[醫(yī)學(xué)微生物學(xué)]細(xì)菌的感染與免疫

1、 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)第七章第七章細(xì)菌的感染與免疫細(xì)菌的感染與免疫第一節(jié)第一節(jié) 正常菌群與條件致病菌正常菌群與條件致病菌 一、正常菌群（一、正常菌群（normal flora）正常菌群的意義：正常菌群的意義： 生物拮抗生物拮抗 生物屏障生物屏障 受體與營養(yǎng)競爭受體與營養(yǎng)競爭 營養(yǎng)作用營養(yǎng)作用 參與代謝參與代謝 營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化合成營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化合成 免疫作用免疫作用 促進(jìn)免疫器官發(fā)育促進(jìn)免疫器官發(fā)育 免疫應(yīng)答免疫應(yīng)答 抗衰老抗衰老 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶SODSOD抗氧化抗氧化抑腫瘤抑腫瘤 轉(zhuǎn)化致癌物轉(zhuǎn)化致癌物 激活巨噬細(xì)胞激活巨噬細(xì)胞部位部位主要菌群主要菌群皮皮 膚膚葡萄球菌葡萄球菌,鏈

2、球菌鏈球菌,類白喉類白喉,銅綠銅綠,丙酸。丙酸?？诳?腔腔葡萄球菌葡萄球菌,鏈球菌鏈球菌,肺炎球菌肺炎球菌,奈瑟球菌。奈瑟球菌。鼻咽腔鼻咽腔 葡萄球菌葡萄球菌,鏈球菌鏈球菌,肺炎球菌肺炎球菌,奈瑟球菌。奈瑟球菌。外耳道外耳道 葡萄球菌葡萄球菌,類白喉棒狀桿菌類白喉棒狀桿菌,銅綠。銅綠。眼結(jié)膜眼結(jié)膜 葡萄球菌葡萄球菌,干燥棒狀桿菌干燥棒狀桿菌,非致病奈瑟菌。非致病奈瑟菌。腸腸 道道大腸艾希菌大腸艾希菌,雙歧桿雙歧桿,產(chǎn)氣桿菌產(chǎn)氣桿菌,變形桿菌。變形桿菌。尿尿 道道葡萄球菌葡萄球菌,類白喉棒狀桿菌類白喉棒狀桿菌,分枝桿菌。分枝桿菌。陰陰 道道乳桿菌乳桿菌,類白喉棒狀桿菌類白喉棒狀桿菌,奈瑟球菌。奈

3、瑟球菌。人體正常菌群分布人體正常菌群分布 二二 機(jī)會致病菌機(jī)會致病菌（conditioned pathogen） 正常菌群寄居部位改變正常菌群寄居部位改變 大腸艾希菌進(jìn)入泌尿道大腸艾希菌進(jìn)入泌尿道, ,手術(shù)傷口化膿感染。手術(shù)傷口化膿感染。 宿主免疫功能底下宿主免疫功能底下大量使用激素大量使用激素, ,腫瘤化療腫瘤化療, ,放療放療,AIDS,AIDS晚期。晚期。 菌群失調(diào)菌群失調(diào)長期使用廣譜抗生素長期使用廣譜抗生素, ,正常菌群被抑制正常菌群被抑制, ,劣勢或劣勢或外來菌趁機(jī)大量分子繁殖引起二重感染外來菌趁機(jī)大量分子繁殖引起二重感染, ,金葡菌金葡菌, ,白假絲酵母菌偽膜性腸炎白假絲酵母菌偽膜

4、性腸炎, ,腸炎腸炎, ,肺炎。肺炎。 三、微生態(tài)平衡與失調(diào)三、微生態(tài)平衡與失調(diào) 微生態(tài)學(xué)微生態(tài)學(xué) microecology細(xì)胞或分子水平研究微生物與宿主細(xì)胞或分子水平研究微生物與宿主,環(huán)境三環(huán)境三者之間的關(guān)系。者之間的關(guān)系。醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)研究寄居在人體表面和與外界相通腔道粘膜表面研究寄居在人體表面和與外界相通腔道粘膜表面的微生物與微生物的微生物與微生物, ,微生物與人體微生物與人體, ,微生物和人體與微生物和人體與外界環(huán)境之間相互依存相互制約的關(guān)系。外界環(huán)境之間相互依存相互制約的關(guān)系。微生物群與宿主微生物群與宿主, ,外部環(huán)境動態(tài)平衡外部環(huán)境動態(tài)平衡- -微生態(tài)平衡微生態(tài)平衡; ;

5、微微生態(tài)失調(diào)生態(tài)失調(diào); ;菌群失調(diào)癥菌群失調(diào)癥。 第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)菌的致病作用細(xì)菌的致病作用 致病性致病性- -細(xì)菌對宿主的致病能力細(xì)菌對宿主的致病能力毒力毒力（Virulence）細(xì)菌致病性強(qiáng)弱程度。）細(xì)菌致病性強(qiáng)弱程度。用半數(shù)致死量用半數(shù)致死量LD50或半數(shù)感染量或半數(shù)感染量ID50表示。表示。50%50%試驗(yàn)動物感染試驗(yàn)動物感染死亡的細(xì)菌數(shù)量或死亡的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。毒素劑量。一一 細(xì)菌的毒力細(xì)菌的毒力（一）侵襲力（一）侵襲力 細(xì)菌突破宿主皮膚細(xì)菌突破宿主皮膚, ,黏膜屏障黏膜屏障1 1, ,進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定值進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定值2 2, ,繁殖擴(kuò)散繁殖擴(kuò)散3 3的能力。的能力。 粘

6、附素粘附素, ,莢膜莢膜, ,侵襲性物質(zhì)侵襲性物質(zhì), ,細(xì)菌生物被膜細(xì)菌生物被膜。1.1.黏附素黏附素（adhensin）定居因子）定居因子 菌毛粘附素菌毛粘附素: :菌毛頂端菌毛頂端, ,大腸桿菌。大腸桿菌。非菌毛粘附素非菌毛粘附素:G:G- -外膜蛋白外膜蛋白, ,鏈球菌鏈球菌M M蛋白。蛋白。黏附素與宿主細(xì)胞表面上受體特異性結(jié)合定黏附素與宿主細(xì)胞表面上受體特異性結(jié)合定居居, ,繁殖繁殖, ,破壞組織破壞組織, ,產(chǎn)生毒素。產(chǎn)生毒素。2.2.莢膜莢膜 抗吞噬抗吞噬, ,抗體液中殺菌物質(zhì)抗體液中殺菌物質(zhì), ,侵襲力強(qiáng)。侵襲力強(qiáng)。3.3.侵襲性物質(zhì)侵襲性物質(zhì) a.a.侵襲素侵襲素（invasi

