酶工程各章試題

1、酶工程第一章測試試題卷一 填空 (每空1分,共20分)1. 1878年,_首次將酵母中酒精發(fā)酵的物質稱為酶.2. 1913年,Michaelis 和Menten根據(jù)中間產(chǎn)物學說,推導出酶催化反應的基本動力學方程-米氏方程,可用公式表示為_.3. 1982年Thomas Cech等人發(fā)現(xiàn)四膜蟲的rRNA可以在沒有蛋白質存在的情況下自身催化切除內(nèi)含子,完成加工過程.這一具有催化活性的RNA的發(fā)現(xiàn)改變了傳統(tǒng)的酶的化學本質是_的概念。4. 對同一種酶可同時采用系統(tǒng)命名和_命名兩種方法.5. 乳酸脫氫酶可標識為EC1.1.1.2,其中EC代表_.6. 催化L-谷氨酸 D谷氨酸的酶屬于_酶.7. 核酸類酶

2、的基本組成單位是_.8. 酶的有機輔助因子在催化過程中起_的作用.9. 在酶的二級結構片狀折疊中,_式結構更穩(wěn)定.10. 酶的絕對專一性又稱為_專一性.11. PH對酶的影響主要是影響到了氨基酸的_狀態(tài).12. 在測酶活力時,為了使酶反應速度不受底物濃度底限制,反應系統(tǒng)應使用足夠高的底物濃度,一般要求:_.13. 酶分離純化整個工作包括三個基本環(huán)節(jié):抽取 純化和_.14. 工業(yè)應用的三大酶制劑是蛋白酶 _和脂肪酶.15 核酸類酶催化反應的類型,可以將R-酶分為三類:剪切酶,剪接酶和_酶.16、具有不同分子形式但卻催化相同反應的酶稱為_.17、每毫克蛋白或RNA中所具有的酶活力數(shù)稱為酶的_.用u

3、/mg表示.18、酶制劑可分為液體酶制劑,固體酶制劑,純酶制劑和_酶制劑.二. 選擇題 (每題2分,共10分)1. 谷氨酸脫氫酶可有以下四種底物,由Km推斷它的最適底物是( ).A. 谷氨酸Km= 0.12 B. -酮戊二酸Km=2.0 C. NAD氧化形 Km=0.025 D. NAD 還原形 Km=0.0182. D EA B C F G圖示抑制模式屬于:()A累積反饋抑制無分支途徑中酶活性反饋抑制C 順序反饋抑制 D 協(xié)調(diào)反饋抑制3有A.B兩種蛋白酶樣品,A樣品32mg,酶活力單位數(shù)為180U.B樣品52mg ,酶活力單位數(shù)為190U,則兩樣品純度為:A A > B B. A &l

4、t; B C. A = B D. 不能斷定.4某酶四種底物的Km 如下,與酶親和力最大的底物是: ( )A 2.5 ×10-2 B 4.4× 10-1 C 8.8×10-2 D 5.0×10-65從世界范圍看,酶制劑在哪一行業(yè)中的應用占比例最高?( )A 淀粉業(yè) B 乳制品 C 洗滌劑業(yè) D 制酒業(yè)三. 名詞解釋 (每題3分,共12分)1. 調(diào)節(jié)酶 2.別構效應 3.固定化酶 四. 判斷題(每題1分,共7分)2. 1/Km越大,酶與底物親和力越大.3. 酶的最適溫度是一個固定不變的常數(shù),其數(shù)值不受底物的種類.作用時間而改變.4. 鹽析法分離蛋白質時,應將

5、溶液PH調(diào)至蛋白質等電點附近.5. 酶濃度越高,酶結晶越大.6. 調(diào)節(jié)酶就是別構酶.7. 大腸桿菌丙酮酸脫氫酶是多酶復合體.五. 說明題(共6分)1. 圖示并說明競爭性抑制和非競爭性抑制的區(qū)別.(6分)六. 簡答題 (共21分)1. 簡介酶分子中氨基酸殘基種類及作用.(8分)2請比較說明吸附層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層析的原理.(8分)3、固定化酶的制備原則是什么?(5分)酶工程第一章 測試參考答案一 填空 (每空1分,共18分)1.庫尼 2.v=vmaxS/Km+S 3.酶是具有生物催化功能的蛋白質.4.習慣 5.國際酶學委員會 6.異構酶7.核糖核苷酸8.傳遞電子原子和基團的作用.

6、9.反平行 10.立體異構11.解離 12.S>5Km 13.制劑. 14淀粉酶 15多功能酶16同工酶 17酶的比活力.18固定化酶制劑二. 選擇題 (每題3分,共15分)1.D 2.D 3.A. 4D 5.C三. 名詞解釋 (每題5分,共15分)1. 調(diào)節(jié)酶: 在代謝途徑和物質轉化體系中起調(diào)節(jié)作用的關鍵酶. 2. 別構效應:一種化合物與酶的活性中心以外的部位結合,引起酶的構象發(fā)生變化的現(xiàn)象. 3. 固定化酶:在一定空間內(nèi)呈閉鎖狀態(tài)存在的酶,能連續(xù)地進行反應,反應后酶可以回收重復使用.四. 判斷題(每題2分,共14分)1. 正確 2.錯誤 3. 正確 4. 錯誤 5. 錯誤 6. 正確

