第八章實(shí)驗(yàn)一寄生蟲(chóng)糞便檢查法

1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一寄生蟲(chóng)糞便檢查法寄生蟲(chóng)糞便檢查法一、目的要求一、目的要求掌握糞便中寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵檢查的飽和鹽水漂浮法；應(yīng)用顯微鏡觀察糞便中蟲(chóng)卵的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 二、方法概述二、方法概述用以檢查蠕蟲(chóng)卵、原蟲(chóng)的包囊、滋養(yǎng)體和卵囊。方法簡(jiǎn)便，連續(xù)作3次涂片，可提高檢出率。 1、蠕蟲(chóng)卵檢查：、蠕蟲(chóng)卵檢查： 2、原蟲(chóng)檢查：、原蟲(chóng)檢查：1）活滋養(yǎng)體檢查2）包囊的碘液染色檢查3）隱孢子蟲(chóng)卵囊染色檢查：改良抗酸染色法改良抗酸染色法（一）直接涂片法（一）直接涂片法（二）浮聚法（二）浮聚法原理原理：利用比重較大的液體，使原蟲(chóng)包囊或蠕蟲(chóng)卵上浮，集中于液體表面。常用的方法有三種：1、飽和鹽水浮聚法、飽和鹽水浮聚法2、硫酸鋅離心浮

2、聚法、硫酸鋅離心浮聚法3、蔗糖離心浮聚法、蔗糖離心浮聚法蟲(chóng)卵比重與漂浮液比重蟲(chóng)卵比重與漂浮液比重蟲(chóng)卵種類(lèi)蟲(chóng)卵種類(lèi) 比重比重 漂浮液的種類(lèi)漂浮液的種類(lèi) 比重比重 賈第蟲(chóng)包囊1.040-1.060飽和鹽水 1.171.19豬蛔蟲(chóng)卵 1.045硫酸鋅溶液 1.14鉤蟲(chóng)卵 1.0851.09氯化鈣溶液 1.05毛圓線(xiàn)蟲(chóng)卵 1.1151.13氯化鈣溶液 1.25豬后圓線(xiàn)蟲(chóng)卵1.200硫代硫酸鈉 1.371.39肝片吸蟲(chóng)卵 1.200飽和硫酸鎂 1.26姜片吸蟲(chóng)卵 1.200飽和硝酸鈉 1.21.49華枝睪蟲(chóng)卵 1.200甘油 1.226復(fù)腔吸蟲(chóng)卵 1.200飽和蔗糖溶液1.28飽和鹽水漂浮法操作示意圖飽

3、和鹽水漂浮法操作示意圖1. 自糞便不同處挑取如蠶豆大小的糞塊，置于盛有少量飽和鹽水的漂浮管中2. 將糞便搗碎，與鹽水?dāng)噭?，再加飽和鹽水 3. 將滿(mǎn)時(shí)，改用滴管，加至略高于管口但不超出為止 4. 取潔凈載玻片一張蓋在管口上，靜止30分鐘左右5. 如圖垂直向上提起載玻片6. 敏捷地翻轉(zhuǎn)，覆以蓋片鏡檢（三）沉淀法（三）沉淀法 原蟲(chóng)包囊和蠕蟲(chóng)卵的比重大可沉集于水底，有助于提高檢出率。但比重較小的鉤蟲(chóng)卵和某些原蟲(chóng)包囊則效果較差。 1、自然沉淀法、自然沉淀法 2、離心沉淀法、離心沉淀法（四）漂?。ㄋ模┢?沉淀法沉淀法 該法的原理是利用糞便中各種蟲(chóng)卵及糞渣中其它成份比重的差別，將不同比重的蟲(chóng)卵分別集中進(jìn)行

4、檢查，即先按漂浮法檢查比重較小的蟲(chóng)卵，然后將管中上層液倒掉，取沉淀物檢查不能上浮而沉在下面的比重較大的卵，所以，該法可用于檢查比重大小各異的寄生蟲(chóng)卵。（五）拭子檢查法（五）拭子檢查法適用于在肛周、皮膚產(chǎn)卵（蟯蟲(chóng)），或常在肛門(mén)附近發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)卵（帶絳蟲(chóng)）的蟲(chóng)卵檢查法。1、棉簽拭子法2、透明膠紙法 漏斗幼蟲(chóng)分離法(貝爾曼法)。取糞便15-20g，放在漏斗內(nèi)的金屬篩上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一個(gè)小試管。加入40到淹沒(méi)糞球?yàn)橹?，靜置1-3小時(shí)。此時(shí)大部分幼蟲(chóng)游走于水中，并沉淀于試管底部。取試管底部沉渣制成涂片鏡檢。 平皿法。取被檢糞球3-4個(gè)，放于平皿中，加適量40溫水，浸泡10-15min后，除去糞

