第5章 黃酮類化合物

1、第五章第五章 黃酮類化合物黃酮類化合物 （Flavonoids）概概 述述一、一、黃酮的含義：黃酮的含義： 1經(jīng)典含義是指以二苯基色原酮衍生的一類化合物的總稱，由于該類化合物大多呈淡黃色或黃色，且分子中多具酮基，因此稱為黃酮。 2現(xiàn)代含義是泛指二個(gè)苯環(huán)（A環(huán)和B環(huán)）通過三個(gè)碳原子相互連接而成的一系列化合物的總稱，即具有C6-C3-C6結(jié)構(gòu)的一類化合物的總稱。色原酮二苯基色原酮OO12345678OO12345678O12345678C6 - C3 - C6AB二、存在形式二、存在形式 黃酮類化合物廣泛存在于植物中，不少的常用中藥中主要含有此類成分。大多與糖結(jié)合成苷，稱為黃酮苷類；有的以游離形式

2、存在，即未與糖結(jié)合，稱為游離黃酮或黃酮苷元，同一植物中可能同時(shí)存在游離黃酮及其苷。 三、生物活性三、生物活性 1. 對(duì)心血管系統(tǒng)的作用對(duì)心血管系統(tǒng)的作用 Vp樣作用：蘆丁、橙皮苷等有樣作用：蘆丁、橙皮苷等有Vp樣作用，樣作用，能降低血管脆性及異常通透性，可用作防治能降低血管脆性及異常通透性，可用作防治高血壓及動(dòng)脈硬化的輔助治療劑。高血壓及動(dòng)脈硬化的輔助治療劑。 擴(kuò)冠作用：蘆丁、槲皮素、葛根素、人工合擴(kuò)冠作用：蘆丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。成的力可定。 降血脂及膽固醇：木樨草素降血脂及膽固醇：木樨草素 蘆丁片蘆丁片 蘆丁是從中國(guó)所獨(dú)有的國(guó)槐的花蕾中提取的植蘆丁是從中國(guó)所獨(dú)有的國(guó)槐的花蕾

3、中提取的植物藥，也稱維生素物藥，也稱維生素P P，具有降低毛細(xì)血管的異常，具有降低毛細(xì)血管的異常通透性和脆性的作用，是心腦血管保護(hù)藥，國(guó)通透性和脆性的作用，是心腦血管保護(hù)藥，國(guó)內(nèi)用于心腦血管藥品制劑的主要成分，國(guó)外還內(nèi)用于心腦血管藥品制劑的主要成分，國(guó)外還大量用于食品添加劑和化妝品。大量用于食品添加劑和化妝品。 2. 抗肝臟毒作用抗肝臟毒作用 從水飛薊種子中得到的水飛薊素具有保從水飛薊種子中得到的水飛薊素具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎、肝硬肝作用，用于治療急、慢性肝炎、肝硬化及多種中毒性肝損傷?；岸喾N中毒性肝損傷。 （+）-兒茶素兒茶素(catergen)也可抗肝臟毒作也可抗肝臟毒作用，

4、治療脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化用，治療脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝損傷。碳等引起的中毒性肝損傷。 3. 抗炎抗炎 蘆丁及其衍生物羥乙基蘆丁、二氫槲皮素等具蘆丁及其衍生物羥乙基蘆丁、二氫槲皮素等具 抗炎作用。抗炎作用。 4. 抗菌及抗病毒作用抗菌及抗病毒作用 如木樨草素、黃芩苷、黃芩素如木樨草素、黃芩苷、黃芩素 5. 解痙作用解痙作用 異甘草素、大豆素：解除平滑肌痙攣；異甘草素、大豆素：解除平滑肌痙攣； 大豆苷、葛根素及葛根總黃酮可緩解高血壓患大豆苷、葛根素及葛根總黃酮可緩解高血壓患者的頭痛等癥狀；者的頭痛等癥狀； 杜鵑素、川陳皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、杜鵑素、川陳皮素、槲皮

5、素、山奈酚、芫花素、羥基芫花素：止咳祛痰。羥基芫花素：止咳祛痰。 6. 雌性激素樣作用雌性激素樣作用 大豆素大豆素(daidzein)等異黃酮具有雌性激等異黃酮具有雌性激素樣作用，可能與它們與己烯雌酚結(jié)構(gòu)類素樣作用，可能與它們與己烯雌酚結(jié)構(gòu)類似。似。己烯雌酚HOOH大豆素(dadzein)OOHOOH7. 清除人體自由基作用清除人體自由基作用 黃酮類化合物多具有酚羥基，易氧化黃酮類化合物多具有酚羥基，易氧化成醌類而提供氫離子，故有顯著的抗氧成醌類而提供氫離子，故有顯著的抗氧特點(diǎn)。特點(diǎn)。 另外還有降血脂、血糖，抗動(dòng)脈粥樣另外還有降血脂、血糖，抗動(dòng)脈粥樣硬化及抗癌抗突變等作用。硬化及抗癌抗突變等作

6、用。第一節(jié) 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與分類C6-C3-C6結(jié)構(gòu)（黃酮）結(jié)構(gòu)（黃酮） 依：三碳鏈的氧化程度 三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán) 3-位羥基取代與 B-環(huán)連接位置(2、3-位)1. 1.黃酮類：黃酮類： 黃酮類即以黃酮類即以2-2-苯基色原酮為基本母核，且苯基色原酮為基本母核，且3 3位上位上無(wú)含氧基團(tuán)取代的一類化合物。無(wú)含氧基團(tuán)取代的一類化合物。 OOABC1234567823465 芹菜素（5，7，4-三OH黃酮） 木犀草素（5，7，3，4-四OH黃酮） 黃芩素(5，6，7-三OH黃酮)2.2.黃酮醇類：黃酮醇類： 黃酮醇類的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在黃酮基本母核的黃酮醇類的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在黃酮基本母核的3 3位上連位

7、上連有羥基或其他含氧基團(tuán)。有羥基或其他含氧基團(tuán)。 23OOOH 山柰酚（山柰酚（5，7，4-三三OHOH黃酮醇黃酮醇） 槲皮素（槲皮素（5，7，3，4-四四OHOH黃酮醇黃酮醇） 楊梅素（楊梅素（5，7，3，4，55-五五OHOH黃酮醇黃酮醇） 3.3.二氫黃酮類：二氫黃酮類： 二氫黃酮類結(jié)構(gòu)可視為是黃酮基本母核的二氫黃酮類結(jié)構(gòu)可視為是黃酮基本母核的2 2、3 3位雙鍵被氫化而成位雙鍵被氫化而成。 23OO甘草苷（甘草素甘草苷（甘草素-7-O-glu-7-O-glu苷）苷） 甘草素（甘草素（7 7，4 4 二二OHOH二氫黃酮）二氫黃酮） 橙皮苷（橙皮苷（5，7，3 - 三三OH，4-OCH3

