細菌的接種和注意事項終極版

1、細菌的接種及細菌的接種及注意事項注意事項滅菌接種環(huán)滅菌接種環(huán)v1.要充分滅菌接種環(huán)，以免污染其標本 。v2.要適當冷卻再取標本，以免帶不出標本中的菌種。取標本取標本v1.蘸取標本時應適量，以免標本蘸取標本時應適量，以免標本太少漏檢。太少漏檢。v2.液體標本，如尿液，應注意混液體標本，如尿液，應注意混勻。勻。接種接種1.細菌的接種方法有很多，如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法，等等。但我們用的最多的是：平板劃線法意義指把混雜在一起的微生物，用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線，稀釋得到較多的獨立分布的單個菌落，即將樣本在固體培養(yǎng)基表面多次做由點到線稀釋而達到分純的目的。一區(qū)：所占區(qū)域大約是平

2、板面一區(qū)：所占區(qū)域大約是平板面積的積的1/51/4二區(qū)：由一區(qū)向二區(qū)：由一區(qū)向二區(qū)帶出三四條二區(qū)帶出三四條平行線平行線三區(qū)：由二區(qū)引出三四次，但三區(qū)：由二區(qū)引出三四次，但 三區(qū)面積最大三區(qū)面積最大vCO2在細菌培養(yǎng)中在細菌培養(yǎng)中的意義的意義v1有些細菌在初次分離培養(yǎng)時，需要有些細菌在初次分離培養(yǎng)時，需要5 5-10-10的的CO2CO2。因為。因為細菌在生長過程中能夠分解培養(yǎng)細菌在生長過程中能夠分解培養(yǎng)基中的某些含氮物質(zhì)產(chǎn)生氮，對該菌有殺滅作基中的某些含氮物質(zhì)產(chǎn)生氮，對該菌有殺滅作用，而用，而CO2能中和細菌產(chǎn)生的氮，以減少對細能中和細菌產(chǎn)生的氮，以減少對細菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌

3、、牛菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。布魯菌等。 v2.為細菌提供碳源，促進細菌的生長。如肺炎為細菌提供碳源，促進細菌的生長。如肺炎鏈球菌，草綠色鏈球菌。鏈球菌，草綠色鏈球菌。在細菌室的培養(yǎng)箱上有一個在細菌室的培養(yǎng)箱上有一個CO2的的開關(guān)，為什么要用開關(guān)，為什么要用CO2呢？呢？常見細菌的鑒別及其特點常見細菌的鑒別及其特點陽性球菌 葡萄球菌-金黃色葡萄球菌金葡特點是人類化膿性感染最常見的病原菌，是人類化膿性感染最常見的病原菌， 可以引起局部感染，也可以引起全身感可以引起局部感染，也可以引起全身感染。染。血漿凝固酶，陽性。血漿凝固酶，陽性。血平板上呈黃色菌落，大而凸起，表血平板上

4、呈黃色菌落，大而凸起，表 面光滑，有面光滑，有溶血環(huán)。溶血環(huán)。G+陽性球菌，葡萄狀排列，無芽孢，無陽性球菌，葡萄狀排列，無芽孢，無莢膜。莢膜。1.2.3.4. 葡萄球菌-表面葡萄球菌表葡特點正常存在于人體皮膚、黏膜表面，多正常存在于人體皮膚、黏膜表面，多見于院內(nèi)感染，如體內(nèi)異物留置，靜見于院內(nèi)感染，如體內(nèi)異物留置，靜脈導管等脈導管等血漿凝固酶，陰性血漿凝固酶，陰性表葡形態(tài)同金葡相似，但是為白色、表葡形態(tài)同金葡相似，但是為白色、扁平菌落，無溶血環(huán)扁平菌落，無溶血環(huán)1.2.3.3.鏈球菌 常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌綠色鏈球菌、肺炎鏈球

5、菌 。 根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)不同可以把鏈球菌分為根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)不同可以把鏈球菌分為A A、B B、C C、D D等二十個群，但對人類有致病性的等二十個群，但對人類有致病性的大多數(shù)屬于大多數(shù)屬于A A群，少量屬于群，少量屬于B B群。群。根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種：根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種： 甲型（甲型（型）溶血性鏈球菌，又稱草綠色型）溶血性鏈球菌，又稱草綠色鏈球菌，菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，致病力弱，鏈球菌，菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，致病力弱，是條件致病菌。是條件致病菌。 乙型（乙型（型）溶血性鏈球菌，產(chǎn)生強烈的型）溶血性鏈球菌，產(chǎn)生強烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周圍出現(xiàn)溶血毒素，在血平板上可

