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1、微生物售后服務(wù)中遇到的常見問題處理及經(jīng)驗(yàn)交流一 支原體試劑1支原體感染的臨床癥狀? 男性:男性患者常有明顯或不明顯尿道刺激征,尿道口有漿液性或粘液膿性分泌物,清晨有“糊口”現(xiàn)象,陰囊部有不適感;女性:尿頻、排尿困難、陰道炎或?qū)m頸炎時(shí)有充血、水腫、糜爛、分泌物增多現(xiàn)象,外陰部位刺癢不適等約有三分一的病人可無任何自覺癥狀。2支原體感染的主要危害? NGU 和不孕不育3臨床上支原體感染率?根據(jù)資料顯示和臨床調(diào)查,我國(guó)現(xiàn)在Uu的感染率在30-60%之間,孕婦更高,在50-80%之間,不同地區(qū)有所差異;Mh的感染率在10-30%之間,不同地區(qū)有所差異;4檢測(cè)支原體試劑的標(biāo)本類型?由于支原體主要黏附于生殖

2、道上皮細(xì)胞上,所以標(biāo)本時(shí)最好是:男性:尿道上皮細(xì)胞;女性:宮頸上皮細(xì)胞;但也有用精液,前列腺液或尿液的,但敏感性不如上面的;5與其他支原體藥敏試劑相比,我公司的特點(diǎn)?1)藥敏種類多:包括臨床上常用的治療支原體的六大類10種抗生素,而銀科,黑馬,麗珠,浪峰的只有4種;2)結(jié)果快速:參考PPLO肉湯配方和SP-4培養(yǎng)基配方,選用進(jìn)口的原材料合理配比,相對(duì)更適合支原體的生長(zhǎng),可在24小時(shí)內(nèi)達(dá)到檢測(cè)支原體的目的;3)與法國(guó)梅里埃的培養(yǎng)試劑相比符合率達(dá)95%以上;6客戶反映我公司支原體試劑陽性率太高如何解釋?支原體可寄居于健康人的泌尿生殖道,屬于條件致病微生物。有資料顯示,流行病學(xué)調(diào)查表明,34正常男性

3、可分離到解脲支原體,而在對(duì)孕婦的研究中:解脲支原體(UU)在孕婦下生殖道的寄居率可高達(dá)5080%。各地孕婦UU感染率不同,可能與各地的檢測(cè)試劑、方法和時(shí)間不同有關(guān)。當(dāng)然,試劑的陽性率高低還需要統(tǒng)計(jì)一定時(shí)期,一定的標(biāo)本量,同時(shí)結(jié)合該地區(qū)的經(jīng)濟(jì)和文化狀況等作出結(jié)論。7客戶反映我公司支原體試劑陽性率太低如何解釋?1)標(biāo)本采集問題:由于操作者技術(shù)問題沒采集到或采集到太少的標(biāo)本;2)試劑沒恢復(fù)到室溫而操作,導(dǎo)致支原體凍死;3)支原體感染有人群性差異,區(qū)域性差異,應(yīng)結(jié)合該地區(qū)情況作出判斷;4)試劑保存不當(dāng),導(dǎo)致試劑靈敏度下降;8支原體藥敏板特殊模式如何處理?1)混合孔變色,Uu和Mh孔不變色,而藥敏結(jié)果正

4、常:解釋:標(biāo)本沒有混勻建議:建議重做。2)混合孔不變色,而Uu和/或Mh孔變色,而藥敏結(jié)果正常:解釋:可能標(biāo)本沒混勻建議:如藥敏結(jié)果出現(xiàn)耐藥或中介均勻的情況,可直接報(bào)告結(jié)果,否則重做。3)藥敏結(jié)果倒置即高濃度耐藥,低濃度敏感:解釋:可能標(biāo)本沒混勻或者藥敏板本身的原因。建議:如果其它結(jié)果正常則無須重做,剔除此空,直接報(bào)告結(jié)果。4)滿板紅:解釋:病人可能患有腎炎導(dǎo)致堿性標(biāo)本,或者是精液,前列腺液標(biāo)本加入太多所致。建議:更換標(biāo)本類型重做。二衣原體試劑:1結(jié)果不易判斷:原因:主要是由于我公司現(xiàn)在所配的專用拭子在劇烈多次攪拌的情況下可產(chǎn)生假陽性以及結(jié)果顏色介于陰性和陽性之間的顏色,再加上衣原體作為性病,

