桂林醫(yī)學(xué)院機能學(xué)實驗指導(dǎo)

1、桂林醫(yī)學(xué)院機能學(xué)實驗指導(dǎo)桂林醫(yī)學(xué)院機能實驗室2006年9月目錄第一章緒言 (1)第二章常用的儀器及器械 (6)一、BL-410 生物機能實驗系統(tǒng)(6)二、721分光光計 (10)三、電刺激器具(11)四、常用手術(shù)器材(11)第三章動物實驗的基本操作技術(shù)(14)一、實驗動物的選擇(14)二、實驗動物的捉持法、給藥法及取血法(14)三、實驗動物的編號(21)四、實驗動物的麻醉(22)五、實驗動物的固定(26)六、實驗動物的處死方法(27)七、急性動物實驗常用手術(shù)方法(27)第四章 實驗設(shè)計(31)一、實驗設(shè)計的基本要求(31)二、實驗設(shè)計的基本步驟和內(nèi)容(32)三、實驗設(shè)計的組織實施(33)附：醫(yī)

2、用統(tǒng)計學(xué)的基本知識(34)第五章實驗(37) 第一節(jié) 基礎(chǔ)實驗(37)實驗一 蟾蜍神經(jīng)肌肉標本制備(37)實驗二 坐骨神經(jīng)標本制備(40)實驗三 神經(jīng)干動作電位的測定(41)實驗四 刺激強度與刺激持續(xù)時間之間的關(guān)系(42)實驗五 刺激強度與組織反應(yīng)的關(guān)系(43)實驗六 神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定(45)實驗七 神經(jīng)干不應(yīng)期現(xiàn)象的觀察(46)實驗八 刺激頻率與骨骼肌收縮的關(guān)系(47)實驗九 骨骼肌動作電位和機械收縮的同時記錄(50)實驗十 影響血液凝固的因素(53)實驗十一 紅細胞滲透脆性的測定(56)實驗十二 紅細胞沉隆率試驗(57)實驗十三 蛙心起搏點分析(58)實驗十四 蛙心搏動的描記及興奮性

3、變化的觀察(60)實驗十五 蛙心搏動與心肌動作電位（宏電極）的同時記錄(62)實驗十六 離體蛙心灌流(63)實驗十七 心肌單細胞跨膜電位（錄像）(65)實驗十八 蟾蜍腸系膜微循環(huán)觀察（示教）(66)實驗十九 減壓神經(jīng)放電（錄像）(67)實驗二十 胸內(nèi)負壓與氣胸觀察(68)實驗二十一 胃腸運動的觀察(69)實驗二十二 大腦皮層體感誘發(fā)電位(71)實驗二十三 大腦皮層運動機能定位（錄像）(72)實驗二十四 去大腦僵直（錄像）(73)實驗二十五 藥物的基本作用(74)實驗二十六 溶液PH值對藥物轉(zhuǎn)運速率的影響 (75)實驗二十七 藥物的協(xié)同作用(77)實驗二十八 磺胺藥血漿半衰期測定(78)實驗二十

4、九 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥對動物血壓的影響(81)實驗三十 Ach量效關(guān)系曲線及阿托品PA2測定 (83)實驗三十一 藥物對離體氣管的作用(86)第二節(jié) 綜合性實驗(88) 實驗一 心血管活動的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)及藥物的影響(88) 實驗二 心律失常與治療(91) 實驗三 呼吸運動的調(diào)節(jié)與藥物對呼吸的影響(92)實驗四 理化因子及藥物對消化道平滑肌的生理特性的影響(95)實驗五 影響尿生成的因素及利尿藥的作用(97)實驗六 血液凝固過程及DIC發(fā)生發(fā)展機理和救治原則(101)實驗七 氨在肝性腦病發(fā)生中的作用及救治原則(104) 第三節(jié) 人體實驗(105)實驗一 ABO血型鑒定 (105)實驗二 人體動脈血壓

5、的測定(107)實驗三 人體心電圖（ECG）的描記 (110) 第四節(jié) 動物疾病模型的復(fù)制實驗 (113)實驗一 藥物對抗尼可剎米的致驚厥作用(113)實驗二 杜冷丁鎮(zhèn)痛作用(113)實驗三 有機磷酸酯類中毒及解救(114)實驗四 藥物的平喘作用(115)實驗五 藥物L(fēng)D50及ED50的測定(116)實驗六 急性心力衰竭(120)實驗七 急性缺氧(121)實驗八 失血性休克(122)實驗九 急性心功能不全(123)第六章 處方學(xué)(125)附錄：常用生理溶液的成分及用途(131)實驗動物用藥劑量的計算方法(131)機能實驗學(xué)教學(xué)的目標(136)機能實驗學(xué)教學(xué)的內(nèi)容要求(137)第一章 緒言隨著自

6、然科學(xué)的發(fā)展，醫(yī)學(xué)科學(xué)逐漸形成了許多分支學(xué)科，實驗學(xué)就是其中的一個重要組成部分。目前，醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)一般分為形態(tài)學(xué)、機能學(xué)、分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)4大類，掌握實驗學(xué)的基本技術(shù)，對于從事醫(yī)學(xué)的學(xué)生來說是具有重要意義的。機能實驗學(xué)的研究包括臨床研究和動物實驗研究。機能實驗學(xué)的研究多采用動物實驗方法進行（因為前者只允許在不損害機體健康、不耽誤病情、不加重病人痛苦的條件下進行）。實驗者可以根據(jù)設(shè)計的意圖、控制或改變某些條件，探討正常、病理或藥物干預(yù)的情況下有關(guān)器官功能的變化的規(guī)律及其機制，或進行實驗性治療和預(yù)防，為臨床工作提供線索和依據(jù)。機能實驗學(xué)的特點：它是一門理論性較強的學(xué)科，也是一門實踐性較強的學(xué)

7、科，其目的和任務(wù)是：從不同角度、用不同方法去研究正常和患病機體的生命活動規(guī)律，闡明疾病的原因、發(fā)生發(fā)展的過程，研究疾病過程中的機體功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)改變的特征，為認識和掌握疾病發(fā)生發(fā)展的規(guī)律、為防病治病提供必要的理論基礎(chǔ)和實驗研究依據(jù)。實驗教學(xué)是機能實驗學(xué)主要的教學(xué)形式，但它也不是附屬于某門理論課，它獨立開課，獨立考核，自成體系。機能實驗學(xué)的研究方法：從研究對象來看，可分為細胞、器官和系統(tǒng)、整體三個水平的研究。（一）細胞和分子水平需將某種組織細胞從整體取下后，在一定的環(huán)境條件下對其功能進行研究。如：將一個或數(shù)個細胞從整體分離出來，觀察其生物電活動等。（二）器官和系統(tǒng)水平以離體或在體的一個器官