7、 7. 正確五、圖示說明題(共12分)2. 圖示并說明競爭性抑制和非競爭性抑制的區(qū)別.(6分)競爭性抑制劑結構往往與正常底物非常相似,從而與底物競爭酶分子上同一個結合部位(活性中心),阻止底物和酶的結合.因而酶不能與抑制劑和底物同時結合.ESI復合物缺乏反應活性基團不能繼續(xù)分解成產(chǎn)物,形成死端復合物.(圖4分,解釋2分)不論底物分子是否與酶結合, 非競爭性抑制劑都能與酶分子結合產(chǎn)生死端復合物. 非競爭性抑制劑與活性中心以外的基團結合,其結構肯與底物分子毫無相關之處,兩者沒有競爭作用,但ESI不能進一步分解成產(chǎn)物. (圖4分,解釋2分)七. 簡答題 (共26分)1. 請比較說明吸附層析、離子交換

8、層析、凝膠層析、親和層析分離酶的原理.(16分)層析類型原理吸附層析利用吸附劑對不同物質的吸附力不同而使混合物各組分分離離子交換層析利用離子交換劑上的可解離基團對各種離子的親和力不同而達到分離目的.凝膠層析是以各種多孔凝膠位固定相,利用溶液中各組分的相對分子質量不同而進行分離的技術.親和層析利用生物分子與培基之間所具有的專一而又可逆的親和力使酶等生物大分子分離純化.2. 固定化酶的制備原則是什么?(10分)(1)維持酶的催化活性和專一性.(2)應有利于生產(chǎn)自動化.連續(xù)化.(3)與載體牢固結合(4)載體不與底物.產(chǎn)物和反應物發(fā)生化學反應.(5)成本要低,利于工業(yè)使用.第二、 三章 酶的生物合成法

9、生產(chǎn) 測試題填空題1、SOD是_酶，具有_的功效。2、依據(jù)在體外培養(yǎng)時對生長基質依賴性差異，動物細胞可分為兩類：_、_。3、動物細胞培養(yǎng)的PH應控制在_；溫度控制在_,允許波動_。判斷題谷草芽孢桿菌是應用最廣泛的產(chǎn)酶微生物。大多數(shù)產(chǎn)酶微生物采用淀粉或其水解產(chǎn)物為碳源,植物細胞一般以蔗糖為碳源。植物細胞培養(yǎng)要求的氮源一般為有機氮源。×動物細胞培養(yǎng)主要用于各種功能蛋白質的生產(chǎn)。動物細胞傳代培養(yǎng)時可以用胃蛋白酶分散細胞。×簡答題：1、固定化原生質體產(chǎn)酶有何特點？2、植物細胞培養(yǎng)產(chǎn)酶的工藝流程？3、酶的生物合成有哪幾種模式？各有何特點？P36-384、影響酶生物合成的主要因素有哪些

10、？結合酶的生物合成模式，分析說明怎樣提高產(chǎn)酶效率。P39答案：填空題1、抗輻射、抗氧化、抗衰老 2、貼壁依賴型細胞，非貼壁依賴型細胞 3、7.07.4 微堿性，36.5 ，允許波動范圍在0.25簡答題1、(1)、變胞內(nèi)產(chǎn)物為胞外產(chǎn)物 固定化黑曲霉原生質體生產(chǎn)葡萄糖氧化酶，使細胞內(nèi)葡萄糖氧化酶的90以上分泌到細胞外。(2)、提高產(chǎn)酶率 固定化枯草芽孢桿菌原生質體生產(chǎn)堿性磷酸酶，使原來存在于細胞間質中的堿性磷酸酶全部分泌到發(fā)酵液中，產(chǎn)酶率提高36。(3)、穩(wěn)定性好(4)、易于分離純化2、外植體 誘導愈傷組織 細胞培養(yǎng) 分離純化 酶第四章 酶的提取與分離純化 測試題填空題1、酶在結晶之前，酶液必須經(jīng)

11、過純化達到一定的純度。通常酶的純度應當在_以上，方能進行結晶。2、酶結晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的劑型有：_、_、_和固定化酶制劑；通常用作分析試劑或用作醫(yī)療藥物的酶制劑要求是_。4、注射用的醫(yī)用酶應設法除去_。判斷題1、一般采用稀鹽溶液進行酶的提取，鹽的濃度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸銨鹽析沉淀酶蛋白。3、鹽析沉淀酶蛋白時，溶液的pH值應調(diào)節(jié)到遠離酶的等電點。×4、等電點結晶是通過緩慢改變濃酶液的pH值，使之逐漸遠離酶的等電點，而使酶析出結晶的過程。×名詞解釋：1、選擇性變性沉淀法 2、酶的提取3、親和層析簡答題：1、酶的分離純化工作的基

12、本原則？2、舉例說明細胞破碎的幾種方法及原理。 3、穩(wěn)定酶的方法有哪些？答案：填空題1、50。2、鹽析結晶法、有機溶劑結晶法、透析平衡結晶法、等電點結晶法。3、固體酶制劑、液體酶制劑、純酶制劑、固定化酶制劑；純酶制劑。4、熱源物質名詞解釋1、選擇性變性沉淀法：選擇一定的條件使酶液中存在的某些雜蛋白等雜質變性沉淀，而不影響所需的酶，這種分離方法稱為選擇性變性沉淀法2、酶的提取是指在一定的條件下，用適當?shù)娜軇┨幚砗冈希姑赋浞秩芙獾饺軇┲械倪^程，也稱為酶的抽提。3、親和層析是利用生物分子與配基之間所具有的專一而又可逆的親和力，使酶等生物分子分離純化的技術。簡答題1、（1）、防止酶變性失效 凡用