8、二氫黃酮）二氫黃酮）4.4.二氫黃酮醇類：二氫黃酮醇類： 二氫黃酮醇類具有黃酮醇類的、位被氫化的二氫黃酮醇類具有黃酮醇類的、位被氫化的基本母核，且常與相應(yīng)的黃酮醇共存于同一植物體中?；灸负?，且常與相應(yīng)的黃酮醇共存于同一植物體中。 23OOOH 二氫槲皮素（二氫槲皮素（5，7，3，4-四四OH二氫黃酮醇）二氫黃酮醇） 二氫桑色素（二氫桑色素（5，7，2，4-四四OH二氫黃酮醇）二氫黃酮醇）5.5.異黃酮類：異黃酮類： 異黃酮類母核為異黃酮類母核為3-3-苯基色原酮的結(jié)構(gòu)，苯基色原酮的結(jié)構(gòu)，即即B B環(huán)連接在環(huán)連接在C C環(huán)的環(huán)的3 3位上。位上。 23OO 大豆素（大豆素（7 7，4-4-二二

9、OHOH異黃酮）異黃酮） 大豆苷（大豆素大豆苷（大豆素-7-O-glc-7-O-glc苷）苷） 葛根素（葛根素（7 7，4-4-二二OHOH，8- glc8- glc異黃酮苷）異黃酮苷）6.6.二氫異黃酮類：二氫異黃酮類： 二氫異黃酮類具有異黃酮的二氫異黃酮類具有異黃酮的2 2、3 3位被位被氧化的基本母核。氧化的基本母核。 23OO紫檀素紫檀素魚藤酮魚藤酮7. 7. 查爾酮類：查爾酮類： 查耳酮類的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是二氫黃酮查耳酮類的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是二氫黃酮C C環(huán)的環(huán)的1 1、2 2位位鍵斷裂生成的開環(huán)衍生物，即三碳鏈不構(gòu)成環(huán)。鍵斷裂生成的開環(huán)衍生物，即三碳鏈不構(gòu)成環(huán)。2345623465OOHOOHO

10、HOHOHOglc紅花苷紅花苷 查耳酮的主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是C環(huán)未成環(huán)，另外定位也與其他黃酮不同。其可以看作是二氫黃酮在堿性條件下C環(huán)開環(huán)的產(chǎn)物，兩者互為同分異構(gòu)體，常在植物體內(nèi)共存。同時(shí)兩者的轉(zhuǎn)變伴隨著顏色的變化。 二氫黃酮 2-羥基查耳酮 OOOHOH+OH-123456123456 紅花所含的色素紅花苷是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的查耳酮類植紅花所含的色素紅花苷是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的查耳酮類植物成分。物成分。 紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；開花中期，花冠紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；開花中期，花冠呈深黃色；開花后期或采收干燥過程中由于酶的作呈深黃色；開花后期或采收干燥過程中由于酶的作用，氧化成紅色。用，氧化成紅色。S

11、O2氧化酶異構(gòu)化醌式紅花苷(紅色)紅花苷(carthamone)(黃色)新紅花苷(neo-carthamin)(無(wú)色)OHOOOOglcOHOHOHOHOOglcOHOOHOHOOglcOH8. 8. 二氫查爾酮類：二氫查爾酮類： 二氫查耳酮類為查耳酮二氫查耳酮類為查耳酮，位雙鍵氫化而成。位雙鍵氫化而成。此種類型在植物界分布極少，如薔薇科梨屬植物根此種類型在植物界分布極少，如薔薇科梨屬植物根皮和蘋果種仁中含有的梨根苷（皮和蘋果種仁中含有的梨根苷（phloridzinphloridzin）。）。 OOHOOHOHOHOglc梨根苷梨根苷9 .橙酮類橙酮類 黃酮的C環(huán)分出一個(gè)碳原子變成五元環(huán)，其余

12、部位不變，但C原子定位也有所不同。是黃酮的同分異構(gòu)體，屬于苯駢呋喃的衍生物，又名噢哢。如黃花波斯菊花中含有的硫磺菊素就屬于此類。 橙酮基本結(jié)構(gòu) 硫磺菊素 OCHO2345612361745ABOCHOHO234561236174510. 10. 花色素類花色素類 花色素類是一類以離子形式存在的色原烯的衍生物。廣泛存在于植物的花、果、葉、莖等部位，是形成植物藍(lán)、紅、紫色的色素。由于花色素多以苷的形式存在，故又稱花色苷。如矢車菊素、飛燕草素、天竺葵素等屬于此類。 飛燕草素R1=R2=OH 矢車菊素R1=OH R2=H 天竺葵素R1=R2=HOHOOHOHR2R1OH+11. 11. 黃烷醇類黃烷醇

13、類 黃烷醇類生源上是由二氫黃酮醇類還原而來(lái)，可看成是脫去C4位羰基氧原子后的二氫黃酮醇類化合物。 黃烷-3-醇在植物界分布很廣， 如兒茶素和表兒茶素。 故又稱為兒茶素類。 兒茶素為中藥兒茶的有效成分，具有一定的抗癌活性。 （+）兒茶素 （-）表兒茶素 OHOOHHOHHOHOHOHOOHHOHOHOHHn黃烷黃烷-3，4-二醇二醇OO HO H34OO HOHO HO HO HO HO H無(wú)色飛燕草素?zé)o色飛燕草素12. 12. 雙黃酮類雙黃酮類 由二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植由二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。銀杏中含有多種雙黃酮，如銀杏素。物中。銀杏中

14、含有多種雙黃酮，如銀杏素。 GINKGETINOOOHCH3OOCH3OHHOOHOO13.13.其他黃酮類其他黃酮類 OOOHOHOHOHglcOO異芒果素訕酮（雙苯吡酮訕酮（雙苯吡酮 )：苯：苯駢駢色原酮，其基本母核由苯環(huán)和色色原酮，其基本母核由苯環(huán)和色原酮的原酮的2，3位位駢合而成。駢合而成。 此類化合物大多不符合C6-C3-C6的基本骨架，但因具有苯駢-吡喃酮結(jié)構(gòu)，我們也將其歸為黃酮類化合物。 凱林 麥冬高異黃酮A 紅鐮酶素 OOOHOHOOOCH3OCH3OCH3OOOCH3HOOCH3OHO 類別 特點(diǎn)或組間區(qū)別 組內(nèi)區(qū)別黃酮和黃酮醇 2-苯基色原酮 3-OH （C2-C3雙鍵）二

