微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

1、微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制 廣東省微生物研究所廣東省微生物研究所廣東省微生物分析檢測(cè)中心廣東省微生物分析檢測(cè)中心20122012年年11 11月月前言前言 在實(shí)際工作中存在許多復(fù)雜因素影響微生物在實(shí)際工作中存在許多復(fù)雜因素影響微生物學(xué)檢驗(yàn)，可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差甚至錯(cuò)誤，因?qū)W檢驗(yàn)，可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差甚至錯(cuò)誤，因此必須對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的諸多因素采取控制手段此必須對(duì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的諸多因素采取控制手段保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性，不斷完善微生物檢驗(yàn)的保證檢驗(yàn)結(jié)果的正確性，不斷完善微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。質(zhì)量控制。 主要內(nèi)容主要內(nèi)容 1 1 檢驗(yàn)人員檢驗(yàn)人員 2 2 儀器、設(shè)備儀器、設(shè)備 3 3

2、 檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑 4 4 檢驗(yàn)環(huán)境檢驗(yàn)環(huán)境 5 5 采樣采樣 6 6 樣品的接收和預(yù)處理樣品的接收和預(yù)處理 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 8 8 校驗(yàn)的執(zhí)行校驗(yàn)的執(zhí)行 9 9 參考菌株及其保存參考菌株及其保存 10 10 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制 11 11 檢驗(yàn)報(bào)告及結(jié)果質(zhì)量控制檢驗(yàn)報(bào)告及結(jié)果質(zhì)量控制1 1 檢驗(yàn)人員檢驗(yàn)人員 （1 1）微生物檢驗(yàn)不能完全依賴全自動(dòng)鑒定儀器，）微生物檢驗(yàn)不能完全依賴全自動(dòng)鑒定儀器，檢驗(yàn)工作中每一步驟均需要有高度的主觀分析和檢驗(yàn)工作中每一步驟均需要有高度的主觀分析和判斷能力，與個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)、技能和微生物檢驗(yàn)基判斷能力，與個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)、技

3、能和微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)水平密切相關(guān)。礎(chǔ)知識(shí)水平密切相關(guān)。 （2 2）除要求微生物檢驗(yàn)人員必須具備嚴(yán)肅認(rèn)真）除要求微生物檢驗(yàn)人員必須具備嚴(yán)肅認(rèn)真的工作態(tài)度、精密細(xì)致的觀察和操作習(xí)慣，注重的工作態(tài)度、精密細(xì)致的觀察和操作習(xí)慣，注重個(gè)人衛(wèi)生外，還必須熟練掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)。個(gè)人衛(wèi)生外，還必須熟練掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)。 1 1 檢驗(yàn)人員檢驗(yàn)人員 （3 3）檢驗(yàn)人員應(yīng)執(zhí)行上崗前培訓(xùn)制度，上崗前）檢驗(yàn)人員應(yīng)執(zhí)行上崗前培訓(xùn)制度，上崗前培訓(xùn)合格方能上崗操作，還要主動(dòng)參加學(xué)習(xí)、培培訓(xùn)合格方能上崗操作，還要主動(dòng)參加學(xué)習(xí)、培訓(xùn)、講座，學(xué)習(xí)新技術(shù)，掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)方法、訓(xùn)、講座，學(xué)習(xí)新技術(shù)，掌握微生物學(xué)檢驗(yàn)方法、標(biāo)

4、準(zhǔn)及相關(guān)法律法規(guī)；標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法律法規(guī)； （4 4）參與編寫測(cè)試程序及儀器操作程序，學(xué)習(xí)）參與編寫測(cè)試程序及儀器操作程序，學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系知識(shí)和計(jì)量學(xué)基本知識(shí)；質(zhì)量保證體系知識(shí)和計(jì)量學(xué)基本知識(shí)； 1 1 檢驗(yàn)人員檢驗(yàn)人員 （5 5）參加各類水平測(cè)試和盲樣測(cè)試，提高檢測(cè)）參加各類水平測(cè)試和盲樣測(cè)試，提高檢測(cè)水平和分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力；水平和分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力； （6 6）微生物學(xué)檢驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期對(duì)檢驗(yàn)人員）微生物學(xué)檢驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期對(duì)檢驗(yàn)人員進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作熟練程度的考核，提高檢驗(yàn)進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作熟練程度的考核，提高檢驗(yàn)人員的素質(zhì)。人員的素質(zhì)。 2 2 儀器、設(shè)備儀器、設(shè)備 大型微

5、生物檢驗(yàn)室的主要儀器及設(shè)備包括：大型微生物檢驗(yàn)室的主要儀器及設(shè)備包括： 無(wú)菌室、微生物自動(dòng)鑒定儀、微生物快速初篩無(wú)菌室、微生物自動(dòng)鑒定儀、微生物快速初篩儀、顯微鏡、菌落計(jì)數(shù)器、高壓滅菌器、干熱滅儀、顯微鏡、菌落計(jì)數(shù)器、高壓滅菌器、干熱滅菌器、離心機(jī)、蒸餾設(shè)備、培養(yǎng)箱、厭氧箱、水菌器、離心機(jī)、蒸餾設(shè)備、培養(yǎng)箱、厭氧箱、水浴箱、冰箱、超凈工作臺(tái)、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、浴箱、冰箱、超凈工作臺(tái)、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、PCRPCR儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)等。儀、電泳儀、凝膠成像系統(tǒng)等。 2 2 儀器、設(shè)備儀器、設(shè)備 要求所有的儀器和設(shè)備均應(yīng)按照生產(chǎn)廠家提要求所有的儀器和設(shè)備均應(yīng)按照生產(chǎn)廠家提供的方法和有關(guān)規(guī)定正確使

6、用。供的方法和有關(guān)規(guī)定正確使用。 需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備，經(jīng)符合需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備，經(jīng)符合資歷的計(jì)量部門校準(zhǔn)合格后方可使用。資歷的計(jì)量部門校準(zhǔn)合格后方可使用。 對(duì)于常用的貴重儀器和設(shè)備，在使用前應(yīng)加對(duì)于常用的貴重儀器和設(shè)備，在使用前應(yīng)加以檢查，使用后要登記，要做到定期維護(hù)，以保以檢查，使用后要登記，要做到定期維護(hù)，以保證儀器處于良好的工作狀態(tài)。證儀器處于良好的工作狀態(tài)。 2.1 2.1 高壓滅菌器高壓滅菌器 （1 1）操作人員應(yīng)了解蒸氣滅菌的原理并遵守操）操作人員應(yīng)了解蒸氣滅菌的原理并遵守操作規(guī)則。作規(guī)則。 （2 2）放入的滅菌物品不宜放得過(guò)擠。）放入的滅菌物品不宜放得過(guò)擠