13、于預防蛋白質變性失效的方法與措施都應考慮用于酶的分離純化。A、除少數(shù)例外外，所有操作都必須在低溫條件下進行，特別是在有機溶劑存在的情況下更應小心。B、大多數(shù)酶在PH<4或PH>10的情況下穩(wěn)定，應控制整個系統(tǒng)不要過酸、過堿，同時要避免在調(diào)整PH時局部過酸或過堿。C、重金屬能使酶失效，有機溶劑能使酶變性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破壞，所有這些都應周全考慮。可以加入蛋白酶抑止劑，殺菌劑，穩(wěn)定蛋白質構象和酶活性的還原劑。（2）、酶活性測定貫串純化過程的始終也就是說，從原理開始，整個過程的每一步都要進行比活力與總活力的檢測與比較，以便知道每一步驟中可采用什么方法與什么條件，分

14、別使酶的純度提高了多少，回收了多少酶，從而決定其取舍。（3）、選擇有效的純化方法凡用于蛋白質純化的一切方法同樣適用于酶。應根據(jù)目的酶的物理、化學性質選取。（4）、原料來源要方便，成本要低2、舉例說明細胞破碎的幾種方法及原理 方法舉例原理酶降解溶菌酶處理細菌消化細胞壁化學破碎甲苯抽提酵母化學溶解細胞壁細胞溶解紅細胞滲透破碎細胞膜手動勻漿器肝組織迫使細胞通過窄縫撕開細胞膜超聲波細胞懸浮液破壞細胞膜3、穩(wěn)定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止劑和輔酶（2）、添加SH保護劑 如谷胱甘肽、二巰基乙醇（3）、低溫（04）（4）、添加某些低分子無機離子 Ca2保護淀粉酶，Mn2+能穩(wěn)定溶菌酶，CL能穩(wěn)定透明質

15、酸酶等（5）、固體酶制劑穩(wěn)定性高 可保存數(shù)月或幾年以上；熱敏性酶多用冷凍干燥法，例如注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的穩(wěn)定性的好方法。第四章 酶的提取與分離純化 測試題填空題1、酶在結晶之前，酶液必須經(jīng)過純化達到一定的純度。通常酶的純度應當在_以上，方能進行結晶。2、酶結晶的主要方法有：_、_、_、_。3、酶的劑型有：_、_、_和固定化酶制劑；通常用作分析試劑或用作醫(yī)療藥物的酶制劑要求是_。4、注射用的醫(yī)用酶應設法除去_。判斷題1、一般采用稀鹽溶液進行酶的提取，鹽的濃度一般控制在0.020.5 molL 。2、常用硫酸銨鹽析沉淀酶蛋白。3、鹽析沉淀酶蛋白時，溶液的pH值應調(diào)節(jié)到遠離酶的等

16、電點。×4、等電點結晶是通過緩慢改變濃酶液的pH值，使之逐漸遠離酶的等電點，而使酶析出結晶的過程。×名詞解釋：1、選擇性變性沉淀法 2、酶的提取3、親和層析簡答題：1、酶的分離純化工作的基本原則？2、舉例說明細胞破碎的幾種方法及原理。 3、穩(wěn)定酶的方法有哪些？答案：填空題1、50。2、鹽析結晶法、有機溶劑結晶法、透析平衡結晶法、等電點結晶法。3、固體酶制劑、液體酶制劑、純酶制劑、固定化酶制劑；純酶制劑。4、熱源物質名詞解釋1、選擇性變性沉淀法：選擇一定的條件使酶液中存在的某些雜蛋白等雜質變性沉淀，而不影響所需的酶，這種分離方法稱為選擇性變性沉淀法2、酶的提取是指在一定的條件

17、下，用適當?shù)娜軇┨幚砗冈?，使酶充分溶解到溶劑中的過程，也稱為酶的抽提。3、親和層析是利用生物分子與配基之間所具有的專一而又可逆的親和力，使酶等生物分子分離純化的技術。簡答題1、（1）、防止酶變性失效 凡用于預防蛋白質變性失效的方法與措施都應考慮用于酶的分離純化。A、除少數(shù)例外外，所有操作都必須在低溫條件下進行，特別是在有機溶劑存在的情況下更應小心。B、大多數(shù)酶在PH<4或PH>10的情況下穩(wěn)定，應控制整個系統(tǒng)不要過酸、過堿，同時要避免在調(diào)整PH時局部過酸或過堿。C、重金屬能使酶失效，有機溶劑能使酶變性，微生物污染以及蛋白酶的存在都能使酶分解破壞，所有這些都應周全考慮?？梢约尤氲?/p>

18、白酶抑止劑，殺菌劑，穩(wěn)定蛋白質構象和酶活性的還原劑。（2）、酶活性測定貫串純化過程的始終也就是說，從原理開始，整個過程的每一步都要進行比活力與總活力的檢測與比較，以便知道每一步驟中可采用什么方法與什么條件，分別使酶的純度提高了多少，回收了多少酶，從而決定其取舍。（3）、選擇有效的純化方法凡用于蛋白質純化的一切方法同樣適用于酶。應根據(jù)目的酶的物理、化學性質選取。（4）、原料來源要方便，成本要低2、舉例說明細胞破碎的幾種方法及原理 方法舉例原理酶降解溶菌酶處理細菌消化細胞壁化學破碎甲苯抽提酵母化學溶解細胞壁細胞溶解紅細胞滲透破碎細胞膜手動勻漿器肝組織迫使細胞通過窄縫撕開細胞膜超聲波細胞懸浮液破壞細