8、或系統(tǒng)為實驗研究對象，觀察其功能活動，研究其功能活動的內(nèi)在機制以及各種因素對其活動的影響。如：離體蛙心灌流、各種因素對心血管活動的影響、各種因素對呼吸運動的影響等實驗。（三）整體水平以完整的機體為研究對象，觀察和研究在各種生理條件下不同的器官、系統(tǒng)之間互相聯(lián)系、互相協(xié)調(diào)的規(guī)律，如體溫調(diào)節(jié)的研究等。上述三個水平的實驗研究，是互相聯(lián)系、互相補充的。從實驗的具體方法來看，可分為急性實驗和慢性實驗。急性實驗：在較短的時間內(nèi)完成。一般是在麻醉情況下對動物施行手術(shù)，將某一器官暴露或取出，在一定的條件下對其功能活動進行觀察。急性實驗費將某一器官暴露或取出，在一定的條件下對其功能活動進行觀察。急性實驗用時短，

9、教學(xué)實驗多為此類實驗。慢性實驗：此類實驗研究對象的狀況比較接近正常情況，能夠進行較長時間的連續(xù)觀察，獲得比較系統(tǒng)的實驗資料。但往往需較長時間。一、機能實驗學(xué)的教學(xué)目的機能實驗學(xué)是在保留了部分經(jīng)典的電生理、人體生理和藥理實驗的基礎(chǔ)上，將生理、藥理、病理生理的某些實驗有機的結(jié)合起來，使學(xué)生通過實驗，不僅掌握基本的操作技術(shù)，而且通過各種病理動物實驗?zāi)Ｐ偷闹苽洹⑺幬锛捌渌椒ǖ木戎蔚?，將生理、藥理、病理生理知識融會貫通，更加貼近臨床。培養(yǎng)并提高學(xué)生自學(xué)，獨立思考，獨立工作，科學(xué)思維的能力；進行實驗設(shè)計和統(tǒng)計分析結(jié)果等分析問題、解決問題的能力；培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)嚴謹和實事求是的工作作風(fēng)。二、機能實驗學(xué)的教學(xué)要

10、求1實驗前(l）仔細閱讀實驗指導(dǎo)，了解實驗的目的、要求、操作方法及其實驗操作重點，領(lǐng)會實驗原理。(2）結(jié)合實驗內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)理論，做到充分理解，盡可能預(yù)測實驗各個步驟應(yīng)得的結(jié)果，注意和估計實驗中可能發(fā)生的誤差，以便及時糾正操作上的錯誤。(3）根據(jù)觀察指標，設(shè)計記錄實驗數(shù)據(jù)的表格。2. 實驗時(1）遵守課堂紀律和實驗室守則。(2）清點所用器材和藥品，檢查儀器的功能，并正確調(diào)試儀器，按實驗步驟操作，準確計算給藥量。(3）仔細觀察實驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象，要隨時作好原始記錄并結(jié)合所學(xué)理論判斷實驗結(jié)果。3實驗后(l）將實驗用具整理就緒：所用器材擦洗干凈；按實驗前的布置整理安放好；檢查儀器性能狀況，填寫使用

11、單；如有損壞短少之處，立即報告實驗教師。(2）值日同學(xué)要做好實驗室清潔衛(wèi)生工作，關(guān)好門、窗、水、電，方能離開實驗室。(3）整理實驗記錄，作出實驗結(jié)論，認真填寫實驗報告，作到文字簡練、通順，書寫清楚，客觀地填寫和敘述實驗結(jié)果與分析，按時交給實驗教師評閱。三、實驗結(jié)果的處理學(xué)生在實驗過程中通過科學(xué)方法將所觀察，檢測及計算出的實驗結(jié)果，進行分析、統(tǒng)計和整理，轉(zhuǎn)變?yōu)榭啥ㄐ?、定量的?shù)據(jù)和圖表，以便研究其所獲得的各種變化的規(guī)律。在實驗所得的結(jié)果中，凡屬于可以定量檢測的資料，如長短、高低、快慢、輕重等，均應(yīng)以正確的單位和數(shù)值定量。在可以記錄到曲線的實驗項目中，應(yīng)盡量采用曲線來表示實驗結(jié)果，在曲線上應(yīng)標注說明

12、；有些實驗結(jié)果可采用表格和繪圖。制表格時可將觀察的項目列在表內(nèi)左側(cè)，右側(cè)順序填寫各項結(jié)果變化數(shù)值，亦可簡要說明；繪圖時，以橫軸表示各種刺激條件，縱軸表示所發(fā)生的各種反應(yīng)，坐標軸要有適當注解，包括劑量單位。選擇大小適宜的標度以便作圖，根據(jù)圖的大小確定坐標的長短。繪制經(jīng)過各點的曲線或折線要光滑。如果不是連續(xù)性變化，也可用直方圖表示，圖下注明實驗條件，實驗名稱等。需作統(tǒng)計學(xué)處理的實驗數(shù)據(jù)，應(yīng)按衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)中所規(guī)定的統(tǒng)計學(xué)方法進行處理后（詳見第五章），才能對實驗結(jié)果進行評價。四、實驗作業(yè)實驗課時或?qū)嶒炚n后，學(xué)生應(yīng)按教師的要求，按時完成實驗作業(yè)。實驗作業(yè)有實驗報告、填充圖表、口頭答辯等形式，下面主要介紹實

13、驗報告的書寫要求。（一）實驗報告格式：(l）試驗者姓名、班次、組別、日期。(2）實驗序號與題目。(3）實驗?zāi)康摹?4）實驗方法：一般不必詳盡描述，如有實驗儀器與方法臨時變動，或因操作技術(shù)影響觀察的可靠性時，可作簡要說明。(5）實驗結(jié)果：是實驗中最重要的部位。目前，醫(yī)學(xué)論文多采用三線表、直方圖、曲線或文字描述等方式表達實驗結(jié)果。要求把實驗過程獲得的數(shù)據(jù)、曲線、文字等原始資料加以整理填入實驗報告本的適當位置。(6）討論和結(jié)論：實驗結(jié)果的討論是根據(jù)結(jié)果和現(xiàn)象用已知的理論和知識進行的解釋和推理分析。要判斷實驗結(jié)果是否為預(yù)期的，如果出現(xiàn)非預(yù)期結(jié)果，應(yīng)該再考慮和分析其可能原因。實驗結(jié)論是從實驗結(jié)果中歸納出