5、球，留下的液體在低倍顯微鏡下檢查。（六）糞便內(nèi)蠕蟲(chóng)幼蟲(chóng)檢查法（六）糞便內(nèi)蠕蟲(chóng)幼蟲(chóng)檢查法 1、幼蟲(chóng)分離法：網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)、類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng)、幼蟲(chóng)分離法：網(wǎng)尾線(xiàn)蟲(chóng)、類(lèi)圓線(xiàn)蟲(chóng) 2、糞便內(nèi)蟲(chóng)卵培養(yǎng)法：圓形線(xiàn)蟲(chóng)目、糞便內(nèi)蟲(chóng)卵培養(yǎng)法：圓形線(xiàn)蟲(chóng)目 3、毛蚴孵化法：、毛蚴孵化法：結(jié)腸小袋纖毛蟲(chóng)結(jié)腸小袋纖毛蟲(chóng)Balantidium coli十二指腸賈第蟲(chóng)十二指腸賈第蟲(chóng)Giardia duodenalis 球蟲(chóng)球蟲(chóng)隱孢子蟲(chóng)隱孢子蟲(chóng)肝片形吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵肝片形吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵蛭形巨吻棘頭蟲(chóng)蛭形巨吻棘頭蟲(chóng)膜殼絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵膜殼絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵犬復(fù)孔絳蟲(chóng)卵犬復(fù)孔絳蟲(chóng)卵豬帶絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵豬帶絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵莫尼茨絳蟲(chóng)蟲(chóng)

6、卵莫尼茨絳蟲(chóng)蟲(chóng)卵犬鞭蟲(chóng)卵犬鞭蟲(chóng)卵鉤蟲(chóng)卵鉤蟲(chóng)卵犬弓首蛔蟲(chóng)卵犬弓首蛔蟲(chóng)卵鴿毛細(xì)線(xiàn)蟲(chóng)卵，球蟲(chóng)卵囊鴿毛細(xì)線(xiàn)蟲(chóng)卵，球蟲(chóng)卵囊肉鴿蛔蟲(chóng)卵肉鴿蛔蟲(chóng)卵豬蛔蟲(chóng)卵豬蛔蟲(chóng)卵通常的鏡臺(tái)測(cè)微尺是中央部分刻有精確等分線(xiàn)的載玻片，一般將lmm等分為100格，每格長(zhǎng)l0m，是專(zhuān)門(mén)用來(lái)校正目鏡測(cè)微尺的。 通常的目鏡測(cè)微尺是一塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長(zhǎng)度刻成50等分、把10 mm長(zhǎng)度刻成100等分或?qū)?mm長(zhǎng)度刻成100等分。 測(cè)微尺的使用漏斗架2個(gè)/組；漏篩6個(gè)/組；小燒杯（50ml）12個(gè)/組；500ml燒杯2個(gè)/組；100mL燒杯1個(gè)/組；青霉素瓶6個(gè)/組；離心管6個(gè)/組；滴管1個(gè)/人；飽和鹽水1瓶/組；甘油水1瓶/組

7、；100mL量筒1個(gè)/組；小方瓷盤(pán)1個(gè)/組；擦鏡紙1平皿/組；小棉塊1份/組；載玻片、蓋玻片1份/組；離心機(jī)、小天平各1臺(tái)；鑷子2個(gè)/組；顯微鏡；試管架1個(gè)/組；動(dòng)物糞便1份/班；50mL燒杯兩個(gè)用于配平。一）、實(shí)驗(yàn)用品一）、實(shí)驗(yàn)用品三、試驗(yàn)內(nèi)容三、試驗(yàn)內(nèi)容1. 每每2人操作人操作1份飽和鹽水漂浮法份飽和鹽水漂浮法靜置濾液靜置濾液 30分鐘；分鐘；2. 直接涂片法（每直接涂片法（每2人操作人操作1份）；份）；3. 離心沉淀法（每離心沉淀法（每2人操作人操作1份）；份）；4. 繼續(xù)繼續(xù)“1”未完的操作。未完的操作。二）實(shí)驗(yàn)安排二）實(shí)驗(yàn)安排六、注意事項(xiàng)六、注意事項(xiàng)1.高倍鏡下觀察必須加蓋玻片2.采用直接涂片法時(shí)，不要涂得太多，必須分散 開(kāi)