19、胞膜3、穩(wěn)定酶的某些方法（1）、添加底物、抑止劑和輔酶（2）、添加SH保護劑 如谷胱甘肽、二巰基乙醇（3）、低溫（04）（4）、添加某些低分子無機離子 Ca2保護淀粉酶，Mn2+能穩(wěn)定溶菌酶，CL能穩(wěn)定透明質酸酶等（5）、固體酶制劑穩(wěn)定性高 可保存數(shù)月或幾年以上；熱敏性酶多用冷凍干燥法，例如注射用酶等。（6）、固定化酶也是提高酶的穩(wěn)定性的好方法。第五章 酶分子的修飾與應用 測試題填空題1、酶分子修飾的意義是：_,_,_。名詞解釋1、酶分子修飾通過各種方法使酶分子的結構發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的過程稱為酶分子修飾。2、金屬離子置換修飾3、酶分子的物理修飾簡答題：1、什么是酶分子的

20、側鏈修飾？酶分子側鏈修飾有何意義？2、請舉例說明酶分子修飾的應用答案填空題：1、提高酶的活力；增強酶的穩(wěn)定性；降低或消除酶的抗原性。名詞解釋1、酶分子修飾：通過各種方法使酶分子的結構發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的過程稱為酶分子修飾。2、把酶分子中的金屬離子換成另一種金屬離子，使酶的功能和特性發(fā)生改變的修飾方法稱為金屬離子置換修飾。3、通過各種物理方法使酶分子的空間構象發(fā)生某些改變，從而改變酶的某些特性和功能的方法稱為酶分子的物理修飾。簡答題1、采用一定的方法（一般為化學法）使酶的側鏈基團發(fā)生改變，從而酶分子的特性和功能的修飾方法稱為側鏈基團修飾。意義：（1）、通過酶分子側鏈基團修飾

21、，可以研究各種基團在酶分子中的作用及其對酶的結構、特性和功能的影響，并可以用于研究酶的活性中心的必須基團。如果某基團修飾后不引起酶活力的顯著變化，則可以認為此基團屬于非必須基團。（2）、通過酶分子側鏈基團修飾，可以測定某一種基團在酶分子中的數(shù)量，例如，采用三硝基苯磺酸測定氨基的數(shù)量；用對汞苯甲酸測定巰基的數(shù)量；用碳二亞胺測定羧基的數(shù)量；用四唑重氮鹽測定咪唑基的數(shù)量等。（3）、酶分子側鏈基團修飾，在酶工程方面可以提高酶的活力、增加酶的穩(wěn)定性、降低酶的抗原性，并且可以引起酶催化特性和催化功能的改變，以提高酶的使用價值。（4）、酶分子側鏈基團修飾，還可以獲得自然界原來不存在的新酶種，例如，某些抗體酶

22、和人工改造的核酸類酶。第六章 酶、細胞、原生質體固定化與應用測試題填空題1、固定化酶的制備方法主要有：_、_、_、_。2、 交聯(lián)法常用的雙功能試劑是：_。判斷題1、酶經(jīng)固定化后，其作用的最適pH值往往會發(fā)生一些變化。2、固定化酶的最適作用溫度與游離酶相比沒有變化。×3、一般來說，用帶負電荷的載體制備的固定化酶，其最適pH值比游離酶的最適pH值為高（即向堿性一側移動）；用帶正電荷載體制備的固定化酶的最適pH值比游離酶的最適PH為低（即向酸性一側移動）4、一般說來，催化反應的產(chǎn)物為酸性時，固定化酶的最適pH值要比游高酶的最適PH低一些；產(chǎn)物為堿性時，固定化酶的最適pH值要比游離酶的最適p

23、H值高一些。×5、固定化酶的底物特異性變化與底物分子量的大小有一定關系。名詞解釋1、交聯(lián)法2、載體活化3、固定化細胞。簡答題1、 什么是固定化酶？有何顯著優(yōu)點？2、 請舉例說明固定化（酶、細胞、原生質體）技術的應用答案填空題1、吸附法、包埋法、結合法、交聯(lián)法和熱處理法等。名詞解釋1、交聯(lián)法：借助雙功能試劑使酶分子之間發(fā)生交聯(lián)作用，制成網(wǎng)狀結構的固定化酶的方法稱為交聯(lián)法。2、載體活化：要使載體與酶形成共價鍵對酶進行固定化，必須首先使載體活化，即借助于某種方法，在載體上引進一活潑基團。然后此活潑基團再與酶分子上的某一基團反應，形成共價鍵。3、固定在載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進行生命活動的

24、細胞稱為固定化細胞。簡答題1、什么是固定化酶？有何顯著優(yōu)點？固定化酶是指固定在一定載體上并在一定的空間范圍內(nèi)進行催化反應的酶。固定化酶既保持了酶的催化特性，又克服了游離酶的不足之處，具有增加穩(wěn)定性、可反復或連續(xù)使用以及易于和反應產(chǎn)物分開等顯著優(yōu)點。2、略第七章 酶非水相催化 測試題判斷題1、有機溶劑往往會使酶變性失活，因此只有在水溶液中酶才有催化活性。2、在有機介質中，由于酶分子活性中心的結合部位與底物之間的結合狀態(tài)發(fā)生某些變化，致使酶的底物特異性發(fā)生改變。3、許多酶在有機介質中的熱穩(wěn)定性比在水溶液中的熱穩(wěn)定性更好。4、目前世界上化學合成藥物中的40左右屬于手性藥物。在這些手性藥物中，大多數(shù)仍

