第八章 污染生態(tài)學(xué)的一般研究方法

1、1污染生態(tài)學(xué)污染生態(tài)學(xué)Pollution ecology 第八章第八章 污染生態(tài)學(xué)的一般研究方法污染生態(tài)學(xué)的一般研究方法 （Chapter 8: General Methods for Pollution Ecology Research ）主講：環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院主講：環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院 王宏鑌王宏鑌 2012年年12月月14日日2講授內(nèi)容講授內(nèi)容一、野外調(diào)查一、野外調(diào)查二、受控實(shí)驗(yàn)二、受控實(shí)驗(yàn) （一）體內(nèi)研究（一）體內(nèi)研究整體生物試驗(yàn)整體生物試驗(yàn) （二）體外研究（二）體外研究器官、細(xì)胞和亞細(xì)胞水平器官、細(xì)胞和亞細(xì)胞水平試驗(yàn)試驗(yàn)三、多學(xué)科交叉三、多學(xué)科交叉四、新技術(shù)的運(yùn)用四、新技術(shù)的運(yùn)用 （

2、一）生化和分子水平研究（一）生化和分子水平研究 （二）環(huán)境因素（二）環(huán)境因素“三致三致”作用的研究技術(shù)作用的研究技術(shù) （三）微宇宙試驗(yàn)（三）微宇宙試驗(yàn)3一、野外調(diào)查一、野外調(diào)查野外調(diào)查是真實(shí)獲得生物與污染環(huán)境相互野外調(diào)查是真實(shí)獲得生物與污染環(huán)境相互關(guān)系第一手資料的關(guān)鍵步驟。關(guān)系第一手資料的關(guān)鍵步驟。 能否采集到有代表性的樣本是野外調(diào)查的能否采集到有代表性的樣本是野外調(diào)查的關(guān)鍵關(guān)鍵 。在開(kāi)展野外調(diào)查前，需要精心做好準(zhǔn)備。在開(kāi)展野外調(diào)查前，需要精心做好準(zhǔn)備。采樣的記錄根據(jù)調(diào)查目的而定，但要完整，采樣的記錄根據(jù)調(diào)查目的而定，但要完整，所記載的參數(shù)要全面。所記載的參數(shù)要全面。 4一、野外調(diào)查一、野外調(diào)

3、查野外觀測(cè)研究技術(shù)野外觀測(cè)研究技術(shù) 生態(tài)環(huán)境樣品采集技術(shù)生態(tài)環(huán)境樣品采集技術(shù) 自然環(huán)境觀測(cè)技術(shù)自然環(huán)境觀測(cè)技術(shù) 土壤樣品采集技術(shù)土壤樣品采集技術(shù) 小氣候觀測(cè)技術(shù)小氣候觀測(cè)技術(shù) 水樣品采集技術(shù)水樣品采集技術(shù) 生物環(huán)境觀測(cè)技術(shù)生物環(huán)境觀測(cè)技術(shù) 大氣樣品采集技術(shù)大氣樣品采集技術(shù) 野外實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)技術(shù)野外實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)技術(shù) 生物樣品采集技術(shù)生物樣品采集技術(shù)5二、受控實(shí)驗(yàn)二、受控實(shí)驗(yàn)受控實(shí)驗(yàn)是在模擬自然生態(tài)系統(tǒng)的受控生受控實(shí)驗(yàn)是在模擬自然生態(tài)系統(tǒng)的受控生態(tài)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中研究單項(xiàng)或多項(xiàng)因子相互作態(tài)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中研究單項(xiàng)或多項(xiàng)因子相互作用及其對(duì)種群或群落影響的方法技術(shù)（鄭用及其對(duì)種群或群落影響的方法技術(shù)（鄭師章等，師章等，1

4、994）。）。由于野外干擾因素多，生物對(duì)污染的反應(yīng)由于野外干擾因素多，生物對(duì)污染的反應(yīng)是對(duì)綜合環(huán)境條件的反應(yīng)，要探索單一污是對(duì)綜合環(huán)境條件的反應(yīng)，要探索單一污染物或污染物之間對(duì)生物的聯(lián)合作用，在染物或污染物之間對(duì)生物的聯(lián)合作用，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)需要進(jìn)行添加外源污染物的受控實(shí)驗(yàn)室內(nèi)需要進(jìn)行添加外源污染物的受控實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)。 6（一）體內(nèi)研究（一）體內(nèi)研究整體生物試驗(yàn)整體生物試驗(yàn)根據(jù)暴露時(shí)間的長(zhǎng)短可分為急性、亞慢性（亞急根據(jù)暴露時(shí)間的長(zhǎng)短可分為急性、亞慢性（亞急性）和慢性毒性試驗(yàn)。性）和慢性毒性試驗(yàn)。急性毒性試驗(yàn)是研究化學(xué)物等有害因子大劑量急性毒性試驗(yàn)是研究化學(xué)物等有害因子大劑量一一次暴露或次暴露或24h