7、n）侵襲基因編碼產(chǎn)生的蛋）侵襲基因編碼產(chǎn)生的蛋白質(zhì)白質(zhì),介導(dǎo)細(xì)菌侵入鄰近上皮細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)菌侵入鄰近上皮細(xì)胞, ,促進(jìn)擴(kuò)散。促進(jìn)擴(kuò)散。 b.b.侵襲性酶類侵襲性酶類 血漿凝固酶血漿凝固酶: :纖維蛋白包裹菌體抗吞噬。纖維蛋白包裹菌體抗吞噬。 透明質(zhì)酸酶透明質(zhì)酸酶: :利于細(xì)菌毒素?cái)U(kuò)散。利于細(xì)菌毒素?cái)U(kuò)散。 IgA蛋白酶蛋白酶: :分解膜表面分解膜表面SIgA,利于感染。利于感染。4.4.細(xì)菌生物被膜細(xì)菌生物被膜（bacterial biofilm）細(xì)菌與多糖組成的膜狀細(xì)菌群體。細(xì)菌與多糖組成的膜狀細(xì)菌群體。利于細(xì)菌附著在支撐物表面。利于細(xì)菌附著在支撐物表面。阻擋抗生素的滲入和免疫細(xì)胞殺傷。阻擋抗生素

8、的滲入和免疫細(xì)胞殺傷。易發(fā)生耐藥基因和毒力基因的轉(zhuǎn)移。易發(fā)生耐藥基因和毒力基因的轉(zhuǎn)移。脫落后擴(kuò)散感染脫落后擴(kuò)散感染;氣管插管氣管插管,人工關(guān)節(jié)。人工關(guān)節(jié)。銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌,表皮葡萄球菌常見。表皮葡萄球菌常見。 靜脈導(dǎo)管表面的葡萄球菌生物膜 （二）毒素（二）毒素1.1.外毒素外毒素（exotoxin）基因在染色體基因在染色體,質(zhì)粒質(zhì)粒,噬菌體。噬菌體。 主要特點(diǎn)主要特點(diǎn): a.活細(xì)菌產(chǎn)生活細(xì)菌產(chǎn)生,代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物,分泌到細(xì)胞外。分泌到細(xì)胞外。 b.蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),AB亞單位亞單位,A是毒性部分是毒性部分,B載體載體,與細(xì)胞與細(xì)胞受體結(jié)合受體結(jié)合,單獨(dú)無致病性。單獨(dú)無致病性。 c.毒性強(qiáng)毒

9、性強(qiáng),肉毒毒素強(qiáng)氰化鉀肉毒毒素強(qiáng)氰化鉀1萬倍萬倍,麻痹。麻痹。 d.絕大多數(shù)不耐熱絕大多數(shù)不耐熱,葡萄球菌腸毒素例外。葡萄球菌腸毒素例外。 e.抗原性強(qiáng)抗原性強(qiáng),4%甲醛脫毒成類毒素甲醛脫毒成類毒素-疫苗。疫苗。 外毒素的種類和作用機(jī)制外毒素的種類和作用機(jī)制神經(jīng)毒素（神經(jīng)毒素（neurotoxin）破傷風(fēng)痙攣毒素破傷風(fēng)痙攣毒素 全身骨骼肌強(qiáng)直性痙攣。全身骨骼肌強(qiáng)直性痙攣。肉毒毒素肉毒毒素 全身肌肉松弛全身肌肉松弛, ,麻痹。麻痹。細(xì)胞毒素（細(xì)胞毒素（cytotoxin）白喉毒素白喉毒素 抑制宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成抑制宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成, ,心肌炎。心肌炎。腸毒素（腸毒素（enterotoxin）霍

10、亂毒素腸功能紊亂霍亂毒素腸功能紊亂, ,嚴(yán)重腹瀉嚴(yán)重腹瀉, ,失水酸中毒。失水酸中毒。 2.2.內(nèi)毒素內(nèi)毒素（endotoxin） 特點(diǎn)特點(diǎn): :a.G菌死亡裂解產(chǎn)生菌死亡裂解產(chǎn)生; ;b.b.細(xì)胞壁脂多糖細(xì)胞壁脂多糖LPS,由由O特異多糖特異多糖, ,非特異非特異核心多糖核心多糖, ,脂質(zhì)脂質(zhì)A A組成組成; ;c.c.理化因素穩(wěn)定理化因素穩(wěn)定: :耐熱耐熱1601602-4hr2-4hr致熱源致熱源; ;d.d.毒性較弱毒性較弱, ,對組織無選擇性對組織無選擇性, ,反應(yīng)一致；反應(yīng)一致； e.e.不能不能用甲醛脫毒成類毒素。用甲醛脫毒成類毒素。 LPS結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 脂質(zhì)脂質(zhì)A A: :毒性部分

11、毒性部分核心多糖核心多糖; ;屬抗原屬抗原特異多糖特異多糖: :菌體菌體O O抗原抗原 內(nèi)毒素的生物學(xué)效應(yīng)內(nèi)毒素的生物學(xué)效應(yīng)發(fā)熱反應(yīng)發(fā)熱反應(yīng) 作用于巨嗜細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞作用于巨嗜細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞, ,釋放內(nèi)源性釋放內(nèi)源性致熱源致熱源IL-1,IL-6,TNF,IL-1,IL-6,TNF,刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞樞, ,發(fā)熱發(fā)熱, ,微血管擴(kuò)微血管擴(kuò), ,炎癥反應(yīng)炎癥反應(yīng); ;腫瘤治療。腫瘤治療。白細(xì)胞反應(yīng)白細(xì)胞反應(yīng) 早期中性粒細(xì)胞黏附于毛細(xì)血管壁早期中性粒細(xì)胞黏附于毛細(xì)血管壁, ,數(shù)小時(shí)后數(shù)小時(shí)后, ,由由LPSLPS誘生的中性粒細(xì)胞釋放因子刺激骨髓釋誘生的中性粒細(xì)胞釋放

12、因子刺激骨髓釋放大量中性粒細(xì)胞入血放大量中性粒細(xì)胞入血, ,先低后高。先低后高。 內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克內(nèi)毒素血癥內(nèi)毒素血癥: :敗血癥敗血癥, ,感染病灶入血感染病灶入血, ,輸液；輸液；巨嗜細(xì)胞巨嗜細(xì)胞, ,中粒中粒, ,內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞, ,血小板血小板, ,補(bǔ)體等誘生補(bǔ)體等誘生TNF,IL-1,IL-6,IL-8,TNF,IL-1,IL-6,IL-8,組胺等活性物質(zhì)；組胺等活性物質(zhì)；使小血管功能紊亂使小血管功能紊亂, ,微循環(huán)障礙微循環(huán)障礙, ,器官毛細(xì)血管器官毛細(xì)血管灌注不足灌注不足; ;缺血缺氧酸中毒。缺血缺氧酸中毒。激活補(bǔ)體激活補(bǔ)體, ,引發(fā)高熱引發(fā)高熱,