14、一般的、概括性的判斷，也就是這一實驗所能驗證的概念、原則或理論的簡明總結(jié)。結(jié)論中一般不要羅列具體的結(jié)果。在實驗中未能得到充分證據(jù)的理論分析不應(yīng)寫入結(jié)論。（二）寫報告應(yīng)注意文字簡練、通暢，書寫整潔、清楚，正確使用標點符號。（三）實驗的結(jié)論和討論的書寫是富有創(chuàng)造性的工作，應(yīng)該嚴肅認真，不應(yīng)盲目抄襲書本，嚴禁抄襲別人的作業(yè)。參考課外讀物，應(yīng)注明出處。以下為實驗報告的一般格式：機能學(xué)實驗報告姓名： 班次： 組別： 日期：實驗序號與題目：實驗?zāi)康模簩嶒瀸ο螅簩嶒灲Y(jié)果：討論和結(jié)論：五、自學(xué)及病例討論人的知識主要是通過自學(xué)而獲得的?！皩W(xué)會學(xué)習(xí)”是學(xué)生的重要任務(wù)，大學(xué)生更應(yīng)該重視自學(xué)能力的培養(yǎng)。由于機能實驗學(xué)

15、成為一門獨立的學(xué)科，實驗課不可避免地與有關(guān)的理論課存在著“時間差”。這既是“缺陷”，也是培養(yǎng)同學(xué)們的自學(xué)能力的機會。因此，熱切希望同學(xué)們能根據(jù)機能實驗學(xué)的進程，按照有關(guān)理論課的教學(xué)大綱進行復(fù)習(xí)或自學(xué)，以求提高實驗課的質(zhì)量。病例討論課的目的是培養(yǎng)同學(xué)們的臨床思維能力，把學(xué)習(xí)過的理論知識運用到實際病例中去，解決臨床實際問題。這包括解釋疾病發(fā)生發(fā)展及臨床表現(xiàn)的機制、提出合理的藥物治療方案和其它防治措施等。為此，希望同學(xué)們能做到以下幾點：(l）認真預(yù)習(xí)病例及復(fù)習(xí)有關(guān)的生理學(xué)、病理生理學(xué)、藥理學(xué)的基本理論；(2）聯(lián)系有關(guān)學(xué)科（如生物化學(xué)、病理學(xué)和診斷學(xué)等）的知識來分析病例；(3）按照思考題，認真思考問題

16、；(4）討論時，要積極發(fā)言，發(fā)言時，要語言簡練，觀點明確，言之有理，言之有據(jù)。藉此機會，訓(xùn)練自己的口頭表達能力。附 實驗室守則1 遵守學(xué)校紀律，準時到達實驗室并穿好實驗工作服。2 實驗時應(yīng)嚴肅認真，不得進行任何與實驗無關(guān)的活動。保持實驗室安靜。3 參加實驗者應(yīng)熟悉儀器和設(shè)備的性能及操作要求，而后動手使用。如遇儀器和設(shè)備故障或損壞，應(yīng)立即報告指導(dǎo)教師，以便及時維修或更換，干萬不可擅自拆修或調(diào)換。實驗用的動物按組分發(fā)，如需補充使用，需經(jīng)教師同意才能補領(lǐng)。4 各實驗小組的實驗儀器和器材各自保管使用，不得隨意與他組調(diào)換娜用；如需補發(fā)增添時，應(yīng)向指導(dǎo)教師提出，經(jīng)同意后方能補領(lǐng)。每次實驗后應(yīng)清點一下實驗器

17、材用品。5 愛惜公用財物，愛護實驗動物，注意節(jié)約各種實驗器材和用品。6 保持實驗室清潔整齊，除實驗指導(dǎo)，相應(yīng)的專業(yè)課教材及原始記錄紙外，不必要的物品不要帶進實驗室。實驗完畢后，應(yīng)將實驗器材、用品和實驗桌凳收拾干凈；實驗動物的尸體及廢物應(yīng)放到指定的地點，不得隨地亂丟。實驗室的清潔衛(wèi)生工作應(yīng)由各實驗小組輪流負責(zé)打掃，并最后注意關(guān)好水、電、門窗等，經(jīng)指導(dǎo)教師檢查后，方可離開實驗室。第二章 常用的儀器及器械一、BL-410 生物機能實驗系統(tǒng)。BL-410生物機能實驗系統(tǒng)是一種智能化的四通道生物信號采集、顯示及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，它具有記錄儀示波器放大器刺激器心電圖儀等傳統(tǒng)的生理儀器的全部功能。BL-410生

18、物機能實驗系統(tǒng)以中文操作的windows為基礎(chǔ)，實現(xiàn)全圖形化界面的鼠標操作，此外還具有自動分析、參數(shù)預(yù)置、操作提示、中文顯示、鼠標驅(qū)動等功能。(一)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)的主界面及窗口簡介1.主界面使用前必須首先熟悉該系統(tǒng)的主界面及主界面上各個部分的用途。進入BL-410生物機能實驗系統(tǒng)主界面的路徑：(1)開機：只有當計算機各接口連接完畢后，才能開機。(2)待進入windows界面后，鼠標雙擊左鍵“BL-410”圖標，顯示“BL-410智能型生物信號顯示與處理系統(tǒng)”主界面(圖2-1)。圖2-1總體上主界面從上到下依次分為:標題條、菜單條、工具條、生物信號波形顯示窗口、數(shù)據(jù)滾動條及反演按鈕

19、區(qū)、狀態(tài)條等6個部分。主界面中間部分(即“生物信號波形顯示窗口”所處水平)從左到右主要分為：標尺調(diào)節(jié)區(qū)、波形顯示窗口和分時復(fù)用區(qū)三個部分。在左側(cè)的標尺調(diào)節(jié)區(qū)的上方是刺激器調(diào)節(jié)區(qū)。生物信號顯示窗口的右邊為控制區(qū)和信息區(qū)：控制區(qū)從上到下可分為兩個部分：(1)4個通道的參數(shù)調(diào)節(jié)及掃描速度調(diào)節(jié)與顯示區(qū)；(2)特殊實驗標記選擇區(qū)。(二)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)使用步驟1開機只有當計算機各接口連接完畢后，才能開機。2進入“BL-410智能型生物信號顯示與處理系統(tǒng)”鼠標雙擊左鍵“BL-410”圖標，顯示主界面。3選擇實驗項目將鼠標拖至主界面上方菜單條的“實驗項目”并單擊左鍵，打開實驗項目下拉式菜單，選擇