25、然以外消旋體形式使用。5、常用的消炎解熱鎮(zhèn)痛藥萘普生(Neproxen)的兩種對映體中，S (+)-萘普生的療效是R-()-萘普生療效的28倍。6、鎮(zhèn)靜劑反應停的S-構型有鎮(zhèn)靜作用，R-構型也有鎮(zhèn)靜作用，但療效甚微。7、一些消旋體藥物可以在有機介質體系中用酶法進行拆分，獲得單一對映體。 名詞解釋1、酶的對映體選擇性2、手性化合物第八章 酶定向進化 復習題一、填空題：酶基因隨機突變的方法有：_、_、_。二、名詞解釋：酶定向進化 易錯PCR技術三、簡答題：1酶定向進化的特點？ 2.酶隨機突變的三種方法是什么？請解釋并比較分析。3.舉例說明酶定向進化技術的應用。第九章 酶反應器 復習題各種酶反應器及

26、其特點反應器類型適用的操作方式適用的酶特點攪拌罐式反應器分批式,流加分批式連續(xù)式,游離酶固定化酶反應比較完全，反應條件容易調(diào)節(jié)控制。填充床式反應器連續(xù)式固定化酶密度大，可以提高酶催化反應的速度。在工業(yè)生產(chǎn)中普遍使用。流化床反應器分批式流加分批式連續(xù)式固定化酶流化床反應器具有混合均勻，傳質和傳熱效果好，溫度和pH值的調(diào)節(jié)控制比較容易，不易堵塞，對粘度較大反應液也可進行催化反應。鼓泡式反應器分批式流加分批式連續(xù)式游離酶固定化酶鼓泡式反應器的結構簡單，操作容易，剪切力小，混合效果好，傳質、傳熱效率高,適合于有氣體參與的反應。膜反應器連續(xù)式游離酶固定化酶清洗比較困難 噴射式反應器連續(xù)式游離酶通入高壓噴

27、射蒸汽，實現(xiàn)酶與底物的混合，進行高溫短時催化反應，適用于某些耐高溫酶的反應簡答題：P240復習題1、2、5第十章 1 酶在醫(yī)藥方面的應用 測試題一、 填空題1、指示肝功能異常的常用酶有：_、_、_。2、_酶可以檢測癌細胞。3、治療消化不良、食欲不振的酶有：_、_、_。4、具有抗癌作用的酶有：_、_、_、_。5、_酶可以治療各種出血。6、_酶可以治療齲齒。7、_酶可以溶血栓。8、_酶可以治療白血病。9、_酶用于制造抗腫瘤人參皂苷。10、_酶可用于制造人胰島素。二、判斷題1、乳酸脫氫酶廣泛存在于各種組織以及紅細胞中，在正常情況下，血清中乳酸脫氫酶的含量很低，但是在肝癌、急性肝炎、心肌梗塞等疾病的患

28、者血清中，該酶活力顯著升高。2、蛋白酶可用于治療多種疾病，是在臨床上使用最早、用途最廣的藥用酶之一，它可作為消化劑、消炎劑并可用于治療高血壓。三、請寫出以下藥品的酶法生產(chǎn)反應式6氨基青霉烷酸（6-APA）多巴四、分析說明題1、 請分析說明尿糖試紙檢測尿糖的原理2、 繪圖并說明血液透析裝置及裝置中酶法除去尿素的原理。3、 舉兩例分析說明酶在藥物制造方面的應用價值。4、 請分析說明溶菌酶的應用價值5、 請分析說明SOD的應用價值答案 填空題1、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、膽堿酯酶2、端粒酶3、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶4、L-精氨酸酶、L-組氨酸酶、L蛋氨酸酶、谷氨酰胺酶5、凝血酶 6、右旋糖酐酶 7、溶

29、纖酶 8、L- 天冬酰胺酶 9、D葡萄糖苷酶 10、無色桿菌蛋白酶請寫出以下藥品的酶法生產(chǎn)反應式1、6氨基青霉烷酸（6-APA）青霉素 青霉素?；?6氨基青霉烷酸（6-APA）2、多巴酪氨酸 酪氨酸酶 多巴鄰苯二酚丙酮酸氨 酪氨酸酶 多巴分析說明題4、溶菌酶主要從蛋清、植物和微生物中分離得到。作用機理：溶菌酶作用于細菌的細胞壁，可使病原菌、腐敗性細菌等溶解消滅，對抗生素有耐藥性的細菌同樣起溶菌作用，具有顯著療效而對人體的副作用很小，是一種較為理想的藥用酶。應用價值：臨床上主要用于治療各種炎癥，溶菌酶與抗生素聯(lián)合使用，可顯著提高抗生素的療效，常用于難治的感染病癥的治療；還可用于食品保鮮；在護膚

30、品中添加可以消除皮膚表面黏附的細菌，起到殺菌消炎的作用。5、SOD即超氧化物歧化酶，具有抗氧化、抗衰老、抗輻射的功效，添加到護膚品中可以有效防治紫外線對人體的傷害，消除自由基的影響，減少色素沉著。在醫(yī)療領域，用于預防輻射損傷，治療紅斑狼瘡，皮肌炎，結腸炎，氧中毒。第十章 2 酶在食品方面的應用測試題 填空題1、_酶和_酶可用于食品保鮮。2、_酶可將蔗糖原料中的棉子糖分解成蔗糖與半乳糖，提高蔗糖的收得率。3、果膠酶(pectinase)是催化果膠質分解的一類酶的總稱，主要包括_和_。4、_酶可用于呈味核苷酸的酶法生產(chǎn)。判斷題1、糊精是淀粉低程度水解的產(chǎn)物，廣泛應用于食品增稠劑、填充劑和吸收劑。2