15、氫黃酮和 2-苯基色原酮 3-OH二氫黃酮醇 （C2-C3單鍵）異黃酮和二氫異黃酮 3-苯基色原酮 C2-C3雙鍵和單鍵查耳酮和二氫查耳酮 C環(huán)開環(huán) 3碳鏈為雙鍵和單鍵橙酮 C環(huán)為五元環(huán)花色素和黃烷醇 無(wú)4位羰基 離子和分子其他類 均有色原酮結(jié)構(gòu)總結(jié)：各類黃酮類化合物的特點(diǎn)和區(qū)別章目錄章目錄第二節(jié)第二節(jié) 理化性質(zhì)理化性質(zhì)一性狀一性狀1：形態(tài)：形態(tài)：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無(wú)定形粉末。多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無(wú)定形粉末。（苷）（苷）2：顏色：顏色： 多為黃色多為黃色 交叉共軛體系（電子轉(zhuǎn)移、重排，共軛增強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的基礎(chǔ)）交叉共軛體系（電子轉(zhuǎn)移、重排，共軛增強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的基礎(chǔ)） 助色團(tuán)（給系統(tǒng)提供電

16、子，使顏色加深，尤其助色團(tuán)（給系統(tǒng)提供電子，使顏色加深，尤其7，4-位，輔助作用）位，輔助作用） 有有 交 叉 共 軛 體 系交 叉 共 軛 體 系 無(wú)無(wú)黃酮（灰黃黃酮（灰黃黃色）黃色） 二氫黃酮二氫黃酮黃酮醇（灰黃黃酮醇（灰黃黃色）黃色） 二氫黃酮醇二氫黃酮醇查耳酮（黃查耳酮（黃橙橙黃色）黃色） 二氫查耳酮二氫查耳酮花色素類（顏色隨花色素類（顏色隨pH而改變）而改變） 黃烷醇類黃烷醇類 異黃酮（無(wú)或微黃色）異黃酮（無(wú)或微黃色） 紅色（紅色（pH 8.8.5）OOOOOO47+二旋光性：二旋光性： 旋光性旋光性 取決于取決于 不對(duì)稱碳原子的有無(wú)不對(duì)稱碳原子的有無(wú) 有有 無(wú)無(wú) 所有黃酮苷（糖）所

17、有黃酮苷（糖） 游離黃酮：游離黃酮： 游離黃酮游離黃酮 ： 黃酮黃酮 二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 異黃酮異黃酮 二氫異黃酮二氫異黃酮 查耳酮（二氫查耳酮（二氫 ） 黃烷醇類黃烷醇類 橙酮橙酮 花色素類等花色素類等 （2-位）位） （2，3-位）位） （無(wú)）（無(wú)）*OHOOOO2*OO三溶解性：符合苷的溶解性規(guī)律三溶解性：符合苷的溶解性規(guī)律 水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀堿水 1.游離黃酮 -+ + + + + +（酚羥基) 取決于 分子的立體結(jié)構(gòu) 取代基團(tuán)的性質(zhì)、數(shù)目、連接位置 引入羥基，數(shù)目多，7、4-位，水溶度較大 羥基甲基化（-OCH3）, 水溶度降低R

18、=H 平面型分子 非平面型分子 黃酮 二氫類（C-環(huán)半椅式結(jié)構(gòu)） 黃酮醇 異黃酮（羰基與B-環(huán)立體障礙） 查耳酮 分子間排列不緊密， （交叉共軛） 水分子易于進(jìn)入 水溶度小 水溶度大 2OOHRH R=H 二氫黃酮R=OH 二氫黃酮醇節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄水水 甲醇乙醇甲醇乙醇 乙酸乙酯乙酸乙酯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 稀堿水稀堿水 + + + - - - +黃酮類化合物溶解性（極性）規(guī)律黃酮類化合物溶解性（極性）規(guī)律:三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元3 - O - 糖苷 7 - O - 糖苷（平面性分子）花色素(平面性分子,離子型) 非平面性分子 平面性分子2 .黃酮苷黃酮苷(親水性親水性) 四酸

19、堿性四酸堿性1酸性酸性 酸 性 來(lái)源 影響 酚羥基（ 數(shù)目、位置）酸性規(guī)律：酸性規(guī)律： 7，4-OH酸性強(qiáng)于其他位置羥基的酸性（處于羰基對(duì) 位，羰基的共軛誘導(dǎo)）。 5-OH酸性最弱（處于羰基鄰位，形成分子內(nèi)氫鍵）。 酚羥基數(shù)目越多，酸性越強(qiáng)。 7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OHNaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + 應(yīng)用應(yīng)用pH梯度法分離（游離黃酮）節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄OOH+Cl2.堿性：堿性： -吡喃酮環(huán)吡喃酮環(huán)1-氧原子氧原子 微弱堿性（孤對(duì)電子，接受質(zhì)子）微弱堿性（孤對(duì)電子，接受質(zhì)子） 僅溶于強(qiáng)的、濃酸僅溶于強(qiáng)的、濃酸+

20、水水 （濃硫酸）（濃硫酸） 烊烊 鹽（呈色）鹽（呈色） 應(yīng)用應(yīng)用 初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇 黃黃橙色，并有熒光橙色，并有熒光 二氫黃酮二氫黃酮 橙紅（冷）、紫紅（熱）橙紅（冷）、紫紅（熱） 查耳酮查耳酮 橙紅橙紅洋紅洋紅 異黃酮（二氫）異黃酮（二氫） 黃色黃色 橙酮橙酮 紅紅洋紅洋紅節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章

21、目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄章目錄章目錄章目錄章目錄52525353節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄節(jié)目錄節(jié)目錄章目錄章目錄 第三節(jié)第三節(jié) 提取、分離提取、分離 溶劑法溶劑法 關(guān)鍵關(guān)鍵 溶劑的選擇溶劑的選擇 選擇依據(jù)選擇依據(jù) 黃酮類成分的存在狀態(tài)（游離、苷）及溶解性黃酮類成分的存在狀態(tài)（游離、苷

22、）及溶解性 溶劑的溶解性能溶劑的溶解性能 提取方法（煎煮法、滲漉法、回流法等）的選擇提取方法（煎煮法、滲漉法、回流法等）的選擇 溶劑溶劑 提取原理提取原理 游離黃酮游離黃酮 黃酮苷黃酮苷 備備 注注 乙醇乙醇 溶解范圍廣溶解范圍廣 + + （甲醇）（甲醇） 苷、苷元均可溶苷、苷元均可溶 （9095%） ( 60%） 甲醇毒性大甲醇毒性大沸水沸水 多糖苷易于水多糖苷易于水 + 成本低、安全成本低、安全,水溶性雜質(zhì)多水溶性雜質(zhì)多 堿性水或堿性水或 稀氫氧化鈉溶出能力強(qiáng)稀氫氧化鈉溶出能力強(qiáng) 堿性乙醇?jí)A性乙醇 酚羥基的酸性酚羥基的酸性 + + 石灰水除雜質(zhì)效果好石灰水除雜質(zhì)效果好一提取方法一提取方法