20、實驗的系統(tǒng)，再選定具體實驗題目。4調(diào)節(jié)屏幕顯示方式根據(jù)實驗要求選擇單通道全屏顯示或多通道同時顯示。如要以全屏方式顯示某通道信號，只需用鼠標左鍵雙擊該通道任何一部位，即完成單通道的全屏顯示。如要恢復(fù)原來的通道顯示，同樣鼠標左鍵雙擊全屏顯示的任一部位。用鼠標可隨意拖動每個通道間的橫分隔條以調(diào)節(jié)通道的大小。5調(diào)節(jié)波形顯示的參數(shù)根據(jù)被觀察信號的大小及波形特點，調(diào)節(jié)該通道的增益、濾波及掃描速度,它們的控制旋鈕都位于位于波形顯示窗口的右側(cè),具體操作如下： 增益，即信號波形的放大倍數(shù)：將鼠標移動到增益控制旋鈕（G）上，單擊鼠標左鍵可使信號波形幅度增大，相反單擊鼠標右鍵則可使信號波形幅度變小。 高頻濾波：作用

21、是衰減高頻噪音而讓低頻信號通過。位于增益控制旋鈕的右側(cè)，將鼠標移動到高頻濾波控制旋鈕（F）上，單擊鼠標左鍵可使濾波頻率增高；相反單擊鼠標右鍵則可使濾波頻率降低。 時間常數(shù)（低頻濾波）：作用是衰減地頻噪音而讓高頻信號通過。將鼠標移動到時間常數(shù)控制旋鈕（T）上，單擊鼠標左鍵可使濾波頻率增高；相反單擊鼠標右鍵則可使濾波頻率降低。 掃描速度調(diào)節(jié)：將鼠標移動到所調(diào)通道的掃描速度調(diào)節(jié)區(qū)位置，在綠色柱的右邊單擊鼠標一次，掃描速度增快一檔；而在黃色柱的左邊單擊鼠標一次，掃描速度減慢一檔；此時該通道掃描速度顯示也將同時改變。6調(diào)節(jié)刺激參數(shù)一般情況下，刺激器的參數(shù)調(diào)節(jié)面板以最小化隱藏。當需要調(diào)節(jié)刺激參數(shù)時，用鼠標

22、單擊顯示窗口左側(cè)的刺激器調(diào)節(jié)區(qū)內(nèi)“打開刺激器調(diào)節(jié)對話框” 按鈕 ，這時刺激器的參數(shù)調(diào)節(jié)面板將展開在主界面的左方?？筛鶕?jù)實驗需要調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)方法為，用鼠標單擊某項參數(shù)右邊的兩個上、下箭頭為粗調(diào)，下邊的兩個左、右箭頭為細調(diào)。根據(jù)實驗的要求，可選擇下列項目：刺激方式：有粗電壓、細電壓、粗電流、細電流等；刺激形式：單刺激、雙刺激、串刺激等；刺激強度；刺激波寬；刺激頻率（或刺激間隔）。7施行刺激實驗中當需要給標本刺激時，用鼠標單擊工具條中的“啟動刺激”按鈕 ；需停止刺激時，用鼠標再一次單擊該按鈕。8作刺激標記在進行實驗時常需記錄刺激標記，從屏幕的右下角點擊“實驗標記項”，進入特殊實驗標記選擇區(qū)，選擇實驗項

23、目名稱點擊選定后，在屏幕上合適的地方點擊一次，即可打上相應(yīng)的刺激標記。9.結(jié)束實驗當實驗完成需要結(jié)束的時候，用鼠標單擊工具條上的“實驗停止命令”鍵 ，此時會彈出一個存盤對話框，提示你給剛才記錄的實驗數(shù)據(jù)輸入文件名(文件名自定)，點擊“保存”。如沒輸入文件名，計算機將以“Temp.dat”作為該實驗數(shù)據(jù)的文件名，并覆蓋前一次相同文件名的數(shù)據(jù)。10.實驗結(jié)果處理(1)圖形反演及選擇：實驗結(jié)果處理須先將存盤記錄保存的圖形重新播放（即反演）以供處理。用鼠標單擊菜單條上的“文件”項，顯示“打開”對話窗口。在文件名表框中找出所需文件并單擊，即可打開該文件，用鼠標拖動屏幕下方的滾動條進行查找。主界面的右下角

24、設(shè)置有“波形橫向展寬”按鈕 和“波形橫向壓縮”按鈕 ，在反演時，可根據(jù)實驗的要求，將記錄波形進行展寬或壓縮，以便在一幅圖上獲得較理想的曲線。(2)圖形剪輯 在實時實驗過程或數(shù)據(jù)反演中，按下“暫停”按鈕使實驗處于暫停狀態(tài)，按下“圖形剪輯（右上方剪刀形標記）”按鈕使系統(tǒng)處于圖形剪輯狀態(tài)； 對有意義的一段波形進行區(qū)域選擇，用鼠標選定并按住左鍵拖動鼠標選擇，剪輯區(qū)域此時被選定區(qū)域變黑，松開左鍵即可進入剪輯頁（剪輯窗口）。 當進行了區(qū)域選擇以后，圖形剪輯窗口出現(xiàn)，上一次選擇的圖形將自動粘貼進入到圖形剪輯窗口中。 選擇圖形剪輯窗口右邊工具條上的退出按鈕 ，退出圖形剪輯窗口。 重復(fù)上述步驟，剪輯其它波形段的

25、圖形，然后拼接成一幅整體圖形，此時可以打印或存盤。(3)輸入實驗組號及實驗人員名單實驗完成，需要在實驗結(jié)果上打印實驗組號及實驗人員名單。輸入方法為：用鼠標單擊菜單條上的“編輯”項，彈出菜單，選擇“實驗人員名單編輯”項并單擊，屏幕上將顯示“實驗人員及實驗組號”輸入對話框，用鍵盤輸入實驗人員名單及組號，最后按“OK”即可。(4)打印在圖形剪輯頁中，用鼠標單擊“打印”按鈕，即可由打印機打印出一張剪輯后的圖形。(三)BL-410生物機能實驗系統(tǒng)使用注意事項：(1)在開機狀態(tài)下，切忌插入或拔出計算機各插口的連線。(2)切忌液體滴入計算機及附屬設(shè)備內(nèi)。(3)未經(jīng)允許，不得隨意改動計算機系統(tǒng)的設(shè)置。(4)在

26、實驗開始記錄時，注意是否在記錄狀態(tài)下(記錄按鈕是否已變紅)，否則數(shù)據(jù)存盤沒有進行，反演時無記錄圖形數(shù)據(jù)。(5)未經(jīng)許可不得自帶軟盤上機操作。二、721 型分光光度計（圖2-4 ) 1、原理：溶液中的物質(zhì)在光照時對光有吸收作用，物質(zhì)對光吸收具選擇性，不同的物質(zhì)都具各自的吸收光譜。當某單色光通過溶液時，其能量就會被溶液中對其具有選擇性吸收功能的物質(zhì)所吸收而減弱。光能量減弱的程度（即被吸收的程度）與物質(zhì)的濃度和數(shù)量成一定比例關(guān)系，即符合比色原理：比耳（Beer-lamebert）定律：E=KCL。E-消光度（吸光度）,L-溶液的光徑長度（比色杯厚度）,C-溶液濃度。2、主要結(jié)構(gòu)由下列幾部分組成：光源