5、內(nèi)內(nèi)多次暴露對(duì)所試生物引起的毒性試多次暴露對(duì)所試生物引起的毒性試驗(yàn)。驗(yàn)。亞慢性（亞急性）毒性試驗(yàn)是指機(jī)體亞慢性（亞急性）毒性試驗(yàn)是指機(jī)體連續(xù)多日連續(xù)多日接接觸環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)試驗(yàn)，一般暴露時(shí)間為觸環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)試驗(yàn)，一般暴露時(shí)間為1-3月月。慢性毒性試驗(yàn)是指機(jī)體慢性毒性試驗(yàn)是指機(jī)體長(zhǎng)期接觸長(zhǎng)期接觸環(huán)境污染物的毒環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)試驗(yàn)，一般暴露時(shí)間為性效應(yīng)試驗(yàn)，一般暴露時(shí)間為6個(gè)月至個(gè)月至2年年，甚至，甚至終生染毒。終生染毒。二、受控實(shí)驗(yàn)二、受控實(shí)驗(yàn)7劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系曲線圖關(guān)系曲線圖劑量10050反應(yīng)強(qiáng)度（）圖 1劑量反應(yīng)曲線（直線型）劑量10050死

6、亡率（）圖2 劑量反應(yīng)曲線（拋物線型）對(duì)數(shù)劑量10050死亡率（）圖3 劑量反應(yīng)曲線（S形線型）死亡率（概率單位）對(duì)數(shù)劑量10050圖4 劑量反應(yīng)曲線8（二）體外研究（二）體外研究器官、細(xì)胞器官、細(xì)胞和亞細(xì)胞水平試驗(yàn)和亞細(xì)胞水平試驗(yàn)器官灌流技術(shù)；器官灌流技術(shù)；單細(xì)胞懸液；單細(xì)胞懸液；細(xì)胞分離技術(shù)；細(xì)胞分離技術(shù)；生物離心技術(shù)。生物離心技術(shù)。9（三）微宇宙試驗(yàn)（三）微宇宙試驗(yàn)微宇宙法（微宇宙法（microcosm）是研究污染物在生）是研究污染物在生物種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)和生物圈水平上物種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)和生物圈水平上生物效應(yīng)的一種方法，又被稱(chēng)為模型生態(tài)生物效應(yīng)的一種方法，又被稱(chēng)為模型生態(tài)系統(tǒng)法（

7、系統(tǒng)法（model ecosystem）。）。微宇宙是自然生態(tài)系統(tǒng)的一部分，包括有微宇宙是自然生態(tài)系統(tǒng)的一部分，包括有生物和非生物的組織及其過(guò)程，能提供自生物和非生物的組織及其過(guò)程，能提供自然生態(tài)系統(tǒng)的群落結(jié)構(gòu)和功能。然生態(tài)系統(tǒng)的群落結(jié)構(gòu)和功能。微宇宙不完全等于自然生態(tài)系統(tǒng)，沒(méi)有自微宇宙不完全等于自然生態(tài)系統(tǒng)，沒(méi)有自然生態(tài)系統(tǒng)龐大和復(fù)雜，不能包含自然生然生態(tài)系統(tǒng)龐大和復(fù)雜，不能包含自然生態(tài)系統(tǒng)的所有組成。態(tài)系統(tǒng)的所有組成。10（三）微宇宙試驗(yàn)（三）微宇宙試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化水生微宇宙標(biāo)準(zhǔn)化水生微宇宙（Standardized Aquatic Microcosm，SAM）用于在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定有毒物質(zhì)在多物種水

8、平對(duì)淡用于在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定有毒物質(zhì)在多物種水平對(duì)淡水生態(tài)系統(tǒng)的影響。水生態(tài)系統(tǒng)的影響。試驗(yàn)時(shí)間試驗(yàn)時(shí)間64天，容器為天，容器為4L的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物包括生物包括10種藻、種藻、4種無(wú)脊椎動(dòng)物、種無(wú)脊椎動(dòng)物、1種細(xì)菌。種細(xì)菌。對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、pH值等理化參數(shù)均有具體值等理化參數(shù)均有具體要求。要求。11（三）微宇宙試驗(yàn)（三）微宇宙試驗(yàn)燒杯水生微宇宙燒杯水生微宇宙（Mixed Flask Culture，MFC）又稱(chēng)燒杯混合培養(yǎng)，試驗(yàn)時(shí)間又稱(chēng)燒杯混合培養(yǎng)，試驗(yàn)時(shí)間1214周，容器周，容器為為1L的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物包括的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物包括4種藻、種藻、2