23、溶劑法溶劑法 1. 苷元苷元 多用多用CHCl3、Et2O、EtOAc等極性較小等極性較小溶劑提??；溶劑提取； 對(duì)于多對(duì)于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提化的成分，用苯、石油醚提?。蝗?； 對(duì)于極性大的成分，如查耳酮、橙酮、雙對(duì)于極性大的成分，如查耳酮、橙酮、雙黃酮、羥基黃酮等，用黃酮、羥基黃酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶劑提取。等溶劑提取。 2. 苷類苷類 水或熱水提取，（多糖苷在熱水水或熱水提取，（多糖苷在熱水 中溶解度較大，在冷水中溶解度較中溶解度較大，在冷水中溶解度較?。?；?。?； 也可用也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。提取。 3. 含

24、羥基的苷或苷元，可用堿水提取。含羥基的苷或苷元，可用堿水提取。 4. 提取花青素類可加入少量酸，但一提取花青素類可加入少量酸，但一般黃酮類化合物則應(yīng)避免。般黃酮類化合物則應(yīng)避免。 堿水提酸沉淀法堿水提酸沉淀法 適用于含酚羥基的化合物，如槐米中蘆丁的提適用于含酚羥基的化合物，如槐米中蘆丁的提取。取。 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 酸堿度不宜過大酸堿度不宜過大 鄰二酚羥基的保護(hù)：堿性條件下，鄰二酚羥鄰二酚羥基的保護(hù)：堿性條件下，鄰二酚羥基易被氧化，加硼砂保護(hù)基易被氧化，加硼砂保護(hù) 石灰乳的加入可除去果膠、粘液等水溶性酸石灰乳的加入可除去果膠、粘液等水溶性酸性雜質(zhì)性雜質(zhì) 炭粉吸附法炭粉吸附法 適用于苷類的精

25、制工作。適用于苷類的精制工作。 植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，過濾得吸附苷的活性炭粉末。過濾得吸附苷的活性炭粉末。 依次用沸甲醇、沸水、依次用沸甲醇、沸水、7%酚酚/水、水、15%酚酚/醇洗脫，分步收集、檢查、合并。醇洗脫，分步收集、檢查、合并。 大部分苷類可用大部分苷類可用7%酚酚/水洗下，經(jīng)減壓濃水洗下，經(jīng)減壓濃縮至小體積，乙醚除酚，余下水層經(jīng)減縮至小體積，乙醚除酚，余下水層經(jīng)減壓濃縮得較純黃酮苷。壓濃縮得較純黃酮苷。二二.分離方法分離方法（一）溶劑萃取法（一）溶劑萃取法 黃酮與雜質(zhì)黃酮與雜質(zhì) 分離依據(jù)：成分之間分離依據(jù)：成分之間 苷與苷元苷與苷元

26、 之間的極性（分配系數(shù)之間的極性（分配系數(shù)K）差異）差異 苷元與苷元苷元與苷元 分離工藝：分離工藝： 原料的提取濃縮液（水溶液）原料的提取濃縮液（水溶液） 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取 石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水飽和正丁醇水飽和正丁醇 母液母液（脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)） 回收回收 回收回收 減壓回收減壓回收 （水溶性雜質(zhì)（水溶性雜質(zhì)) 苷元苷元 單糖苷單糖苷 多糖苷多糖苷 （二）（二）pH梯度萃取法梯度萃取法 分離依據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差異（見黃酮酸性規(guī)律）分離依據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差異（見

27、黃酮酸性規(guī)律） 分離工藝：總游離黃酮的乙醚液分離工藝：總游離黃酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取萃取 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 0.2 % NaOH液液 4% NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）7，4-OH黃酮黃酮 7或或4-OH黃酮黃酮 一般一般-OH黃酮黃酮 5-OH黃酮黃酮（三）柱色譜法（三）柱色譜法 吸附原理吸附原理 異黃酮、二氫黃酮（醇）、異黃酮、二氫黃酮（醇）、 氯仿氯仿-甲醇不同比例甲醇不同比例（105，活化），活化） 高度甲基化或乙?；S酮（醇）高度甲基化或乙?；?/p>

28、黃酮（醇） 混合溶劑洗脫混合溶劑洗脫 （極性?。O性?。┓峙湓矸峙湓?多羥基黃酮醇或黃酮苷類多羥基黃酮醇或黃酮苷類 氯仿氯仿-甲醇甲醇-水水 （加水失活或不活化）（加水失活或不活化） （極性大）（極性大） （80 ：20 ：1）等比例）等比例1硅膠柱色譜硅膠柱色譜2聚酰胺色譜聚酰胺色譜 （1）原理：）原理： 氫鍵吸附氫鍵吸附 吸附規(guī)律：吸附規(guī)律：酚羥基數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。酚羥基數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。酚羥基數(shù)目相同的情況下，酚羥基所處的位置有利酚羥基數(shù)目相同的情況下，酚羥基所處的位置有利形成分子內(nèi)氫鍵，吸附能力減弱。形成分子內(nèi)氫鍵，吸附能力減弱。3-OH3-OH或或5-OH5-OH黃

29、酮的吸附力小于其他位置黃酮的吸附力小于其他位置-OH-OH黃酮；黃酮；鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或?qū)ξ环恿u基黃鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或?qū)ξ环恿u基黃酮酮分子內(nèi)芳香化程度越高，吸附力越強(qiáng)。分子內(nèi)芳香化程度越高，吸附力越強(qiáng)。 查耳酮查耳酮 二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇 黃酮黃酮 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 異黃酮異黃酮 與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力 水（中）水（中） 甲醇、乙醇甲醇、乙醇（濃度由（濃度由 低到高）低到高） 堿性溶劑堿性溶劑 洗脫規(guī)律洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)，與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)， 越難洗脫（薄層越難洗脫（薄層Rf越小）越?。?（2

30、） “雙重色譜雙重色譜”原理原理主要用于解釋黃酮苷與苷元聚酰胺色譜現(xiàn)象主要用于解釋黃酮苷與苷元聚酰胺色譜現(xiàn)象 正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜聚酰胺：聚酰胺：極性固定相（極性酰胺基團(tuán)）極性固定相（極性酰胺基團(tuán)） 非極性固定相非極性固定相（非極性脂肪鏈）（非極性脂肪鏈）洗脫劑：洗脫劑：有機(jī)溶劑（氯仿有機(jī)溶劑（氯仿-甲醇，極性小甲醇，極性?。?含水溶劑含水溶劑（甲醇（甲醇-水，極性大）水，極性大） 先洗脫：先洗脫：游離黃酮（苷元，極性?。┯坞x黃酮（苷元，極性?。?苷苷（極性大）（柱色譜分離）（極性大）（柱色譜分離） Rf值：值： 苷元苷元 苷苷 苷元苷元 雙糖苷雙糖苷 單糖苷單糖苷 苷元苷元 1