7、。 （3 3）使用時(shí)，放入生物指示條或化學(xué)指示條。）使用時(shí)，放入生物指示條或化學(xué)指示條。 （4 4）生物指標(biāo)為嗜熱脂肪芽胞桿菌的耐受性）生物指標(biāo)為嗜熱脂肪芽胞桿菌的耐受性（121121，1515minmin）。）。 （5 5）滅菌后，再培養(yǎng)觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)）滅菌后，再培養(yǎng)觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。 （6 6）也可采用水銀留點(diǎn)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。）也可采用水銀留點(diǎn)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。 2.2 2.2 干熱滅菌器干熱滅菌器 （1 1）應(yīng)遵守操作規(guī)則，放入箱內(nèi)滅菌的器皿）應(yīng)遵守操作規(guī)則，放入箱內(nèi)滅菌的器皿不宜放得過(guò)擠，器皿與內(nèi)層底板不能直接接觸。不宜放得過(guò)擠，器皿與內(nèi)層底板不能直接接觸。 （2 2）滅菌完畢，不能立

8、即開(kāi)門取物，須關(guān)閉）滅菌完畢，不能立即開(kāi)門取物，須關(guān)閉電源，待溫度下降至電源，待溫度下降至5050以下再開(kāi)門取物。以下再開(kāi)門取物。 （3 3）帶有紙包裝的物品滅菌溫度不能超過(guò)）帶有紙包裝的物品滅菌溫度不能超過(guò)160160。 2.3 2.3 培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱 （1 1）箱內(nèi)不應(yīng)放入過(guò)熱或過(guò)冷的物品，取放物品時(shí)，）箱內(nèi)不應(yīng)放入過(guò)熱或過(guò)冷的物品，取放物品時(shí)，應(yīng)隨手關(guān)閉箱門，以維持恒溫。應(yīng)隨手關(guān)閉箱門，以維持恒溫。 （2 2）如培養(yǎng)物不慎潑灑到箱內(nèi)，應(yīng)馬上清潔，并采）如培養(yǎng)物不慎潑灑到箱內(nèi)，應(yīng)馬上清潔，并采取必要的消毒措施。取必要的消毒措施。 （3 3）培養(yǎng)物不宜與培養(yǎng)箱最底層直接接觸。）培養(yǎng)物不宜與培養(yǎng)

9、箱最底層直接接觸。 （4 4）必要時(shí)，可放入裝水容器以維持箱內(nèi)的濕度。）必要時(shí)，可放入裝水容器以維持箱內(nèi)的濕度。 （5 5）每天記錄溫度及濕度的變化，觀察培養(yǎng)箱內(nèi)溫）每天記錄溫度及濕度的變化，觀察培養(yǎng)箱內(nèi)溫度與設(shè)定溫度是否一致。在兩次計(jì)量周期之間要進(jìn)度與設(shè)定溫度是否一致。在兩次計(jì)量周期之間要進(jìn)行至少一次內(nèi)部校準(zhǔn)。行至少一次內(nèi)部校準(zhǔn)。 2.5 2.5 顯微鏡顯微鏡 按使用說(shuō)明進(jìn)行操作。按使用說(shuō)明進(jìn)行操作。 使用油鏡后先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用使用油鏡后先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用沾上二甲苯的擦鏡紙擦拭，最后用干凈擦鏡紙沾上二甲苯的擦鏡紙擦拭，最后用干凈擦鏡紙擦干。（擦干。（建議使用無(wú)水乙醇

10、建議使用無(wú)水乙醇+ +乙醚乙醚） 注意防塵，保持清潔、干燥。注意防塵，保持清潔、干燥。2 2 儀器、設(shè)備儀器、設(shè)備 實(shí)驗(yàn)室需要使用的無(wú)菌器具應(yīng)能正確實(shí)施滅實(shí)驗(yàn)室需要使用的無(wú)菌器具應(yīng)能正確實(shí)施滅菌，無(wú)菌器具和器皿有明顯標(biāo)識(shí)，以便與非無(wú)菌菌，無(wú)菌器具和器皿有明顯標(biāo)識(shí)，以便與非無(wú)菌器具和器皿加以區(qū)別。器具和器皿加以區(qū)別。 3 3 檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑檢驗(yàn)培養(yǎng)基、試劑 3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 微生物學(xué)檢驗(yàn)所用干粉培養(yǎng)基，必須由專微生物學(xué)檢驗(yàn)所用干粉培養(yǎng)基，必須由專業(yè)廠家生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)業(yè)廠家生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保存也應(yīng)符合要求，防止潮解、結(jié)塊等。準(zhǔn)，保存也應(yīng)符合要求，

11、防止潮解、結(jié)塊等。 干粉培養(yǎng)基易受潮變性，需要重視。干粉培養(yǎng)基易受潮變性，需要重視。一旦一旦變質(zhì)，不得再使用。變質(zhì)，不得再使用。 3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 為保證干粉培養(yǎng)基質(zhì)量指標(biāo)，在實(shí)際工作中為保證干粉培養(yǎng)基質(zhì)量指標(biāo)，在實(shí)際工作中應(yīng)注意：應(yīng)注意： （1 1）加強(qiáng)包裝的密封性能；）加強(qiáng)包裝的密封性能； （2 2）使用時(shí)盡量縮短開(kāi)蓋時(shí)間；）使用時(shí)盡量縮短開(kāi)蓋時(shí)間； （3 3）干粉培養(yǎng)基一般放在通風(fēng)、干燥、避光的）干粉培養(yǎng)基一般放在通風(fēng)、干燥、避光的環(huán)境中保存，對(duì)于易受潮的品種，啟用后宜放入環(huán)境中保存，對(duì)于易受潮的品種，啟用后宜放入干燥器中保存；干燥器中保存； （4 4）由于配制水分不同、啟用次數(shù)

