(diào)試，使轉(zhuǎn)籃底部距溶出杯內(nèi)底部25mm2mm。分別量取經(jīng)脫氣處理的溶出介質(zhì)，置各溶出杯內(nèi)，實際量取的體積與規(guī)定體積的差異應不超過1%，待溶出介質(zhì)溫度恒定在370.5后，取供試品6片，分別投入6個干燥的轉(zhuǎn)籃內(nèi)，將轉(zhuǎn)籃降入溶出杯中，

24、注意供試品表面應無氣泡，按各品種項下規(guī)定的轉(zhuǎn)速啟動儀器，計時；至規(guī)定的取樣時間(實際取樣時間與規(guī)定時間的差異不超過2%)，吸取溶出液適量(取樣位置應在轉(zhuǎn)籃頂端至液面的中點，距溶出杯內(nèi)壁不小于10mm處；須多次取樣時，所量取溶出液的體積之和應在溶出液的1%之內(nèi)，如超過總體積的1%時，應及時補充相同體積的溫度為370.5的溶出介質(zhì)，或在計算時加以校正)，立即用適當?shù)奈⒖诪V膜濾過，自取樣至濾過應在30秒鐘內(nèi)完成。取澄清濾液，照該品種項下規(guī)定的方法測定，計算每片的溶出量。47判定標準：符合下述條件之一者，可判為符合規(guī)定：6片中，每片的溶出量按標示量計算，均不低于規(guī)定限度(Q)；6片中，如有12片低于Q

25、，但不低于Q-10%，且其平均溶出量不低于Q；6片中，有12片低于Q，其中僅有1片低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出量不低于Q時，應另取6片復試；初、復試的12片中有13片低于Q，其中僅有1片低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出量不低于Q。48 第二法(槳法)：除將轉(zhuǎn)籃換成攪拌槳外(當各品種項下規(guī)定需要使用沉降籃或其他沉降裝置時，可將片劑等先裝入規(guī)定的沉降籃內(nèi))，其他裝置和要求與第一法相同。第三法(小杯法)：使用250ml溶出杯及相應攪拌槳，適用于測定藥物含量較低的片劑溶出度。49ChP2010釋放度測定法 第一法(用于緩釋制劑或控釋制劑)：照溶出度測定法項下進行，但

26、至少采用三個時間取樣，在規(guī)定取樣時間點，吸取溶液適量，及時補充相同體積的溫度為370.5的溶出介質(zhì)，濾過，自取樣至濾過應在30秒內(nèi)完成。照各品種項下規(guī)定的方法測定，計算每片的釋放量。除另有規(guī)定外，符合下述條件之一者，可判為符合規(guī)定：6片中，每片在每個時間點測得的釋放量按標示量計算，均未超出規(guī)定范圍；6片中，在每個時間點測得的釋放量，如有12片超出規(guī)定范圍，但未超出規(guī)定范圍的10%，且在每個時間點測得的平均釋放量未超出規(guī)定范圍； 50 6片中，在每個時間點測得的釋放量，如有12片超出規(guī)定范圍，其中僅有1片超出規(guī)定范圍的10%，但未超出規(guī)定范圍的20%，且在每個時間點測得的平均釋放量未超出規(guī)定范圍

27、，應另取6片復試；初、復試的12片中，在每個時間點測得的釋放量，如有13片超出規(guī)定范圍，其中僅有1片超出規(guī)定范圍的10%，但未超出規(guī)定范圍的20%，且其平均釋放量未超出規(guī)定范圍。51第二法(用于腸溶制劑)方法1酸中釋放量：除另有規(guī)定外，量取0.1mol/L鹽酸溶液750ml，注入每個溶出杯，依法進行釋放操作，2小時后在規(guī)定取樣點吸取溶液適量，依法測定，計算每片的酸中釋放量。緩沖液中釋放量：上述酸液中加入溫度為370.5的0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml(必要時用2mol/L鹽酸溶液或2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8)，繼續(xù)運轉(zhuǎn)45分鐘，或按各品種項下規(guī)定的時間，在規(guī)定取樣點吸取溶