5、所以醫(yī)院在報(bào)結(jié)果時(shí)更加謹(jǐn)慎,對(duì)于這些摸棱兩可的結(jié)果,他們不敢報(bào),這也是這段時(shí)間衣原體反映最多的問題。解決:嚴(yán)格按照說明書操作,更換拭子,配套質(zhì)控品;2陽性率太高;原因:把介于陰性和陽性之間的顏色判為陽性,把其他顏色如粉紅色,灰色等判為陽性;解決:嚴(yán)格按說明書操作,更換拭子,嚴(yán)格依據(jù)說明書進(jìn)行結(jié)果判斷;三BV試劑:1臨床Bv陽性率:有區(qū)域性,人群性,年齡性,文化水平等的差別,一般在1050之間。2檢測(cè)Bv金標(biāo)準(zhǔn)(Amsel):a .陰道PH值>4.5; b. 陰道分泌物增多,變稀,有異味;c .陰道分泌物加10KOH有魚腥味; d .陰道涂片可見線索細(xì)胞;四項(xiàng)中三項(xiàng)為陽性(線索細(xì)胞必有)即

6、為陽性結(jié)果3市場(chǎng)常見Bv檢測(cè)試劑盒的原理:1、改良胺實(shí)驗(yàn):主要廠家有鄭州安圖,珠海銀科,珠海浪峰,廣州泉池,三明博峰等。2、唾液酸酶法:Bvblue,珠海銀科,珠海浪峰,中山天洋,珠海麗拓 廣州泉池等。3、蛋白水解酶法:廣州泉池,珠海浪峰等。4、細(xì)菌性陰道病聯(lián)檢:4我公司BV試劑盒原理:細(xì)菌性陰道病患者的陰道分泌物中有腐胺、尸胺和組胺,當(dāng)這些致病因子胺與反應(yīng)液產(chǎn)生反應(yīng)所產(chǎn)生的氣體(堿性)就會(huì)與復(fù)合膜上物質(zhì)結(jié)合使PH值升高,并使其中的指示劑變紅而顯示陽性.5.我公司的BV 與其他公司的相比:1)操作簡(jiǎn)單,一步法;2)檢測(cè)時(shí)間短,只需5分鐘;3)固相膜顯色,類似膠金試劑(我們稱之為類膠金),檢測(cè)結(jié)

7、果更直觀;4)復(fù)合膜放大反應(yīng),提高檢測(cè)的靈敏度,靈敏度高達(dá)94.6%;5)一個(gè)標(biāo)本可以同時(shí)做Bv和白帶常規(guī);6.我公司BV陽性率低?其主要是室溫過低造成的,因?yàn)槲夜綛V試劑盒的原理是氣液相相結(jié)合的原理,氣溫過低不利于氣體的揮發(fā),從而影響結(jié)果,可延長(zhǎng)時(shí)間避免溫度對(duì)結(jié)果的影響。四血培養(yǎng)瓶:1標(biāo)本類型?主要是血液,心包液、胸腔液、腹腔液、骨髓、腦脊液以及漿膜腔積液也可用血液培養(yǎng)瓶增菌。2血培養(yǎng)常見菌?革蘭陰性菌主要包括大腸埃希菌、肺炎克雷柏菌、腸桿菌,傷寒沙門菌、綠膿假單胞菌、不動(dòng)桿菌屬等;革蘭陽性菌主要包括金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、念珠菌屬等。3血培養(yǎng)結(jié)果處理發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)信號(hào),應(yīng)無菌缺

8、抽取培養(yǎng)物,涂片行革蘭染色,發(fā)現(xiàn)細(xì)菌,盡快報(bào)告染色結(jié)果;根據(jù)染色特征,選擇合適的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)種,見表1表1 根據(jù)革蘭染色特征選擇轉(zhuǎn)種培養(yǎng)基類型的建議 染色特點(diǎn)5%10%CO2孵育a厭氧氣體孵育a血瓊脂巧克力瓊脂中國(guó)藍(lán)或麥康凱或EMB血瓊脂PEA或CAN革蘭陽性球菌XXX桿菌XXX革蘭陰性球菌XXXX桿菌XXXXX真菌bXX    注;a:所有培養(yǎng)至少孵育45h;EMB:伊紅美藍(lán)瓊脂;PEA;苯乙基醇瓊脂;CAN;多黏菌素-蔡啶酸瓊脂;b:增加真菌培養(yǎng)基(如:沙保弱葡萄糖瓊脂)和30孵育;X:選擇的培養(yǎng)基革蘭染色未找到細(xì)菌的血培養(yǎng)瓶,補(bǔ)充吖啶橙染色檢查彎曲菌和布魯菌,發(fā)現(xiàn)陽性者進(jìn)