12、或時(shí)間增加，）由于配制水分不同、啟用次數(shù)或時(shí)間增加，干粉培養(yǎng)基干粉培養(yǎng)基的的pHpH值可能會(huì)有所變化，應(yīng)隨時(shí)略加值可能會(huì)有所變化，應(yīng)隨時(shí)略加調(diào)整。調(diào)整。 3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 干粉培養(yǎng)基所要求的理化指標(biāo)，可以從下干粉培養(yǎng)基所要求的理化指標(biāo)，可以從下面幾個(gè)方面進(jìn)行初步檢查：面幾個(gè)方面進(jìn)行初步檢查： （1 1）干粉培養(yǎng)基應(yīng)為疏松顆粒狀或粉末狀，顏）干粉培養(yǎng)基應(yīng)為疏松顆粒狀或粉末狀，顏色正常、一致；色正常、一致； （2 2）溶解后清徹透明，無(wú)沉淀；）溶解后清徹透明，無(wú)沉淀； （3 3）4545時(shí)時(shí)pHpH值為值為7.27.2士士0.20.2；熔化溫度；熔化溫度7070左左右，凝固溫度為右，凝固溫

13、度為35-4035-40； （4 4）水分含量符合標(biāo)準(zhǔn)。）水分含量符合標(biāo)準(zhǔn)。 3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 商品化培養(yǎng)基的平皿應(yīng)對(duì)所用培養(yǎng)基做外觀商品化培養(yǎng)基的平皿應(yīng)對(duì)所用培養(yǎng)基做外觀檢查，如培養(yǎng)基是否開(kāi)裂、平皿有無(wú)破碎、血平檢查，如培養(yǎng)基是否開(kāi)裂、平皿有無(wú)破碎、血平板有否溶血、有否冰凍、灌注是否均勻、有否過(guò)板有否溶血、有否冰凍、灌注是否均勻、有否過(guò)多的氣泡，清晰度和有無(wú)污染也需要檢查。多的氣泡，清晰度和有無(wú)污染也需要檢查。 培養(yǎng)基平皿的制備商必須按照標(biāo)準(zhǔn)隨產(chǎn)品附培養(yǎng)基平皿的制備商必須按照標(biāo)準(zhǔn)隨產(chǎn)品附上書面鑒定資料，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將此鑒定書保存一定上書面鑒定資料，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)將此鑒定書保存一定時(shí)期。時(shí)期。

14、3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)室自制培養(yǎng)基應(yīng)有質(zhì)量控制，包括：實(shí)驗(yàn)室自制培養(yǎng)基應(yīng)有質(zhì)量控制，包括： 制備數(shù)量制備數(shù)量 制備日期制備日期 有效日期有效日期 制備者姓名制備者姓名 還必須檢查：還必須檢查： 培養(yǎng)基顏色培養(yǎng)基顏色 均勻度均勻度 厚度厚度 光潔度光潔度 溶血與否溶血與否 有否過(guò)多氣泡有否過(guò)多氣泡 是否污染是否污染 3.1 3.1 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 培養(yǎng)基的配制應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)培養(yǎng)基的配制應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行操作，并做好配制記錄。行操作，并做好配制記錄。為保證培養(yǎng)基質(zhì)量，在配制時(shí)應(yīng)注意：為保證培養(yǎng)基質(zhì)量，在配制時(shí)應(yīng)注意： 制備培養(yǎng)基必須在玻璃容器、搪瓷缸中進(jìn)行，制備培養(yǎng)基必

15、須在玻璃容器、搪瓷缸中進(jìn)行，如用銅、鐵等金屬器皿，可能會(huì)對(duì)微生物生長(zhǎng)有毒如用銅、鐵等金屬器皿，可能會(huì)對(duì)微生物生長(zhǎng)有毒害作用。害作用。 配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)按檢驗(yàn)項(xiàng)目規(guī)定的配方添加，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)按檢驗(yàn)項(xiàng)目規(guī)定的配方添加，不得隨意增減或更改培養(yǎng)基成分。不得隨意增減或更改培養(yǎng)基成分。 3.1 3.1 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 使用專用的角匙取藥品，避免交叉污染。使用專用的角匙取藥品，避免交叉污染。 使用蒸餾水或去離子水配制，不得使用自來(lái)使用蒸餾水或去離子水配制，不得使用自來(lái)水，因其中含有氯等抗菌物質(zhì)。水，因其中含有氯等抗菌物質(zhì)。 不同類型的微生物對(duì)不同類型的微生物對(duì)pHpH值的要求不同，配制值的要求不同，配制培養(yǎng)基

16、時(shí)應(yīng)測(cè)定培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)測(cè)定pHpH值，如測(cè)定結(jié)果與所要求的值，如測(cè)定結(jié)果與所要求的pHpH值不符，則用值不符，則用lmollmol/L /L NaOHNaOH或或lmollmol/L /L HClHCl溶液進(jìn)溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。行調(diào)節(jié)。 3.1 3.1 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 制備好的培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)使用，使用不完制備好的培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)使用，使用不完的，如無(wú)特殊需求，可室溫或的，如無(wú)特殊需求，可室溫或2-82-8冷藏保存。冷藏保存。 如用塑料袋密封，保存期可延長(zhǎng)，發(fā)生變?nèi)缬盟芰洗芊猓４嫫诳裳娱L(zhǎng)，發(fā)生變質(zhì)等被污染跡象或干裂現(xiàn)象的則不能再使用。質(zhì)等被污染跡象或干裂現(xiàn)象的則不能再使用。 表表1 1 培養(yǎng)基在培養(yǎng)基在2-8

