2[1].1.1《植物細胞工程的基本技術(shù)》

1、生物 選修3現(xiàn)代生物科技專題1專題2 細胞工程2 細胞工程是指應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過細胞水平或細胞器水平上的操作，按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術(shù)。什么叫細胞工程？按操作對象分植物細胞工程動物細胞工程3應用的原理和方法研究的水平研究的目的細胞生物學和分子生物學細胞水平或細胞器水平按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品概念：4前者是細胞水平或細胞器水平上生物技術(shù),后者是分子水平上的生物技術(shù)?？寺《嗬蜓蚣夹g(shù)是 水平上的技術(shù)，培育抗蟲棉是 水平上的技術(shù)。細胞工程與基因工程相比：細胞分子思考:52.1 植物細胞工程植物細胞工程技術(shù)常

2、用的技術(shù)手段：植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交植物細胞工程理論基礎(chǔ)：植物細胞的全能性62.1.1植物細胞工程的基本技術(shù)回憶：1、植物組織培養(yǎng)的大致過程包括哪幾個階段？離體的器官、組織或細胞脫分化愈傷組織再分化根、芽植物體2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是什么？植物細胞具有全能性7一、細胞的全能性：1、概念： 生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能，細胞的這種特性叫細胞的全能性。2、基礎(chǔ)（具有全能性的原因）：生物體的每個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所需的全部基因。83、全能性的程度：4、生物體內(nèi)細胞并沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織器官的原因 基因在特定的

3、時間和空間條件下選擇性表達的結(jié)果（1） 受精卵的全能性最高 受精卵生殖細胞體細胞（2）植物細胞動物細胞 （3）（4）分化程度低的細胞分化程度高的細胞95、植物細胞表現(xiàn)出全能性的條件： 處于離體狀態(tài)，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，植物細胞就可能表現(xiàn)全能性，發(fā)育成完整的植株。10 怎樣才能由一塊組織通過培養(yǎng)得到一株完整植株, 應該如何操作?11二、植物組織培養(yǎng)技術(shù)：植物組織培養(yǎng)1213(1)在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？ 防止雜菌污染，因為雜菌生長快，會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)。雜菌生長過程中會產(chǎn)生有害的物質(zhì)，導致培養(yǎng)物迅速死亡。討論14(2)在本實驗中

4、，切取胡蘿卜塊根時強調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導形成愈傷組織。請思考一下，胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實驗的方法進行驗證嗎？胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導愈傷組織比較困難。15(3)請根據(jù)上面的實驗過程，概括出植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡圖。植物材料（消毒）脫分化無菌接種、誘導愈傷組織再分化誘導試管苗移栽到大田,培養(yǎng)成正常植株模型構(gòu)建16依據(jù)學過的知識和實驗過程思考回答：2、決定植物脫分化、再分化的關(guān)鍵因素是什么？植物激素的種類和比例1、離體的器官、組織或細胞，如果不進行脫分化處理能否培養(yǎng)成完整的植物體？不能，因為

5、細胞已經(jīng)分化，失去了分裂能力。不進行脫分化處理就不能形成愈傷組織17 3、為什么誘導愈傷組織的過程中應避光培養(yǎng)？在有光時，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織。（但再分化時需要光，光能使細胞內(nèi)形成葉綠體、葉綠素，進行光合作用）18應該掌握的幾個概念： 1、愈傷組織：離體的植物器官、組織或細胞，在培養(yǎng)一段時間以后，通過細胞分裂，形成一種高度液泡化、無定形狀態(tài)薄壁細胞組成的排列疏松無規(guī)則的組織。19 2、植物細胞的脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱去分化。脫分化的實質(zhì)和結(jié)果分別是什么？實質(zhì)是恢復細胞的全能性過程。結(jié)果是形成愈傷組織。20 3、植物細胞的再分化：脫分

6、化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化根或芽等器官的過程。21小結(jié)：植物組織培養(yǎng)的過程外植體愈傷組織根、芽植物體脫分化再分化（離體的,已分化組織或細胞）（未分化）（分化）幼芽或幼根？條件？優(yōu)點？特點？繁殖速度快不受季節(jié)限制工廠化生產(chǎn)幼苗無毒保持優(yōu)良性狀適宜溫度、光照、 pH和無菌環(huán)境。無機物、有機物和植物激素（生長素，細胞分裂素等）無定形狀態(tài)薄壁細胞高度液泡化排列疏松、無規(guī)則無葉綠體,不進行光合作用分化程度低去分化較易22植物組織培養(yǎng)的概念： 植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整

7、的植株。23脫分化、再分化的比較：見步步高P.211表影響脫分化、再分化的因素：激素選修3P.42-4324三、植物體細胞雜交技術(shù)：因為不同種生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的。于是，這些科學家試圖用這兩種植物的體細胞進行雜交，來實現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。這幅番茄馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能實現(xiàn)嗎？為什么？251你認為兩個來自不同植物的體細胞完成融合，遇到的第一個障礙是什么？2有沒有一種溫和的去壁方法呢？3為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細胞膜的什么特性有關(guān)？4、把原生質(zhì)體放在一起能自然融合嗎？5如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一步該做何處理？6如何將雜

8、種細胞培育成雜種植株？請思考：261、過程：雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生出細胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細胞AB去 壁去 壁人工誘導方法？促進融合的方法？融合完成的標志植物細胞B27去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等） 原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等 化學法：聚乙二醇（PEG） 28利用電激發(fā)將野生馬鈴薯與栽培馬鈴薯進行細胞融合29去壁去壁纖維素酶果膠酶原生質(zhì)體植物細胞原生質(zhì)體融合離心、振動、電刺激、聚乙二醇再生細胞壁雜種細胞去分化愈傷組織雜種植株激素篩選等量激素再分化植物體細胞雜交過程示意圖302、概念：將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。3、優(yōu)勢：（與有性雜交方法比較） 打破了不同種生物間的生殖隔離限制，大大擴展了可用于雜交的親本組合范圍。31白菜甘藍白菜甘藍“白菜甘藍”同普通白菜相比，具有生長期短、耐熱性強和易于貯藏等優(yōu)點。32為什么“番茄馬鈴薯”超級雜種植株沒有如科學家所想像的那樣，地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯？主要原因是：生物基因的表達不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，馬鈴薯番茄雜交植株的細胞中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達，所以雜交植株不能地上長番茄、