9、行分離鑒定,未發(fā)現(xiàn)陽性則應(yīng)轉(zhuǎn)種厭氧和需氧血平板,然后繼續(xù)培養(yǎng)監(jiān)測(cè)至最終報(bào)告的時(shí)間,注意其他不常見細(xì)菌見附錄。 革蘭染色為形態(tài)均一的細(xì)菌,根據(jù)革蘭染色結(jié)果選擇抗菌藥物進(jìn)行直接抗菌藥物敏感試驗(yàn),同時(shí)轉(zhuǎn)種培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)菌落,立即做細(xì)菌鑒定和標(biāo)準(zhǔn)抗菌藥物敏感試驗(yàn)。使用雙相培養(yǎng)基進(jìn)行血培養(yǎng)時(shí),如有菌落生長(zhǎng)可直接進(jìn)行細(xì)菌鑒定和標(biāo)準(zhǔn)抗菌藥物敏感試驗(yàn)。4臨床血培養(yǎng)的陽性率?根據(jù)資料和臨床調(diào)查大約為10%5陽性結(jié)果的特征:液體混濁、溶血、產(chǎn)生氣泡及瓊脂斜面上有菌落菌苔等。6我公司血培養(yǎng)瓶的特點(diǎn)?1)液相含有茴香腦磺酸鈉(SPS)不僅有抗血凝作用,更能中和或部份中和血中免疫因子和殘留抗生素(鏈霉素、卡那霉素、慶大毒素

10、、多粘菌素B等)的殺菌抑菌作用。2)含多種生長(zhǎng)因子、完整的氨基酸系列和各種維生素,故不僅能促使血中的一般細(xì)菌快速繁殖,更能支持各種營(yíng)養(yǎng)苛求菌如血培養(yǎng)標(biāo)本中的常見菌流感嗜血桿菌、腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌等的正常生長(zhǎng);3)固、液雙相血培養(yǎng)瓶形式,不僅可縮短檢菌時(shí)間、簡(jiǎn)化操作和減少污染,而且國(guó)外最新研究也證實(shí),苛養(yǎng)菌在固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)顯著優(yōu)于液體培養(yǎng)基。4)需氧和厭氧同時(shí)進(jìn)行可提高檢處率。五平板1我公司培養(yǎng)基的類型有?1) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)瓊脂:用于常見菌的培養(yǎng)以及常用于院內(nèi)感染計(jì)菌落數(shù)用。2) 富集培養(yǎng)基:血平板和哥倫比亞血平板:營(yíng)養(yǎng)比營(yíng)養(yǎng)瓊脂更豐富,可觀察溶血環(huán),還可以培養(yǎng)出一些苛氧菌3) 選

11、擇性培養(yǎng)基中國(guó)藍(lán),伊紅美藍(lán),麥康凱,SS,淋球菌培養(yǎng)基,嗜血桿菌培養(yǎng)基,腦膜炎奈瑟氏菌培養(yǎng)基等。4) 藥敏專用平板(紙片法專用)MH平板:對(duì)平板的厚度要求嚴(yán)格,要求厚度4mm顯色平板:十種顯色平板2巧克力色培養(yǎng)基的類型?1)普通巧克力色血瓊脂:以GC干粉為基礎(chǔ),加入營(yíng)養(yǎng)添加劑。用于苛養(yǎng)性微生物的培養(yǎng),尤其奈瑟氏菌屬和嗜血桿菌菌屬。2)巧克力色血瓊脂(培養(yǎng)嗜血桿菌)以哥倫比亞干粉為基礎(chǔ),加入萬古霉素。用于流感嗜血桿菌的培養(yǎng)。3)巧克力色血瓊脂(培養(yǎng)腦膜炎奈瑟氏菌)以哥倫比亞干粉為基礎(chǔ),加入萬古霉素和多粘菌素。(巧克力雙抗培養(yǎng)基)用于從鼻咽分泌物和污染的腦脊液等標(biāo)本中分離腦膜炎奈瑟氏菌。4)淋球菌培養(yǎng)基以GC干粉為基礎(chǔ),加入營(yíng)養(yǎng)添加劑和萬古霉素、多粘菌素和制霉菌素,甲氧芐氨嘧啶。用于致病性的奈瑟氏菌屬(淋球菌、腦膜炎奈瑟氏菌)的培養(yǎng)。3血平板出水多顏色變暗?主要原因:由于羊血質(zhì)量,培養(yǎng)基基底液(未加血的液體)成分不合理,造成RBC處于滲透壓,運(yùn)輸,保存不當(dāng)?shù)仍驅(qū)е卵桨逯械募t細(xì)胞破碎溶血所致。這是目前血平板所面臨的普遍現(xiàn)象,從技術(shù)上無法回避,只能采取一定的方法盡量減少。解決:放冰箱時(shí)注意不要靠近冰箱壁,因?yàn)橄浔诘臏囟鹊?,易凍壞平板引起溶血,另如果平板?nèi)出現(xiàn)冷凝水,滴或流到

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