17、2-8冷藏條件下保存的有效期冷藏條件下保存的有效期培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類保存條件保存條件有效期有效期平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基不裝塑料袋不裝塑料袋2周周塑料袋密封塑料袋密封8周周試管（棉塞）培養(yǎng)基試管（棉塞）培養(yǎng)基不裝塑料袋不裝塑料袋2周周-1個(gè)月個(gè)月塑料袋密封塑料袋密封2個(gè)月個(gè)月試管（螺旋蓋）培養(yǎng)基試管（螺旋蓋）培養(yǎng)基不裝塑料袋不裝塑料袋2個(gè)月個(gè)月塑料袋密封塑料袋密封4個(gè)月個(gè)月3.13.1培養(yǎng)基培養(yǎng)基 每批自制培養(yǎng)基必須做無(wú)菌試驗(yàn)和規(guī)定的質(zhì)每批自制培養(yǎng)基必須做無(wú)菌試驗(yàn)和規(guī)定的質(zhì)控菌株測(cè)試，對(duì)各種不同培養(yǎng)基規(guī)定了專門的質(zhì)控菌株測(cè)試，對(duì)各種不同培養(yǎng)基規(guī)定了專門的質(zhì)控測(cè)試菌株?？販y(cè)試菌株。 無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)可

18、將滅菌后的培養(yǎng)基放入無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)可將滅菌后的培養(yǎng)基放入3737的培養(yǎng)箱培養(yǎng)的培養(yǎng)箱培養(yǎng)24244848小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。3.1培養(yǎng)基 效果試驗(yàn)是指按不同的培養(yǎng)基接種相應(yīng)的效果試驗(yàn)是指按不同的培養(yǎng)基接種相應(yīng)的菌株，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血菌株，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血等特征，據(jù)此判斷培養(yǎng)基是否符合要求。等特征，據(jù)此判斷培養(yǎng)基是否符合要求。 3.2 3.2 檢驗(yàn)試劑及藥品檢驗(yàn)試劑及藥品 檢驗(yàn)藥品、試劑須在分析純檢驗(yàn)藥品、試劑須在分析純( (AR)AR)級(jí)以上。級(jí)以上。 在利用藥品、試劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液、染色液、緩沖在利用藥品、試劑配制標(biāo)準(zhǔn)溶液、

19、染色液、緩沖液及其他試劑時(shí)應(yīng)注意：液及其他試劑時(shí)應(yīng)注意： (1)(1)按要求選取溶劑；按要求選取溶劑； (2)(2)用帶塞的試劑瓶盛裝；用帶塞的試劑瓶盛裝； (3)(3)易分解的試劑宜用棕色瓶；易分解的試劑宜用棕色瓶； (4)(4)揮發(fā)性的試劑其瓶口應(yīng)予密封；揮發(fā)性的試劑其瓶口應(yīng)予密封； (5)(5)如發(fā)現(xiàn)溶液有變質(zhì)現(xiàn)象，應(yīng)停止使用；如發(fā)現(xiàn)溶液有變質(zhì)現(xiàn)象，應(yīng)停止使用； (6)(6)標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)定時(shí)標(biāo)定。標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)定時(shí)標(biāo)定。 3.2 3.2 檢驗(yàn)試劑及藥品檢驗(yàn)試劑及藥品 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保存的試劑應(yīng)定期進(jìn)行清點(diǎn)，過(guò)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保存的試劑應(yīng)定期進(jìn)行清點(diǎn)，過(guò)期或變質(zhì)的試劑應(yīng)棄去；期或變質(zhì)的試劑應(yīng)棄去； 注意試劑在

20、保存條件下的使用有效期以及最注意試劑在保存條件下的使用有效期以及最佳保存方式。佳保存方式。 3.3 3.3 染色液染色液 染色液配制后，必須選用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株作染色液配制后，必須選用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)菌株作陽(yáng)性及陰性對(duì)照來(lái)鑒定染色液的性能，如革蘭氏陽(yáng)性及陰性對(duì)照來(lái)鑒定染色液的性能，如革蘭氏染色選用枯草桿菌、葡萄球菌和大腸桿菌作為對(duì)染色選用枯草桿菌、葡萄球菌和大腸桿菌作為對(duì)照，鞭毛染色液采用普通變形桿菌和福氏志賀氏照，鞭毛染色液采用普通變形桿菌和福氏志賀氏菌作為對(duì)照。菌作為對(duì)照。 對(duì)經(jīng)驗(yàn)不足者，每次染色時(shí)均應(yīng)作對(duì)照染色。對(duì)經(jīng)驗(yàn)不足者，每次染色時(shí)均應(yīng)作對(duì)照染色。 3.43.4診斷血清診斷血清 沙門氏菌屬、

21、志賀氏菌屬、致病性大腸埃希氏菌等診斷沙門氏菌屬、志賀氏菌屬、致病性大腸埃希氏菌等診斷血清，使用時(shí)應(yīng)注意有效期及效價(jià)。血清，使用時(shí)應(yīng)注意有效期及效價(jià)。 每月用相應(yīng)的菌株檢查其有效性，過(guò)期血清和變混濁的每月用相應(yīng)的菌株檢查其有效性，過(guò)期血清和變混濁的血清不應(yīng)繼續(xù)使用。血清不應(yīng)繼續(xù)使用。 診斷血清一般放普通冰箱內(nèi)保存，使用時(shí)應(yīng)以最短的時(shí)診斷血清一般放普通冰箱內(nèi)保存，使用時(shí)應(yīng)以最短的時(shí)間暴露于空氣中。間暴露于空氣中。 最好備有兩個(gè)生物制品研究所生產(chǎn)的診斷血清，以便互最好備有兩個(gè)生物制品研究所生產(chǎn)的診斷血清，以便互相對(duì)照，檢查其可靠性。相對(duì)照，檢查其可靠性。 4 4 檢驗(yàn)環(huán)境檢驗(yàn)環(huán)境 微生物學(xué)檢驗(yàn)均在檢

22、驗(yàn)室進(jìn)行，既不能讓微微生物學(xué)檢驗(yàn)均在檢驗(yàn)室進(jìn)行，既不能讓微生物散布出去，又必須使樣品不再受污染，更不生物散布出去，又必須使樣品不再受污染，更不能允許病原菌感染檢驗(yàn)人員，為此，檢驗(yàn)室的環(huán)能允許病原菌感染檢驗(yàn)人員，為此，檢驗(yàn)室的環(huán)境要求和衛(wèi)生管理制度非常重要。境要求和衛(wèi)生管理制度非常重要。 實(shí)驗(yàn)室總體布局和各部位的安排應(yīng)減少潛在實(shí)驗(yàn)室總體布局和各部位的安排應(yīng)減少潛在的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害。的對(duì)樣本的污染和對(duì)人員的危害。 4 4 檢驗(yàn)環(huán)境檢驗(yàn)環(huán)境 微生物學(xué)檢驗(yàn)室要求內(nèi)外環(huán)境整潔，布局合理，操作區(qū)微生物學(xué)檢驗(yàn)室要求內(nèi)外環(huán)境整潔，布局合理，操作區(qū)域與辦公區(qū)域分開(kāi)。域與辦公區(qū)域分開(kāi)。 洗滌室、培養(yǎng)室