31、-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮黃酮 常用洗脫劑常用洗脫劑： 堿水（堿水（0.1mol / L NH3.H2O） 鹽水（鹽水（0.5mol / L NaCl） 醇或醇水不同比例。醇或醇水不同比例。6高效液相色譜法（高效液相色譜法（HPLC）適用于各種黃酮適用于各種黃酮 類化合物的分離類化合物的分離 原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大）原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大） 固定相：固定相：ODS 流動(dòng)相：水流動(dòng)相：水-乙腈不同比例乙腈不同比例 第四節(jié)第四節(jié) 鑒定鑒定一理化檢識(shí)一理化檢識(shí) 1.顏色：多呈黃色顏色：多呈黃色 2.母核檢識(shí)：鹽酸母核檢識(shí)：鹽酸-鎂粉反應(yīng)鎂粉反應(yīng)-

32、黃酮、黃酮醇、二氫黃酮黃酮、黃酮醇、二氫黃酮 二氫黃酮醇（二氫黃酮醇（+） 四氫硼鈉反應(yīng)四氫硼鈉反應(yīng)-二氫黃酮（醇）類（二氫黃酮（醇）類（+） 五氯化銻五氯化銻-查耳酮類（查耳酮類（+） 3.取代基團(tuán)檢識(shí)：鋯鹽取代基團(tuán)檢識(shí)：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)枸櫞酸反應(yīng)-3-OH（+） 5-OH（-） 黃酮鑒別黃酮鑒別 氨性氯化鍶反應(yīng)氨性氯化鍶反應(yīng)-鄰二酚羥基（鄰二酚羥基（+）二二.色譜檢識(shí)色譜檢識(shí) （一）紙色譜（一）紙色譜（PPC） 原理：分配原理原理：分配原理 適用范圍：游離黃酮（苷元）及黃酮苷的分離鑒別適用范圍：游離黃酮（苷元）及黃酮苷的分離鑒別 方法方法： 雙相色譜雙相色譜 第第I向向 醇性展開劑醇性展開

33、劑 第第II向向 水性展開劑水性展開劑（BAW、TBA、水飽和正丁醇）、水飽和正丁醇） （28%HAc、3%NaCl、1%HCl） 正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜固定相（水）極性固定相（水）極性 流動(dòng)相流動(dòng)相 （ *有認(rèn)為是吸附原理）？有認(rèn)為是吸附原理）？Rf規(guī)律：極性小的化合物規(guī)律：極性小的化合物Rf大大 極性大的化合物極性大的化合物Rf大大 苷元（苷元（0.7以上）以上） 單糖苷單糖苷 雙糖苷（雙糖苷（0.7以下）以下） 苷元中，平面型分子苷元中，平面型分子 非平面型分子非平面型分子 Rf規(guī)律與左邊相反規(guī)律與左邊相反母核相同，母核相同，2 2-OH 3 3-OH 4 4-OH 5 5-

34、 OH黃酮黃酮 主要應(yīng)用：苷元的分離鑒別主要應(yīng)用：苷元的分離鑒別 黃酮苷及花色素類的分離鑒別黃酮苷及花色素類的分離鑒別 （二）薄層色譜（TLC）1硅膠薄層色譜 主要用于極性較小的黃酮類化合物（黃酮苷元）的分離鑒別，其色譜行為可參考硅膠柱色譜。2聚酰胺薄層色譜 可用于黃酮苷及游離黃酮的分離鑒別，其色譜行為可參考聚酰胺柱色譜。3纖維素薄層色譜分配原理，其色譜行為可參考PC。各種色譜的檢識(shí)順序：各種色譜的檢識(shí)順序：日光下觀察多數(shù)黃酮有黃色斑點(diǎn)紫外光下觀察多數(shù)黃酮呈黃綠色熒光斑點(diǎn)氨蒸氣熏多數(shù)黃酮有顏色變化噴顯色劑（2%AlCl3甲醇液）多數(shù)黃酮黃色變深，熒光加強(qiáng)第五節(jié)第五節(jié) 結(jié)構(gòu)研究結(jié)構(gòu)研究一一. 紫

35、外可見光譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用紫外可見光譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用 一般鑒定程序一般鑒定程序： 先測(cè)定在甲醇中的光譜 再測(cè)定在加入各種診斷試劑后的紫外光譜 如為苷類，則可水解或甲基化后再水解，并測(cè)定苷元或其衍生物的紫外光譜 將以上各種光譜數(shù)據(jù)（或光譜圖）進(jìn)行對(duì)比分析，即可獲得有關(guān)結(jié)構(gòu)信息。 黃酮（醇）： 帶 II、帶I均強(qiáng)母核光譜特征 二氫黃酮類、異黃酮類：帶 II強(qiáng)、 帶I弱 母核的推斷母核的推斷 （甲醇） 查耳酮、橙酮：帶 II弱、帶I強(qiáng) 取代基：OH等，為助色團(tuán) 依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán)依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán) 甲醇鈉：強(qiáng)堿，所有酚羥基解離 醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離

36、 加入診斷試劑 醋酸鈉/硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)和 相應(yīng)吸收峰紅移 三氯化鋁：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 絡(luò)和 鄰二酚羥基OOROOROOR+黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征 苯甲酰系統(tǒng)苯甲酰系統(tǒng) 桂皮酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)（帶（帶II 220280nm） （帶（帶1 300400nm） 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系 多數(shù)黃酮類化合物由兩個(gè)主要吸收帶組成：多數(shù)黃酮類化合物由兩個(gè)主要吸收帶組成： 帶帶I在在300-400nm區(qū)間，由區(qū)間，由B環(huán)桂皮酰系統(tǒng)的環(huán)桂皮酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起；電子躍遷所引起；OOOO帶帶II在在240-

37、285nm區(qū)間，由區(qū)間，由A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)環(huán)苯甲酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起。的電子躍遷所引起。OOOO 帶帶 I I ( 2 4 0 -285nm)（苯甲（苯甲酰系統(tǒng)）酰系統(tǒng)）帶帶I(300-400nm)桂皮酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)類類 型型說(shuō)說(shuō) 明明 250-285304-350黃酮類黃酮類 -OH越多，越多，帶帶I帶帶II越紅越紅移移 B環(huán)環(huán)3,4有有-OH基，帶基，帶II為 雙 峰 （ 主為 雙 峰 （ 主峰伴肩峰）峰伴肩峰）328-357黃酮醇類黃酮醇類(3-OR) 352-385黃酮醇類黃酮醇類(3-OH) 245-270270-295300-400異黃酮類異黃酮類二 氫 黃 酮二 氫 黃 酮（醇