28、液適量，依法測定，計算每片的緩沖液中釋放量。52 方法2酸中釋放量：除另有規(guī)定外，量取0.1mol/L鹽酸溶液900ml，注入每個溶出杯中，照方法1酸中釋放量項下進行測定。緩沖液中釋放量：棄去上述各溶出杯中酸液，立即加入溫度為370.5的磷酸鹽緩沖液(pH6.8) (取0.1mol/L鹽酸溶液和0.2mol/L磷酸鈉溶液，按3 : 1混合均勻，必要時用2mol/L鹽酸溶液或2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8)900ml，或?qū)⒚科D(zhuǎn)移入另一盛有溫度為370.5的磷酸鹽緩沖液(pH6.8)900ml的溶出杯中，照方法1緩沖液中釋放量項下進行測定。53判定：除另有規(guī)定外，符合下述條件之一者，

29、可判為符合規(guī)定：酸中釋放量：6片中，每片的釋放量均不大于標示量的10%；6片中，有12片大于10%，但其平均釋放量不大于10%。緩沖液中釋放量：6片中，每片的釋放量按標示量計算均不低于規(guī)定限度(Q)；除另有規(guī)定外，Q應為標示量的70%；6片中，僅有12片低于Q，但不低于Q-10%，且其平均釋放量不低于Q；6片中，如有12片低于Q，其中僅有1片低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均釋放量不低于Q時，應另取6片復試；初、復試的12片中有13片低于Q，其中僅有1片低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均釋放量不低于Q。54四、含量測定 片劑在制劑過程中常加入稀釋劑、潤濕劑與黏合劑、崩解劑、

30、潤滑劑等輔料。這些輔料常干擾片劑的含量測定，需通過預處理排除干擾。常見附加劑: 稀釋劑淀粉、糊精、蔗糖、乳糖 潤滑劑硬脂酸鎂、滑石粉 崩解劑淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉 55(一)糖類的干擾及其排除淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是片劑常用的稀釋劑。其中，淀粉、糊精、蔗糖水解產(chǎn)生的葡萄糖具有還原性，乳糖是還原糖，均可能干擾氧化還原測定法。使用氧化還原滴定法測定含有糖類稀釋劑的片劑含量時，不應使用高錳酸鉀法、溴酸鉀法等以強氧化性物質(zhì)為滴定劑的容量分析方法；同時，應采用陰性對照品(空白輔料)進行陰性對照試驗，若陰性對照品消耗滴定劑，須改用其他方法測定。56示例18-10 ChP2010硫酸亞鐵及其片劑的含量測

31、定法硫酸亞鐵的含量測定法：取本品約0.5g，精密稱定，加稀硫酸與新沸過的冷水各15ml溶解后，立即用高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)滴定至溶液顯持續(xù)的粉紅色。每1ml高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)相當于27.80mg的FeSO47H2O。硫酸亞鐵片的含量測定法：取本品10片，置200ml量瓶中，加稀硫酸60ml與新沸過的冷水適量，振搖使硫酸亞鐵溶解，用新沸過的冷水稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙迅速濾過，精密量取續(xù)濾液30ml，加鄰二氮菲指示液數(shù)滴，立即用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當于27.80mg的FeSO47H2O。57(二)硬脂

32、酸鎂的干擾及其排除 硬脂酸鎂是片劑常用的潤滑劑。其中，鎂離子(Mg2+)可能干擾配位滴定法，硬脂酸根離子(C17H35COO-)可能干擾非水溶液滴定法。58 在配位滴定法中，當pH值約為10時，Mg2+與EDTA可形成穩(wěn)定的配位化合物(lgKMY為8.64)；若被測金屬離子與EDTA形成的配位化合物比Mg2+與EDTA形成的配位化合物穩(wěn)定得多，則Mg2+對測定的干擾可忽略不計。否則，Mg2+消耗的EDTA滴定液使測定結(jié)果偏高，可加入掩蔽劑排除干擾。例如，在pH6.07.5條件下，加入掩蔽劑酒石酸，可與Mg2+形成更穩(wěn)定的配位化合物，排除硬脂酸鎂對配位滴定法的干擾。在非水溶液滴定法中，硬脂酸根離