23、、消毒間、無(wú)菌室應(yīng)分開(kāi)，設(shè)有專室。洗滌室、培養(yǎng)室、消毒間、無(wú)菌室應(yīng)分開(kāi)，設(shè)有專室。 無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間，最好設(shè)推拉門，以防空氣無(wú)菌室要設(shè)有套間或緩沖間，最好設(shè)推拉門，以防空氣振蕩過(guò)大。振蕩過(guò)大。 微生物檢驗(yàn)室應(yīng)備有自動(dòng)或腳踩式洗手池和固定的消毒微生物檢驗(yàn)室應(yīng)備有自動(dòng)或腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。設(shè)施。 4 4 檢驗(yàn)環(huán)境檢驗(yàn)環(huán)境 微生物檢驗(yàn)室應(yīng)制定合理、完善的衛(wèi)生管理微生物檢驗(yàn)室應(yīng)制定合理、完善的衛(wèi)生管理制度，工作人員必須每天堅(jiān)持做好環(huán)境衛(wèi)生工作，制度，工作人員必須每天堅(jiān)持做好環(huán)境衛(wèi)生工作，防止灰塵飛揚(yáng)，定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行消毒。防止灰塵飛揚(yáng)，定期對(duì)操作環(huán)境進(jìn)行消毒。 對(duì)經(jīng)培養(yǎng)后的培養(yǎng)基、

24、培養(yǎng)液、用過(guò)的檢樣對(duì)經(jīng)培養(yǎng)后的培養(yǎng)基、培養(yǎng)液、用過(guò)的檢樣及其他廢棄物，應(yīng)投入指定的容器內(nèi)，經(jīng)無(wú)害化及其他廢棄物，應(yīng)投入指定的容器內(nèi)，經(jīng)無(wú)害化處理后方可排放，禁止亂扔亂放，以防某些病原處理后方可排放，禁止亂扔亂放，以防某些病原微生物散布。微生物散布。 4 4 檢驗(yàn)環(huán)境檢驗(yàn)環(huán)境 對(duì)需在無(wú)菌條件下工作的區(qū)域應(yīng)以明確標(biāo)識(shí)并能有效對(duì)需在無(wú)菌條件下工作的區(qū)域應(yīng)以明確標(biāo)識(shí)并能有效地控制、監(jiān)測(cè)和記錄；地控制、監(jiān)測(cè)和記錄； 檢驗(yàn)人員應(yīng)待無(wú)菌室過(guò)濾凈化裝置開(kāi)機(jī)檢驗(yàn)人員應(yīng)待無(wú)菌室過(guò)濾凈化裝置開(kāi)機(jī)0.50.51 1h h后，再后，再進(jìn)入無(wú)菌室工作；進(jìn)入無(wú)菌室工作； 每天記錄環(huán)境檢測(cè)報(bào)告，并經(jīng)常進(jìn)行空氣落菌實(shí)驗(yàn)：每天記

25、錄環(huán)境檢測(cè)報(bào)告，并經(jīng)常進(jìn)行空氣落菌實(shí)驗(yàn)：空氣落菌以營(yíng)養(yǎng)瓊脂開(kāi)上皿空氣落菌以營(yíng)養(yǎng)瓊脂開(kāi)上皿1515minmin后蓋上蓋子，后蓋上蓋子，363611培培養(yǎng)養(yǎng)4848h h計(jì)數(shù)；計(jì)數(shù)； 定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行室內(nèi)環(huán)境消毒，空氣消毒可采用甲定期對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行室內(nèi)環(huán)境消毒，空氣消毒可采用甲醛熏蒸法，甲醛與高錳酸鉀比例醛熏蒸法，甲醛與高錳酸鉀比例2:12:1。 5 5 采樣采樣 （1 1）采樣工具和容器宜選用耐消毒滅菌的材料，如）采樣工具和容器宜選用耐消毒滅菌的材料，如玻璃、陶瓷、搪瓷、鋁、不銹鋼等，使用之前應(yīng)進(jìn)玻璃、陶瓷、搪瓷、鋁、不銹鋼等，使用之前應(yīng)進(jìn)行認(rèn)真清洗、干燥和相應(yīng)的滅菌處理。采樣工具和行認(rèn)真清洗、干

26、燥和相應(yīng)的滅菌處理。采樣工具和容器不能用消毒劑消毒，樣品中也不得加入防腐劑，容器不能用消毒劑消毒，樣品中也不得加入防腐劑，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確性。以免影響檢驗(yàn)結(jié)果的正確性。 （2 2）在嚴(yán)格無(wú)菌操作的條件下，按國(guó)家規(guī)定的樣品）在嚴(yán)格無(wú)菌操作的條件下，按國(guó)家規(guī)定的樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻而準(zhǔn)確地取樣，并及時(shí)封口，使樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻而準(zhǔn)確地取樣，并及時(shí)封口，使樣品具有準(zhǔn)確性和代表性。具有準(zhǔn)確性和代表性。 5 5 采樣采樣 （3 3）每件樣品封口后，貼上標(biāo)簽，做好記錄）每件樣品封口后，貼上標(biāo)簽，做好記錄( (如如樣品名稱、采樣地點(diǎn)、時(shí)間、數(shù)量、儲(chǔ)藏情況、樣品名稱、采樣地點(diǎn)、時(shí)間、數(shù)量、儲(chǔ)藏情況、采集或送檢