38、）（醇）B環(huán)上有環(huán)上有-OH, OCH3對(duì)帶對(duì)帶I影響不大影響不大 220-270340-390或或340-390(Ia) 300-320(Ib)查耳酮類查耳酮類查耳酮查耳酮2-OH使帶使帶I向紅移向紅移影響大影響大370-430(3-4個(gè)小峰個(gè)小峰)橙酮類橙酮類 不同類型黃酮類化合物的紫外光譜取代基團(tuán)對(duì)共軛吸收的影響 黃酮類核中引入黃酮類核中引入-OH（酚羥基）等供電基團(tuán)，使共軛（酚羥基）等供電基團(tuán)，使共軛程度增強(qiáng)，相程度增強(qiáng)，相 應(yīng)的吸收峰紅移。應(yīng)的吸收峰紅移。 一般，一般，A環(huán)引入環(huán)引入 OH，帶，帶II紅移，紅移，B環(huán)引入環(huán)引入 OH帶帶I紅移。紅移。 羥基甲基化或苷化后，原酚羥基的供

39、電能力下降，引羥基甲基化或苷化后，原酚羥基的供電能力下降，引起相應(yīng)的吸收峰紫移。起相應(yīng)的吸收峰紫移。 3-OH甲基化或苷化，帶甲基化或苷化，帶I紫移，紫移， 5-OH（與羰基形成分子內(nèi)氫鍵）甲基化，帶（與羰基形成分子內(nèi)氫鍵）甲基化，帶I、帶帶II均紫移均紫移515nm， 4-OH甲基化，帶甲基化，帶I紫移紫移310nm。 羥基乙酰化后，乙酰基的吸電作用，使原來(lái)酚羥基對(duì)羥基乙?；螅阴；奈娮饔?，使原來(lái)酚羥基對(duì)共軛系統(tǒng)的供電能力消失，對(duì)光譜的影響亦將完全消共軛系統(tǒng)的供電能力消失，對(duì)光譜的影響亦將完全消失。失。 黃酮黃酮 、黃酮醇加入診斷試劑后吸收峰（帶、黃酮醇加入診斷試劑后吸收峰（帶I、帶、

40、帶II）的位移規(guī)律）的位移規(guī)律診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬 NaOMe 帶帶I紅移紅移4060nm，強(qiáng)度不降，強(qiáng)度不降 示有示有4-OH 帶帶I紅移紅移5060 nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降 示有示有3-OH、但無(wú)、但無(wú)4-OHNaOAc 帶帶II紅移520nm 示有7-OH2.加入診斷試劑后引起的位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義加入診斷試劑后引起的位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義（見下表（見下表）NaOAc / H3BO3 帶帶I紅移1230nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶II紅移510nm 示A環(huán)有鄰二酚羥基 （不包括5，6-鄰二酚羥基）AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl

41、譜圖 = AlCl3譜圖 示無(wú)鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 AlCl3譜圖 示有鄰二酚羥基 帶帶I紫移3040 nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 帶帶I紫移5065 nm 示A、B環(huán)均可能有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 = MeOH譜圖 示無(wú)3-及/或5-OH AlCl3/HCl譜圖 MeOH譜圖 示可能有3-及/或5-OH 帶帶I紅移3555 nm 示只有5-OH 紅移60nm 示只有3-OH 紅移5060nm 示可能有3-OH及5-OH 僅紅移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 從中藥柴胡中得到山奈苷，酸水解從中藥柴胡中得到山奈苷，酸水解PPC檢

42、查出鼠李糖，該苷及苷元的檢查出鼠李糖，該苷及苷元的UVmax(nm)譜如下，解析結(jié)構(gòu)。譜如下，解析結(jié)構(gòu)。山奈苷山奈苷 帶帶II 帶帶IMeOH 265 345NaOMe 265 388 43，4-OHAlCl3 275 399 54，5-OHAlCl3/HCl 275 399AlCl3= AlCl3/HCl：無(wú)鄰二酚羥基：無(wú)鄰二酚羥基NaOAc 265 399帶帶II無(wú)紅移，無(wú)無(wú)紅移，無(wú)7-OHNaOAc/H3BO3 265 356 11山奈苷元山奈苷元 帶帶II 帶帶IMeOH 267 367NaOMe 276 416（分解）（分解） 帶帶I紅移紅移49，且分解，且分解，3，4-OHAlCl

43、3 268 424 54，5-OHAlCl3/HCl 269 424AlCl3= AlCl3/HCl：無(wú)鄰二酚羥基：無(wú)鄰二酚羥基NaOAc 276 387帶帶II紅移紅移9，7-OHNaOAc/H3BO3 267 372 40?三、三、1H-NMR 常用溶劑：氘代氯仿（常用溶劑：氘代氯仿（CDDl3），氘代），氘代二甲基亞砜（二甲基亞砜（DMSO-d6），氘代吡啶），氘代吡啶（C5D5N）。）。 也可將黃酮類化合物作成三甲基硅醚衍也可將黃酮類化合物作成三甲基硅醚衍生物溶于四氯化碳中進(jìn)行測(cè)定。生物溶于四氯化碳中進(jìn)行測(cè)定。（一）（一）A環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子15, 7-二二OH黃酮黃酮H-6, H-8, 5

44、.7-6.9, J=2.5HzH-6較H-8高場(chǎng) 86OOHOOH27-OH黃酮黃酮H-5 7.7-8.2 (d, J=9Hz)H-6 6.4-7.1(dd, J=9, 2.5Hz) H-8 6.8-7.0 (d, J=2.5Hz) 5OOHO68H-5較較H-6、H-8低場(chǎng)，是由于羰基的負(fù)屏蔽低場(chǎng)，是由于羰基的負(fù)屏蔽效應(yīng)的影響。效應(yīng)的影響。H-6、H-8較較5, 7-二二OH黃酮低場(chǎng)，且相互位黃酮低場(chǎng)，且相互位置可能顛倒。置可能顛倒。 （二）（二） B環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 6.5-814-氧取代黃酮類化合物氧取代黃酮類化合物5632ORH-3, 5 6.5-7.1, d, J=8.5HzH-2, 6

45、 7.1-8.1, d, J=8.5Hz由于由于C環(huán)對(duì)環(huán)對(duì)H-2, 6的負(fù)屏蔽作用大于對(duì)的負(fù)屏蔽作用大于對(duì)H-3, 5， 且且H-3, 5受受4-OR的屏蔽作用，故前者較低場(chǎng)；的屏蔽作用，故前者較低場(chǎng)；C環(huán)氧化程度越高，環(huán)氧化程度越高，H-2, 6處于越低場(chǎng)的位置。處于越低場(chǎng)的位置。23, 4-二氧取代黃酮類化合物二氧取代黃酮類化合物 562ORORH-2受受C環(huán)負(fù)屏蔽和環(huán)負(fù)屏蔽和3-OR屏蔽作用，屏蔽作用，H-6 也受也受C環(huán)負(fù)屏環(huán)負(fù)屏蔽作用，而蔽作用，而H-5則僅則僅4-OR屏蔽作用。故由低場(chǎng)到高場(chǎng)的屏蔽作用。故由低場(chǎng)到高場(chǎng)的順序?yàn)椋喉樞驗(yàn)椋篐-6 H-2 H-5。但有時(shí)也會(huì)發(fā)生但有時(shí)也會(huì)