27、、單色器、狹縫、樣品池、檢測系統(tǒng)，如圖2-5所示。圖2-4 721 型分光光度計1 讀數(shù)表頭：2 比色皿暗箱：3 電源開關(guān)：4 比色皿座架拉桿；5 光量調(diào)節(jié)器；6. O ”電位鈕：7 波長選擇鈕：8 靈敏度檔3、使用方法如下：(l）打開電源開關(guān)，使儀器預(yù)熱20 min。(2）根據(jù)實驗要求，轉(zhuǎn)運波長選擇鈕，選用所需的波長。(3）調(diào)節(jié)“0”點，輕輕旋動“0 電位鈕”，使表頭指針讀數(shù)恰好在透光度為“ O 處”。(4）將盛空白溶液的比色杯放入比色杯架中的第一格內(nèi)，把比色杯暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)運光量調(diào)節(jié)器，使表頭指針指在透光度為“100 ”處。(5）將盛有待測溶液的比色杯放入比色杯架中的其他格內(nèi)，蓋上暗

28、箱蓋，拉動比色杯架的拉桿，使測定杯進入光路，此時表頭指針所示即為該待測溶液的吸光度A 。讀數(shù)后，打開比色杯暗箱蓋切斷光源。重復(fù)上述測量操作1 一2 次，讀取相應(yīng)的吸光度，取其平均值。(6）比色完畢后，關(guān)上電源開關(guān)，取出比色杯，將比色杯暗箱蓋好，清洗比色杯并晾干三、電刺激器具（一）鋅銅弓（圖2-6 ) 鋅銅弓是簡單的電刺激器，常用來檢驗神經(jīng)肌肉標本的興奮性。鋅銅弓有兩臂（即刺激電極），由鋅或銅制成。使用時將鋅銅弓的兩臂先濕少許任氏液，然后輕輕地同時接觸被檢查的神經(jīng)，即可產(chǎn)生微弱的電刺激。此時銅臂帶正電，鋅臂帶負電，兩臂通過被檢組織形成了“接觸電位差。（二）電子刺激器圖2-7 電極電子刺激器一般為

29、電脈沖刺激儀，其輸出脈沖的寬度、幅度、頻率、間隔等都能準確地進行定量控制，故為機能實驗中刺激組織的最常用儀器。（三）刺激電極（圖2-7 ) 1普通雙極電極該電極由兩根金屬絲安裝在一絕緣桿內(nèi)組成，一端通過導(dǎo)線與電子刺激器輸出端相連，另一端的金屬絲裸露少許，以便與組織接觸而施加刺激。2保護電極保護電極是將金屬絲包埋在絕緣物內(nèi)，一端通過導(dǎo)線與電子刺激器輸出端相連，另一端挖有空槽，金屬絲在槽內(nèi)裸露少許接觸組織以便刺激，保護電極一方面可刺激擬受刺激的組織（如神經(jīng)千），同時不會刺激周圍的其他組織而起到所謂的保護作用。四、常用手術(shù)器材在機能實驗中所使用的手術(shù)器械，基本上與人用外科手術(shù)器械相同。但也有些外科器

30、械是給動物手術(shù)時使用的。現(xiàn)將常用的手術(shù)器械及其用法，簡介于下：1手術(shù)刀 主要用于切開和解剖組織?？筛鶕?jù)手術(shù)部位與性質(zhì)，更換大小不同的刀片手術(shù)刀片有圓、尖、彎刃及大、小、長、短之分。手術(shù)刀柄也有大小及長短之分。另有一類手術(shù)刀柄與刀片連在一起的，也有圓刃、尖頭及眼科手術(shù)刀（柳葉刀）之分。常用的執(zhí)刀方法有兩種（圖2-8) :(l）執(zhí)弓式 為最常用的一種執(zhí)刀方式，動作范圍廣而靈活，用于腹部、頸部或股部的皮膚切口。(2）執(zhí)筆式 用于切割短小的切口，用力輕柔而操作精確。如解剖血管、神經(jīng)，作腹膜小切口等。2剪刀(1）手術(shù)剪 主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。此外也可用來分離組織，即利用剪刀的尖端插入組織間隙，

31、分離無大血管的結(jié)締組織等手術(shù)剪分尖頭剪和鈍頭剪，其尖端有直、彎之別另外還有一種小型手術(shù)剪，叫眼科剪，主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織，眼科剪也有直頭與彎頭之分，正確的執(zhí)剪姿勢如圖2-9 所示，即用拇指與無名指持剪，食指置于手術(shù)剪上方。(2）粗剪刀 用于蛙類實驗中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織。3手術(shù)鑷 主要用于夾住或提起組織，以便于剝離，剪斷或縫合。手術(shù)鑷分有齒和無齒兩種，并且長短不一。有齒鑷用于夾持較堅韌的組織，如皮膚、筋膜、肌腆等。無齒鑷用于夾持軟脆弱的組織，如血管、神經(jīng)、粘膜等。正確的執(zhí)鑷方法如圖2-10，即以拇指對食指和中指，輕、穩(wěn)和用力適當?shù)匕殉纸M織。4. 血管鉗（止血鉗） 主要用于鉗夾

32、血管或出血點，以達到止血的目的。也用于分離組織，牽引縫線，把持和拔出縫針等執(zhí)血管鉗的姿勢與執(zhí)手術(shù)剪姿勢相同開放血管鉗的手法是：利用右手已套入血管鉗環(huán)口的拇指與無名指相對擠壓，繼而以旋工的動作開放血管鉗。血管鉗按手術(shù)所需分直、彎、有齒、長柄、無損傷以及大中小等各類型。例如直血管鉗用于手術(shù)野淺部或皮下止血；彎血管鉗用于較深部止血；蚊式血管鉗用于精確的止血和分離組織。5骨鉗 打開顱腔和骨髓腔時用于咬切骨質(zhì)。6顱骨鉆 開顱時鉆孔用。7金屬探針 專門用來毀壞蛙類腦和脊姍的器械，分為針柄和針部。8玻璃解剖針 專用于分離神經(jīng)與血管等組織。有直頭與彎頭，尖端圓滑。9. 蛙心夾 使用時一端夾住心尖，另一端借縛線