27、單位及姓名、采樣現(xiàn)場(chǎng)溫度、濕度及采集或送檢單位及姓名、采樣現(xiàn)場(chǎng)溫度、濕度及衛(wèi)生狀況等衛(wèi)生狀況等) )。采集后的樣品，一般可保存在。采集后的樣品，一般可保存在2-2-88的環(huán)境中，如果樣品是冷凍食品，應(yīng)保持在的環(huán)境中，如果樣品是冷凍食品，應(yīng)保持在冷凍狀態(tài)，并及時(shí)送檢。冷凍狀態(tài)，并及時(shí)送檢。 （4 4）采樣數(shù)量不能少于全部檢驗(yàn)需要量的）采樣數(shù)量不能少于全部檢驗(yàn)需要量的3 3倍，倍，以供檢驗(yàn)、復(fù)檢、備查。以供檢驗(yàn)、復(fù)檢、備查。 6 6 樣品的接收和預(yù)處理樣品的接收和預(yù)處理 樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)檢查樣品標(biāo)記是否與樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)檢查樣品標(biāo)記是否與樣品相符，樣品包裝狀況是否正常。樣品相符，樣品包裝狀

28、況是否正常。 若存在下述情況，應(yīng)考慮拒收樣品：若存在下述情況，應(yīng)考慮拒收樣品： （1 1）抽樣后樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間太遲，）抽樣后樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間太遲， 使其不能在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)；使其不能在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)； （2 2）樣品溫度太高；）樣品溫度太高； （3 3）在轉(zhuǎn)運(yùn)中樣品遭到破損或受到污染。）在轉(zhuǎn)運(yùn)中樣品遭到破損或受到污染。 6 6 樣品的接收和預(yù)處理樣品的接收和預(yù)處理 若對(duì)這些樣品進(jìn)行分析，應(yīng)將情況記錄若對(duì)這些樣品進(jìn)行分析，應(yīng)將情況記錄并在分析報(bào)告中加以說(shuō)明。并在分析報(bào)告中加以說(shuō)明。 檢驗(yàn)前，冷凍食品應(yīng)在最高溫度為檢驗(yàn)前，冷凍食品應(yīng)在最高溫度為44下下解凍，不超過(guò)解凍，不超過(guò)

29、1818h h； 較小、易解凍的樣品可放置于最高溫度為較小、易解凍的樣品可放置于最高溫度為3737的恒溫箱內(nèi)最長(zhǎng)達(dá)的恒溫箱內(nèi)最長(zhǎng)達(dá)15 15 minmin。 6 6 樣品的接收和預(yù)處理樣品的接收和預(yù)處理 微生物學(xué)檢驗(yàn)室在收到樣品后，必須及微生物學(xué)檢驗(yàn)室在收到樣品后，必須及時(shí)準(zhǔn)備條件、組織力量進(jìn)行檢驗(yàn)。時(shí)準(zhǔn)備條件、組織力量進(jìn)行檢驗(yàn)。 送檢的樣品，一般需保持在送檢的樣品，一般需保持在2 288的環(huán)境的環(huán)境中，對(duì)于冷凍食品應(yīng)保持在冷凍狀態(tài)，直到檢中，對(duì)于冷凍食品應(yīng)保持在冷凍狀態(tài)，直到檢驗(yàn)為止。驗(yàn)為止。 6 6 樣品的接收和預(yù)處理樣品的接收和預(yù)處理 凍藏的樣品應(yīng)盡快放在冷藏的溫度下解凍，凍藏的樣品應(yīng)盡

30、快放在冷藏的溫度下解凍，亦可放在適宜溫度亦可放在適宜溫度(37)(37)下短時(shí)間下短時(shí)間(15(15min)min)使其使其解凍，但溫度必須較低，以防止病原菌死亡。解凍，但溫度必須較低，以防止病原菌死亡。 凍結(jié)樣品化凍時(shí)，必須小心放置于細(xì)菌生長(zhǎng)凍結(jié)樣品化凍時(shí)，必須小心放置于細(xì)菌生長(zhǎng)溫度之下以免使細(xì)菌數(shù)量增加。從容器中取出樣溫度之下以免使細(xì)菌數(shù)量增加。從容器中取出樣品、稱取樣品應(yīng)注意無(wú)菌操作。品、稱取樣品應(yīng)注意無(wú)菌操作。 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 除按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)所需檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行除按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)所需檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)外，在實(shí)際工作中還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面，檢測(cè)外，在實(shí)際工作中還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面

31、，否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性：否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性： 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （1 1）在定量檢驗(yàn)時(shí)用）在定量檢驗(yàn)時(shí)用重量法重量法還是用還是用體積法體積法，檢驗(yàn)，檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)有誤差，因?yàn)楸戎夭坏扔诮Y(jié)果會(huì)有誤差，因?yàn)楸戎夭坏扔? 1的樣品，的樣品，1 1mLmL和和1 1g g的檢驗(yàn)結(jié)果絕不會(huì)相等。的檢驗(yàn)結(jié)果絕不會(huì)相等。 一般固態(tài)的樣品宜用重量法，液體樣品宜用一般固態(tài)的樣品宜用重量法，液體樣品宜用體積法。體積法。 但對(duì)于粘性液體但對(duì)于粘性液體( (如酸牛奶如酸牛奶) )，如用體積法，如用體積法，會(huì)粘附一定量的樣品在吸管上，因此此類樣品最會(huì)粘附一定量的樣品在吸管上，因此此類樣品最好用重量法。

32、好用重量法。 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （2 2）如檢樣需用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水稀釋，）如檢樣需用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水稀釋，則最好用勻質(zhì)器或組織搗碎機(jī)，以則最好用勻質(zhì)器或組織搗碎機(jī)，以800080001000010000轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /minmin的轉(zhuǎn)速處理的轉(zhuǎn)速處理1 1minmin，制成均勻的菌懸液。制成均勻的菌懸液。 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （3 3）樣品稀釋時(shí)，常會(huì)滯留少量樣品在吸管）樣品稀釋時(shí)，常會(huì)滯留少量樣品在吸管內(nèi)外，應(yīng)多加注意。內(nèi)外，應(yīng)多加注意。 吸管插入樣品或稀釋液中應(yīng)深淺一致，否吸管插入樣品或稀釋液中應(yīng)深淺一致，否則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果；則會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果； 吸入液體后，應(yīng)沿管壁慢慢注