31、、寫出以下產(chǎn)品酶法生產(chǎn)的反應式1、L氨基酸的生產(chǎn)2、低乳糖奶的生產(chǎn)3、L-蘋果酸的生產(chǎn)4、天苯肽的酶法生產(chǎn)寫出以下工藝過程酶法處理的反應式1、柑橘制品脫苦處理2、果蔬制品的脫色簡答題1、請分析說明果葡糖漿生產(chǎn)的工藝流程及條件控制2、請分析說明右旋糖酐酶的應用價值3、請分析說明酶在啤酒發(fā)酵生產(chǎn)中的應用答案填空題1、葡萄糖氧化酶，溶菌酶2、蜜二糖酶（半乳糖苷酶）3、果膠酯酶(PE)，聚半乳糖醛酸酶(PG) 4、5，磷酸二酯酶寫出以下產(chǎn)品酶法生產(chǎn)的反應式1、 L氨基酸的生產(chǎn)N?；鵇L氨基酸 氨基酰化酶 L氨基酸蛋白質 蛋白酶 L氨基酸延胡索酸氨 天冬氨酸酶 L天冬氨酸酮戊二酸NH3NAD(P)H谷氨

32、酸脫氫酶 L谷氨酸+H2ONAD(P)+a-酮戊二酸+L-氨基酸 轉氨酶 L-谷氨酸+-酮酸2、低乳糖奶的生產(chǎn)乳糖 乳糖酶（半乳糖苷酶）半乳糖葡萄糖3、L-蘋果酸 的生產(chǎn)延胡索酸水 延胡索酸酶 L蘋果酸 4、天苯肽的酶法生產(chǎn)L-Asp +L-Phe-Ome嗜熱菌蛋白酶L-Asp-L-Phe-Ome (L-天冬氨酸) (L-苯丙氨酸甲酯) (天苯肽)寫出以下工藝過程酶法處理的反應式1、柑橘制品脫苦處理柚苷（柚配質7蕓香糖苷）柚苷酶（鼠李糖苷酶）鼠李糖無苦味的普魯寧(柚配質一7一葡萄糖苷)2、果蔬制品的脫色花青素 花青素酶 葡萄糖和它的配基簡答題1、請分析說明果葡糖漿生產(chǎn)的工藝流程及條件控制工藝流

33、程：淀粉漿a-淀粉酶，Ca2，8090 液化液 糖化酶 葡萄糖（DE>96）層析去Ca2，pH值為6570，加入001 molL的硫酸鎂，在6070的溫度條件下，葡萄糖異構酶 果葡糖漿。控制條件：（1）、鈣離子對a-淀粉酶有保護作用，在淀粉液化時需要添加，但它對葡萄糖異構酶卻有抑制作用，所以葡萄糖溶液需用層析等方法精制。（2）、控制PH 葡萄糖異構酶(glucose isomerase，EC 5.3.1.5)的最適pH值，根據(jù)其來源不同而有所差別。一般放線菌產(chǎn)生的葡萄糖異構酶，其最適PH值在6.58.5的范圍內(nèi)。但在堿性范圍內(nèi)，葡萄糖容易分解而使糖漿的色澤加深，為此，生產(chǎn)時pH值一般控制

34、在6.57.0。（3）、控制溫度葡萄糖轉化為果糖的異構化反應是吸熱反應。隨著反應溫度的升高，反應平衡向有利于生成糖的方向變化，異構化反應的溫度越高，平衡時混合糖液中果糖的含量也越高。但當溫度超過70時，葡萄糖異構酶容易變性失活，所以異構化反應的溫度以6070為宜。2、請分析說明右旋糖酐酶的應用價值制糖設備中存在大分子黏性葡聚糖，堵塞管道，妨礙設備清洗及蔗糖的結晶。用右旋糖酐酶（內(nèi)切1，6葡聚糖酶）處理，可使右旋糖酐分解為異麥芽糖與異麥芽三糖，黏度迅速下降。右旋糖酐酶還可用于防齲。3、請分析說明酶在啤酒發(fā)酵生產(chǎn)中的應用在啤酒釀造過程中，制漿和調(diào)理兩個階段是要使用酶制劑的1、浸泡麥芽漿時，溫度約6

35、5，有利于蛋白酶，葡聚糖酶，淀粉酶，發(fā)揮作用，使麥芽中的多糖及蛋百類物質降解為酵母可利用的合適的營養(yǎng)物質。2、加啤酒花前，煮沸麥芽汁使上述酶失活。在發(fā)酵完畢后，啤酒需要加一些酶處理，以使其口味和外觀更易于為消費者接受。蛋白酶降解使啤酒混濁的蛋白質成分，防止啤酒的冷混濁，延長啤酒的儲存期。糖化酶能夠降解啤酒中的殘留糊精，一方面保證了啤酒中最高的乙醇含量，另一方面不必添加濃糖液來增加啤酒的糖度。這種低糖度的啤酒糖尿病患者也可以飲用。第十章 3 酶在其他領域的應用測試題填空題1、造紙業(yè)的主要用酶有：_和_。2、_酶可以水解RNA,生產(chǎn)四種5，核苷酸。3、生絲脫膠和羊毛除垢可以用_酶。4、利用_酶檢測