33、連于杠桿，以進行心臟活動的描記10. 蛙板 約為2015 厘米的木板，用于固定蛙類，可用大頭針將蛙腿釘在板上，以便進行實驗。11. 動脈夾 用于阻斷動脈血流。12. 氣管插管 急性動物實驗時插入氣管，以保證呼吸暢通口。13. 血管插管 動脈插管在急性動物實驗時插入動脈，在哺乳類動物實驗中，另一端接壓力換能器，以記錄血壓，插管腔內(nèi)不可有氣泡，以免影響結(jié)果，靜脈插管還可用于向動物體內(nèi)注射藥物和溶液。各種手術(shù)器械使用結(jié)束后，都應(yīng)及時清洗。齒間軸節(jié)間的血跡和污物用小刷在水中擦洗，后用干布擦干，忌用火焰烘干或作重擊用，以免鍍鎳層剝脫生銹。久置不用的金屬器械還需擦油劑加以保護。第三章 動物實驗的基本操作技

34、術(shù)一、實驗動物的選擇“實驗動物”是指供生物醫(yī)學(xué)實驗而科學(xué)育種、繁殖和飼養(yǎng)的動物。高質(zhì)量的實驗動物是指通過遺傳學(xué)與微生物學(xué)的控制，培育出來的個體；這些個體具有較好的遺傳均一性，對外來刺激的敏感性和實驗再現(xiàn)性。（一）一般原則1. 年齡體重相當幼齡動物對藥物比較敏感，老齡動物代謝緩慢，生理功能低下，一般機能實驗均應(yīng)采用成年動物。常用動物成年時的體重為；小鼠18-28 g，大鼠180-280 g，家免2-3 kg。同一實驗的動物應(yīng)當年齡一致，體重相近，相差小于10%”。2. 雌雄動物各半不同性別動物對藥物的敏感性有一定差異，雌鼠對藥物的敏感險稍大于雄鼠。如無待殊要求，一般實驗宜選壓雌雄動物各50%。3

35、. 健康狀況良好體弱有病的動物對各種刺激耐受性小實驗結(jié)果不穩(wěn)定。饑餓、寒冷與炎熱等環(huán)境條件也會影響動物的生理變化；懷孕期與喃乳期的動物對外界刺激的反應(yīng)常常有變化，在一股實驗研究中應(yīng)鑒別剔除。4. 注意生物節(jié)捷動機機體的反應(yīng)性有節(jié)律性變化。體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝率和激素分泌等也有晝夜節(jié)律性變化（二）常用實驗動物的特點1. 蟾蛛和蛙它們的離體心臟能較持久地、有節(jié)律地搏動，常用于藥物對心臟作用；坐骨神經(jīng)膝腸肌標本可用于引導(dǎo)動作電位或觀察骨骼肌的收縮變化。2小鼠適應(yīng)于需要大量動物的實驗，如篩選藥物、半數(shù)致死量等，但不同品系的小鼠對同一刺激的反應(yīng)性差異較大。3大鼠與小鼠相似，但大鼠的實驗動物模型較穩(wěn)定。另

36、外，一些在小鼠身上不便進行的實驗可選用體形較大的大鼠。如用于胃酸分泌、胃排空、水腫、炎癥、休克等研究。4家兔常用于藥物或其他條件對心臟、血壓、呼吸的影響及有機磷農(nóng)藥中毒和解救的實驗。5. 豚鼠性情溫順。因其對組胺敏感，并易于致敏，故常選用于抗過敏藥如平喘藥和抗組胺藥的實驗。又因它對結(jié)核菌敏感，故也常用于抗結(jié)核病藥的治療研究。也常用于離體心房、心臟實驗和鉀代謝障礙、酸堿平衡紊亂的研究。二、實驗動物的捉持法、給藥法及取血法（一）動物的捉持方法1. 蛙和蟾蜍 通常以左手握持用食指按其頭部使略向前屈，拇指按住其背部，其余三指則按住它的四肢和腹部；右手持金屬探針，即可用探針刺入枕骨大孔以破壞腦和脊翻（圖

37、3-1）。2. 小白鼠 以右手提起鼠尾，將小鼠放于籠蓋或其它粗糙面上，將鼠尾向后輕拉，使小鼠前肢固定于粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏住小鼠頸背部皮膚，并以小指與無名指夾持其尾根部，固定于手中（圖3-2 ).圖3-1 蟾妹的捉持法及破環(huán)腦脊髓 圖3-2 小白鼠捉持法3. 大白鼠 將大鼠放于粗糙面上，用右手拉其尾部，左手戴保護手套，以拇指和食指握住頭部，其余三指握住背腹部。對于身體特大或兇狠易咬人的大鼠，可先以布巾包裹全身，露出口、鼻然后進行操作。4. 家兔 一只手抓住頸背部皮膚，將兔輕輕提起，另一只手托住臀部，使呈蹲坐姿勢，切忌提拿雙耳（圖3-3 ）。圖3-3 家兔促持法5. 狗 馴服的狗

38、可戴上特制嘴套，用繩帶固足于頸部；兇暴的狗可用長柄捕狗頭鉗住狗的頸部，然后套上嘴套。狗嘴也可用繩帶固定，操作時先將繩帶繞過狗嘴的下領(lǐng)打結(jié)，再繞到頸后部打結(jié)，以防繩帶滑脫。6. 豚鼠的捉持豚鼠性情溫和，不咬人，用手輕輕握住身體即可抓起。（二）常用實驗動物的給藥方法1. 經(jīng)口給藥法此法有口服與灌胃兩種方法。適用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等動物。口服法可將藥物放入飼料或溶于飲水中令動物自由攝取。若為保證劑量準確，可應(yīng)用灌胃法。小鼠以左手捉持小鼠，使腹部朝上，右手持灌胃器（以1-2 ml注射器上連接細玻管或把注射針頭磨鈍制成），灌胃管長4-5 cm，直徑l mm 。先從小鼠口角插入口腔內(nèi)，然后沿著上額

39、壁輕輕插入食道，稍感有阻力時(大約灌胃管插入1/2)，相當于食道過隔肌的部位。此時，即可推動注射器，進行灌胃（圖3-4）。若注射器推動困難，應(yīng)重插若插入氣管給藥可使小鼠死亡注藥后輕輕拔出灌胃管，一次投藥為0.1-0.3 ml/10 g體重。大鼠用左手以捉持法握住大鼠（若兩人合作時，助手捉持大鼠用右手抓住后肢和尾已），灌胃方法與小鼠相類似，僅采用安裝在5 -1O ml注射器上的金屬灌胃管（長6-8cm，直徑1.2 mm，尖端為球狀的金屬灌胃管）。一次投藥量為l-2 ml/100 g體重。豚鼠(1）口服（適用于固體劑型藥物）把豚鼠放在金屬網(wǎng)上，以左手掌從背部握住豚鼠的頭頸部而固定之，以拇指和食指壓