46、發(fā)生H-2和和H-6重疊的現(xiàn)象。重疊的現(xiàn)象。（1）3, 4-二氧取代黃酮及二氧取代黃酮及 黃酮醇黃酮醇H-5 6.7-7.1 d, J=8.5HzH-2 7.2 d, J=2.5HzH-6 7.9 dd, J=2.5, 8.5Hz（2）3, 4-二氧取代異黃酮、二氫黃酮及二氧取代異黃酮、二氫黃酮及 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 H-2, 5,6常作為一個(gè)復(fù)雜多重峰（通常常作為一個(gè)復(fù)雜多重峰（通常為兩組峰）為兩組峰） 6.7-7.1562OROR33, 4,5-三氧取代黃酮類化合物三氧取代黃酮類化合物62OR2OR1OR3若若R1=R2=R3=H，則，則H-2,6為單峰，為單峰， 6.7-7.5若上述條

47、件不成立，則若上述條件不成立，則H-2,6分別為二重峰分別為二重峰（J=2Hz） （三）（三） C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 1. 黃酮類黃酮類H-3, 6.33OHO2. 異黃酮類異黃酮類32OOHH-2位于羰基位于羰基 位，同時(shí)受羰基和苯環(huán)的負(fù)屏位，同時(shí)受羰基和苯環(huán)的負(fù)屏蔽作用，且通過碳與氧相連，故較一般芳香蔽作用，且通過碳與氧相連，故較一般芳香質(zhì)子低場(chǎng)，質(zhì)子低場(chǎng)，7.6-7.8。若用若用DMSO-d6作溶劑，則作溶劑，則8.5-8.7。 3. 二氫黃酮和二氫黃酮醇二氫黃酮和二氫黃酮醇 1) 二氫黃酮二氫黃酮23OHOH兩個(gè)兩個(gè)H-3, 分別為分別為dd峰，中心位于峰，中心位于2.8 ，J = 17Hz

48、（偕偶），（偕偶），5Hz（順偶）及（順偶）及J = 17Hz（偕偶），偕偶），11Hz（反偶）（反偶）H-2, dd, 5.2, Jtrans = 11Hz（反偶）（反偶）, Jcis = 5Hz（順偶）（順偶）（2）二氫黃酮醇）二氫黃酮醇32(2S, 3S)二氫黃酮OOHOHH3-OR苷化，供電子能力下降，兩個(gè)氫的苷化，供電子能力下降，兩個(gè)氫的值升高（向低場(chǎng)位移），可用于判斷二氫值升高（向低場(chǎng)位移），可用于判斷二氫黃酮醇苷中糖的位置。黃酮醇苷中糖的位置。 H-2與與H-3為反為反 式雙直立鍵，式雙直立鍵， J=11HzH-2 4.9H-3 4.34. 查耳酮查耳酮d, 7. 3-7. 7,

49、 J=17H zd, 6. 7-7. 4, J=17H zO5.橙酮橙酮s, 6.5-6.7 6.37-6.94 (DMSO-d6)OCHO黃酮苷類化合物上糖的質(zhì)子信號(hào)（端基質(zhì)子） 黃酮醇黃酮醇-3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 5.70 6.00 黃酮醇黃酮醇-3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 5.00 5.10 黃酮類黃酮類 -7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 4.80 5.20 黃酮類黃酮類-4-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黃酮類黃酮類 -5-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 黃酮類黃酮類-6 及及 8-C-糖苷糖苷（四） 糖端基碳上的質(zhì)子1 1）葡萄糖位于不同位置時(shí)端基）葡萄糖位于不同位置時(shí)端基H H化學(xué)化學(xué) 位移的區(qū)別：位移

50、的區(qū)別： C3-OR 1C3-OR 1-H-H的的 值約為值約為5.85.8 C-5, C-6, C-7, C-4-OR C-5, C-6, C-7, C-4-OR 1 1-H-H的的 值約為值約為4.8-5.24.8-5.22) 2) 葡萄糖苷與鼠李糖苷的區(qū)別葡萄糖苷與鼠李糖苷的區(qū)別 黃酮醇黃酮醇3-O-3-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 5.8, d, J=7Hz 5.8, d, J=7Hz （二直立鍵偶合系統(tǒng)）（二直立鍵偶合系統(tǒng)） 黃酮醇黃酮醇3-O-3-O-鼠李糖苷鼠李糖苷 5.0-5.1, d, J=2Hz 5.0-5.1, d, J=2Hz （二平伏鍵偶合系統(tǒng)）（二平伏鍵偶合系統(tǒng)） 另外鼠李

51、糖上的另外鼠李糖上的C-CH3 C-CH3 0.8-1.2, d, 0.8-1.2, d, J=6.5HzJ=6.5Hz三三13C-NMR譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用 推斷黃酮類化合物的骨架類型推斷黃酮類化合物的骨架類型 （一）黃酮類化合物骨架類型的判斷（一）黃酮類化合物骨架類型的判斷 利用13C-NMR譜中黃酮類化合物的中央三個(gè)碳核信號(hào)的位置以及它們?cè)谄舱袢ヅ甲V中的裂分情況 13C-NMR譜中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的中央三碳核的信號(hào)特征譜中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的中央三碳核的信號(hào)特征 C=O C-2（或（或C-） C-3（或（或C-a a） 歸屬歸屬 174.5

52、184.0 (s) 160.5163.2 (s) 104.7111.8 (d) 黃酮類黃酮類 149.8155.4 (d) 122.3125.9 (s) 異黃酮類異黃酮類 147.9 (s) 136.0 (s ) 黃酮醇類黃酮醇類 182.5182.7(s) 146.1147.7(s) 111.6111.9 (d) 橙酮類橙酮類 ( =CH- )188.0197.0 (s) 136.9145.4 (d) 116.6128.1(d) 查耳酮類查耳酮類 75.080.3 (d) 42.844.6 (t) 二氫黃酮類二氫黃酮類 82.7(d) 71.2 (d) 二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類178.416

53、3.2153.6133.7129.0126.3OO131.8131.6125.2125.7124.0118.1107.6129.0126.3（二）黃酮類化合物取代圖式的確定（二）黃酮類化合物取代圖式的確定 利用黃酮類化合物中芳香碳原子 （A-環(huán)碳原子、B-環(huán)碳原子）的信號(hào)特征 確定取代基的取代圖式黃酮母核黃酮母核13C-NMR信號(hào)歸屬信號(hào)歸屬推斷取代基（推斷取代基（X）的連接位置）的連接位置 依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律 ( B-環(huán)環(huán)) X Zi Zo Zm Zp -OH +26.0 -12.8 +1.6 -7.1 -OCH3 +31.4 -14.4 +1.0 -7.8確定確定