13、,低血壓低血壓, ,凝血系統(tǒng)活化凝血系統(tǒng)活化, , 導(dǎo)致禰散性血管內(nèi)凝血。導(dǎo)致禰散性血管內(nèi)凝血。嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致微循環(huán)衰竭嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致微循環(huán)衰竭, ,內(nèi)毒素休克或死亡。內(nèi)毒素休克或死亡。外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別區(qū)別要點(diǎn)區(qū)別要點(diǎn) 外毒素外毒素 內(nèi)毒素內(nèi)毒素 來來 源源 G+部分部分G- G- 基基 因因 質(zhì)粒質(zhì)粒 前噬菌體前噬菌體 染色體染色體 染色體染色體 方方 式式 活菌生產(chǎn)分泌活菌生產(chǎn)分泌 成分裂解產(chǎn)生成分裂解產(chǎn)生 成成 分分 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 脂多糖脂多糖 穩(wěn)穩(wěn) 定定 60-803030 160 1602-4hr2-4hr 毒毒 性性 強(qiáng)強(qiáng) 選擇性選擇性 特殊癥狀特殊癥狀 弱

14、弱 發(fā)熱微循環(huán)發(fā)熱微循環(huán) 抗抗 原原 強(qiáng)強(qiáng) 抗毒素抗毒素 類毒素類毒素 弱弱 不成類毒素不成類毒素 二二 細(xì)菌侵入的數(shù)量細(xì)菌侵入的數(shù)量引起感染所需細(xì)菌的數(shù)量決定于兩個因素引起感染所需細(xì)菌的數(shù)量決定于兩個因素致病菌毒力的強(qiáng)弱致病菌毒力的強(qiáng)弱 宿主免疫力的高低宿主免疫力的高低 三三 細(xì)菌侵入的途徑細(xì)菌侵入的途徑呼吸道呼吸道 肺炎球菌肺炎球菌,結(jié)核結(jié)核,流腦。流腦。消化道消化道 霍亂弧菌霍亂弧菌,痢疾痢疾,傷寒傷寒,傷口傷口 葡萄球菌葡萄球菌,鏈球菌化膿性感染鏈球菌化膿性感染,破傷風(fēng)。破傷風(fēng)。多途徑感染多途徑感染 結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌 第三節(jié)第三節(jié) 宿主的免疫防御機(jī)制宿主的免疫防御機(jī)制 免疫系統(tǒng)免疫系統(tǒng)

15、免疫器官免疫器官:骨髓骨髓,胸腺胸腺,脾臟脾臟,淋巴結(jié)淋巴結(jié),扁桃體扁桃體,小腸集合淋巴結(jié)小腸集合淋巴結(jié),闌尾闌尾,黏膜免疫系統(tǒng)。黏膜免疫系統(tǒng)。免疫細(xì)胞免疫細(xì)胞:淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞,單核吞噬細(xì)胞單核吞噬細(xì)胞,中粒中粒,嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞,肥大細(xì)胞肥大細(xì)胞,血小板。血小板。免疫分子免疫分子:補(bǔ)體補(bǔ)體,免疫球蛋白免疫球蛋白,細(xì)胞因子。細(xì)胞因子。 非特異性免疫非特異性免疫 ；特異性免疫。；特異性免疫。 一一 非特異性免疫非特異性免疫 天然免疫天然免疫人類在長期的種系發(fā)育和進(jìn)化過程中人類在長期的種系發(fā)育和進(jìn)化過程中, ,逐漸建立起來的逐漸建立起來的, ,一系列防御病原微生

16、一系列防御病原微生物的功能。物的功能。特點(diǎn)特點(diǎn): :出生就有出生就有;不針對某一病原微生物。不針對某一病原微生物。屏障結(jié)構(gòu)屏障結(jié)構(gòu) 吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)胞體液因素體液因素（一）屏障結(jié)構(gòu)（一）屏障結(jié)構(gòu)1.皮膚與黏膜皮膚與黏膜a a阻擋和排除作用阻擋和排除作用: : 阻擋阻擋; ;纖毛運(yùn)動纖毛運(yùn)動, ,腸蠕動排除。腸蠕動排除。b b分泌殺菌物質(zhì)分泌殺菌物質(zhì): : 乳酸乳酸, ,脂肪酸脂肪酸, ,溶菌酶溶菌酶, ,胃酸胃酸, ,蛋白酶。蛋白酶。c c正常菌群拮抗作用正常菌群拮抗作用 生物屏障生物屏障, ,受體和營養(yǎng)競爭受體和營養(yǎng)競爭, ,抗菌物質(zhì)?？咕镔|(zhì)。2. .血腦屏障血腦屏障由軟腦膜由軟腦膜, ,脈

17、絡(luò)膜脈絡(luò)膜, ,腦毛細(xì)血管和星狀膠腦毛細(xì)血管和星狀膠質(zhì)細(xì)胞組成質(zhì)細(xì)胞組成, ,阻擋病原菌及其毒性產(chǎn)物進(jìn)入阻擋病原菌及其毒性產(chǎn)物進(jìn)入CNSCNS。嬰幼兒發(fā)育不完善。嬰幼兒發(fā)育不完善。3.3.胎盤屏障胎盤屏障由母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜和胎兒絨毛膜由母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜和胎兒絨毛膜組成組成, ,阻擋阻擋病原菌和藥物進(jìn)入胎兒病原菌和藥物進(jìn)入胎兒, ,妊娠三妊娠三個月內(nèi)發(fā)育不完善。個月內(nèi)發(fā)育不完善。（二）吞噬細(xì)胞（二）吞噬細(xì)胞包括中粒包括中粒; ;單核吞噬細(xì)胞單核吞噬細(xì)胞, ,血液單核細(xì)胞和組織血液單核細(xì)胞和組織器官中的巨噬細(xì)胞。非特異性吞噬器官中的巨噬細(xì)胞。非特異性吞噬, ,殺傷殺傷, ,消化病消化病原菌

18、。吞噬過程：原菌。吞噬過程： * *趨化趨化 趨化因子使細(xì)胞穿過毛細(xì)血管壁定向聚集。趨化因子使細(xì)胞穿過毛細(xì)血管壁定向聚集。黏附黏附 表面受體與病菌接觸表面受體與病菌接觸;IgG;IgG和和C C3 3受體。受體。吞入吞入 細(xì)胞膜內(nèi)陷細(xì)胞膜內(nèi)陷, ,伸出偽足包圍伸出偽足包圍, ,攝入細(xì)胞。攝入細(xì)胞。殺滅與消化殺滅與消化 吞噬體與溶酶體融合成吞噬溶酶體吞噬體與溶酶體融合成吞噬溶酶體, ,殺菌溶菌。殺菌溶菌。依氧殺菌系統(tǒng)依氧殺菌系統(tǒng)- -活性氧活性氧; ;非依氧殺菌系統(tǒng)非依氧殺菌系統(tǒng)- -溶菌酶。溶菌酶。吞噬細(xì)胞對細(xì)菌的吞噬和消化過程 吞噬作用的后果吞噬作用的后果: :完全吞噬完全吞噬: :化膿性球