40、迫其口角部使口張開。用鑷子夾住藥物，放進豚鼠舌根部的凹處，使其迅速閉口而咽下。當證實藥物被咽下后即可放開豚鼠。(2）灌胃（適用于液體劑型藥物） 助手以左手從動物的背部把后腿伸開，并把腰部和后腿一起固定，用左手的拇指和食指捏住兩前腿固定之。實驗者以右手所持的豚鼠用灌胃管沿動物上額壁滑行插入食道，進而插入胃給藥。 用木或竹制開口器，把導(dǎo)尿管或直徑1 cm尼龍管經(jīng)開口器中央的孔插入胃內(nèi)給藥。上述兩種方法皆需稍回抽一下注射器的內(nèi)拴證實注射器內(nèi)無空氣時，再慢慢注入藥液，最后注入生理鹽水1-2 ml ，沖盡管內(nèi)藥液，保證劑量的準確。貓(1）口服（適用于固體劑型的藥物）：將貓固定，扒開上下額的齒列，啟開貓嘴

41、，用鑷子夾住藥物，放在舌根部，迅速封合上下額，即可咽下藥物。特別馴服的貓，輕輕固定全身，將頭號向上方拉，張開口，用鑷子將藥物放到舌根部即可兇暴的貓必須用固定后給藥。無苦味的能溶于水的藥物，也可混入飼料中任其自己攝入。(2）管或直徑1 的尼龍管從鼻腔或口腔插入食道內(nèi)給藥。兔固體劑型藥的口服法與豚鼠基本相同。液體劑型藥物灌胃法需兩人合作。一人坐好，兩腿將兔身夾住，右手抓住雙耳，固定頭部，手抓住雙前肢。另一人將木或竹制開口器壓下舌頭，以導(dǎo)尿管經(jīng)開口器中央小孔慢慢沿上額壁插入食道約5-6 寸長，將導(dǎo)尿管端置于一杯清水中，若無氣泡冒出，說明導(dǎo)尿管沒有插入氣管，這時即可用注射器抽取需要量藥液從導(dǎo)尿管灌入兔

42、胃。然后用3-5 ml清水沖洗導(dǎo)尿管后，抽出導(dǎo)尿管，取出開口器。犬(1）口服（適用于固體劑型藥物）：其口服給藥法與貓相似，但犬較易傷人，因此，先用鐵制犬夾夾住頭頸部，以強栓住嘴，一人以雙手抓住犬的雙耳，兩腿夾住犬身固定，解開栓嘴繩，由另一人用木制開口器將舌壓住，用鑷子夾住藥物從開口器甲央置于犬的舌根部后，迅速取開開口器，使犬舌下藥物給藥前若先以水濕潤口腔內(nèi)部，更易吞下藥物。(2）灌胃（適用于液體劑型藥物）：與兔灌胃相似，先以（l）法固定犬以后，從木制開口器的中央孔插入導(dǎo)尿管于食道，以清水試之，證明未插入氣管后，即可用注射器抽取需要量藥物，從導(dǎo)尿管灌胃，并用清水沖洗導(dǎo)尿管中余物，然后取出導(dǎo)尿管，

43、取出開口器。2注射給藥法淋巴囊內(nèi)注射：蛙及蟾蛛皮下有多個淋巴囊（圖3-5)，對藥物易吸收。一般將藥物注射于胸、腹或股淋巴囊。因其皮膚較薄，為避免藥液從針眼中漏出，故作胸部淋巳囊注射時，針頭由口腔底部穿下領(lǐng)肌層而達胸部皮下；作股部淋巴囊注射時，應(yīng)從小腿皮膚刺入，通過膝關(guān)節(jié)而達大腿部皮下。注入藥液量一般為0.25-0.5 ml。皮下注射：(l)小鼠 通常在背部皮下注射將皮膚拉起，注射針刺入皮下，把針尖輕輕向左右擺動，易擺動表示己刺入皮下，然后注射藥物。拔針時，以手指按住針刺部位，防止藥物外漏（圖3-6）。注射藥量為0.1-0.3ml/10 g體重。圖3-5 蛙胸淋巴囊 圖3-6 小鼠皮下注射法(2

44、）大鼠 以捉持法握住大鼠，于背部或大腿拉起皮膚，將注射針刺入皮下。一次注射藥量為小于1.0 ml/l00 g體重。(3）豚鼠 注射部位選用大腿內(nèi)側(cè)面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常在大腿內(nèi)側(cè)面注射。一般需兩人合作，一人固定豚鼠，一人進行注射。(4）兔 左手將兔背部皮膚提起，右手持注射器，針尖刺入皮下松開左手，進行注射。(5）貓 將臀部皮膚拉起，將注射針刺入皮膚與肌肉之間，注射藥液。(6）犬 于犬的頸部或背部將皮膚拉起，注射針刺入皮下進行注射。皮內(nèi)注射：先將注射部位剪去毛，酒精消毒。提起注射部位的皮膚，注射針沿皮膚表淺層刺入，注射藥液，這時注射處出現(xiàn)白色小皮丘。大鼠、豚鼠一般選背部或腹部皮內(nèi)

45、。肌肉注射：兔、貓、犬選擇兩側(cè)臀部肌肉。在固定動物后，注射器與肌肉成60 度角，一次刺入肌肉注射，但應(yīng)避免針刺入肌肉血管內(nèi)注射完后輕輕按摩注射部分，以助藥物吸收。小鼠、大鼠、豚鼠因肌肉較小，較少采用肌肉注射，若有必須，以股部肌肉較適，用藥量不宜過大，特別是小鼠，每側(cè)不宜超過0.1ml。靜脈注射：(l）大鼠和小鼠一般采用尾靜脈注射，事先將小鼠和大鼠置于固定的筒內(nèi)或針絲罩內(nèi)，或扣于燒杯內(nèi)，使尾巴露出，于45-50 的溫水中浸泡或用75 % 的酒精棉球擦之，使血管擴張。選擇尾巴左右兩側(cè)靜脈注射，注射時若出現(xiàn)隆起的白色皮丘，說明未注入血管，應(yīng)重新向尾根部移動注射。一次注射量小鼠為0.05 -0.1ml