36、有機磷農(nóng)藥污染5、利用_酶的同工酶監(jiān)測重金屬污染6、通過_監(jiān)測大腸桿菌污染名詞解釋：酶標記免疫反應檢測請分析說明蛋白酶在輕工、化工業(yè)中的應用。加酶洗滌劑應該滿足什么條件？加酶洗滌劑有何優(yōu)勢 ？酶法檢測必須具備什么條件？答案填空題1、木質素酶，木聚糖酶 2、5，-磷酸二酯酶 3、蛋白酶4、膽堿酯酶5、乳酸脫氫酶 6、-葡聚糖苷酸酶名詞解釋：酶標記免疫反應檢測是將酶的檢測技術與免疫檢測技術相結合，用于測定樣品液中抗體或抗原含量的技術。簡稱為酶標免疫檢測。請分析說明蛋白酶在輕工、化工業(yè)中的應用。生絲的脫膠處理天然蠶絲的主要成分是不溶于水的有光澤的絲蛋白。絲蛋白的表面有一層絲膠包裹著，在高級絲綢的制作

37、過程中，必須進行脫膠處理，即將表面的絲膠除去，以提高絲的質量。采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶或微生物蛋白酶處理，可在比較溫和的條件下催化絲膠蛋白水解，進行生絲脫膠，從而使生絲的質量顯著提高。 羊毛的除垢處理羊毛在染色之前需經(jīng)預處理，以除去羊毛表面的鱗垢，才能使羊毛著色。羊毛表面的鱗垢是由一些蛋白質堆積而成的聚和體，利用枯草桿菌蛋白酶或其他適宜的蛋白酶處理，通過蛋白酶的催化作用，可以去除羊毛表面上存在的鱗垢，提高羊毛的著色率，并保持羊毛的特點，顯著提高羊毛制品的質量。皮革的脫毛處理皮革是由牛、羊、豬等動物的皮，經(jīng)過脫毛處理后鞣制而成。傳統(tǒng)的脫毛方法是采用石灰和硫酸鈉溶液浸漬，不僅時間長，勞動強度大，而

38、且對環(huán)境造成嚴重污染?，F(xiàn)在普遍采用酶法脫毛處理，即采用細菌、霉菌、放線菌等微生物產(chǎn)生的堿性或中性蛋白酶，將毛與真皮連接的毛囊中的蛋白質水解除去，從而使毛脫落。原料皮軟化 脫毛處理后得到的原料皮，還要加進適量的蛋白酶和脂肪酶進行處理，以除去原料皮上黏附的油脂和污垢，使皮革松軟、光滑，從而提高皮革制品的質量。 添加到牙膏中，分解牙齒中的殘余食物；添加到洗滌劑中提高洗滌效果；加到護膚品中的彈性蛋白酶，可以水解皮膚表面老化、死亡細胞的蛋白頂，達到皮膚表面光潔、有彈性的效果。加酶洗滌劑應該滿足的條件：（1） 堿性條件下（PH9-10）能夠有效洗滌。（2） 表面活性劑存在下，很少失活。LAS十二烷基苯磺酸

39、鈉，AOS-烯基磺酸鈉 （alpha olefin sulfonate）（3） 在熒光染料、漂白劑、香料等洗滌劑輔助成分存在下不失活（4） 在洗滌溫度下能有效發(fā)揮作用。優(yōu)勢：衣物上的有機污垢15%40%以蛋白質與纖維素結合的方式存在，如果將酶加入洗滌劑中可以大大縮短洗滌時間，提高洗滌效果，防止衣物發(fā)黃。加酶洗滌劑已成為低磷化技術中提高去污力的一個公認方向。（這是因為堿性蛋白酶和表面活性劑之間有協(xié)同作用，酶能強化表面活性劑的溶解、分散、乳化等性能，從而彌補由于低磷化導致去污力的降低。）酶法檢測以酶的專一性為基礎，以酶作用后物質的變化為依據(jù)來進行。必須具備兩個條件：（1）高度專一性的酶（2）對酶作

40、用后的物質變化要有可靠的檢測方法。 第一、二章知識點 習題1. 固定化細胞就是被限制自由移動的細胞，既細胞受到物理化學等因素約束或限制在一定的空間界限內(nèi)，但細胞仍保留催化活性并具備能被反復或連續(xù)使用的活力。是在酶固定化基礎上發(fā)展起來的一項技術。 2. 與游離細胞相比固定化細胞的優(yōu)點： （1）固定化細胞可以將微生物發(fā)酵改為連續(xù)酶反應（2）可以獲得更高的細胞濃度；（3）細胞可以重復使用；（4）在高稀釋率時，不會產(chǎn)生洗脫現(xiàn)象；（5）單位容積的產(chǎn)率高；（6）提高遺傳穩(wěn)定性；（7）細胞不會受到剪切效應的影響。（8）發(fā)酵液中菌體含量少，有利與產(chǎn)品的分離純化。 3. 與固定化酶相比，固定化細胞具有

41、以下優(yōu)點：（1）免去了破碎細胞提取酶的手續(xù) （2）酶在細胞內(nèi)的穩(wěn)定性較高，完整細胞固定化后酶活性損失少 （3）固定化細胞制備的成本比固定化酶低（4）無需輔酶再生 4. 雖然固定化細胞具有上述許多優(yōu)點，但也有不足之處，具體表現(xiàn)在：1，僅能利用胞內(nèi)酶；2，細胞膜、細胞壁和載體都存在著擴散限制作用；3，載體形成的孔隙大小影響高分子底物的通透性；4，可能有副反應。 5. 按固定的細胞類型不同分為三類：（1）微生物；（2）動物；（3）植物。 6. 按細胞的生理狀態(tài)不同分為兩大類：（1）死細胞：包括完整細胞、細胞碎片、細胞器。適用于一種酶催化的反應。（2）活細胞：包括增殖細胞、靜止細胞