19、菌被吞噬后化膿性球菌被吞噬后5-105-10死死亡亡,30,30-60-60完全消化完全消化, ,殘?jiān)懦黾?xì)胞外。殘?jiān)懦黾?xì)胞外。不完全吞噬不完全吞噬: :結(jié)核桿菌仍存活結(jié)核桿菌仍存活, ,免受抗體免受抗體, ,抗菌藥物傷害抗菌藥物傷害; ;繁殖殺傷吞噬細(xì)胞繁殖殺傷吞噬細(xì)胞; ;隨細(xì)隨細(xì)胞游走擴(kuò)散。胞游走擴(kuò)散。組織損傷組織損傷: :溶酶體釋放的多種蛋白水解酶溶酶體釋放的多種蛋白水解酶破壞臨近組織破壞臨近組織, ,引起炎癥引起炎癥, ,損傷。損傷。（三）體液因素（三）體液因素1.1.補(bǔ)體補(bǔ)體（complement）一組球蛋白一組球蛋白, ,巨噬細(xì)胞巨噬細(xì)胞, ,腸上皮細(xì)胞腸上皮細(xì)胞, ,肝肝,

20、,脾細(xì)脾細(xì)胞產(chǎn)生胞產(chǎn)生, ,激活產(chǎn)生激活產(chǎn)生: :趨化趨化, ,調(diào)理調(diào)理, ,溶菌溶菌, ,溶細(xì)胞。溶細(xì)胞。經(jīng)典途徑經(jīng)典途徑: :由抗原抗體復(fù)合物激活。由抗原抗體復(fù)合物激活。旁路途徑旁路途徑: :細(xì)菌脂多糖細(xì)菌脂多糖, ,酵母多糖酵母多糖, ,凝聚的凝聚的IgA,IgGIgA,IgGC C3a3a,C,C5a5a 吸引吞噬細(xì)胞到達(dá)炎癥部位吸引吞噬細(xì)胞到達(dá)炎癥部位, ,趨化作用。趨化作用。 C C3b3b,C,C4b4b 促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬活性促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬活性, ,調(diào)理作用。調(diào)理作用。C C3b-93b-9 膜攻擊復(fù)合物膜攻擊復(fù)合物, ,溶解殺傷溶解殺傷G G- -菌和包膜病毒。菌和包膜病

21、毒。2.2.溶菌酶溶菌酶（Lysozyme）吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的堿性蛋白吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的堿性蛋白, ,分布在血清分布在血清, ,唾液唾液, ,淚液淚液, ,乳汁乳汁, ,黏膜分泌液中。裂解黏膜分泌液中。裂解G G+ +菌。菌。3.3.防御素防御素（defensin）含精氨酸的小分子多肽含精氨酸的小分子多肽, ,中粒細(xì)胞和腸細(xì)胞產(chǎn)中粒細(xì)胞和腸細(xì)胞產(chǎn)生生, ,破壞細(xì)菌細(xì)胞膜破壞細(xì)菌細(xì)胞膜, ,殺傷溶解細(xì)菌。殺傷溶解細(xì)菌。 其它其它 乙型溶素乙型溶素, ,吞噬細(xì)胞殺菌素吞噬細(xì)胞殺菌素, ,組蛋白組蛋白, ,乳素乳素, ,正常調(diào)理素。正常調(diào)理素。 二二 特異性免疫特異性免疫個體出生后個體出生后, ,與病原微生

22、物及其產(chǎn)物等抗原與病原微生物及其產(chǎn)物等抗原分子接觸后產(chǎn)生的一系列免疫防御功能。分子接觸后產(chǎn)生的一系列免疫防御功能。特點(diǎn)特點(diǎn): :對引發(fā)免疫的相同抗原起作用對引發(fā)免疫的相同抗原起作用; ;不遺傳不遺傳; ;有免疫記憶性有免疫記憶性, ,再次接觸反應(yīng)明顯增強(qiáng)。再次接觸反應(yīng)明顯增強(qiáng)。 體液免疫，由體液免疫，由B B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)。淋巴細(xì)胞介導(dǎo)。細(xì)胞免疫，由細(xì)胞免疫，由T T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)。淋巴細(xì)胞介導(dǎo)。 （一）體液免疫（一）體液免疫 B B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)淋巴細(xì)胞介導(dǎo),CD,CD4+4+ThTh細(xì)胞起輔助作細(xì)胞起輔助作用。用。相同抗原再次接觸；相同抗原再次接觸；Th2Th2細(xì)胞分泌細(xì)胞分泌IL-4,5,6,

23、10IL-4,5,6,10；在在IL-2IL-2參與下誘導(dǎo)參與下誘導(dǎo)B B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。漿細(xì)胞，產(chǎn)生抗體。Fab端Fc端抗體的應(yīng)答效應(yīng)抗體的應(yīng)答效應(yīng)：抑制病原菌黏附抑制病原菌黏附 SIgASIgA阻斷細(xì)菌黏附。阻斷細(xì)菌黏附。調(diào)理吞噬調(diào)理吞噬 吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)胞IgG-FCIgG-FC受體受體,C3,C3受體。受體。中和外毒素中和外毒素 阻斷毒素與靶細(xì)胞受體結(jié)合。阻斷毒素與靶細(xì)胞受體結(jié)合。參與溶菌參與溶菌 與病原菌結(jié)合激活補(bǔ)體溶菌。與病原菌結(jié)合激活補(bǔ)體溶菌。 抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用 IgG-FCIgG-FC段段與與NKNK細(xì)胞細(xì)胞FCF

24、C受體結(jié)合受體結(jié)合,NK,NK攻擊裂解病原菌。攻擊裂解病原菌。（二）細(xì)胞免疫（二）細(xì)胞免疫 細(xì)胞內(nèi)寄生菌細(xì)胞內(nèi)寄生菌, ,病毒病毒, ,真菌。真菌。 效應(yīng)細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞: :細(xì)胞毒性細(xì)胞毒性T T細(xì)胞細(xì)胞; ;CD4CD4+ +Th1Th1細(xì)胞。細(xì)胞。 1.CD1.CD8+8+CTL:CTL:直接殺傷靶細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞, ,受受MHCMHC限制限制, ,識識別殺傷有相同別殺傷有相同MHCMHC類抗原分子的靶細(xì)胞。類抗原分子的靶細(xì)胞。 a.a.釋放穿孔素和顆粒酶釋放穿孔素和顆粒酶, ,水進(jìn)入細(xì)胞。水進(jìn)入細(xì)胞。 b.b.激活靶細(xì)胞自殺基因激活靶細(xì)胞自殺基因, ,細(xì)胞凋亡。細(xì)胞凋亡。 2.CD2.C