33、入遞增的稀吸入液體后，應(yīng)沿管壁慢慢注入遞增的稀釋液中，特別注意此時(shí)吸管尖端切不可碰到稀釋液中，特別注意此時(shí)吸管尖端切不可碰到稀釋液中。釋液中。 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （4 4）在培養(yǎng)基傾注入檢樣、菌懸液時(shí)，注意培）在培養(yǎng)基傾注入檢樣、菌懸液時(shí)，注意培養(yǎng)基溫度宜在養(yǎng)基溫度宜在45-5045-50之間，并使培養(yǎng)基與檢樣、之間，并使培養(yǎng)基與檢樣、菌懸液充分混合。菌懸液充分混合。 （5 5）微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)要求選擇正確的培）微生物培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)要求選擇正確的培養(yǎng)溫度和時(shí)間。養(yǎng)溫度和時(shí)間。 7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （6 6）應(yīng)用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水作空白對(duì)照，）應(yīng)用無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水作空白對(duì)

34、照，如果在空白對(duì)照中檢出細(xì)菌，則可認(rèn)為培養(yǎng)基如果在空白對(duì)照中檢出細(xì)菌，則可認(rèn)為培養(yǎng)基質(zhì)量存在問(wèn)題或在操作過(guò)程中存在污染情況。質(zhì)量存在問(wèn)題或在操作過(guò)程中存在污染情況。 另外，采用標(biāo)準(zhǔn)菌種作陽(yáng)性對(duì)照，觀察培另外，采用標(biāo)準(zhǔn)菌種作陽(yáng)性對(duì)照，觀察培養(yǎng)基的質(zhì)量情況。養(yǎng)基的質(zhì)量情況。7 7 檢驗(yàn)質(zhì)量檢驗(yàn)質(zhì)量 （7 7）整個(gè)檢驗(yàn)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。）整個(gè)檢驗(yàn)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。 （8 8）及時(shí)檢查結(jié)果，做好原始數(shù)據(jù)記錄。）及時(shí)檢查結(jié)果，做好原始數(shù)據(jù)記錄。 8 8 校驗(yàn)的執(zhí)行校驗(yàn)的執(zhí)行 儀器設(shè)備檔案應(yīng)包含以下內(nèi)容儀器設(shè)備檔案應(yīng)包含以下內(nèi)容: : （1 1）儀器名稱、編號(hào)、啟用日期。）儀器名稱、編號(hào)、啟用

35、日期。 （2 2）常規(guī)校驗(yàn)的方法和校驗(yàn)周期。）常規(guī)校驗(yàn)的方法和校驗(yàn)周期。 （3 3）可以接受的操作范圍。）可以接受的操作范圍。 （4 4）儀器功能上的缺陷，如有克服缺陷）儀器功能上的缺陷，如有克服缺陷 的步驟應(yīng)詳細(xì)列出。的步驟應(yīng)詳細(xì)列出。 （5 5）常規(guī)維修的日期）常規(guī)維修的日期( (按制造商的推薦意按制造商的推薦意 見(jiàn)見(jiàn)) ) 。 8 8 校驗(yàn)的執(zhí)行校驗(yàn)的執(zhí)行 儀器只要不報(bào)廢，維修記錄均應(yīng)保存。儀器只要不報(bào)廢，維修記錄均應(yīng)保存。 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)預(yù)先制定儀器校驗(yàn)計(jì)劃，并按計(jì)劃實(shí)驗(yàn)室應(yīng)預(yù)先制定儀器校驗(yàn)計(jì)劃，并按計(jì)劃對(duì)需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備經(jīng)符合資歷對(duì)需要強(qiáng)制性定期檢定的儀器和設(shè)備經(jīng)符合資歷計(jì)量

36、部門校驗(yàn)，根據(jù)校驗(yàn)結(jié)果決定對(duì)儀器設(shè)備繼計(jì)量部門校驗(yàn)，根據(jù)校驗(yàn)結(jié)果決定對(duì)儀器設(shè)備繼續(xù)使用、降級(jí)使用或停止使用。續(xù)使用、降級(jí)使用或停止使用。 8 8 校驗(yàn)的執(zhí)行校驗(yàn)的執(zhí)行 實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)需要對(duì)部分儀器進(jìn)行自校以實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)需要對(duì)部分儀器進(jìn)行自校以節(jié)約成本，但用于自校的計(jì)量工具必須經(jīng)過(guò)計(jì)節(jié)約成本，但用于自校的計(jì)量工具必須經(jīng)過(guò)計(jì)量部門校準(zhǔn)方可使用。量部門校準(zhǔn)方可使用。 9 9 標(biāo)準(zhǔn)菌株及其保存標(biāo)準(zhǔn)菌株及其保存 標(biāo)準(zhǔn)菌株可以從國(guó)際菌種保藏中心標(biāo)準(zhǔn)菌株可以從國(guó)際菌種保藏中心（ATCCATCC）、國(guó)內(nèi)具有資質(zhì)菌種保藏中心（、國(guó)內(nèi)具有資質(zhì)菌種保藏中心（CMCCCMCC、ASAS、MIGMIG等等）等等）或室間質(zhì)

37、控活動(dòng)中獲得，準(zhǔn)確鑒或室間質(zhì)控活動(dòng)中獲得，準(zhǔn)確鑒定過(guò)的分離株也可使用。定過(guò)的分離株也可使用。 實(shí)驗(yàn)室要準(zhǔn)備好足夠種類和數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)菌實(shí)驗(yàn)室要準(zhǔn)備好足夠種類和數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)菌株，滿足培養(yǎng)基、試劑盒和試劑質(zhì)量測(cè)試的需株，滿足培養(yǎng)基、試劑盒和試劑質(zhì)量測(cè)試的需要。要。 標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存 保存菌株要定期傳代，注意無(wú)菌操作，使菌保存菌株要定期傳代，注意無(wú)菌操作，使菌株不污染、不死亡、不丟失；株不污染、不死亡、不丟失； 應(yīng)設(shè)專人妥善保管，菌株保存箱應(yīng)加鎖放置應(yīng)設(shè)專人妥善保管，菌株保存箱應(yīng)加鎖放置適宜環(huán)境，取出使用應(yīng)登記；適宜環(huán)境，取出使用應(yīng)登記；標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存 保存菌株應(yīng)建冊(cè)登記，基本項(xiàng)