46、/10 g體重（圖3-7 ）。圖3-7 小白鼠尾靜脈注射 圖3-8 兔耳緣靜脈注射(2）豚鼠 一般用前肢皮下頭靜脈注射，后肢小隱靜脈注射也可以。接近下部比較容易刺入靜脈。注射量一般不超過2 ml。(3）兔 一般采用耳緣靜脈注射?？捎镁凭耷蛲坎炼窟吘夓o脈，或用電燈泡烘烤兔耳使血管擴張。以左手指在兔耳下作墊，右手持注射器，針頭經(jīng)皮下進入血管。注射時若無阻力或發(fā)白隆起現(xiàn)象，說明針頭在血管內(nèi)，注射完畢，壓住針眼，拔去針頭，繼續(xù)壓迫數(shù)分鐘止血（圖3-8）。(4）貓 一般采用前肢皮下頭靜脈注射。注射前先裝貓將固定袋或籠內(nèi)，左手抓住前肢，酒精消毒后，以前肢的末端將注射器針頭刺入靜脈證實針在靜脈內(nèi)后，即可

47、注射。(5）犬 可選用前肢皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈注射。以手或橡皮帶把靜脈向心端扎緊，使血管充血。酒精消毒后，針向近心端刺入靜脈，回抽針栓倘有回血即可推注藥液（圖3-9 ）。腹腔注射：(1）小鼠以左手捉持小鼠，腹部向上，右手將注射器針頭刺入皮膚，其部位是距離下腹部腹白線稍向左或右的位置。向前推進3-5 mm，接著使注射器針頭與皮膚呈45度。角度刺入腹肌，繼續(xù)向前刺入，通過腹肌進入腹腔后抵抗消失，這時即可輕輕注射藥液小鼠的一次注射量為0.1-0.2ml/10 g體重（圖3-10）。大鼠腹腔注射與小鼠相同注射量為1-2 ml/100 g 體重。(2）豚鼠、貓、兔等豚鼠、貓腹腔注射部位同小鼠。兔在下

48、腹部近腹白線左右兩側(cè)約1 cm 處，犬在臍后腹白線側(cè)邊1-2 cm 處注射為宜。（三）常用實驗動物取血法1. 小鼠、大鼠取血法(l）頸靜脈或頸動脈取血 將麻醉的小鼠或大鼠背位固定，剪去一側(cè)頸部外側(cè)毛。作頸靜脈或頸動脈分離手術(shù)，當動、靜脈暴露清楚后，血管下各穿一根絲線，以作提起血管用，這時即可用注射針沿血管平行方向以向心端刺入抽取所需血最。體重20 g 的小鼠可取血0.6 ml左右，體重300 g 大鼠可取血8 ml左右。(2）股靜脈或股動脈取血小鼠或大鼠經(jīng)麻醉后，背位固定，左或右腹股溝處動靜脈分離手術(shù)，血管下分別穿一根絲線，以提拉血管用，右手持注射器將注射針平行于血管刺入血管內(nèi)，即行取血。若需

49、連續(xù)多次取血則取血鄰位盡量靠離心端(3）心臟取血小鼠或大鼠仰臥于固定板上，剪去心前區(qū)毛，酒精消毒，在左胸側(cè)第3-4 肋間，用左手食指觸摸到心搏動處，右手持注射器刺入心臟，血管隨心臟跳動的力量自動進入注射器。也可切開胸腔，直接從見到的心臟內(nèi)抽吸血液。(4）尾尖取血小鼠大鼠麻醉后，將尾巴于50 熱水中浸泡數(shù)分鐘后，擦千剪去尾尖，小鼠約1-2 mm，大鼠5-10 mm。然后自尾根部向尾尖按摩，血自尾尖流出，若需連續(xù)取血，每次將鼠尾剪去很小一段，在取血后可用棉球壓迫止血并用60% 液體火棉膠涂于尾巴傷口處，使其涂一層薄膜，保護傷口，此法每次取血3ml還可用銳利刀片每次切割鼠尾靜脈一段，每次取血O-0.

50、5 ml，鼠尾的三根靜脈可交替切割，切割后用棉球壓迫止血，這種方法適用于大鼠。(5）眶動脈和眶靜脈取血先將小鼠或大鼠倒持壓迫眼球使突出充血后，以止血鑷迅速摘去眼球，這時眶內(nèi)很快流出血液，流完為止，一般可取動物體重的約4-5%的血液量，此法因動物死亡而只宜一次使用。(6）眼球后靜脈從取血用玻璃制長約7-10 cm長的取血管，其一端為內(nèi)徑1-1.5 mm的毛細管，另一端漸擴大成喇叭形，毛細管段長約1 cm。預(yù)先將玻璃浸入場肝素溶液中，取后干澡。左手抓住鼠兩耳之間的頭部皮膚，使頭固定，并輕輕向下壓迫頸部兩側(cè)，引起頭部靜脈血液回流困難，使眼球充分外突，右手持毛細玻網(wǎng)管，將其尖端插入下眼瞼與眼球之間以后

51、，輕輕向眼底部方向移動，在該處旋轉(zhuǎn)取血管以切開靜脈叢把取血管保持水平位，稍加吸引，血液即流入玻璃管中當取血完畢，拔出取血管。同時放開左手，即可使出血停止。此法適用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔等動物，并可在數(shù)分鐘后在同一穿刺孔重復(fù)取血。(7）斷頭取血用剪刀迅速剪掉鼠頭，立即將鼠頸向下，提起動物，血液可流入已準備好的容器中。2. 豚鼠取血法(1)心臟取血背位固定豚鼠，左手食指觸摸心臟搏動處，于胸骨左緣第4-6 肋間腔插入注射器刺入心臟，血液隨心臟跳動而進入注射器內(nèi)。部分取血可采5-7 ml，采全血量可達15-20 ml。(2）背中足靜脈取血一人固定豚鼠，另一人以酒精消毒左或右后肢膝關(guān)節(jié)腳背面，找出背中足

52、靜脈后，左后拉住豚鼠趾端，右手拿注射針刺入靜脈，拔針后立即出血而取血，采血后用紗布或棉球壓迫止血。若需反復(fù)取血時，兩后肢可交替使用。3兔取血法(l）心臟取血 操作方法似豚鼠，穿刺部位在第3肋間隙胸骨左緣3 mm處。每次取血不宜超過20-25 ml。經(jīng)一周后可重復(fù)使用。(2）耳中央動脈取血 將兔于固定箱內(nèi)固定，用左手固定兔耳，右手取注射器在中央動脈的末端，沿著動脈平行地向心方向刺入動脈，進行取血，此法一次抽血可達15 ml。因中央動脈易發(fā)生痙攣，所以當血管擴張后迅速抽血，不宜等待時間過長。(3）耳緣靜脈取血 以小血管夾央緊耳根部，并以二甲苯局部使血管擴張后，用酒精擦凈。然后以粗大針頭插入耳緣靜脈取血。(4）后肢脛部皮下靜脈 取血將兔仰臥固定，拔去脛部的毛，在脛部上端股部扎以橡皮管，則在脛部外側(cè)淺表皮下，可清楚見到皮下靜脈用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有5 號針頭的注射器由皮下靜脈平行方向刺入