25、D4+4+Th1Th1細(xì)胞細(xì)胞: :分泌分泌IL-2,IFN,TNF,IL-2,IFN,TNF,誘導(dǎo)細(xì)誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)胞免疫和遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng), ,抗細(xì)胞內(nèi)菌感染?？辜?xì)胞內(nèi)菌感染。 （三）黏膜免疫（三）黏膜免疫 MISMIS 黏膜反應(yīng)系統(tǒng)黏膜反應(yīng)系統(tǒng): :呼吸呼吸, ,消化黏膜下淋巴組織。消化黏膜下淋巴組織。腸壁集合淋巴結(jié)腸壁集合淋巴結(jié), ,誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答。誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答。黏膜上皮黏膜上皮M M細(xì)胞細(xì)胞 抗原內(nèi)吞后轉(zhuǎn)運(yùn)到抗原內(nèi)吞后轉(zhuǎn)運(yùn)到PayerPayer淋巴結(jié)淋巴結(jié), ,提呈抗原給提呈抗原給T,BT,B細(xì)胞。細(xì)胞。黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞: :細(xì)菌病毒激活后細(xì)菌病毒

26、激活后, ,表現(xiàn)出細(xì)胞毒作用。表現(xiàn)出細(xì)胞毒作用。MISMIS主要功能主要功能: :感染或口服疫苗后感染或口服疫苗后, ,在腸道在腸道, ,呼吸道呼吸道, ,泌尿道泌尿道, ,淚液淚液, ,乳汁中出現(xiàn)乳汁中出現(xiàn)SIgA SIgA 。 三三 抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn)抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn) （一）抗胞外菌感染（一）抗胞外菌感染 特點(diǎn)特點(diǎn): :產(chǎn)毒素和酶產(chǎn)毒素和酶; ;化膿感染化膿感染; ;體液免疫。體液免疫。 1.1.吞噬細(xì)胞的作用吞噬細(xì)胞的作用 中粒吞噬中粒吞噬, ,殺滅殺滅, ,消化。消化。 2.2.抗體和補(bǔ)體的作用抗體和補(bǔ)體的作用阻止細(xì)菌黏附阻止細(xì)菌黏附:sIgA,:sIgA,菌毛抗體。菌毛抗體。調(diào)

27、理吞噬調(diào)理吞噬: :細(xì)胞細(xì)胞IgG-FCIgG-FC和和C3C3受體受體, ,促進(jìn)吞噬。促進(jìn)吞噬。溶菌溶菌:IgG,IgM:IgG,IgM與細(xì)菌結(jié)合激活補(bǔ)體。與細(xì)菌結(jié)合激活補(bǔ)體。中和細(xì)菌外毒素中和細(xì)菌外毒素: :封閉毒性中心封閉毒性中心, ,破傷風(fēng)。破傷風(fēng)。 3.3.細(xì)胞免疫的作用細(xì)胞免疫的作用: :輔助輔助B B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。 （二）抗胞內(nèi)菌感染（二）抗胞內(nèi)菌感染特點(diǎn)特點(diǎn): :細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi), ,慢性感染慢性感染, ,肉芽腫肉芽腫, ,細(xì)胞免疫。細(xì)胞免疫。1.1.吞噬細(xì)胞作用吞噬細(xì)胞作用: :單核吞噬細(xì)胞單核吞噬細(xì)胞, ,激活后殺激活后殺菌菌;NK;NK直接殺傷靶細(xì)胞。直

28、接殺傷靶細(xì)胞。2.2.細(xì)胞免疫作用細(xì)胞免疫作用:Th1:Th1分泌分泌IL-2,IFN,TNF,IL-2,IFN,TNF,激激活巨噬細(xì)胞活巨噬細(xì)胞; ;引發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)引發(fā)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng); ;CTLCTL釋放釋放穿孔素溶解細(xì)胞穿孔素溶解細(xì)胞; ;顆粒酶殺傷胞內(nèi)菌。顆粒酶殺傷胞內(nèi)菌。3.3.局部黏膜免疫局部黏膜免疫: :sIgA干擾細(xì)菌對黏膜上皮干擾細(xì)菌對黏膜上皮細(xì)胞的黏附和定植細(xì)胞的黏附和定植, ,阻止侵入細(xì)胞。阻止侵入細(xì)胞。第四節(jié)第四節(jié) 感染的發(fā)生與發(fā)展感染的發(fā)生與發(fā)展 一一 感染的來源感染的來源外源性感染外源性感染: :傳染源傳染源: :病人病人: :全病程全病程, ,早期診斷早期診斷,

29、 ,隔離治療。隔離治療。帶菌者帶菌者: :腦膜炎腦膜炎, ,傷寒傷寒, ,白喉白喉, ,長期排菌。長期排菌。病畜及帶菌動物病畜及帶菌動物, ,引起引起人畜共患病人畜共患病通過病畜及帶菌動物傳染通過病畜及帶菌動物傳染, ,職業(yè)性職業(yè)性; ;患病動物肉患病動物肉, ,蛋蛋, ,奶奶; ; 傳播途徑傳播途徑: :呼吸道呼吸道: :痰液痰液, ,唾液唾液, ,分泌物分泌物; ;肺結(jié)核肺結(jié)核, ,白喉。白喉。消化道消化道: :食品食品, ,飲水飲水; ;抗胃酸和膽汁細(xì)菌?？刮杆岷湍懼?xì)菌。 皮膚傷口皮膚傷口: :創(chuàng)燒傷創(chuàng)燒傷, ,咬傷咬傷; ;化膿感染化膿感染, ,厭氧菌。厭氧菌。節(jié)肢動物節(jié)肢動物: :

30、鼠蚤傳播鼠疫鼠蚤傳播鼠疫; ;虱傳播斑疹傷寒。虱傳播斑疹傷寒。性傳播性傳播: :泌尿系統(tǒng)的感染泌尿系統(tǒng)的感染, ,膿性分泌物。膿性分泌物。多途徑感染多途徑感染: :結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌, ,炭疽炭疽, ,鼠疫。鼠疫。.結(jié)核桿菌每年新發(fā)病例900萬,死亡300萬我國25萬傳染病第一位呼吸道傳播3.24白喉?xiàng)U菌呼吸道傳播呼吸道傳播消化道傳播志賀菌消化道傳播Clostridium Botulinum： Subterminal spore is larger than diameter of cell, it is like a tennis racket.消化道傳播破傷風(fēng)梭菌傷口傳播傷口傳播產(chǎn)氣莢膜梭菌