33、子(C17H35COO-)能被高氯酸滴定。若主藥的含量高、硬脂酸鎂的含量低，則硬脂酸根離子(C17H35COO-)對測定的干擾可忽略不計。否則，C17H35COO-消耗的高氯酸滴定液使測定結(jié)果偏高。對于脂溶性藥物，可用適當?shù)挠袡C溶劑提取藥物，排除硬脂酸鎂的干擾后，再用非水溶液滴定法測定?；蛘吒挠闷渌椒y定。59第三節(jié) 注射劑分析 一、性狀二、鑒別試驗三、劑型檢查及安全性檢查四、含量測定60一、性狀 ChP2010附錄“制劑通則”注射液項下規(guī)定，溶液型注射液應澄明；混懸型注射液若有可見沉淀，振搖時應容易分散均勻；乳狀液型注射液應穩(wěn)定，不得有相分離現(xiàn)象。 此外，注射液還應符合正文各品種項下的性狀

34、描述。61二、鑒別試驗鑒別溶液型注射液時，輔料一般不干擾藥物的鑒別，可依據(jù)藥物的性質(zhì)，參考相應原料藥的鑒別方法，從化學法、光譜法、色譜法及其他方法中選用24種不同原理的分析方法，組成一組鑒別試驗。若輔料干擾藥物的鑒別，可排除干擾后，再進行鑒別。62三、劑型檢查及安全性檢查 ChP2010附錄“制劑通則”注射劑項下規(guī)定，除另有規(guī)定外，注射液應進行以下常規(guī)檢查：【裝量】【滲透壓摩爾濃度】【可見異物】【不溶性微?！俊緹o菌】【細菌內(nèi)毒素】【熱原】63(一)注射劑的裝量1.注射液的裝量 =2mL, 取 5支; 2mL10mL，取3支； 10mL以上，取2支。判定：每支注射液的裝量不少于其標示量2、注射用

35、無菌粉末的裝量差異判定：每瓶裝量與平均裝量比較，應符合規(guī)定64ChP2010裝量檢查法 標示裝量不大于2ml者取供試品5支，2ml以上至50ml者(標示裝量為50ml以上的注射液及注射用濃溶液照最低裝量檢查法檢查)取供試品3支；開啟時注意避免損失，將內(nèi)容物分別用相應體積的干燥注射器及注射針頭抽盡，然后注入經(jīng)標化的量入式量筒內(nèi)(量筒的大小應使待測體積至少占其額定體積的40%)，在室溫下檢視，每支的裝量均不得少于其標示量。測定油溶液或混懸液的裝量時，應先加溫搖勻，再用干燥注射器及注射針頭抽盡后，同前法操作，放冷，檢視。65(二)滲透壓摩爾濃度滲透壓在溶質(zhì)擴散或生物膜的液體轉(zhuǎn)運中起著極其重要的作用。

36、凡處方中添加了滲透壓調(diào)節(jié)劑的制劑，均應控制其滲透壓摩爾濃度(osmolality)。通常滲透壓摩爾濃度以每千克溶劑中溶質(zhì)的毫滲透壓摩爾(mOsmol/kg)為單位。ChP2010規(guī)定，除另有規(guī)定外，靜脈輸液及椎管注射用注射液按各品種項下的規(guī)定，照滲透壓摩爾濃度測定法檢查，應符合規(guī)定。滲透壓摩爾濃度通常采用冰點下降法測定。66(三)可見異物ChP2010規(guī)定，可見異物(visible particles或foreign insoluble matter)系指存在于注射劑、眼用液體制劑中，在規(guī)定條件下目視可以觀測到的不溶性物質(zhì)，其粒徑或長度通常大于50m?？梢姰愇餀z查法包括燈檢法和光散射法。一般常

37、用燈檢法。燈檢法不適用的品種，如用深色透明容器包裝或液體色澤較深(一般深于各標準比色液7號)的品種，可用光散射法。67ChP2010第一法(燈檢法) 溶液型、乳狀液及混懸型制劑：除另有規(guī)定外，取供試品20支(瓶)，除去容器標簽，擦凈容器外壁，必要時將藥液轉(zhuǎn)移至潔凈透明的適宜容器內(nèi)；置供試品于遮光板邊緣處，在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測距離，通常為25cm)，分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)容器使藥液中可能存在的可見異物懸浮(但應避免產(chǎn)生氣泡)，輕輕翻搖后立即目視檢查，重復3次，總時限為20秒。供試品裝量每支(瓶)在10ml及10ml以下的注射劑，每次檢查時可手持2支(