9、種無(wú)脊椎動(dòng)物、一些細(xì)菌和原生動(dòng)物。對(duì)溫度、種無(wú)脊椎動(dòng)物、一些細(xì)菌和原生動(dòng)物。對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、光照強(qiáng)度、pH值等理化參數(shù)均有具體要求。值等理化參數(shù)均有具體要求。與與SAM不同的是通過(guò)加入來(lái)自生態(tài)系統(tǒng)浸出液不同的是通過(guò)加入來(lái)自生態(tài)系統(tǒng)浸出液提供給微宇宙中生物群落所需的基質(zhì)。提供給微宇宙中生物群落所需的基質(zhì)。12（三）微宇宙試驗(yàn)（三）微宇宙試驗(yàn)室外水生微宇宙室外水生微宇宙（Outdoor Aquatic Microcosm）又稱(chēng)中宇宙（又稱(chēng)中宇宙（Mesocosm），試驗(yàn)單元），試驗(yàn)單元6 m3，試驗(yàn)生物包，試驗(yàn)生物包括浮游植物、浮游動(dòng)物、魚(yú)類(lèi)、大型水生植物和無(wú)脊括浮游植物、浮游動(dòng)物、魚(yú)類(lèi)、大型水

10、生植物和無(wú)脊椎動(dòng)物。椎動(dòng)物。土壤核心微宇宙土壤核心微宇宙（Soil Core Microcosm，SCM ）該法采用野外環(huán)境的土壤核心，將其設(shè)置在環(huán)境條件控該法采用野外環(huán)境的土壤核心，將其設(shè)置在環(huán)境條件控制的實(shí)驗(yàn)室中，試驗(yàn)生物因土壤核心采集場(chǎng)所不同而制的實(shí)驗(yàn)室中，試驗(yàn)生物因土壤核心采集場(chǎng)所不同而不同，可研究化學(xué)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)元素對(duì)農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的不同，可研究化學(xué)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)元素對(duì)農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的影響及其環(huán)境歸趨。影響及其環(huán)境歸趨。模擬農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)模擬農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)（Modeling agricultural ecosystem）該系統(tǒng)模擬農(nóng)田條件，無(wú)陸生動(dòng)物，為同時(shí)測(cè)定農(nóng)藥在該系統(tǒng)模擬農(nóng)田條件，無(wú)陸生動(dòng)物

11、，為同時(shí)測(cè)定農(nóng)藥在土壤、植物、水溶液和空氣中的殘留而設(shè)計(jì)，采用土壤、植物、水溶液和空氣中的殘留而設(shè)計(jì)，采用0.75 m3的矩形玻璃室，可打入足夠數(shù)量的空氣，通的矩形玻璃室，可打入足夠數(shù)量的空氣，通過(guò)玻璃室模擬微風(fēng)并能收集揮發(fā)的農(nóng)藥。過(guò)玻璃室模擬微風(fēng)并能收集揮發(fā)的農(nóng)藥。13生態(tài)環(huán)境樣品實(shí)驗(yàn)室技術(shù)生態(tài)環(huán)境樣品實(shí)驗(yàn)室技術(shù)植物樣品分析技術(shù)植物樣品分析技術(shù)動(dòng)物樣品分析技術(shù)動(dòng)物樣品分析技術(shù)微生物樣品分析技術(shù)微生物樣品分析技術(shù)環(huán)境樣品分析技術(shù)環(huán)境樣品分析技術(shù)14三、多學(xué)科交叉三、多學(xué)科交叉生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)等學(xué)科的研究方法均可借鑒到生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)等學(xué)科的研究方法均可借鑒到污染生態(tài)學(xué)的研究中污染生態(tài)學(xué)的研究中