31、臭蟲虱鼠疫桿菌鼠蚤斑疹傷寒虱性傳播.結(jié)核桿菌每年新發(fā)病例900萬,死亡300萬我國25萬傳染病第一位多途徑傳播肺結(jié)核,胃腸結(jié)核,腎結(jié)核,骨關(guān)節(jié)結(jié)核,胸腹腦膜炎多途徑傳播多途徑傳播腺鼠疫、敗血性鼠疫和肺鼠疫 內(nèi)源性感染內(nèi)源性感染: :體內(nèi)正常菌群體內(nèi)正常菌群, ,與宿主間生態(tài)平衡失調(diào)感染。與宿主間生態(tài)平衡失調(diào)感染。寄居部位改變寄居部位改變:大腸桿菌泌尿系感染大腸桿菌泌尿系感染,膽囊炎。膽囊炎。菌群失調(diào)菌群失調(diào), ,抗生素治療中抗生素治療中, ,細(xì)菌數(shù)量比例改變。細(xì)菌數(shù)量比例改變。抵抗力降低抵抗力降低:大量使用皮質(zhì)激素大量使用皮質(zhì)激素,抗腫瘤藥物?？鼓[瘤藥物。糖尿病糖尿病,AIDS,AIDS。 二

32、二 感染的類型感染的類型 隱性感染隱性感染: :免疫力強(qiáng)免疫力強(qiáng), ,病原菌少病原菌少, ,毒力弱。毒力弱。顯性感染顯性感染: :免疫力差免疫力差, ,菌多菌多, ,毒力強(qiáng)毒力強(qiáng), ,癥狀。癥狀。急性感染急性感染: :起病急起病急, ,病程短病程短, ,恢復(fù)快恢復(fù)快, ,流腦。流腦。慢性感染慢性感染: :病程緩慢病程緩慢; ;結(jié)核結(jié)核, ,麻風(fēng)。麻風(fēng)。按感染部位按感染部位：局部感染局部感染: :皮膚化膿性感染皮膚化膿性感染: :瘡瘡, ,癤癤, ,癰。癰。全身感染全身感染: :胞外菌引起。分五種類型：胞外菌引起。分五種類型： 毒血癥毒血癥: :病原菌在局部感染繁殖病原菌在局部感染繁殖, ,毒產(chǎn)

33、入血毒產(chǎn)入血; ;破傷風(fēng)。破傷風(fēng)。 內(nèi)毒素血癥內(nèi)毒素血癥: :G G- -菌血液繁殖菌血液繁殖, ,死亡裂解產(chǎn)生大量內(nèi)毒素死亡裂解產(chǎn)生大量內(nèi)毒素; ; 病灶中細(xì)菌死亡病灶中細(xì)菌死亡, ,釋放毒素入血。釋放毒素入血。 菌血癥菌血癥: :病原菌進(jìn)入血流病原菌進(jìn)入血流, ,不繁殖不繁殖, ,只是路過。只是路過。 敗血癥敗血癥: :病原菌入血繁殖病原菌入血繁殖, ,產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物物, ,全身中毒全身中毒, ,高熱高熱, ,皮膚粘膜淤血斑皮膚粘膜淤血斑, ,肝脾肝脾腫大。腫大。 膿毒血癥膿毒血癥: :化膿性病菌入血大量繁殖化膿性病菌入血大量繁殖, ,擴(kuò)散到體內(nèi)其他器官擴(kuò)散到體內(nèi)其他器官,

34、 ,產(chǎn)生產(chǎn)生新的化膿性病灶新的化膿性病灶。 帶菌狀態(tài)帶菌狀態(tài): : 病人痊愈病人痊愈, ,病原菌會持續(xù)存在病原菌會持續(xù)存在- -帶菌者帶菌者, ,間歇間歇排菌排菌, ,重要傳染源重要傳染源, ,傷寒病。傷寒病。 三三 環(huán)境因素對感染的影響環(huán)境因素對感染的影響寒冷能降低呼吸道抵抗力寒冷能降低呼吸道抵抗力,易呼吸道感染。易呼吸道感染。夏季氣溫高夏季氣溫高,蒼蠅易滋生蒼蠅易滋生,消化道傳染病。消化道傳染病。原始森林野生動物吸血昆蟲傳播人畜共患。原始森林野生動物吸血昆蟲傳播人畜共患。第五節(jié)第五節(jié) 醫(yī)院感染醫(yī)院感染 hospital infection 患者住院期間發(fā)生的其他感染患者住院期間發(fā)生的其他感

35、染; ;醫(yī)務(wù)人員在醫(yī)務(wù)人員在醫(yī)院發(fā)生的感染。醫(yī)院發(fā)生的感染。 一一 基本特點(diǎn)基本特點(diǎn)地點(diǎn)地點(diǎn): :必須在醫(yī)院內(nèi)；必須在醫(yī)院內(nèi)；時(shí)間時(shí)間: :住院期間或出院不久出現(xiàn)的感染；住院期間或出院不久出現(xiàn)的感染；內(nèi)源性感染為主內(nèi)源性感染為主, ,機(jī)會致病性微生物。機(jī)會致病性微生物。主要為住院患者主要為住院患者, ,密切接觸密切接觸, ,侵入性診療。侵入性診療。病原菌多為耐藥菌株。病原菌多為耐藥菌株。 醫(yī)院感染的分類醫(yī)院感染的分類內(nèi)源性感染內(nèi)源性感染, ,自身感染：自身感染：抵抗力降低抵抗力降低, ,正常菌群和潛在的病原菌。正常菌群和潛在的病原菌。外源性感染外源性感染交叉感染交叉感染 患者之間或醫(yī)護(hù)人員接觸

36、?；颊咧g或醫(yī)護(hù)人員接觸。環(huán)境感染環(huán)境感染 消毒不嚴(yán)或污染的醫(yī)療用品消毒不嚴(yán)或污染的醫(yī)療用品; ;環(huán)境中微生物氣溶膠吸入感染。環(huán)境中微生物氣溶膠吸入感染。 二二 醫(yī)院感染中的微生物特點(diǎn)醫(yī)院感染中的微生物特點(diǎn) 主要為條件致病性微生物主要為條件致病性微生物 多屬內(nèi)源性感染多屬內(nèi)源性感染; ;有時(shí)會出現(xiàn)外源性病原菌引起的暴發(fā)流行。有時(shí)會出現(xiàn)外源性病原菌引起的暴發(fā)流行。 常具有耐藥性常具有耐藥性 甚至多重耐藥甚至多重耐藥, ,銅綠銅綠, ,金葡。金葡。 常發(fā)生種類的變遷常發(fā)生種類的變遷 2020世紀(jì)世紀(jì)5050年代主要為年代主要為G G+ +球菌球菌,70-80,70-80年代多為年代多為G G- -