38、瓶)。68 結(jié)果判定： 各類注射劑、眼用液體制劑，在靜置一定時間后輕輕旋轉(zhuǎn)時均不得檢出煙霧狀微粒柱，且不得檢出金屬屑、玻璃屑、長度或最大粒徑超過2mm的纖維和塊狀物等明顯可見異物。微細可見異物(如點狀物、2mm以下的短纖維和塊狀物等)如有檢出，除另有規(guī)定外，應分別符合相應的規(guī)定。69ChP2010第二法(光散射法)溶液型注射液： 除另有規(guī)定外，取供試品20支(瓶)，除去不透明標簽，擦凈容器外壁，置儀器上瓶裝置上，根據(jù)儀器的使用說明書選擇適宜的測定參數(shù)，啟動儀器，檢測供試品3次，記錄結(jié)果。凡儀器判定有1次不合格者，須用燈檢法作進一步確認(燈檢法不適用的品種除外)。結(jié)果判定：同燈檢法。70(四)不

39、溶性微?？梢姰愇锏臋z查一般只能檢出粒徑或長度大于50m的不溶性物質(zhì)，更小的微粒則難以檢出。靜脈用注射劑直接進入血液循環(huán)，且用量大，應嚴格控制不溶性微粒(sub-visible particles或insoluble particulate matter)。71 檢查100mL以上靜脈注射溶液中10um以上，50um以下粒子。在可見異物檢查合格后,用以檢查溶液型靜脈用注射劑中不溶性微粒的大小和數(shù)量. 方法： 1、顯微計數(shù)法 2、光阻法72ChP2010檢查法 本法系在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈用注射劑(溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液)及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大

40、小及數(shù)量。 不溶性微粒檢查法包括光阻法和顯微計數(shù)法。當光阻法測定結(jié)果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測定時，應采用顯微計數(shù)法測定，并以顯微計數(shù)法的測定結(jié)果作為判定依據(jù)。光阻法不適用于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進入傳感器時容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。對于黏度過高、采用兩種方法都無法直接測定的注射液，可用適宜的溶劑經(jīng)適當稀釋后測定。73第一法(光阻法)(1)標示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液：除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試品溶液沖洗開啟口及取樣杯，再將供試品溶液倒入取樣杯中，靜置2分鐘或適

41、當時間脫氣，置于取樣器上(或?qū)⒐┰嚻啡萜髦苯又糜谌悠魃?。開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動，使溶液混勻(避免氣泡產(chǎn)生)，依法測定至少3次，每次取樣應不少于5ml，記錄數(shù)據(jù)；另取至少2個供試品，同法測定。每個供試品第一次數(shù)據(jù)不計，取后續(xù)測定結(jié)果的平均值計算。74(五)無菌無菌檢查法(sterility)系用于檢查藥典要求無菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。若供試品符合無菌檢查法的規(guī)定，僅表明供試品在該檢驗條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。ChP2010無菌檢查法包括薄膜過濾法和直接接種法。只要供試品性狀允許，應采用薄膜過濾法。兩種方法均由陽性對照、陰性對照和供試品檢查三部分組成。75 陽

42、性對照：應根據(jù)供試品特性選擇陽性對照菌(例如，無抑菌作用及抗革蘭陽性菌為主的供試品，以金黃色葡萄球菌為對照菌)，陽性對照管培養(yǎng)4872小時應生長良好。陰性對照：應取相應溶劑和稀釋液、沖洗液同法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。供試品檢查：供試品處理及接種培養(yǎng)基(薄膜過濾法和直接接種法)；培養(yǎng)及觀察。76結(jié)果判定：檢查供試品前須驗證檢查方法并符合規(guī)定，陽性對照管應生長良好，陰性對照管不得有菌生長。否則，試驗無效。若供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定；若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長，判供試品不符合規(guī)定，除非能充分證明試驗結(jié)果無效，即生長的微生物非供試品所