6、使菌落周圍出現(xiàn)2 24mm4mm的無色透明溶血環(huán)。的無色透明溶血環(huán)。 丙型（丙型（r-）鏈球菌，菌落周圍無溶血環(huán)，又）鏈球菌，菌落周圍無溶血環(huán)，又叫不溶血性鏈球菌，通常不致病。叫不溶血性鏈球菌，通常不致病。 肺炎鏈球菌菌落特點菌落特點：在血平板上：在血平板上0.51.5mm,灰白色半透灰白色半透明，表面光滑，扁平，明，表面光滑，扁平，周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)，周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)放置培養(yǎng)放置24h以上的菌落，以上的菌落，還會因為產(chǎn)生自溶酶的還會因為產(chǎn)生自溶酶的作用，而致菌落中央塌作用，而致菌落中央塌陷而邊緣隆起，呈臍窩陷而邊緣隆起，呈臍窩狀。狀。肺炎鏈球菌、群、群的區(qū)分肺炎鏈球菌、群、群的區(qū)

7、分： pt試驗試驗抑菌環(huán)抑菌環(huán)14, 鑒定為肺鏈鑒定為肺鏈桿菌肽試驗桿菌肽試驗群群CAMP試驗試驗B群群Opt實驗桿菌肽實驗11葡萄球菌與鏈球菌的鑒別： 1.涂片涂片革蘭染色，葡萄球菌呈葡萄串樣，鏈球菌呈鏈狀。 2M-H試驗當染片不能區(qū)別時，接種到M-H平板，長成菌落之后，可挑單個菌落做觸酶試驗，+是葡萄球菌，是鏈球菌。腸球菌腸球菌屬特點：腸球菌屬特點：+，成圓球形或橢圓形，單，成圓球形或橢圓形，單個，成對，或短鏈，均可。個，成對，或短鏈，均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.51.0mm大小的菌落，可有溶血現(xiàn)象。大小的菌落，可有溶血現(xiàn)象。以糞腸

8、球菌和屎腸球菌為常見： 阿拉伯糖阿拉伯糖 山梨醇山梨醇屎腸球菌屎腸球菌 陽性陽性 陰性陰性糞腸球菌糞腸球菌 陰性陰性 陽性陽性 陰性桿菌 大腸桿菌：G-桿菌，有鞭毛、菌毛，無芽胞。菌落23mm,圓形凸起，灰白濕潤，光滑半透明，邊緣整齊。某些菌落可產(chǎn)生有透明溶血環(huán)。鮑曼不動桿菌菌落特點菌落特點：較大菌落、凸起、灰白色黏液型、相鄰菌落容易發(fā)生融合可挑出長絲狀細絲肺炎克雷伯桿菌肺炎克雷伯桿菌變形桿菌遷徙生長遷徙生長菌落特點菌落特點：G-，兩邊鈍圓，有明顯的多形性，呈球形或絲狀，無芽胞無莢膜，有鞭毛，運動活潑。普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴散生長，迅速彌漫。波紋狀薄膜布滿整個培養(yǎng)基表面。嗜麥芽假單胞菌菌落特點：菌落特點：G-桿菌，細長略桿菌，細長略彎曲。不透明，彎曲。不透明，灰黃色菌落，在灰黃色菌落，在血平板上可產(chǎn)生血平板上可產(chǎn)生氨味。本菌氧化氨味。本菌氧化酶陰性，與大多酶陰性，與大多數(shù)假單胞菌不同。數(shù)假單胞菌不同。在普通瓊脂培養(yǎng)基在普通瓊脂培養(yǎng)基上能產(chǎn)生水溶性綠上能產(chǎn)生水溶性綠色素，使整個培養(yǎng)色素，使整個培養(yǎng)基變?yōu)榫G色基變?yōu)榫G色l菌落灰綠色、半透菌落灰綠色、半透明、大而扁平、表明、大而扁平、表面濕潤、邊緣不齊；面濕潤、邊緣不齊；有金屬光澤；有生有金屬光澤；有生姜樣芳香氣味；菌姜樣芳香氣味；菌落周圍有寬大的蘭落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。綠