37、桿菌。桿菌。 適應(yīng)性強(qiáng)適應(yīng)性強(qiáng) 營養(yǎng)要求低營養(yǎng)要求低, ,潮濕環(huán)境可生長潮濕環(huán)境可生長: :土土壤壤, ,水水, ,塵埃塵埃, ,污染的醫(yī)療器械污染的醫(yī)療器械, ,空調(diào)循環(huán)水?？照{(diào)循環(huán)水。 三三 醫(yī)院感染的流行病學(xué)特征醫(yī)院感染的流行病學(xué)特征三要素三要素: :傳染源傳染源, ,傳播途徑傳播途徑, ,易感者。易感者。 傳染源傳染源 病人病人 最重要傳染源最重要傳染源, ,致病性強(qiáng)。致病性強(qiáng)。攜帶者攜帶者 無明顯癥狀無明顯癥狀, ,最危險(xiǎn)的傳染源。最危險(xiǎn)的傳染源。環(huán)境貯源環(huán)境貯源 病菌在醫(yī)院中集中病菌在醫(yī)院中集中, ,多重耐藥。多重耐藥。動物動物 醫(yī)院鼠害醫(yī)院鼠害, ,病原菌重要宿主病原菌重要宿主,

38、 ,沙門菌。沙門菌。 傳播途徑傳播途徑 接觸接觸 直接接觸直接接觸; ;間接接觸間接接觸; ;飛沫傳播。飛沫傳播?？諝饪諝?空氣傳播空氣傳播, ,微生物氣溶膠微生物氣溶膠,1-2,1-2米。米。媒介物媒介物 水水, ,食物食物, ,血制品血制品, ,藥物藥物, ,醫(yī)療器具。醫(yī)療器具。昆蟲昆蟲 鼠鼠, ,蚊蚊, ,蚤蚤, ,蠅蠅, ,蜱蜱, ,蟑螂蟑螂, ,叮咬傳播。叮咬傳播。醫(yī)源性感染醫(yī)源性感染 注射注射, ,手術(shù)手術(shù), ,輸血輸血, ,梅毒梅毒,AIDS,AIDS,乙肝乙肝 易感者易感者 決定于病原菌的毒力和宿主的易感性決定于病原菌的毒力和宿主的易感性; ;醫(yī)療過程醫(yī)療過程破壞原有的防御機(jī)能

39、和微生態(tài)平衡破壞原有的防御機(jī)能和微生態(tài)平衡, ,手術(shù)。手術(shù)。 四四 醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素 1.1.易感對象的年齡和基礎(chǔ)疾病易感對象的年齡和基礎(chǔ)疾病老年人老年人 器官老化器官老化, ,功能衰退功能衰退, ,慢性病多。慢性病多。嬰幼兒嬰幼兒 免疫器官發(fā)育不健全。免疫器官發(fā)育不健全。 2.2.診療技術(shù)診療技術(shù) 器官移植器官移植 感染是最常見并發(fā)癥。感染是最常見并發(fā)癥。血液透析和腹膜透析血液透析和腹膜透析 尿毒癥患者尿毒癥患者, ,易感。易感。 3.3.侵入性檢查與治療侵入性檢查與治療侵入性檢查侵入性檢查 支氣管鏡支氣管鏡, ,膀胱鏡膀胱鏡, ,胃鏡胃鏡, ,黏膜黏膜損傷損傷; ;器械

40、消毒不徹底器械消毒不徹底, ,帶入病原菌。帶入病原菌。侵入性治療侵入性治療 氣管切開氣管切開, ,氣管插管氣管插管, ,導(dǎo)尿?qū)? ;引引流流, ,心導(dǎo)管心導(dǎo)管, ,心瓣膜等心瓣膜等, ,損傷黏膜。損傷黏膜。 4.4.損害免疫系統(tǒng)的因素?fù)p害免疫系統(tǒng)的因素放射治療放射治療 無選擇性無選擇性, ,損害免疫系統(tǒng)。損害免疫系統(tǒng)?；瘜W(xué)治療化學(xué)治療 細(xì)胞毒類藥物細(xì)胞毒類藥物, ,損害免疫系統(tǒng)。損害免疫系統(tǒng)。激素激素 抗炎抗炎, ,抗毒素抗毒素, ,抗休克抗休克, ,抑制免疫。抑制免疫。其它其它 濫用抗生素濫用抗生素, ,長期住院。長期住院。 五五 醫(yī)院感染的預(yù)防和控制醫(yī)院感染的預(yù)防和控制 1.1.消毒與滅

41、菌消毒與滅菌進(jìn)入人體的醫(yī)療用品必須滅菌進(jìn)入人體的醫(yī)療用品必須滅菌; ;接觸皮膚接觸皮膚黏膜的必須消毒黏膜的必須消毒, ,注射器注射器, ,輸液器輸液器, ,導(dǎo)管。導(dǎo)管。污染醫(yī)療器材污染醫(yī)療器材, ,先消毒后清洗先消毒后清洗, ,再滅菌。再滅菌。消毒劑消毒劑: :有效濃度有效濃度, ,消毒時(shí)間消毒時(shí)間, ,影響因素。影響因素。氧氣濕化瓶氧氣濕化瓶, ,霧化器霧化器, ,呼吸機(jī)及管道呼吸機(jī)及管道, ,定期定期消毒消毒; ;每日更換用無菌水每日更換用無菌水, ,加濕器。加濕器。消毒滅菌后消毒滅菌后, ,效果檢測。效果檢測。勤洗手勤洗手, ,清潔消毒清潔消毒, ,禁留長指甲禁留長指甲, ,戴戒指。戴戒

42、指。 2.2.隔離預(yù)防隔離預(yù)防切斷傳染源切斷傳染源, ,防止病原菌傳播。防止病原菌傳播。 3.3.合理使用抗合理使用抗菌藥物菌藥物合理使用抗菌素合理使用抗菌素, ,降低院內(nèi)感染率。降低院內(nèi)感染率。重點(diǎn)監(jiān)測重點(diǎn)監(jiān)測: :急診室急診室, ,重癥監(jiān)護(hù)室重癥監(jiān)護(hù)室, ,治療室治療室, ,嬰嬰兒室兒室, ,手術(shù)室手術(shù)室, ,檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科, ,供應(yīng)室。供應(yīng)室。一次性醫(yī)療用品等醫(yī)療垃圾一次性醫(yī)療用品等醫(yī)療垃圾, ,規(guī)范處理。規(guī)范處理。第八章第八章細(xì)菌感染的檢查方法與防細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則治原則第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)菌感染的診斷細(xì)菌感染的診斷 一一 病原菌檢測病原菌檢測 （一）標(biāo)本采集與送檢（一）標(biāo)本采集與

43、送檢早期早期 急性期急性期, ,使用抗菌藥物之前使用抗菌藥物之前采集采集 。 無菌無菌 嚴(yán)格無菌操作嚴(yán)格無菌操作, ,避免雜菌污染。避免雜菌污染。準(zhǔn)確準(zhǔn)確 呼吸呼吸, ,消化道消化道;CNS-;CNS-腦脊液腦脊液, ,血液。血液。盡快送檢盡快送檢 甘油鹽水保存甘油鹽水保存, ,腦膜炎球菌保溫。腦膜炎球菌保溫。做好標(biāo)記做好標(biāo)記 化驗(yàn)單與標(biāo)本一致?；?yàn)單與標(biāo)本一致。 （二）細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定（二）細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定1.1.分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)瓊脂劃線接種瓊脂劃線接種, ,挑選可疑菌落。挑選可疑菌落。菌落大小菌落大小,1-2mm;2-4mm;4-6mm,1-2mm;2-4mm;4-6mm形狀形狀, ,