38、目應(yīng)包括保存菌株應(yīng)建冊(cè)登記，基本項(xiàng)目應(yīng)包括菌種名稱、分離來(lái)源、分離日期、傳代日期、菌種名稱、分離來(lái)源、分離日期、傳代日期、保存方法、主要性狀、保管者、領(lǐng)用者等；保存方法、主要性狀、保管者、領(lǐng)用者等； 對(duì)保存菌種，經(jīng)傳代數(shù)次后應(yīng)進(jìn)行一次系對(duì)保存菌種，經(jīng)傳代數(shù)次后應(yīng)進(jìn)行一次系統(tǒng)生化反應(yīng)、血清學(xué)特性等生物學(xué)性狀觀察，統(tǒng)生化反應(yīng)、血清學(xué)特性等生物學(xué)性狀觀察，檢查其是否發(fā)生變異。檢查其是否發(fā)生變異。標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存 常見(jiàn)的參考菌株保存方法如下：常見(jiàn)的參考菌株保存方法如下： 細(xì)菌細(xì)菌 (1)(1)營(yíng)養(yǎng)要求不高的需氧細(xì)菌在胰胨大豆瓊脂斜面上營(yíng)養(yǎng)要求不高的需氧細(xì)菌在胰胨大豆瓊脂斜面上能存活能存活1

39、 1年。年。 (2)(2)需氧或厭氧菌的長(zhǎng)期儲(chǔ)存需冷凍干燥，或存放在需氧或厭氧菌的長(zhǎng)期儲(chǔ)存需冷凍干燥，或存放在-70-70冰箱。冰箱。 (3)(3)營(yíng)養(yǎng)要求不高的凍干菌種每隔營(yíng)養(yǎng)要求不高的凍干菌種每隔5 5年要解凍分離重年要解凍分離重新凍干，好氧菌每隔新凍干，好氧菌每隔3 3年重新凍干。年重新凍干。 (4)(4)細(xì)菌低溫冰凍保存時(shí)可懸浮于消毒去脂牛奶、含細(xì)菌低溫冰凍保存時(shí)可懸浮于消毒去脂牛奶、含15%15%甘油的胰胨大豆肉湯或無(wú)菌馬血中。甘油的胰胨大豆肉湯或無(wú)菌馬血中。 真菌真菌(1)(1)酵母菌按營(yíng)養(yǎng)要求不高的細(xì)菌同樣處理。酵母菌按營(yíng)養(yǎng)要求不高的細(xì)菌同樣處理。(2)(2)霉菌在馬鈴薯葡萄糖瓊

40、脂（霉菌在馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDAPDA）斜面上，于）斜面上，于44儲(chǔ)存可達(dá)儲(chǔ)存可達(dá)6 6個(gè)月，斜面上覆蓋消毒石蠟油可個(gè)月，斜面上覆蓋消毒石蠟油可在室溫下較長(zhǎng)時(shí)間存放。在室溫下較長(zhǎng)時(shí)間存放。 10 10 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制 10.1 10.1 內(nèi)部質(zhì)量控制內(nèi)部質(zhì)量控制 為保證實(shí)驗(yàn)室連續(xù)評(píng)價(jià)結(jié)果的可靠性和精密度，為保證實(shí)驗(yàn)室連續(xù)評(píng)價(jià)結(jié)果的可靠性和精密度，必須對(duì)所用方法的重復(fù)性及再現(xiàn)性定期測(cè)定。必須對(duì)所用方法的重復(fù)性及再現(xiàn)性定期測(cè)定。 對(duì)于不同的控制系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室必須建立限值，對(duì)于不同的控制系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室必須建立限值，超過(guò)限值應(yīng)采取糾偏措施。超過(guò)限值應(yīng)采取糾偏措施。 10.1 1

41、0.1 內(nèi)部質(zhì)量控制內(nèi)部質(zhì)量控制 實(shí)踐中內(nèi)部質(zhì)量控制可包括：實(shí)踐中內(nèi)部質(zhì)量控制可包括： （1 1）系統(tǒng)地使用一式雙份的菌落計(jì)數(shù)測(cè)定；）系統(tǒng)地使用一式雙份的菌落計(jì)數(shù)測(cè)定； （2 2）由同一檢驗(yàn)人員和幾個(gè)檢驗(yàn)人員作平）由同一檢驗(yàn)人員和幾個(gè)檢驗(yàn)人員作平 行樣；行樣； （3 3）定期或不定期進(jìn)行盲樣測(cè)試。）定期或不定期進(jìn)行盲樣測(cè)試。 （實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部比對(duì)試驗(yàn)）（實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部比對(duì)試驗(yàn)） 10.210.2外部質(zhì)量控制外部質(zhì)量控制 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng)，對(duì)其開(kāi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動(dòng)，對(duì)其開(kāi)展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。展的每一項(xiàng)檢測(cè)均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。（實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)）（實(shí)驗(yàn)室

42、間比對(duì)） 對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室或管理機(jī)構(gòu)發(fā)出的測(cè)試樣品應(yīng)對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室或管理機(jī)構(gòu)發(fā)出的測(cè)試樣品應(yīng)嚴(yán)格地當(dāng)作普通樣品一樣處理，這樣一種方法嚴(yán)格地當(dāng)作普通樣品一樣處理，這樣一種方法有助于實(shí)驗(yàn)室每天測(cè)試的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，是有助于實(shí)驗(yàn)室每天測(cè)試的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，是對(duì)實(shí)驗(yàn)室所用的方法、試劑、設(shè)備和人員能力對(duì)實(shí)驗(yàn)室所用的方法、試劑、設(shè)備和人員能力的測(cè)試。的測(cè)試。 實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證 （CNASCNAS、CNCACNCA、CMACMA等組織的比對(duì)試驗(yàn)）等組織的比對(duì)試驗(yàn)） 10 10 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外部質(zhì)量控制 從室間樣品測(cè)試中的錯(cuò)誤可以發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的從室間樣品測(cè)試中的錯(cuò)誤可以發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的不足之處，對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)、教育，可以提不足之處，對(duì)工作人員進(jìn)行培訓(xùn)、教育，可以提高實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量。高實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)質(zhì)量。 對(duì)反饋的室間測(cè)定評(píng)級(jí)中存在的問(wèn)