54、5，7-二二OH取代黃酮圖式取代黃酮圖式 依依5，7-二二OH黃酮中的黃酮中的C6和和C8信號(hào)特征信號(hào)特征 90100ppm范圍內(nèi)范圍內(nèi) C6 C8 確定糖與苷元的連接位置確定糖與苷元的連接位置 依苷化位移規(guī)律依苷化位移規(guī)律 苷元（酚羥基）：苷元（酚羥基）： a a-C移向高場(chǎng)，移向高場(chǎng)，降低降低 鄰、對(duì)位鄰、對(duì)位-C-C移向低場(chǎng)，移向低場(chǎng)，增大增大 糖（酚苷）：糖（酚苷）： 端基碳原子端基碳原子+4.0 6.0ppm四四MS在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用M + . M + . 黃酮類化合物黃酮類化合物MS特征特征 測(cè)定分子量（測(cè)定分子量（M+） 取代基團(tuán)推斷（碎

55、片離子峰）取代基團(tuán)推斷（碎片離子峰）苷元（極性?。┸赵O性小） 苷（極性大、難氣化、與熱不穩(wěn)定）苷（極性大、難氣化、與熱不穩(wěn)定） EI-MS（以前）：苷看不到（以前）：苷看不到,須制備成衍生物（須制備成衍生物（PM等）方能測(cè)得很弱的等）方能測(cè)得很弱的 、 苷元峰為基峰。苷元峰為基峰。 FD-MS、FAB-MS、ESI-MS（目前）：可測(cè)得分子離子峰（目前）：可測(cè)得分子離子峰 或準(zhǔn)分子離子峰或準(zhǔn)分子離子峰M+1、M+23等。等。OOAB+.+.+.+.+.MOCOCHCA1B1EI-MS裂解規(guī)律裂解規(guī)律 1分子離子峰分子離子峰 為基峰為基峰 用于測(cè)定分子量。用于測(cè)定分子量。 2主要碎片離子峰為

56、裂解途徑主要碎片離子峰為裂解途徑I 產(chǎn)生的產(chǎn)生的A1和和B1 母核確定母核確定 及裂解途徑及裂解途徑II產(chǎn)生的產(chǎn)生的 B2+ A、B-環(huán)取代情況確定環(huán)取代情況確定裂解途徑裂解途徑I（RDA裂解）：裂解途徑裂解途徑II：OOAB+.+.+.+.MCOB2OCHC+ 通常，上述兩種基本裂解途徑是相互競(jìng)爭(zhēng)、相互制約的。并且，途徑I裂解產(chǎn)生的碎片離子豐度大致與途徑II裂解產(chǎn)生的碎片離子的豐度互成反比。M + . 兩種途徑裂解得到的碎片離子兩種途徑裂解得到的碎片離子A1、B1、B2等，保等，保留著留著A-環(huán)、環(huán)、B-環(huán)的基本骨架，且碎片環(huán)的基本骨架，且碎片A1與相應(yīng)的與相應(yīng)的B1碎片的質(zhì)荷比之和等于分子

57、離子碎片的質(zhì)荷比之和等于分子離子 的質(zhì)荷比。的質(zhì)荷比。 母核推斷母核推斷 A、B-環(huán)取代情況確定環(huán)取代情況確定 3.其他碎片離子峰還有其他碎片離子峰還有M-H+、M-CO+、M-CH3+（ 含甲氧基）、含甲氧基）、A1+H、A1-CO、B2-CO等碎片離子。等碎片離子。OOAB+.+.+.+.+.+.+.+.+.MOCCHOHM- 128CO M- m/zm/zm/zm/z194 54( )221( )33OCOHOAABC222( )( )100CBOA1+H m/z121A1 m/z ( )120 80B1 m/z ( )10212105 12COCOA1- B1- 2828m/z ( )

58、m/z ( )9277 1449+ 黃酮類基本裂解途徑黃酮類基本裂解途徑 ( 以途徑以途徑-I為主）為主） 途徑途徑I+H轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移途徑途徑II途徑途徑I+A1+HOOOHAB+.+M+B2+CBOCOC6H5+B2B2- 28黃酮醇類基本裂解途徑（以途徑黃酮醇類基本裂解途徑（以途徑-II為主為主）途徑途徑IH轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移途徑途徑-II結(jié)構(gòu)研究舉例結(jié)構(gòu)研究舉例 某化合物分子式為某化合物分子式為C15H10O5，Mg-HCl反反應(yīng)陽(yáng)性，根據(jù)應(yīng)陽(yáng)性，根據(jù)UV、1H-NMR和和MS數(shù)據(jù)寫數(shù)據(jù)寫出化合物結(jié)構(gòu)，說(shuō)明數(shù)據(jù)分析結(jié)果，出化合物結(jié)構(gòu)，說(shuō)明數(shù)據(jù)分析結(jié)果，MS裂解過程，裂解過程， 1H-NMR數(shù)據(jù)歸屬。數(shù)

59、據(jù)歸屬。不飽和度=11UV max(nm)MeOH 267,296sh,336NaOAc 275,324,392 帶帶II紅移紅移275-267=7, 7-OHNaOMe 267,301,376 帶帶I紅移紅移376-336=40, 4-OHAlCl3 276,301,348,384AlCl3/HCl 276,302,340,381 AlCl3= AlCl3/HCl，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基AlCl3/HCl與與MeOH帶帶I紅移紅移381-336=45有有5-OHNaOAc/H3BO3 268,302sh,338 與與MeOH基本相同，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基基本相同，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚

60、羥基1H-NMR（四甲基硅醚衍生物，（四甲基硅醚衍生物，CCl4）6.15(1H, J=2.5Hz) A環(huán)氫，間偶環(huán)氫，間偶(6-H)6.3(1H, s) 黃酮黃酮3-H6.5(1H, d, J=2.5Hz) A環(huán)氫，間偶環(huán)氫，間偶(8-H)6.85(2H, d, J=8.5Hz) B環(huán)氫，鄰偶環(huán)氫，鄰偶(35-H)7.75(2H, d, J=8.5Hz) B環(huán)氫，鄰偶環(huán)氫，鄰偶(26-H)MS.m/e270(M+), 242, 152, 124, 121, 118, 93152證明證明A環(huán)有兩個(gè)酚羥基；環(huán)有兩個(gè)酚羥基；152-120=32118證明證明B環(huán)有一個(gè)酚羥基。環(huán)有一個(gè)酚羥基。118