44、圓形圓形, ,不規(guī)則不規(guī)則透明度透明度, ,透明透明, ,不透明不透明, ,半透明半透明表面表面, ,光滑光滑, ,干燥干燥, ,濕潤濕潤; ;邊緣是否整齊邊緣是否整齊, ,顏色顏色, ,色素色素, ,性質(zhì)性質(zhì)溶血溶血: :血培養(yǎng)基血培養(yǎng)基, ,甲型甲型, ,乙型乙型, ,丙型丙型培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備 配制配制:稱量稱量,溶解溶解,過濾過濾;調(diào)整調(diào)整pH,分裝分裝;高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌：103.4kpa；1.05kg/cm2121.315-20 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基劃線接種劃線接種-分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)菌落菌落colony挑選一個菌落挑選一個菌落-純種純種轉(zhuǎn)種轉(zhuǎn)種-純培養(yǎng)純培養(yǎng)Solid

45、 medium(clone)水溶性色素脂溶性色素 半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基v有鞭毛細(xì)菌有鞭毛細(xì)菌：v擴(kuò)散生長擴(kuò)散生長, ,周圍渾濁周圍渾濁。v無鞭毛細(xì)菌無鞭毛細(xì)菌：v沿穿刺線生長沿穿刺線生長, ,周圍透明周圍透明觀察動力觀察動力,保存菌種。保存菌種。 細(xì)菌在培養(yǎng)基生長現(xiàn)象細(xì)菌在培養(yǎng)基生長現(xiàn)象 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 渾濁渾濁 大多數(shù)細(xì)菌大多數(shù)細(xì)菌沉淀沉淀 鏈狀生長菌鏈狀生長菌菌膜菌膜 專性需氧菌專性需氧菌 結(jié)核桿菌結(jié)核桿菌枯草桿菌枯草桿菌細(xì)菌連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)2.2.形態(tài)學(xué)檢查形態(tài)學(xué)檢查活菌觀察活菌觀察懸滴法懸滴法, ,暗視野鏡暗視野鏡, ,觀察動力。觀察動力。熒光抗體加入培養(yǎng)液熒光抗體加入培養(yǎng)液,

46、,熒光菌球。熒光菌球。染色觀察染色觀察 單染單染, ,復(fù)染復(fù)染, ,革藍(lán)染色革藍(lán)染色, ,抗酸染色。抗酸染色。特殊染色特殊染色 細(xì)胞壁細(xì)胞壁, ,核質(zhì)核質(zhì); ;芽孢芽孢, ,鞭鞭毛毛, ,莢膜。莢膜。3.3.生化試驗(yàn)生化試驗(yàn)糖發(fā)酵糖發(fā)酵, ,蛋白質(zhì)分解試驗(yàn)。蛋白質(zhì)分解試驗(yàn)。4.4.血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn) 細(xì)菌玻片凝集細(xì)菌玻片凝集, ,用抗體進(jìn)行種用抗體進(jìn)行種, ,型鑒定。型鑒定。5.5.動物試驗(yàn)動物試驗(yàn) 小鼠小鼠, ,豚鼠豚鼠, ,家兔家兔; ;結(jié)核痰液注射豚鼠結(jié)核痰液注射豚鼠, ,雜雜菌死亡菌死亡; ;發(fā)病后解剖發(fā)病后解剖, ,得純培養(yǎng)結(jié)核菌。得純培養(yǎng)結(jié)核菌。6.6.藥物敏感試驗(yàn)藥物敏感試驗(yàn)單

47、片紙碟法單片紙碟法- -抑菌直徑抑菌直徑, ,試管試管-MIC-MIC。紫紅酒新來 （三）病原菌抗原的檢測（三）病原菌抗原的檢測酶免疫技術(shù)酶免疫技術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法, ,免疫組化法。免疫組化法。協(xié)同凝集試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn) SPASPA吸附抗體吸附抗體, ,檢測抗原。檢測抗原。免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù) 熒光菌球熒光菌球, ,培養(yǎng)培養(yǎng)4-6hr4-6hr。對流免疫技術(shù)對流免疫技術(shù) 腦膜炎球菌抗原檢測。腦膜炎球菌抗原檢測。免疫印記技術(shù)免疫印記技術(shù) 聚丙烯凝膠酰胺電泳聚丙烯凝膠酰胺電泳, ,轉(zhuǎn)印轉(zhuǎn)印檢測細(xì)菌蛋白。檢測細(xì)菌蛋白。24孔板, 加入抗體,加入待檢標(biāo)本,加入酶標(biāo)記抗體,底物,顯色酶

48、免疫技術(shù)免疫熒光技術(shù)對流免疫電泳 流腦病人腦脊液 （四）檢測病原菌核酸（四）檢測病原菌核酸 核酸雜交技術(shù)核酸雜交技術(shù)同位素標(biāo)記核酸單鏈作為探針同位素標(biāo)記核酸單鏈作為探針, ,與待測標(biāo)與待測標(biāo)本中核酸單鏈互補(bǔ)形成雙鏈本中核酸單鏈互補(bǔ)形成雙鏈, ,儀器檢測。儀器檢測。 PCR技術(shù)技術(shù) 核酸體外擴(kuò)增核酸體外擴(kuò)增DNA或或RNA 體外擴(kuò)增體外擴(kuò)增,將同一基因擴(kuò)增幾將同一基因擴(kuò)增幾百萬倍后凝膠電泳百萬倍后凝膠電泳, 快速快速,敏感敏感,特異。特異。 基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)新近發(fā)展起來的核酸序列分析技術(shù)新近發(fā)展起來的核酸序列分析技術(shù), ,自動自動化檢測化檢測, ,微機(jī)處理微機(jī)處理, ,同時(shí)檢測大量標(biāo)本。同時(shí)檢測大量標(biāo)本。 （五）其它方法五）其它方法噬菌體分型噬菌體分型;細(xì)菌細(xì)菌L型檢測型檢測;氣相色譜檢測細(xì)菌代謝物氣相色譜檢測細(xì)菌代謝物;13C,14C呼吸試驗(yàn)檢測幽門螺桿菌產(chǎn)生的呼吸試驗(yàn)檢測幽門螺桿菌產(chǎn)生的尿素酶。尿素酶。 二二 血清學(xué)診斷血清學(xué)診斷用已知細(xì)菌或特異性抗原用已知細(xì)菌或特異性抗原, ,檢測血清中抗體。檢測血清中抗體。用于病程較長的感染性疾病的診斷用于病程較長的感染性疾病的診斷, ,傷寒。