42、、饑餓細胞。適用于多酶反應，特別是需要輔酶的反應。  7. 細胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價結合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。  8. 吸附法的原理：利用載體和細胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡單，固定化過程對細胞活性影響小。 9. 采用吸附法固定細胞，所用的載體主要有：硅藻土、木

43、屑、多孔玻璃、活性炭、 10. 多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料 11. 影響吸附固定化的因素：（1）Z-電位 （2）細胞的性質和細胞壁的組成（3）載體的性質（4）pH 12. 共價結合法：利用細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無機或有機載體反應，形成共價鍵將細胞固定。用該法制備的固定化細胞一般為死細胞。 13. 交聯(lián)法利用雙功能或多功能試劑與細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應，從而使細胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。 14. 由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。 15. 包埋法是細胞固定化

44、最常用的方法。包埋法可以分為：1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細胞包裹起來，形成微型膠囊；2，凝膠包埋法：是在無菌條件下，將生物細胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過相應的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。 16. 常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。 17. 固定化方法的比較：吸附法：條件溫和、方法簡便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。共價法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細胞的破壞。交聯(lián)法：可得到高細胞濃度，但機械強度低，無法再生，不適于實際應用。包埋法：細胞和載體間沒有束縛，固定化后，細胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。

45、  18. 固定化細胞由于其用途和制備方法不同，可以是顆粒狀、塊狀、條狀、薄膜狀或不規(guī)則狀等。但目前大多數(shù)制備成顆粒狀珠體。 19. 細胞經(jīng)固定化后，其最適pH因固定化方法不同而有一些調(diào)整。如，用聚丙烯酰胺包埋的大腸桿菌中的天門冬氨酸酶和產(chǎn)氨短桿菌中的延胡索酸酶的最適pH向酸性范圍偏移。但用同一方法包埋的大腸桿菌中的青霉素酰胺酶的最適pH則沒有變動。 20. 類似與pH，細胞固定化方法不同，也有可能導致最適溫度產(chǎn)生不同的變化。 21. 穩(wěn)定性，一般而言，細胞經(jīng)固定化后，其穩(wěn)定性會有所提高。 22. 酶工程：應用酶的特異性催化功能并通過為人類生產(chǎn)有用產(chǎn)品及提供有益服務的技術為酶工程。

46、23. 酶：生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質陳為酶。 24. 固定化酶：限制或定位于特定空間位置的酶稱為固定化酶。 25. 固定化細胞：被限制或定位于特定空間位置的細胞稱為固定化細胞。 26. 載體結合法：將細胞懸浮液直接與水不容性載體相結合的固定化方法。 27. 包埋法：將細胞定位于凝膠網(wǎng)格內(nèi)的家伙稱為包埋法。 28. 偶聯(lián)效率：偶聯(lián)固定化反應過程中載體結合蛋白質的能力稱為偶聯(lián)效率。 29. 酶活力：酶類催化特定化學反應的能力稱為酶活力。 30. 酶比活：指每毫克酶蛋白所表現(xiàn)的活力。 31. 固定化反應的酶活力回收率：固定酶所顯示的活力與加入偶聯(lián)液中酶總活力的比值稱為固定化反應的酶活力回收率

47、。 32. 酶試劑盒：將酶、反應試劑、激活劑、填充劑、及緩沖劑等配成檢測用的混合制劑稱酶試劑盒。 33. 酶工程主要是研究酶在工業(yè)、醫(yī)藥等各個領域中的應用。 34. 酶是生物體內(nèi)具有特殊催化功能的蛋白質。 35. 酶工程的主要內(nèi)容：酶的發(fā)酵生產(chǎn)，酶的分離純化，酶的分子修飾，酶和細胞的固定化，酶反應器。 36. 酶在一定條件下僅能影響化學反應速度，而不改變化學反應平衡點。 37. 酶工程的核心內(nèi)容是酶和細胞的固定化技術。 38. 判斷酶固定化方法優(yōu)劣的指標是偶聯(lián)效率及固定化酶活力。 39. 固定化酶偶聯(lián)效率的測定方法有殘留法和水解法。 40. 1972年，國際酶學委員會提出新的酶活單位，稱為Ka

48、tal單位。 41. 固定化酶活力的測定方法有分批測定法和連續(xù)測定法。 42. 管狀固定化酶稱為酶管。 43. 固定化酶操作穩(wěn)定性的表示方法為半衰期。 44. 當酶固定化后，對于高分子底物的活性明顯下降。 45. 固定化酶體外應主要是床式反應器。 46. 編號E.C 3.2.3.1的酶是水解酶。 47. 利用固定化黃色短桿菌可以生產(chǎn)L蘋果酸。 48. 包埋法固定酶可利用的載體是硅膠等。 49. 膠聯(lián)法可用于制備固定化酶，戊醛不能做為交聯(lián)劑。 50. 制備固定化酶的交聯(lián)法中，常用的交聯(lián)劑，己二酰亞胺二甲酯，15-二氟14二硝基苯，雙重氮聯(lián)苯胺2，2二磺酸。 51. 在制備固定化酶的過程中，加入比活1500/Uml的酶液50ml，反應一段時間后，用緩沖液洗脫，得到比活力為50U/ml的酶緩沖液400ml，則偶聯(lián)效率為7303。 52. 1961年，國際酶學委員會規(guī)定，1個酶活單位指特定條件下，1min內(nèi)轉