43、含。試驗若經(jīng)確認無效，應重試。重試時，重新取同量供試品，依法檢查，若無菌生長，判供試品符合規(guī)定；若有菌生長，判供試品不符合規(guī)定。77 當符合下列至少一個條件時，方可判試驗結(jié)果無效：無菌檢查試驗所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查的要求；回顧無菌試驗過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素；供試品管中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌試驗中所用的物品和(或)無菌操作技術(shù)不當引起的。78(六)細菌內(nèi)毒素與熱原細菌內(nèi)毒素(bacterial endotoxins)是革蘭陰性菌細胞壁的脂多糖，具有致熱作用。細菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素單位(EU)表示，1EU與1個內(nèi)毒素國際單位(IU)相當。熱原(py

44、rogens)是藥品中存在的能引起體溫升高的物質(zhì)，主要來源于細菌內(nèi)毒素。ChP2010規(guī)定，除另有規(guī)定外，靜脈用注射劑按各品種項下的規(guī)定，照細菌內(nèi)毒素檢查法或熱原檢查法檢查，應符合規(guī)定。79細菌內(nèi)毒素檢查法 ChP2010檢查法：本法系利用鱟試劑檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細菌內(nèi)毒素是否符合規(guī)定。本法包括凝膠法和光度測定法。雖然兩法均可用于供試品檢查，但仲裁時，除另有規(guī)定外，使用凝膠法。8081熱原檢查法(家兔法) 系將一定劑量的供試品靜脈注入(符合要求且已按規(guī)定準備好的)家兔體內(nèi)，在規(guī)定時間觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原是否符合規(guī)定。82ChP201

45、0檢查法 取適用的家兔3只，測定其正常體溫后15分鐘內(nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫熱至約38的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測量其體溫1次，共測6次，以6次體溫中最高一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度()。如3只家兔中有1只體溫升高0.6或高于0.6，或3只家兔體溫升高的總和達1.3或高于1.3，應另取5只家兔復試，檢查方法同上。83結(jié)果判定：在初試的3只家兔中，體溫升高均低于0.6，且3只家兔體溫升高的總和低于1.3；或在復試的5只家兔中，體溫升高0.6或高于0.6的家兔不超過1只，且初、復試共8只家兔的體溫升高的總和為3.5或低于3.5，均判定供試品的熱原檢查符合規(guī)定。在初試的

46、3只家兔中，體溫升高0.6或高于0.6的家兔超過1只；或在復試的5只家兔中，體溫升高0.6或高于0.6的家兔超過1只；或初、復試共8只家兔的體溫升高的總和超過3.5，均判定供試品的熱原檢查不符合規(guī)定。當家兔升溫為負值時，以0計。84四、含量測定 注射劑在制劑過程中常加入溶劑和附加劑。溶劑主要包括注射用水、注射用油、其他注射用非水溶劑。附加劑主要包括滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、增溶劑、乳化劑、助懸劑、抗氧劑、抑菌劑、麻醉劑等。 測定注射劑的含量時，這些溶劑和附加劑若不產(chǎn)生干擾，可采用原料藥的含量測定方法；否則，需通過預處理排除干擾后，再測定。85注射劑中常見附加劑的干擾和排除 pH值調(diào)節(jié)劑 酸，堿

47、滲透壓調(diào)節(jié)劑 氯化鈉增溶劑 鈣鹽，苯甲酸芐酯抗氧劑 亞硫酸鈉等止痛劑 苯甲醇（防腐劑）抑菌劑 三氯叔丁醇，苯酚各種附加成份86(一)溶劑水的干擾及其排除用非水溶液滴定法測定注射液的含量時，溶劑水干擾非水溶液滴定。對于堿性藥物或其鹽類，可通過堿化、有機溶劑提取游離藥物，排除水的干擾；揮干有機溶劑后，用非水溶液滴定法測定藥物的含量。87(二)溶劑油的干擾及其排除 溶劑油影響以水為溶劑的分析方法和其他分析方法，排除其干擾的方法通常有以下幾種。1. 有機溶劑稀釋法：對于藥物含量較高的注射劑，若測定其含量所需的供試品溶液濃度較低，可用有機溶劑稀釋供試品，降低溶劑油的干擾后，再測定。2. 萃取法：可采用適當