細(xì)菌與病毒的微生物學(xué)檢查法學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1第一頁，共55頁。微生物學(xué)(wi shn w xu)教研室Jiz-Z第1頁/共55頁第二頁，共55頁。第2頁/共55頁第三頁，共55頁。第3頁/共55頁第四頁，共55頁。標(biāo)本的采集和送檢(sn jin)六原則無菌操作：避免(bmin)雜菌污染不同期(tngq)不同標(biāo)本用抗生素以前采集病變明顯部位運(yùn)送注意保存采集雙份血清第4頁/共55頁第五頁，共55頁。第5頁/共55頁第六頁，共55頁?？梢?ky)細(xì)菌感染采集(cij)標(biāo)本血清學(xué)實(shí)驗(yàn)(shyn)雙份血清直接形態(tài)學(xué)檢查細(xì)菌成分檢測(cè)特異性抗體檢測(cè)細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定形態(tài)學(xué)檢查生化學(xué)檢查血清學(xué)鑒定藥物敏感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（毒力）實(shí)驗(yàn)抗原檢測(cè)核酸檢測(cè)直接凝

2、集實(shí)驗(yàn)協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)乳膠凝集實(shí)驗(yàn)免疫熒光檢測(cè)ELISA等核酸雜交聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）DNA芯片凝集反應(yīng)沉淀反應(yīng)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中和試驗(yàn)ELISA等第6頁/共55頁第七頁，共55頁。抗原核酸第7頁/共55頁第八頁，共55頁。第8頁/共55頁第九頁，共55頁。6.熒光顯微鏡熒光顯微鏡第9頁/共55頁第十頁，共55頁。第10頁/共55頁第十一頁，共55頁。鏈球菌第11頁/共55頁第十二頁，共55頁。淋病奈瑟球菌(qijn)-膿液直接涂片第12頁/共55頁第十三頁，共55頁。結(jié)核(jih)分枝桿菌第13頁/共55頁第十四頁，共55頁。第14頁/共55頁第十五頁，共55頁。暗視野顯微鏡鉤端螺旋體第15頁/共

3、55頁第十六頁，共55頁。肺炎(fiyn)雙球菌第16頁/共55頁第十七頁，共55頁。Flame sterilize wire loop, metal forceps, etc before and after use in a hooded Bunsen burner 第17頁/共55頁第十八頁，共55頁。第18頁/共55頁第十九頁，共55頁。化膿性球菌(qijn)葡萄球菌(p to qi jn)鏈球菌第19頁/共55頁第二十頁，共55頁。腸道桿菌(gnjn)大腸(dchng)埃希菌沙門氏菌(sh mn sh jn)志賀菌細(xì)菌形態(tài)無特異性可采用生化學(xué)檢查法-鑒別細(xì)菌的重要方法第20頁/共55

4、頁第二十一頁，共55頁。第21頁/共55頁第二十二頁，共55頁。鑒定中最重要(zhngyo)的生化反應(yīng)乳糖發(fā)酵(f jio)試驗(yàn)?zāi)c道非致病菌（埃希菌屬）發(fā)酵(f jio)乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣腸道致病菌（志賀菌屬、沙門菌屬等）不發(fā)酵乳糖 第22頁/共55頁第二十三頁，共55頁。第23頁/共55頁第二十四頁，共55頁。法第24頁/共55頁第二十五頁，共55頁。第25頁/共55頁第二十六頁，共55頁。全自動(dòng)細(xì)菌(xjn)鑒定儀全自動(dòng)生化(shn hu)分析儀第26頁/共55頁第二十七頁，共55頁。第27頁/共55頁第二十八頁，共55頁。接種(jizhng)途徑皮內(nèi) 皮下 腹膜(fm)內(nèi) 靜脈 顱內(nèi) 椎管內(nèi)

5、 鼻內(nèi) 灌胃第28頁/共55頁第二十九頁，共55頁。第29頁/共55頁第三十頁，共55頁。p抗原(kngyun)的檢測(cè)p核酸的檢測(cè)第30頁/共55頁第三十一頁，共55頁。第31頁/共55頁第三十二頁，共55頁。第32頁/共55頁第三十三頁，共55頁。第33頁/共55頁第三十四頁，共55頁。第34頁/共55頁第三十五頁，共55頁。PCRGene Chip第35頁/共55頁第三十六頁，共55頁。第36頁/共55頁第三十七頁，共55頁。第37頁/共55頁第三十八頁，共55頁。第38頁/共55頁第三十九頁，共55頁。第39頁/共55頁第四十頁，共55頁。o電子顯微鏡（ EM） o免疫(miny)電鏡,

6、 IEMo光學(xué)顯微鏡（CM）o包涵體o內(nèi)基小體（Negri body）HAVNegri body第40頁/共55頁第四十一頁，共55頁。動(dòng)物(dngw)接種：動(dòng)物(dngw)模型雞胚接種(jizhng)： 914d組織培養(yǎng)器官(qgun)培養(yǎng)組織培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng) 原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)三大培養(yǎng)方法第41頁/共55頁第四十二頁，共55頁。血凝抑制(yzh)實(shí)驗(yàn)中和實(shí)驗(yàn)PCR檢測(cè)病毒(bngd)分離培養(yǎng)及鑒第42頁/共55頁第四十三頁，共55頁。第43頁/共55頁第四十四頁，共55頁。 細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）A：未感染病毒的HeLa細(xì)胞；B：被柯薩奇病毒B3感染后，細(xì)胞變圓、皺縮，細(xì)胞折光性減弱；C：被腺病毒感染后，細(xì)胞腫脹，折光性增強(qiáng)，呈葡萄狀排列。200 n 第44頁/共55頁第四十五頁，共55頁。n空斑形成試驗(yàn)n紅細(xì)胞凝集plaque第45頁/共55頁第四十六頁，共55頁?？瞻咝纬?xngchng)試驗(yàn)n用于病毒濃度的精確定量和測(cè)定抗病毒藥物的作用n一個(gè)空斑是由一個(gè)病毒大量(dling)復(fù)制而成，稱為空斑形成單位（Plaque forming unit，PFU）。病毒的感染量用PFU/ml表示第46頁/共55頁第四十七頁，共55頁。第47頁/共55頁第四十八頁，共55頁。第48頁/共55頁第四十九頁，共55頁。第49頁/共55頁第五十