12、 。在實(shí)際研究過(guò)程中，經(jīng)常要借助化學(xué)、土壤學(xué)、在實(shí)際研究過(guò)程中，經(jīng)常要借助化學(xué)、土壤學(xué)、物理化學(xué)、植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、微生物學(xué)、地理學(xué)、物理化學(xué)、植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、微生物學(xué)、地理學(xué)、水文學(xué)、氣象學(xué)等學(xué)科的研究手段。水文學(xué)、氣象學(xué)等學(xué)科的研究手段。 為了更進(jìn)一步研究微觀和宏觀層次下生物與環(huán)境為了更進(jìn)一步研究微觀和宏觀層次下生物與環(huán)境的相互關(guān)系，還需要借助分子生物學(xué)、細(xì)胞生物的相互關(guān)系，還需要借助分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)、景觀生態(tài)學(xué)、學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)、景觀生態(tài)學(xué)、全球生態(tài)學(xué)等的研究方法。全球生態(tài)學(xué)等的研究方法。 15四、新技術(shù)的運(yùn)用四、新技術(shù)的運(yùn)用（一）（一）生化和分

13、子水平研究生化和分子水平研究一般代謝酶的活性測(cè)定一般代謝酶的活性測(cè)定 乙酰膽堿酯酶乙酰膽堿酯酶 三磷酸腺苷酶三磷酸腺苷酶解毒系統(tǒng)酶類(lèi)誘導(dǎo)作用的檢測(cè)解毒系統(tǒng)酶類(lèi)誘導(dǎo)作用的檢測(cè) 混合功能加氧酶混合功能加氧酶 谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)移酶谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)移酶抗氧化防御系統(tǒng)檢測(cè)抗氧化防御系統(tǒng)檢測(cè) PCR-SSCP（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性）單鏈構(gòu)象多態(tài)性）技術(shù)技術(shù)熒光原位雜交技術(shù)熒光原位雜交技術(shù) DNA損傷試驗(yàn)損傷試驗(yàn)基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)16單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（SSCP）單鏈單鏈DNA在中性條件下會(huì)形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。這種二在中性條件下會(huì)形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。這種二級(jí)結(jié)構(gòu)依賴(lài)于其堿基的

14、序列。即使只有一個(gè)堿基級(jí)結(jié)構(gòu)依賴(lài)于其堿基的序列。即使只有一個(gè)堿基的不同，也會(huì)形成不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)并可引起非變的不同，也會(huì)形成不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)并可引起非變性條件下的電泳遷移率的差異。性條件下的電泳遷移率的差異。技術(shù)路線：技術(shù)路線：PCR產(chǎn)物產(chǎn)物95 C變性變性5分鐘，立即置冰上。分鐘，立即置冰上。10%聚丙烯酰胺凝膠電泳。條件：電泳緩沖液聚丙烯酰胺凝膠電泳。條件：電泳緩沖液0.5 TBE，電壓，電壓70v, 4 C環(huán)境下電泳過(guò)夜（環(huán)境下電泳過(guò)夜（0.2%硝硝酸銀染色）。酸銀染色）。17熒光原位雜交技術(shù)熒光原位雜交技術(shù)熒光原位雜交技術(shù)（熒光原位雜交技術(shù)（fluorescence in situ Hyb

15、ridization, FISH）問(wèn)世于）問(wèn)世于70年代后期，年代后期，其原理是標(biāo)記了熒光的單鏈其原理是標(biāo)記了熒光的單鏈DNA（探針）（探針）和與其互補(bǔ)的和與其互補(bǔ)的DNA（玻片上的標(biāo)本）退火（玻片上的標(biāo)本）退火雜交，通過(guò)觀察熒光信號(hào)在染色體上的位置雜交，通過(guò)觀察熒光信號(hào)在染色體上的位置來(lái)反映相應(yīng)基因的情況。來(lái)反映相應(yīng)基因的情況。18熒光原位雜交技術(shù)熒光原位雜交技術(shù) DNA變性：變性： 當(dāng)溶液中的當(dāng)溶液中的DNA分子處于高溫或高分子處于高溫或高pH值值(13)條件下，維持雙螺旋在一起的堿基互補(bǔ)對(duì)就被破條件下，維持雙螺旋在一起的堿基互補(bǔ)對(duì)就被破壞，壞，DNA雙鏈解離成兩條單鏈，這一過(guò)程叫雙鏈解離

16、成兩條單鏈，這一過(guò)程叫DNA變性。變性。 DNA復(fù)性：復(fù)性： 當(dāng)溫度降低至合適溫度或恢復(fù)當(dāng)溫度降低至合適溫度或恢復(fù)pH值至中性，值至中性，兩條裂解的單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則重新形成雙兩條裂解的單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則重新形成雙鏈結(jié)構(gòu)，這一過(guò)程叫鏈結(jié)構(gòu)，這一過(guò)程叫DNA復(fù)性，又叫復(fù)性，又叫DNA雜交。雜交。192021實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)方法：1.1.探針及標(biāo)本的變性探針及標(biāo)本的變性探針變性探針變性：標(biāo)本變性標(biāo)本變性：222.2.雜交雜交 DNA探針探針10L滴于已變性并脫水的玻滴于已變性并脫水的玻片標(biāo)本上，蓋上片標(biāo)本上，蓋上1818蓋玻片，用蓋玻片，用Parafilm封片，置于潮濕暗盒中封片，置于潮濕暗

17、盒中37雜雜交過(guò)夜（約交過(guò)夜（約1517h）。）。 233.洗脫洗脫 244.4.雜交信號(hào)的放大雜交信號(hào)的放大 255.封片封片 可采用不同類(lèi)型的封片液。如果封片液可采用不同類(lèi)型的封片液。如果封片液中不含有中不含有Mowiol（可使封片液產(chǎn)生自封（可使封片液產(chǎn)生自封閉作用），為防止蓋片與載片之間的溶閉作用），為防止蓋片與載片之間的溶液揮發(fā)，可使用指甲油將蓋片周?chē)忾]。液揮發(fā)，可使用指甲油將蓋片周?chē)忾]。封好的玻片標(biāo)本可以在封好的玻片標(biāo)本可以在-20-70的冰箱的冰箱中的暗盒中保持?jǐn)?shù)月之久。中的暗盒中保持?jǐn)?shù)月之久。 262728主要臨床特征主要臨床特征：嚴(yán)重智力低下，生長(zhǎng)遲緩嚴(yán)重智力低下，生長(zhǎng)遲

18、緩枕骨扁平，發(fā)際低枕骨扁平，發(fā)際低眼距寬，外眼角上斜，內(nèi)眥贅皮眼距寬，外眼角上斜，內(nèi)眥贅皮鼻根低平，舌大，腭弓高尖鼻根低平，舌大，腭弓高尖通貫手，小指內(nèi)彎，有一指褶紋通貫手，小指內(nèi)彎，有一指褶紋男性不育、女性偶有生育能力男性不育、女性偶有生育能力發(fā)病率發(fā)病率1/600800 新生兒新生兒先天愚形先天愚形(21三體綜合征，三體綜合征，Down syndrome)2921q22.2 BAC克隆在克隆在Down綜合征間期細(xì)胞中的雜交信號(hào)綜合征間期細(xì)胞中的雜交信號(hào)FISH（熒光原位雜交）（熒光原位雜交）: 熒光標(biāo)記熒光標(biāo)記21號(hào)染色體探針，與外周血或號(hào)染色體探針，與外周血或絨毛、羊水細(xì)胞進(jìn)行原位雜交，

19、患者細(xì)胞出絨毛、羊水細(xì)胞進(jìn)行原位雜交，患者細(xì)胞出現(xiàn)三個(gè)熒光信號(hào)?，F(xiàn)三個(gè)熒光信號(hào)。核型報(bào)告核型報(bào)告： 正常男性核型：正常男性核型： 46，XY 正常女性核型：正常女性核型：46，XXDown綜合征：綜合征： 47，XX（XY），），+2130（二）環(huán)境因素（二）環(huán)境因素“三致三致”作用的研究技術(shù)作用的研究技術(shù)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（bacterial reverse mutation assay）哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)（哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變?cè)囼?yàn)（mammalian cell gene mutation assay）染色體畸變?cè)囼?yàn)（染色體畸變?cè)囼?yàn)（chromosome aberrat

20、ion test）微核試驗(yàn)（微核試驗(yàn)（micronucleus, MN）顯性致死試驗(yàn)（顯性致死試驗(yàn)（dominant lethal）小鼠精子畸形試驗(yàn)（小鼠精子畸形試驗(yàn)（sperm shape abnormality test in mice）31細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)（Ames試驗(yàn)）試驗(yàn)）利用鼠傷寒沙門(mén)氏菌突變株，即組氨酸缺陷型，其原始菌株利用鼠傷寒沙門(mén)氏菌突變株，即組氨酸缺陷型，其原始菌株菌體內(nèi)的組氨酸是通過(guò)自身一系列酶催化反應(yīng)合成的，這菌體內(nèi)的組氨酸是通過(guò)自身一系列酶催化反應(yīng)合成的，這種能自身合成所需營(yíng)養(yǎng)成份的菌株叫做野生型菌株。種能自身合成所需營(yíng)養(yǎng)成份的菌株叫做野生型菌株。本試驗(yàn)用鼠傷寒沙門(mén)氏菌為突變株，其不能合成組氨酸，而本試驗(yàn)用鼠傷寒沙